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硫酸铵-丙酮协同沉淀法纯化南极假丝酵母产脂肪酶 被引量:3
1
作者 李燕妮 曹红光 《化学与生物工程》 CAS 2006年第5期36-37,48,共3页
采用硫酸铵-丙酮协同沉淀法,对南极假丝酵母产脂肪酶(CALB)进行了分离纯化研究。经正交实验确定纯化工艺为:向酶液中加入硫酸铵至饱和度45%的同时加入0.3倍酶液体积的丙酮;离心后再向上清液中加入硫酸铵至饱和度75%,分相后,相界面处沉... 采用硫酸铵-丙酮协同沉淀法,对南极假丝酵母产脂肪酶(CALB)进行了分离纯化研究。经正交实验确定纯化工艺为:向酶液中加入硫酸铵至饱和度45%的同时加入0.3倍酶液体积的丙酮;离心后再向上清液中加入硫酸铵至饱和度75%,分相后,相界面处沉淀即为脂肪酶粗品。经分离纯化后,酶活回收率为54%、纯化倍数为2.72。 展开更多
关键词 南极假丝酵母产脂肪酶 纯化 协同沉淀
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南极假丝酵母产脂肪酶在15L发酵罐中培养条件的研究 被引量:4
2
作者 李燕妮 衣婷婷 李龙森 《化学与生物工程》 CAS 2007年第7期43-44,48,共3页
对15 L发酵罐中南极假丝酵母(C.antarctica DSM3855)的发酵工艺条件进行了研究,确定了最适的产酶工艺条件:搅拌速度为300 r.min-1,通气量为10 L.min-1,接种量为10%,添加GPE作为消泡剂。在此培养条件下,培养54 h产酶达到高峰值,最高酶活... 对15 L发酵罐中南极假丝酵母(C.antarctica DSM3855)的发酵工艺条件进行了研究,确定了最适的产酶工艺条件:搅拌速度为300 r.min-1,通气量为10 L.min-1,接种量为10%,添加GPE作为消泡剂。在此培养条件下,培养54 h产酶达到高峰值,最高酶活力达到19.3 U.mL-1。 展开更多
关键词 发酵 南极酵母 发酵罐
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南极假丝酵母脂肪酶B在黑曲霉中的表达及酶学性质研究
3
作者 邵志伟 马佳欣 +4 位作者 李柱 栾贺然 张会 杜兴 李杰 《饲料博览》 2025年第2期27-34,共8页
为实现南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)在黑曲霉(Aspergillus niger)中的表达,研究选用黑曲霉高效分泌信号肽SglaA、SpepB和融合蛋白XynB分别构建3个CALB的表达载体,并转入黑曲霉TH-2(ΔasaA::pyrG)、TH-2(Δasa... 为实现南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)在黑曲霉(Aspergillus niger)中的表达,研究选用黑曲霉高效分泌信号肽SglaA、SpepB和融合蛋白XynB分别构建3个CALB的表达载体,并转入黑曲霉TH-2(ΔasaA::pyrG)、TH-2(ΔasaA::scerv29ΔprtT::pyrG)中,得到6株黑曲霉重组菌株。摇瓶发酵重组菌株并进行酶活力检测,发现以SglaA为信号肽的CALB酶活是以SpepB为信号肽酶活的105%和108%;以XynB为融合蛋白的CALB酶活是未融合XynB的114%~123%;敲除prtT的CALB重组菌株酶活是未敲除菌株酶活的102%~105%。以SglaA为信号肽,XynB为融合蛋白并转入TH-2(ΔasaA::scerv29ΔprtT::pyrG)的重组菌株酶活力较高,发酵至第12天为21.78±0.77 U·mL^(-1)。对重组CALB进行酶学性质分析,其最适温度为50℃,在30~50℃范围内温度能保持70%以上的相对酶活力;最适pH为8.0,在p H 6.0~8.0时较为稳定并且能保持80%左右的相对酶活力,Na^(+)、K^(+)和甘氨酸对CALB的酶活性产生了增强效果。 展开更多
关键词 南极酵母脂肪酶B 黑曲霉 信号肽 酶活力
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产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)利用未脱毒纤维素水解液开放式发酵产甘油
4
作者 赵晓红 宗红 +1 位作者 陆信曜 诸葛斌 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第5期70-77,共8页
