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南极假丝酵母脂肪酶B在黑曲霉中的表达及酶学性质研究
1
作者 邵志伟 马佳欣 +4 位作者 李柱 栾贺然 张会 杜兴 李杰 《饲料博览》 2025年第2期27-34,共8页
为实现南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)在黑曲霉(Aspergillus niger)中的表达,研究选用黑曲霉高效分泌信号肽SglaA、SpepB和融合蛋白XynB分别构建3个CALB的表达载体,并转入黑曲霉TH-2(ΔasaA::pyrG)、TH-2(Δasa... 为实现南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)在黑曲霉(Aspergillus niger)中的表达,研究选用黑曲霉高效分泌信号肽SglaA、SpepB和融合蛋白XynB分别构建3个CALB的表达载体,并转入黑曲霉TH-2(ΔasaA::pyrG)、TH-2(ΔasaA::scerv29ΔprtT::pyrG)中,得到6株黑曲霉重组菌株。摇瓶发酵重组菌株并进行酶活力检测,发现以SglaA为信号肽的CALB酶活是以SpepB为信号肽酶活的105%和108%;以XynB为融合蛋白的CALB酶活是未融合XynB的114%~123%;敲除prtT的CALB重组菌株酶活是未敲除菌株酶活的102%~105%。以SglaA为信号肽,XynB为融合蛋白并转入TH-2(ΔasaA::scerv29ΔprtT::pyrG)的重组菌株酶活力较高,发酵至第12天为21.78±0.77 U·mL^(-1)。对重组CALB进行酶学性质分析,其最适温度为50℃,在30~50℃范围内温度能保持70%以上的相对酶活力;最适pH为8.0,在p H 6.0~8.0时较为稳定并且能保持80%左右的相对酶活力,Na^(+)、K^(+)和甘氨酸对CALB的酶活性产生了增强效果。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶b 黑曲霉 信号肽 酶活力
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南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母的表达及酶学性质研究 被引量：7
2
作者 孙金鹏 钱圣一 +1 位作者 敬科举 卢英华 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期765-771,共7页
为提高南极假丝酵母脂肪酶B（Candida antarcticalipase B,CALB）的表达量,根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得... 为提高南极假丝酵母脂肪酶B（Candida antarcticalipase B,CALB）的表达量,根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得到多拷贝转化子.摇瓶发酵120 h后上清液酶活力达到46 U/mL,通过金属螯合层析纯化发酵液将CALB纯化了5.23倍,比活力达到856.7 U/mg,去糖基化实验显示重组CALB比野生型CALB大5 ku.实验考察了不同反应温度、pH值和金属离子对重组CALB活性和稳定性的影响,发现重组CALB最适反应温度和pH分别为30℃和6.5,在pH 5.0~8.0之间以及40℃以下有较好稳定性,金属离子（10 mmol/L）Ca2＋,Zn2＋,Mn2＋有助于CALB酶活力的提高,而Cu2＋,Ag＋,Fe3＋强烈抑制酶催化反应. 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶b 毕赤酵母 分泌表达 酶学性质
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表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的毕赤酵母FM22发酵培养基响应面优化 被引量：3
3
作者 陈明祥 谢万勇 +3 位作者 廖锡豪 陈家驹 韩双艳 林影 《中国酿造》 CAS 2012年第10期52-56,共5页
