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人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选被引量：4: 1; 作者吴国球刘乃丰 +3 位作者赵桂琴范小波张臣王明虹《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期464-468,共5页; 目的:从人源单链可变区片段(ScFv)文库中筛选与结缔组织生长因子(CTGF)特异结合的噬菌体克隆,获得ScFv氨基酸序列。方法:以重组硫氧化还原蛋白-结缔组织生长因子(TrxA-CTGF)融合蛋白为靶目标,用差异吸附法,逐步增加选择压力,经过4轮亲... 展开更多; 关键词结缔组织生长因子噬菌体展示人源单链可变区片段; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种可溶性单抗ScFv片段的表达及鉴定被引量：1: 2; 作者钟小林高会广 +1 位作者吉清黄刚《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期691-694,共4页; 目的　利用E .coliHB2 15 1表达结肠癌单抗MC3的单链可变区片段 (Singlechainvariablefragment,ScFv) ,纯化并鉴定其抗原结合活性 ,为结肠癌体内诊断和治疗性研究提供靶向载体分子。方法　利用呈现ScFv抗体的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2 ... 展开更多; 关键词结肠癌单克隆抗体单链可变区片段噬菌体; 在线阅读下载PDF 职称材料

特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建: 3; 作者王潇王秀敏 +3 位作者管庆丰滕达姚军虎王建华《中国饲料》北大核心 2015年第9期19-22,29,共5页; 以纯化的重组大肠杆菌外膜蛋白Omp C免疫BALB/c小鼠,提取骨髓浆细胞总RNA,逆转录获得c DNA,作为模板通过PCR扩增获得重链和轻链可变区序列。由(Gly4Ser)3 linker连接两片段,获得单链抗体可变区片段基因库。重叠延伸PCR添加T7启动子、核... 展开更多; 关键词外膜蛋白C 单链抗体可变区片段核糖体展示文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

融合型B细胞淋巴瘤独特型DNA疫苗表达质粒的构建被引量：1: 4; 作者王福旭张颜 +4 位作者赵冰潘崚张学军罗建民董作仁《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1453-1458,共6页; 已有研究证实,B细胞淋巴瘤病人自身免疫球蛋白独特型可视为肿瘤特异性抗原用于独特型疫苗。为探究带有细胞因子的融合型独特型肿瘤疫苗是否会提高免疫效果,制备小鼠B细胞型淋巴瘤细胞的独特型单链可变区片段,与免疫佐剂单核细胞趋化因子... 展开更多; 关键词 B细胞淋巴瘤单链可变区片段趋化因子增强型绿色荧光蛋白独特型DNA疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