未脱毒水解液中的醛类、酚类等物质抑制菌株的生长发酵。产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)具有多重抗逆性能,过表达相关抗性基因构建重组菌株并进行筛选。相比于对照菌株,过表达CgGCN4的重组菌株在含有3.0 g/L糠醛、2.0 g/L香草... 未脱毒水解液中的醛类、酚类等物质抑制菌株的生长发酵。产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)具有多重抗逆性能,过表达相关抗性基因构建重组菌株并进行筛选。相比于对照菌株,过表达CgGCN4的重组菌株在含有3.0 g/L糠醛、2.0 g/L香草醛、3.5 g/L乙酸的高糖培养基中生物量分别提高25.2%、14.6%、5.2%;葡萄糖消耗速率分别提高9.9%、5.5%、13.1%;在3.0 g/L糠醛的胁迫下甘油产量提高23.4%。在糠醛、香草醛或乙酸的胁迫下,重组菌株胞内活性氧水平的提高程度分别降低35.2%、28.0%、15.3%,与碘化丙啶的结合水平均有不同程度的降低,表明重组菌株可通过降低胞内活性氧的积累、保持细胞膜的完整性来保持菌株优良的生长与发酵性能。将抗性重组菌株应用于未脱毒甘蔗渣水解液开放式发酵生产甘油,可使耗糖速率提高20.0%;生物量提高12.3%;甘油产量提高21.7%。该研究为未脱毒纤维素水解液的应用提供了新思路及遗传资源。 展开更多
关键词 甘油酵母 未脱毒水解液 GCN4 甘油 糠醛 香草醛 乙酸 开放式发酵
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南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母的表达及酶学性质研究 被引量:7
5
作者 孙金鹏 钱圣一 +1 位作者 敬科举 卢英华 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期765-771,共7页
为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticalipase B,CALB)的表达量,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得... 为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticalipase B,CALB)的表达量,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得到多拷贝转化子.摇瓶发酵120 h后上清液酶活力达到46 U/mL,通过金属螯合层析纯化发酵液将CALB纯化了5.23倍,比活力达到856.7 U/mg,去糖基化实验显示重组CALB比野生型CALB大5 ku.实验考察了不同反应温度、pH值和金属离子对重组CALB活性和稳定性的影响,发现重组CALB最适反应温度和pH分别为30℃和6.5,在pH 5.0~8.0之间以及40℃以下有较好稳定性,金属离子(10 mmol/L)Ca2+,Zn2+,Mn2+有助于CALB酶活力的提高,而Cu2+,Ag+,Fe3+强烈抑制酶催化反应. 展开更多
关键词 南极酵母脂肪酶B 毕赤酵母 分泌表达 酶学性质
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粗状假丝酵母产脂肪酶发酵条件的优化 被引量:8
6
作者 陈林林 辛嘉英 +1 位作者 张颖鑫 张帅 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期183-185,共3页
利用粗状假丝酵母发酵生产脂肪酶,通过对粗状假丝酵母胞外脂肪酶发酵过程的培养基和发酵培养条件的优化,得出产脂肪酶的最佳条件:碳源为聚乙烯醇乳化的橄榄油和葡萄糖,氮源为蛋白胨和尿素,酵母浸出液4.5g/L,MgSO4.7H2O0.4g/L,K2HPO43.5g... 利用粗状假丝酵母发酵生产脂肪酶,通过对粗状假丝酵母胞外脂肪酶发酵过程的培养基和发酵培养条件的优化,得出产脂肪酶的最佳条件:碳源为聚乙烯醇乳化的橄榄油和葡萄糖,氮源为蛋白胨和尿素,酵母浸出液4.5g/L,MgSO4.7H2O0.4g/L,K2HPO43.5g/L;反应温度30℃,培养基初始pH7.0,接种量为10%,摇床转速180r/min,培养24h。在此发酵条件下,发酵液的最高酶活达到12U/mL。 展开更多
关键词 粗状酵母 脂肪酶 发酵条件
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粗状假丝酵母(Candida valida T2)生产脂肪酶的发酵条件 被引量:8