FM22培养基以丰富的氮源、较强的适应性等优势,适用于毕赤酵母发酵。为进一步对毕赤酵母发酵表达南极假丝酵母脂肪酶B进行优化,选取培养基中对其影响较大的CaSO4、KH2PO4、(NH4)2SO4、PTM4为自变量,酶活力为响应值。通过单因素试验得自... FM22培养基以丰富的氮源、较强的适应性等优势,适用于毕赤酵母发酵。为进一步对毕赤酵母发酵表达南极假丝酵母脂肪酶B进行优化,选取培养基中对其影响较大的CaSO4、KH2PO4、(NH4)2SO4、PTM4为自变量,酶活力为响应值。通过单因素试验得自变量最佳值及高低水平,再采用Box-Behnken组合设计方法,模拟二次多项式回归方程的预测模型,研究各自变量及其交互作用对酶活力的影响。最终得到自变量最佳值:KH2PO445.02g/L、(NH4)2SO45.63g/L、CaSO40.46g/L、PTM4 1.63mL/L,酶活力为3214.7U/gDCW,较优化前提高约40%。 展开更多
关键词 毕赤酵母表面展示系统 南极假丝酵母脂肪酶b FM22培养基 响应面优化
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表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的重组毕赤酵母高密度发酵条件优化 被引量：3
4
作者 冯琮 林影 +2 位作者 梁书利 苏国栋 韩双艳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期29-34,共6页
以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticlipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40g/L、硫酸铵4... 以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticlipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40g/L、硫酸铵4g/L、PTM14mL/L和CaSO410mmol/L;然后利用多功能补料摇床确定了菌株最适生长和产酶的pH分别为5.5和7.0,最适生长和产酶温度为30℃;再在2L发酵罐上放大,并对甘油流加模式和甲醇流加模式进行了优化筛选,确定了以9.6mL/(L.h)的流速流加甘油12h能有效提高菌体密度;以6.4mL/(L.h)的流速恒速流加甲醇比恒定溶氧流加甲醇诱导产酶更佳。最终单位菌体酶活力可达348.4U/g,比甘油含量40g/L、硫酸铵10g/L、PTM14.35mL/L、CaSO40.93g/L,以6.4mL/(L.h)的流速流加甘油4h和以恒定溶氧流加甲醇的未优化条件下提高34.8%。最后通过细胞表面荧光强度检测和全细胞催化合成活力对比,发现优化后单位菌体展示的蛋白表达量得到提高。 展开更多
关键词 发酵优化 酵母表面展示 南极假丝酵母脂肪酶b 高密度
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南极假丝酵母脂肪酶B在黑曲霉中的分泌表达及其硅藻土固定化应用 被引量：6
5
作者 张玲敏 王斌 潘力 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第14期107-114,共8页
为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)表达量,根据黑曲霉(Aspergillus niger)密码子偏好性设计合成CALB基因,以PnaII/tpi为启动子构建CALB表达载体并转化到黑曲霉HL-1中表达,摇瓶发酵120 h后上清液中重组CALB... 为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)表达量,根据黑曲霉(Aspergillus niger)密码子偏好性设计合成CALB基因,以PnaII/tpi为启动子构建CALB表达载体并转化到黑曲霉HL-1中表达,摇瓶发酵120 h后上清液中重组CALB活力为171 U/mL。研究重组CALB的酶学性质,最适反应温度和pH值分别为50℃和8.0,在pH 6.0~9.0和45℃以下具有较高的稳定性,10 mmol/L Cu2+、Zn2+和0.1 g/100 mL十二烷基硫酸钠强烈抑制酶活力,而1 mmol/L Ca2+、0.1 g/100 mL山梨醇对酶活力具有非常明显的激活作用。此外,以硅藻土为载体固定CALB,固定化酶活力为187 U/g。将制备的硅藻土-CALB固定化酶用于生物合成己酸乙酯,经反应条件优化后在无溶剂体系中己酸乙酯产率达91%。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶b 黑曲霉 分泌表达 酶学性质 固定化 酯化