7
作者 肖海群 段学辉 牛春铃 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期62-66,共5页
对粗状假丝酵母产生脂肪酶的培养条件进行了研究。结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜培养基组成为:桐油15mL/L,黄豆粉30g/L,糊精10g/L,硝酸铵10g/L,MgSO4·7H2O1g/L,K2HPO42g/L,Tween800.5g/L;最佳培养为温度30℃、发酵液起始pH6,摇瓶... 对粗状假丝酵母产生脂肪酶的培养条件进行了研究。结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜培养基组成为:桐油15mL/L,黄豆粉30g/L,糊精10g/L,硝酸铵10g/L,MgSO4·7H2O1g/L,K2HPO42g/L,Tween800.5g/L;最佳培养为温度30℃、发酵液起始pH6,摇瓶发酵脂肪酶活力达到1467U/mL。 展开更多
关键词 粗状酵母 脂肪酶 发酵
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表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的毕赤酵母FM22发酵培养基响应面优化 被引量:3
8
作者 陈明祥 谢万勇 +3 位作者 廖锡豪 陈家驹 韩双艳 林影 《中国酿造》 CAS 2012年第10期52-56,共5页
FM22培养基以丰富的氮源、较强的适应性等优势,适用于毕赤酵母发酵。为进一步对毕赤酵母发酵表达南极假丝酵母脂肪酶B进行优化,选取培养基中对其影响较大的CaSO4、KH2PO4、(NH4)2SO4、PTM4为自变量,酶活力为响应值。通过单因素试验得自... FM22培养基以丰富的氮源、较强的适应性等优势,适用于毕赤酵母发酵。为进一步对毕赤酵母发酵表达南极假丝酵母脂肪酶B进行优化,选取培养基中对其影响较大的CaSO4、KH2PO4、(NH4)2SO4、PTM4为自变量,酶活力为响应值。通过单因素试验得自变量最佳值及高低水平,再采用Box-Behnken组合设计方法,模拟二次多项式回归方程的预测模型,研究各自变量及其交互作用对酶活力的影响。最终得到自变量最佳值:KH2PO445.02g/L、(NH4)2SO45.63g/L、CaSO40.46g/L、PTM4 1.63mL/L,酶活力为3214.7U/gDCW,较优化前提高约40%。 展开更多
关键词 毕赤酵母表面展示系统 南极酵母脂肪酶B FM22培养基 响应面优化
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假丝酵母(Candidasp.Jw4)的产脂肪酶条件及脱脂能力 被引量:1
9
作者 张双凤 张瑞英 +1 位作者 张贺迎 张元亮 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第3期268-272,共5页
从采集的家庭污水样品中 ,分离筛选出一株暂定名为假丝酵母 (Candidasp .Jw4 )的菌株 .该菌株在含油的筛选琼脂平皿上生长良好 ,具有丰满的假菌丝 .最佳产酶条件是 :发酵培养基 (g/L)为菜籽油 30 ,玉米浆 30 ,酵母粉 2 ,K2 HPO4 5 ,MgSO... 从采集的家庭污水样品中 ,分离筛选出一株暂定名为假丝酵母 (Candidasp .Jw4 )的菌株 .该菌株在含油的筛选琼脂平皿上生长良好 ,具有丰满的假菌丝 .最佳产酶条件是 :发酵培养基 (g/L)为菜籽油 30 ,玉米浆 30 ,酵母粉 2 ,K2 HPO4 5 ,MgSO4 ·7H2 O 1和CaCl2 0 .2 ,pH 6 .5 ,2 8℃ .Jw4脂肪酶活力最适温度为4 2℃、最适 pH 8.2 .Jw4既可利用植物油也可降解动物油 .在菜籽油 (皂化值 174 .74 )为 2 5 0 g/L或猪油 (皂化值 185 .10 )为 2 5 0 g/L的反应液中 ,加入粗酶液 ,分别使反应液酶浓度为 10u/mL和 2 0u/mL ,pH 8.0~8.2 ,4 0℃通气振荡 12 0h ,菜籽油和猪油分别脱脂达 80 %和 73% . 展开更多
关键词 脱脂能力 脂肪酶 酵母 脱脂率 酶条件 发酵生 发酵培养基
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产碱性脂肪酶热带假丝酵母LYSC-3的筛选、鉴定及发酵条件的优化 被引量:1
10
作者 肖凯夫 郭晟 +2 位作者 庞一林 林元山 邹冬生 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期218-220,共3页
以橄榄油为唯一碳源,以溴钾酚紫为显色剂,采用琼脂平板法从富含油脂的土壤中筛选到一株产碱性脂肪酶野生型菌株LYSC-3。经形态学、生理生化和分子生物学的鉴定,确定菌株LYSC-3为热带假丝酵母(Candida tropicalis)。经发酵条件优化,菌株L... 以橄榄油为唯一碳源,以溴钾酚紫为显色剂,采用琼脂平板法从富含油脂的土壤中筛选到一株产碱性脂肪酶野生型菌株LYSC-3。经形态学、生理生化和分子生物学的鉴定,确定菌株LYSC-3为热带假丝酵母(Candida tropicalis)。经发酵条件优化,菌株LYSC-3的最佳产碱性脂肪酶的发酵条件为:橄榄油10g·L-1、蛋白胨5g·L-1、蔗糖20g·L-1、(NH4)2SO40.5g·L-1、MgSO4·7H2O0.2g·L-1,K2HPO40.2g·L-1,pH8.0,35℃,150r·min-1摇床振荡培养3d,获得碱性脂肪酶最高酶活力达38.6U·mL-1。 展开更多
关键词 碱性脂肪酶 发酵条件 酵母 菌株筛选
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粗状假丝酵母产脂肪酶催化特性及水解猪油的初步研究 被引量:2
11
作者 董恒涛 吴晓英 +1 位作者 刘仁春 林影 《饲料工业》 2008年第12期8-11,共4页
通过比较,研究了粗状假丝酵母诱变株产脂肪酶催化水解不同底物的相对活力,包括低级酯、脂肪酸甘油酯和天然油脂。并对粗状假丝酵母产脂肪酶催化水解猪油反应中的pH值、温度、时间、加酶量、乳化剂用量和Ca2+浓度等因素进行了研究,得出p... 通过比较,研究了粗状假丝酵母诱变株产脂肪酶催化水解不同底物的相对活力,包括低级酯、脂肪酸甘油酯和天然油脂。并对粗状假丝酵母产脂肪酶催化水解猪油反应中的pH值、温度、时间、加酶量、乳化剂用量和Ca2+浓度等因素进行了研究,得出pH值为7.5、温度为45℃、水解反应时间为72h、加8ml粗酶液、2%油的乳化剂、Ca2+浓度为75mmol/l时,猪油有最佳水解率。通过对该酶反应动力学进行研究得出其水解反应的米氏常数Km为12.25×10-3mol/l和最大反应速率Vmax为11.14μmol/min。 展开更多
关键词 脂肪酶 粗状酵母 水解
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假丝酵母菌GXU08产脂肪酶发酵条件的优化
12
作者 沈芳 刘雄民 +2 位作者 刘力恒 黄荣韶 李志刚 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期689-693,共5页
以假丝酵母菌GXU08产脂肪酶催化合成麝香类香料—环十五内酯目前已备受关注,在一定条件下,环十五内酯的转化率与脂肪酶的水解酶活有直接关系,酶活越高其催化合成环十五内酯的能力越强。通过单因素试验和正交试验,对假丝酵母菌GXU08产脂... 以假丝酵母菌GXU08产脂肪酶催化合成麝香类香料—环十五内酯目前已备受关注,在一定条件下,环十五内酯的转化率与脂肪酶的水解酶活有直接关系,酶活越高其催化合成环十五内酯的能力越强。通过单因素试验和正交试验,对假丝酵母菌GXU08产脂肪酶的发酵条件进行优化。结果表明:最佳发酵培养基配方为蔗糖0.5%,淀粉0.5%,蛋白胨1.5%,K_2HPO_40.05%,MgSO_40.15%,(NH_4)_2SO_41%,茶油1.5%,菜籽油1.5%,pH=8,此培养基在28℃,180 r/min的条件下发酵培养48h,脂肪酶水解活力达到27.53 U/mL,是初始发酵培养基条件下所得脂肪酶酶活的3.74倍;其环十五内酯的转化率为16.6%,是优化前的4倍。 展开更多
关键词 酵母 脂肪酶 发酵条件 正交实验 环十五内酯
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表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的重组毕赤酵母高密度发酵条件优化 被引量:3
13
作者 冯琮 林影 +2 位作者 梁书利 苏国栋 韩双艳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期29-34,共6页