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黑曲霉表面展示南极假丝酵母脂肪酶B催化仲醇动力学拆分 被引量：2
6
作者 李远锋 张锟 +3 位作者 韩双艳 郑穗平 梁书利 林影 《化学与生物工程》 CAS 2018年第5期53-58,共6页
光学活性仲醇是合成多种生物活性化合物的原料和关键中间体,微生物细胞表面展示酶在生物催化和生物转化制备生化产品等方面表现出良好的应用性。研究了黑曲霉表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)制备的全细... 光学活性仲醇是合成多种生物活性化合物的原料和关键中间体,微生物细胞表面展示酶在生物催化和生物转化制备生化产品等方面表现出良好的应用性。研究了黑曲霉表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)制备的全细胞催化剂(AN-CALB)动力学拆分仲醇的催化性能。以2-辛醇作为反应底物,研究了酰基供体、2-辛醇与乙酸异丙烯酯物质的量比、AN-CALB添加量、水活度、温度及溶剂对AN-CALB催化2-辛醇拆分的影响,确定最优反应条件为:以乙酸异丙烯酯为酰基供体、2-辛醇与乙酸异丙烯酯物质的量比1∶1、AN-CALB添加量50 g·L-1、水活度0.11、温度45℃、以甲苯为溶剂,在此条件下,反应12 h的底物转化率达47.4%,eep值为99.6%,E值大于600。在最优反应条件下,AN-CALB对8种仲醇均表现出较好的拆分效果,底物转化率最高接近50%。该研究为仲醇动力学拆分提供了新的催化剂选择。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶b 细胞表面展示 黑曲霉 全细胞催化剂 仲醇 动力学拆分
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南极假丝酵母脂肪酶B基因在大肠杆菌中的表达和发酵优化 被引量：7
7
作者 吴蓉 曹佳睿 +3 位作者 曹君 刘飞翔 杨猛 苏二正 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期138-148,共11页
旨在利用大肠杆菌实现南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因的高效可溶性表达,并降低生产成本。构建带有不同信号肽的CALB基因表达质粒,转化至不同大肠杆菌宿主中,在摇瓶中进行基础培养基、诱导条件、培养基组成成分和进程曲线的优化。结果显... 旨在利用大肠杆菌实现南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因的高效可溶性表达,并降低生产成本。构建带有不同信号肽的CALB基因表达质粒,转化至不同大肠杆菌宿主中,在摇瓶中进行基础培养基、诱导条件、培养基组成成分和进程曲线的优化。结果显示,带有PelB信号肽的重组菌pET25b-CALB-1/Rosetta(DE3)在20℃下使用0.5%(W/V)乳糖在TY培养基中诱导表达效果最好,优化后的合成培养基成分为1.75%(W/V)山梨醇、2.25%(W/V)鱼蛋白胨、1%(W/V)安琪酵母提取物、0.75%(W/V)Na2HPO4。在摇瓶中诱导60 h后,CALB酶活力最高达到35.67 U/mL,相比于初始发酵酶活力提高了17.77倍,是目前大肠杆菌生产CALB的最高水平。成功地构建了大肠杆菌表达系统,经过系统优化后,CALB的高水平可溶性表达得以实现。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶b 大肠杆菌 可溶性表达 发酵优化
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南极假丝酵母脂肪酶B在离子液体/超临界流体体系中的稳定性模拟
8