以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticlipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40g/L、硫酸铵4... 以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticlipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40g/L、硫酸铵4g/L、PTM14mL/L和CaSO410mmol/L;然后利用多功能补料摇床确定了菌株最适生长和产酶的pH分别为5.5和7.0,最适生长和产酶温度为30℃;再在2L发酵罐上放大,并对甘油流加模式和甲醇流加模式进行了优化筛选,确定了以9.6mL/(L.h)的流速流加甘油12h能有效提高菌体密度;以6.4mL/(L.h)的流速恒速流加甲醇比恒定溶氧流加甲醇诱导产酶更佳。最终单位菌体酶活力可达348.4U/g,比甘油含量40g/L、硫酸铵10g/L、PTM14.35mL/L、CaSO40.93g/L,以6.4mL/(L.h)的流速流加甘油4h和以恒定溶氧流加甲醇的未优化条件下提高34.8%。最后通过细胞表面荧光强度检测和全细胞催化合成活力对比,发现优化后单位菌体展示的蛋白表达量得到提高。 展开更多
关键词 发酵优化 酵母表面展示 南极酵母脂肪酶B 高密度
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一株柱状假丝酵母产脂肪酶条件的优化研究 被引量:4
14
作者 徐启峻 滕宏飞 +2 位作者 黄程 赵玉谨 罗红宇 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期70-75,共6页
对一株柱状假丝酵母菌的产酶条件进行了优化。确定最佳培养基配方为橄榄油6 g/L、酵母膏9 g/L、吐温-80 1%、Ca Cl20.5 g/L、K2HPO42 g/L、Mg SO4·7H2O 2 g/L、p H自然;确定最优发酵条件为培养基初始p H 5.2、培养时间25 h、摇床转... 对一株柱状假丝酵母菌的产酶条件进行了优化。确定最佳培养基配方为橄榄油6 g/L、酵母膏9 g/L、吐温-80 1%、Ca Cl20.5 g/L、K2HPO42 g/L、Mg SO4·7H2O 2 g/L、p H自然;确定最优发酵条件为培养基初始p H 5.2、培养时间25 h、摇床转速150 r/min。在最适产酶条件下,重复发酵5批后柱状假丝酵母所产脂肪酶平均酶活在(15.00±0.05)U/m L,RSD为2.34%,重复性较好。该株酵母菌生存环境为酸性,并在p H为5.2时产酶效果最好,推导该脂肪酶为酸性脂肪酶,对油脂水解产生的游离脂肪酸将会有一定程度的抵抗作用。此外,柱状假丝酵母培养25 h后即可获得最佳产酶效果,发酵周期短,既能节约成本,又能提高单位时间产酶量,适用于工业化生产。 展开更多
关键词 柱状酵母 酸性脂肪酶 生长
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南极假丝酵母脂肪酶B在黑曲霉中的分泌表达及其硅藻土固定化应用 被引量:6
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作者 张玲敏 王斌 潘力 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第14期107-114,共8页
为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)表达量,根据黑曲霉(Aspergillus niger)密码子偏好性设计合成CALB基因,以PnaII/tpi为启动子构建CALB表达载体并转化到黑曲霉HL-1中表达,摇瓶发酵120 h后上清液中重组CALB... 为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)表达量,根据黑曲霉(Aspergillus niger)密码子偏好性设计合成CALB基因,以PnaII/tpi为启动子构建CALB表达载体并转化到黑曲霉HL-1中表达,摇瓶发酵120 h后上清液中重组CALB活力为171 U/mL。研究重组CALB的酶学性质,最适反应温度和pH值分别为50℃和8.0,在pH 6.0~9.0和45℃以下具有较高的稳定性,10 mmol/L Cu2+、Zn2+和0.1 g/100 mL十二烷基硫酸钠强烈抑制酶活力,而1 mmol/L Ca2+、0.1 g/100 mL山梨醇对酶活力具有非常明显的激活作用。此外,以硅藻土为载体固定CALB,固定化酶活力为187 U/g。将制备的硅藻土-CALB固定化酶用于生物合成己酸乙酯,经反应条件优化后在无溶剂体系中己酸乙酯产率达91%。 展开更多
关键词 南极酵母脂肪酶B 黑曲霉 分泌表达 酶学性质 固定化 酯化