作者 张静晓 张丽雷 +2 位作者 刘晓洁 吴小亮 徐璐 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期902-907,共6页
脂肪酶在离子液体/超临界流体体系中的结构稳定性是影响其活性的重要因素。本文采用分子动力学方法分别研究了南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)在离子液体CYPHOS IL-201/极性超临界流体CHF_3两相体系和离子液体CYPHOS IL-201/非极性超临界流体... 脂肪酶在离子液体/超临界流体体系中的结构稳定性是影响其活性的重要因素。本文采用分子动力学方法分别研究了南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)在离子液体CYPHOS IL-201/极性超临界流体CHF_3两相体系和离子液体CYPHOS IL-201/非极性超临界流体CO_2两相体系中的结构稳定性,揭示影响CALB结构稳定性的因素。研究结果表明,在超临界CHF_3中,CHF_3破坏蛋白维持α螺旋结构的氢键是蛋白结构不稳定的主要原因;在超临界CO_2中,CALB蛋白的结构紧密性降低,有序二级结构发生了变化,导致稳定性下降。离子液体和两种超临界流体均形成了两相体系,蛋白处于离子液体相中,离子液体不溶于超临界流体,但超临界流体部分进入离子液体相,降低了离子液体相的黏度。其中,相比于CYPHOS IL-201/CO_2体系,CYPHOS IL-201/CHF_3体系的黏度降低多。在离子液体CYPHOS IL-201与超临界流体(CHF_3、CO_2)形成的两相体系中,离子液体CYPHOS IL-201具有保护蛋白结构的作用,使CALB蛋白结构更加稳定。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶b 离子液体 超临界流体 分子模拟
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用蛋白质工程技术提取和修饰南极假丝酵母脂肪酶B
9
作者 于丰海 李丽杰 杨丰科 《化学与生物工程》 CAS 2005年第12期5-7,共3页
从南极假丝酵母中提取的脂肪酶B,具有较高的对应异构体选择性,广泛应用在培养基中,作为不对称有机化学的生物催化剂。近年来,一系列组合蛋白质工程研究和扩展了南极假丝酵母脂肪酶的催化和物理特性。这些工程不但生产出了指定的催化剂,... 从南极假丝酵母中提取的脂肪酶B,具有较高的对应异构体选择性,广泛应用在培养基中,作为不对称有机化学的生物催化剂。近年来,一系列组合蛋白质工程研究和扩展了南极假丝酵母脂肪酶的催化和物理特性。这些工程不但生产出了指定的催化剂,还有助于阐明酶的结构-作用关系,并且有助于说明这些酶的对应异构体选择性。进一步的研究将在工程与酶的关系方面展开讨论。 展开更多
关键词 南极假丝酵母 脂肪酶b 蛋白质工程
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南极假丝酵母脂肪酶B的催化机理及应用前景 被引量：21
10
作者 赵天涛 高静 李伟杰 《分子催化》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期155-160,共6页
关键词 南极假丝酵母脂肪酶 催化机理 影响因素 双底物抑制 应用
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南极假丝酵母产脂肪酶在15L发酵罐中培养条件的研究 被引量：4
11
作者 李燕妮 衣婷婷 李龙森 《化学与生物工程》 CAS 2007年第7期43-44,48,共3页
对15 L发酵罐中南极假丝酵母(C.antarctica DSM3855)的发酵工艺条件进行了研究,确定了最适的产酶工艺条件:搅拌速度为300 r.min-1,通气量为10 L.min-1,接种量为10%,添加GPE作为消泡剂。在此培养条件下,培养54 h产酶达到高峰值,最高酶活... 对15 L发酵罐中南极假丝酵母(C.antarctica DSM3855)的发酵工艺条件进行了研究,确定了最适的产酶工艺条件:搅拌速度为300 r.min-1,通气量为10 L.min-1,接种量为10%,添加GPE作为消泡剂。在此培养条件下,培养54 h产酶达到高峰值,最高酶活力达到19.3 U.mL-1。 展开更多
关键词 发酵 南极假丝酵母 发酵罐