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大孔型纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵微胶囊固定假丝酵母产脂肪酶 被引量:2
16
作者 季艳艳 姚善泾 +2 位作者 张俊 关怡新 林东强 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2162-2165,共4页
In order to produce macromolecules by using the immobilized cells in microcapsules, a novel macro-porous NaCS-PDMDAAC capsules system was used to immobilize Candida valida in a semi-continuous culture mode for produci... In order to produce macromolecules by using the immobilized cells in microcapsules, a novel macro-porous NaCS-PDMDAAC capsules system was used to immobilize Candida valida in a semi-continuous culture mode for producing lipase. It was found that the encapsulation system had no negative effect on the growth and lipase productivity, and the lipase produced inside capsules could diffuse freely to the media outside capsules. The cultivation with the capsules was carried out for 15 batches and the lipase in each batch had almost the same activity. In comparison with free cell cultivation, the immobilized cell fermentation shortened obviously the period of glucose consumption from 24 hours to 8 hours and increased lipase productivity. 展开更多
关键词 脂肪酶 细胞固定化 大孔型微胶囊 纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵微胶囊 酵母
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黑曲霉表面展示南极假丝酵母脂肪酶B催化仲醇动力学拆分 被引量:2
17
作者 李远锋 张锟 +3 位作者 韩双艳 郑穗平 梁书利 林影 《化学与生物工程》 CAS 2018年第5期53-58,共6页
光学活性仲醇是合成多种生物活性化合物的原料和关键中间体,微生物细胞表面展示酶在生物催化和生物转化制备生化产品等方面表现出良好的应用性。研究了黑曲霉表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)制备的全细... 光学活性仲醇是合成多种生物活性化合物的原料和关键中间体,微生物细胞表面展示酶在生物催化和生物转化制备生化产品等方面表现出良好的应用性。研究了黑曲霉表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)制备的全细胞催化剂(AN-CALB)动力学拆分仲醇的催化性能。以2-辛醇作为反应底物,研究了酰基供体、2-辛醇与乙酸异丙烯酯物质的量比、AN-CALB添加量、水活度、温度及溶剂对AN-CALB催化2-辛醇拆分的影响,确定最优反应条件为:以乙酸异丙烯酯为酰基供体、2-辛醇与乙酸异丙烯酯物质的量比1∶1、AN-CALB添加量50 g·L-1、水活度0.11、温度45℃、以甲苯为溶剂,在此条件下,反应12 h的底物转化率达47.4%,eep值为99.6%,E值大于600。在最优反应条件下,AN-CALB对8种仲醇均表现出较好的拆分效果,底物转化率最高接近50%。该研究为仲醇动力学拆分提供了新的催化剂选择。 展开更多
关键词 南极酵母脂肪酶B 细胞表面展示 黑曲霉 全细胞催化剂 仲醇 动力学拆分