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硫酸铵-丙酮协同沉淀法纯化南极假丝酵母产脂肪酶 被引量：3
12
作者 李燕妮 曹红光 《化学与生物工程》 CAS 2006年第5期36-37,48,共3页
采用硫酸铵-丙酮协同沉淀法,对南极假丝酵母产脂肪酶(CALB)进行了分离纯化研究。经正交实验确定纯化工艺为:向酶液中加入硫酸铵至饱和度45%的同时加入0.3倍酶液体积的丙酮;离心后再向上清液中加入硫酸铵至饱和度75%,分相后,相界面处沉... 采用硫酸铵-丙酮协同沉淀法,对南极假丝酵母产脂肪酶(CALB)进行了分离纯化研究。经正交实验确定纯化工艺为:向酶液中加入硫酸铵至饱和度45%的同时加入0.3倍酶液体积的丙酮;离心后再向上清液中加入硫酸铵至饱和度75%,分相后,相界面处沉淀即为脂肪酶粗品。经分离纯化后,酶活回收率为54%、纯化倍数为2.72。 展开更多
关键词 南极假丝酵母产脂肪酶 纯化 协同沉淀
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AOT/Triton X-100混合反胶束体系中假丝酵母脂肪酶催化蓖麻油水解的活性 被引量：9
13
作者 张玉霞 赵继华 +3 位作者 杜中玉 方建 安学勤 沈伟国 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1483-1486,共4页
研究了二(2-乙基己基)琥珀酸磺酸钠(AOT)/Triton X-100混合反胶束体系中假丝酵母脂肪酶(candida rugosa lipase)催化蓖麻油水解的反应.考察了Triton X-100占总表面活性剂的摩尔分数(x(Triton X-100))、水与总体表面活性剂的摩尔比(ω_0)... 研究了二(2-乙基己基)琥珀酸磺酸钠(AOT)/Triton X-100混合反胶束体系中假丝酵母脂肪酶(candida rugosa lipase)催化蓖麻油水解的反应.考察了Triton X-100占总表面活性剂的摩尔分数(x(Triton X-100))、水与总体表面活性剂的摩尔比(ω_0)、pH值、反应温度以及底物蓖麻油的浓度等因素对酶活性的影响.研究结果表明,加入非离子表面活性剂Triton X-100可以使假丝酵母脂肪酶的活性得到显著提高,但是当底物蓖麻油的浓度大于0.24 mol·L^(-1)时,会对假丝酵母脂肪酶产生抑制作用. 展开更多
关键词 混合反胶束 假丝酵母脂肪酶 蓖麻油 AOT TRITON X-100
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粗状假丝酵母产脂肪酶发酵条件的优化 被引量：8
14
作者 陈林林 辛嘉英 +1 位作者 张颖鑫 张帅 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期183-185,共3页
利用粗状假丝酵母发酵生产脂肪酶,通过对粗状假丝酵母胞外脂肪酶发酵过程的培养基和发酵培养条件的优化,得出产脂肪酶的最佳条件:碳源为聚乙烯醇乳化的橄榄油和葡萄糖,氮源为蛋白胨和尿素,酵母浸出液4.5g/L,MgSO4.7H2O0.4g/L,K2HPO43.5g... 利用粗状假丝酵母发酵生产脂肪酶,通过对粗状假丝酵母胞外脂肪酶发酵过程的培养基和发酵培养条件的优化,得出产脂肪酶的最佳条件:碳源为聚乙烯醇乳化的橄榄油和葡萄糖,氮源为蛋白胨和尿素,酵母浸出液4.5g/L,MgSO4.7H2O0.4g/L,K2HPO43.5g/L;反应温度30℃,培养基初始pH7.0,接种量为10%,摇床转速180r/min,培养24h。在此发酵条件下,发酵液的最高酶活达到12U/mL。 展开更多
关键词 粗状假丝酵母 脂肪酶 发酵条件
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214型离子交换树脂固定化假丝酵母脂肪酶的研究 被引量：6
15
作者 钱俊青 蒋盛蓝 +2 位作者 秦德怀 郭辉 凌春英 《浙江工业大学学报》 CAS 2013年第3期244-249,249,共6页