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南极假丝酵母脂肪酶B基因在大肠杆菌中的表达和发酵优化 被引量:7
18
作者 吴蓉 曹佳睿 +3 位作者 曹君 刘飞翔 杨猛 苏二正 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期138-148,共11页
旨在利用大肠杆菌实现南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因的高效可溶性表达,并降低生产成本。构建带有不同信号肽的CALB基因表达质粒,转化至不同大肠杆菌宿主中,在摇瓶中进行基础培养基、诱导条件、培养基组成成分和进程曲线的优化。结果显... 旨在利用大肠杆菌实现南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因的高效可溶性表达,并降低生产成本。构建带有不同信号肽的CALB基因表达质粒,转化至不同大肠杆菌宿主中,在摇瓶中进行基础培养基、诱导条件、培养基组成成分和进程曲线的优化。结果显示,带有PelB信号肽的重组菌pET25b-CALB-1/Rosetta(DE3)在20℃下使用0.5%(W/V)乳糖在TY培养基中诱导表达效果最好,优化后的合成培养基成分为1.75%(W/V)山梨醇、2.25%(W/V)鱼蛋白胨、1%(W/V)安琪酵母提取物、0.75%(W/V)Na2HPO4。在摇瓶中诱导60 h后,CALB酶活力最高达到35.67 U/mL,相比于初始发酵酶活力提高了17.77倍,是目前大肠杆菌生产CALB的最高水平。成功地构建了大肠杆菌表达系统,经过系统优化后,CALB的高水平可溶性表达得以实现。 展开更多
关键词 南极酵母脂肪酶B 大肠杆菌 可溶性表达 发酵优化
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用蛋白质工程技术提取和修饰南极假丝酵母脂肪酶B
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作者 于丰海 李丽杰 杨丰科 《化学与生物工程》 CAS 2005年第12期5-7,共3页
从南极假丝酵母中提取的脂肪酶B,具有较高的对应异构体选择性,广泛应用在培养基中,作为不对称有机化学的生物催化剂。近年来,一系列组合蛋白质工程研究和扩展了南极假丝酵母脂肪酶的催化和物理特性。这些工程不但生产出了指定的催化剂,... 从南极假丝酵母中提取的脂肪酶B,具有较高的对应异构体选择性,广泛应用在培养基中,作为不对称有机化学的生物催化剂。近年来,一系列组合蛋白质工程研究和扩展了南极假丝酵母脂肪酶的催化和物理特性。这些工程不但生产出了指定的催化剂,还有助于阐明酶的结构-作用关系,并且有助于说明这些酶的对应异构体选择性。进一步的研究将在工程与酶的关系方面展开讨论。 展开更多
关键词 南极酵母 脂肪酶B 蛋白质工程
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AOT/Triton X-100混合反胶束体系中假丝酵母脂肪酶催化蓖麻油水解的活性 被引量:9
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作者 张玉霞 赵继华 +3 位作者 杜中玉 方建 安学勤 沈伟国 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1483-1486,共4页
研究了二(2-乙基己基)琥珀酸磺酸钠(AOT)/Triton X-100混合反胶束体系中假丝酵母脂肪酶(candida rugosa lipase)催化蓖麻油水解的反应.考察了Triton X-100占总表面活性剂的摩尔分数(x(Triton X-100))、水与总体表面活性剂的摩尔比(ω_0)... 研究了二(2-乙基己基)琥珀酸磺酸钠(AOT)/Triton X-100混合反胶束体系中假丝酵母脂肪酶(candida rugosa lipase)催化蓖麻油水解的反应.考察了Triton X-100占总表面活性剂的摩尔分数(x(Triton X-100))、水与总体表面活性剂的摩尔比(ω_0)、pH值、反应温度以及底物蓖麻油的浓度等因素对酶活性的影响.研究结果表明,加入非离子表面活性剂Triton X-100可以使假丝酵母脂肪酶的活性得到显著提高,但是当底物蓖麻油的浓度大于0.24 mol·L^(-1)时,会对假丝酵母脂肪酶产生抑制作用. 展开更多
关键词 混合反胶束 酵母脂肪酶 蓖麻油 AOT TRITON X-100
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