以假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase)催化脂肪酸甲酯化是植物油精制副产物中提取天然维生素E的重要预处理反应.为提高预处理效果,通过固定化假丝酵母脂肪酶提高其酯化能力,降低水解反应的能力.笔者在不同性能树脂筛选的基础上,开... 以假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase)催化脂肪酸甲酯化是植物油精制副产物中提取天然维生素E的重要预处理反应.为提高预处理效果,通过固定化假丝酵母脂肪酶提高其酯化能力,降低水解反应的能力.笔者在不同性能树脂筛选的基础上,开展了离子交换树脂214型固定化假丝酵母脂肪酶的研究.以酶固定化率为指标,开展了酶质量浓度、树脂的量、缓冲液pH、固定化温度、时间和振荡速率等条件试验和响应面试验,得到的最适固定化条件为酶质量浓度6.09mg/mL,5mL酶液中加入0.75g树脂,缓冲液pH 8.4,振荡转速134.26r/min,固定化温度30℃,固定化时间4h.该条件下,假丝酵母脂肪酶与树脂的结合率最高,酶的水解作用基本消失,酯化能力得到保持,可以获得较好的维生素E提纯预处理效果. 展开更多
关键词 假丝酵母脂肪酶 固定化 酯化性能 催化活性
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粗状假丝酵母(Candida valida T2)生产脂肪酶的发酵条件 被引量：8
16
作者 肖海群 段学辉 牛春铃 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期62-66,共5页
对粗状假丝酵母产生脂肪酶的培养条件进行了研究。结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜培养基组成为:桐油15mL/L,黄豆粉30g/L,糊精10g/L,硝酸铵10g/L,MgSO4·7H2O1g/L,K2HPO42g/L,Tween800.5g/L;最佳培养为温度30℃、发酵液起始pH6,摇瓶... 对粗状假丝酵母产生脂肪酶的培养条件进行了研究。结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜培养基组成为:桐油15mL/L,黄豆粉30g/L,糊精10g/L,硝酸铵10g/L,MgSO4·7H2O1g/L,K2HPO42g/L,Tween800.5g/L;最佳培养为温度30℃、发酵液起始pH6,摇瓶发酵脂肪酶活力达到1467U/mL。 展开更多
关键词 粗状假丝酵母 脂肪酶 发酵
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固定化假丝酵母脂肪酶催化合成辛酸甘油酯 被引量：4
17
作者 孙猛 尹春华 +2 位作者 陈君 陈必强 谭天伟 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1328-1331,共4页
以自制固定化假丝酵母脂肪酶作为催化剂,研究了无溶剂体系中辛酸和甘油直接酯化合成辛酸甘油酯的反应条件。考察了酶的种类、底物的物质的量之比、温度、酶量、甘油的初始含水量和反应时间等因素对辛酸转化率和产物组成的影响。结果证明... 以自制固定化假丝酵母脂肪酶作为催化剂,研究了无溶剂体系中辛酸和甘油直接酯化合成辛酸甘油酯的反应条件。考察了酶的种类、底物的物质的量之比、温度、酶量、甘油的初始含水量和反应时间等因素对辛酸转化率和产物组成的影响。结果证明,以纺织物作为载体制备的固定化假丝酵母脂肪酶适宜催化辛酸甘油酯的合成。最优反应条件为:辛酸与甘油的物质的量之比为2∶1,固定化假丝酵母脂肪酶加量为0.5g/0.69g甘油,温度为40℃,振荡培养箱转速为190 r/min。最优反应条件下辛酸转化率可以达到94%以上,经过简单处理的固定化酶可以重复使用4批。 展开更多
关键词 固定化假丝酵母脂肪酶 辛酸 甘油酯
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固定化假丝酵母99-125脂肪酶催化酯化脂肪酸低碳醇酯反应条件的研究 被引量：15
18
作者 邓利 刘柳 +1 位作者 董贤 谭天伟 《现代化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第9期30-33,37,共5页
以硅藻土和纺织品为载体 ,采用吸附法制备固定化脂肪酶 ,研究了固定化假丝酵母 99 1 2 5脂肪酶在有机溶剂中催化脂肪酸低碳醇酯酯化合成过程中 ,有机溶剂性质、脂肪酸与低碳醇的结构、pH值、反应温度和体系含水量、低碳醇的抑制作用等... 以硅藻土和纺织品为载体 ,采用吸附法制备固定化脂肪酶 ,研究了固定化假丝酵母 99 1 2 5脂肪酶在有机溶剂中催化脂肪酸低碳醇酯酯化合成过程中 ,有机溶剂性质、脂肪酸与低碳醇的结构、pH值、反应温度和体系含水量、低碳醇的抑制作用等因素对酯化过程的影响。试验结果表明 :底物低碳醇需要采用流加方式加入体系 ,石油醚是最适宜的有机溶剂 ,脂肪酸与醇的碳链越长 ,越易于酯化 ;固定化脂肪酶对直链醇的选择性优于支链醇。以石油醚为有机溶剂 ,在反应温度为 40℃、pH值为 7时 ,硬脂酸与甲醇的酯化率达 95 % ;反应后期应除去体系中的水以避免酶失活。固定化酶间歇催化油酸与甲醇的酯化时 ,重复使用 1 5次 (每次 2 4h) ,其操作半衰期约为 360h。 展开更多
关键词 固定化 假丝酵母99-125脂肪酶 催化 酯化 脂肪酸低碳醇酯 技 应条件 研究
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磁性多孔微球固定化假丝酵母脂肪酶的研究 被引量：2
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作者 肖志红 吴红 +3 位作者 李昌珠 张爱华 刘汝宽 吴晓芙 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期68-73,共6页
通过悬浮聚合法制备了含环氧基团的聚合物载体高分子磁性多孔微球（GHD），用TEM、SEM和Micromeritics ASAP2010等对聚合物载体进行了表征。考察了载体中交联剂含量、固定化时间、给酶量等因素对固定化脂肪酶催化活性的影响。结果表明，... 通过悬浮聚合法制备了含环氧基团的聚合物载体高分子磁性多孔微球（GHD），用TEM、SEM和Micromeritics ASAP2010等对聚合物载体进行了表征。考察了载体中交联剂含量、固定化时间、给酶量等因素对固定化脂肪酶催化活性的影响。结果表明，Fe3O3纳米粒子粒径20nm，分布均匀，磁性多孔微球粒径从几十微米到一百多微米，粒子大小大体呈正态分布且分布较窄，平均粒径为110μm，直径在区间80—150μm范围内的粒子占90％以上。微球表面呈皱褶态且呈现多孔性，孔径从几个纳米到几十纳米，为闭孔，且孔间互相贯穿。固定化酶最适条件为给酶量125mg／g，固定化时间7h，此时酶的吸附量为118．5mg／g，比酶活7．56×10^5U／g，酶的活力回收率95％。以GHD为载体制备的固定化脂肪酶最佳反应温度从37℃上升到42℃，最适反应pH从7．2提高到7．5，固定化后酶对温度和pH的敏感性降低，重复使用12次，固定化酶的活力都能保持在92％以上。 展开更多
关键词 高分子磁性多孔微球 假丝酵母脂肪酶 固定化 催化活性
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产碱性脂肪酶热带假丝酵母LYSC-3的筛选、鉴定及发酵条件的优化 被引量：1
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作者 肖凯夫 郭晟 +2 位作者 庞一林 林元山 邹冬生 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期218-220,共3页
以橄榄油为唯一碳源,以溴钾酚紫为显色剂,采用琼脂平板法从富含油脂的土壤中筛选到一株产碱性脂肪酶野生型菌株LYSC-3。经形态学、生理生化和分子生物学的鉴定,确定菌株LYSC-3为热带假丝酵母(Candida tropicalis)。经发酵条件优化,菌株L... 以橄榄油为唯一碳源,以溴钾酚紫为显色剂,采用琼脂平板法从富含油脂的土壤中筛选到一株产碱性脂肪酶野生型菌株LYSC-3。经形态学、生理生化和分子生物学的鉴定,确定菌株LYSC-3为热带假丝酵母(Candida tropicalis)。经发酵条件优化,菌株LYSC-3的最佳产碱性脂肪酶的发酵条件为:橄榄油10g·L-1、蛋白胨5g·L-1、蔗糖20g·L-1、(NH4)2SO40.5g·L-1、MgSO4·7H2O0.2g·L-1,K2HPO40.2g·L-1,pH8.0,35℃,150r·min-1摇床振荡培养3d,获得碱性脂肪酶最高酶活力达38.6U·mL-1。 展开更多
关键词 碱性脂肪酶 发酵条件 假丝酵母 菌株筛选
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