融合蛋白anti-HER2-ScFv-GFP在昆虫细胞中的表达及其靶向结合乳腺癌细胞的功能分析被引量：3: 5; 作者高国辉王金丹 +5 位作者黄奇迪杨纪峰杨水兵包兵兵张羽胡孝渠《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1034-1040,共7页; 目的:利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达获得携带绿色荧光蛋白(GFP)的抗人表皮生长因子受体2(HER2)的单链抗体可变区片段(ScFv),分析其靶向结合乳腺癌细胞表面受体HER2的功能。方法:构建融合基因anti-HER2-ScFv-GFP,重组获得真核表达... 展开更多; 关键词抗HER2单链抗体可变区片段绿色荧光蛋白融合基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合抗原受体修饰T细胞真的对卵巢癌有杀伤作用吗?: 6; 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期F0002-F0002,共1页; 卵巢癌的标准治疗方案以外科手术治疗为主，辅以顺铂和紫杉烷联合化疗，中位生存期仅为18个月。因此，亟需寻找更有效的卵巢癌治疗手段。陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院全军临床病理学研究所余时沧教授研究团队以间皮素作为... 展开更多; 关键词 T细胞活化抗原受体卵巢癌杀伤作用嵌合修饰第三军医大学单链可变区片段; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选被引量：4: 1; 作者吴国球刘乃丰赵桂琴范小波张臣王明虹; 机构东南大学附属中大医院临床检验中心东南大学临床医学院心血管研究所中国药科大学生命科学与技术学院; 出处《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期464-468,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30070300)~~; 文摘目的:从人源单链可变区片段(ScFv)文库中筛选与结缔组织生长因子(CTGF)特异结合的噬菌体克隆,获得ScFv氨基酸序列。方法:以重组硫氧化还原蛋白-结缔组织生长因子(TrxA-CTGF)融合蛋白为靶目标,用差异吸附法,逐步增加选择压力,经过4轮亲和筛选后随机挑取8个克隆,提取DNA后测序;测序阳性的DNA转化E.coliHB2151,IPTG诱导后用间接ELISA方法检测培养上清单链抗体的活性。MTT法测定单链抗体对CTGF促人近曲肾小管上皮HK-2细胞增殖作用的影响。结果:从8个克隆中获得7个完全一致的DNA序列(W0616);另有1个克隆丢失了重链,且轻链框架区(FR)和互补决定区(CDR)序列与W0616不一致;阳性克隆经诱导后,培养上清用间接ELISA试验证实能与CTGF发生特异性结合,与TrxA及阴性对照比较差异显著(P<0.001)。同时,该单链抗体片段能明显抑制CTGF引起的HK-2细胞的增殖。结论:成功获得与CTGF特异结合的人源单链抗体可变区序列,为CTGF抑制剂的研究奠定基础。; 关键词结缔组织生长因子噬菌体展示人源单链可变区片段; Keywords connective tissue growth factor phage display humanized single-chain variable fragment; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种可溶性单抗ScFv片段的表达及鉴定被引量：1: 2; 作者钟小林高会广吉清黄刚; 机构第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期691-694,共4页; 文摘目的　利用E .coliHB2 15 1表达结肠癌单抗MC3的单链可变区片段 (Singlechainvariablefragment,ScFv) ,纯化并鉴定其抗原结合活性 ,为结肠癌体内诊断和治疗性研究提供靶向载体分子。方法　利用呈现ScFv抗体的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2 15 1进行可溶性抗体表达 ,经点印迹和Western印迹检测可溶性单抗ScFv的表达水平 ,经ELISA检测可溶性ScFv的抗原结合活性。用双脱氧法对组成ScFvDNA的VH和VLDNA进行序列测定。结果　可溶性MC3ScFv获得了成功表达 ,表达产物主要位于周质腔中 ,其分子量约为 3 2× 10 3。来自所获得的 3个克隆周质提取物均能抑制单抗与高水平表达MC3结合抗原的AGS细胞结合 ,抑制率分别为 41.19%、3 6.89%、3 3 .77%。对ScFv的VH和VLDNA的测序结果表明所获抗体的可变区基因属IgG1亚族 ,κ型。结论　利用大肠杆菌HB2 15 1成功表达了具有抗原结合活性的MC3ScFv ,为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。; 关键词结肠癌单克隆抗体单链可变区片段噬菌体; Keywords colorectal carcinoma monoclonal antibody single chain variable fragments phage; 分类号 R394－33 [医药卫生—医学遗传学] R394.3 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建: 3; 作者王潇王秀敏管庆丰滕达姚军虎王建华; 机构西北农林科技大学动物科技学院农业部饲料生物技术重点实验室中国农业科学院饲料研究所基因工程研究室; 出处《中国饲料》北大核心 2015年第9期19-22,29,共5页; 基金国家自然科学基金"畜禽致腹泻大肠杆菌抗体及可变区引导的抗菌肽设计与机理研究"(31372346) 国家十二五科技支撑计划课题"新型微生态制剂的创制与应用"(2013BAD10B02); 文摘以纯化的重组大肠杆菌外膜蛋白Omp C免疫BALB/c小鼠,提取骨髓浆细胞总RNA,逆转录获得c DNA,作为模板通过PCR扩增获得重链和轻链可变区序列。由(Gly4Ser)3 linker连接两片段,获得单链抗体可变区片段基因库。重叠延伸PCR添加T7启动子、核糖体结合位点、gⅢtether和两端茎环结构等元件,成功构建对外膜蛋白C具有特异性亲和力的单链抗体可变区的核糖体展示文库,为特异性强、亲和力高的单链抗体可变区筛选提供了技术和材料基础。构建能与革兰氏阴性菌外膜蛋白C特异性结合的鼠源单链抗体核糖体展示文库,是奠定构建饲料革兰氏阴性腐败菌分子预警和靶向抗菌剂的靶向定位区的高亲和力单链抗体可变区片段的重要基础,对建立有害革兰氏阴性菌分子检测方法和靶向抗革兰氏阴性菌菌剂设计方法具有借鉴作用。; 关键词外膜蛋白C 单链抗体可变区片段核糖体展示文库; Keywords OmpC a single chain antibody fragment ribosome display library; 分类号 S816.3 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名融合型B细胞淋巴瘤独特型DNA疫苗表达质粒的构建被引量：1: 4; 作者王福旭张颜赵冰潘崚张学军罗建民董作仁; 机构河北医科大学第二医院血液科; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1453-1458,共6页; 基金河北省自然科学基金资助项目,编号302503; 文摘已有研究证实,B细胞淋巴瘤病人自身免疫球蛋白独特型可视为肿瘤特异性抗原用于独特型疫苗。为探究带有细胞因子的融合型独特型肿瘤疫苗是否会提高免疫效果,制备小鼠B细胞型淋巴瘤细胞的独特型单链可变区片段,与免疫佐剂单核细胞趋化因子MCP3融合,同时融合报告基因EGFP,构建融合型独特型淋巴瘤DNA疫苗。用RT-PCR法扩增BALB/c小鼠源B细胞淋巴瘤细胞株A20的IgVH和IgVL基因,重组PCR法将编码(Gly4Ser)3的核苷酸片段连接两基因,制备scFv片段。用相同PCR方法,选用1段编码NDAQAPKS连接肽连接趋化因子MCP3基因与scFv片段,获得MCP3-scFv融合基因片段。将scFv和MCP3-scFv融合基因片段分别插入真核表达质粒pTARGET,并在融合基因的下游插入报告基因EGFP,构建真核表达质粒pTARGET/scFv-EGFP和pTARGET/MCP3-scFv-EGFP。结果表明,成功扩增A20细胞的IgVH和IgVL基因片段及scFv-EGFP、MCP3-scFv-EGFP融合基因片段;酶切鉴定表明,成功制备重组真核表达质粒pTARGET/scFv-EGFP和pTARGET/MCP3-scFv-EGFP。结论:成功构建带有鼠源scFv片段、趋化因子MCP3和EGFP融合的独特型抗B细胞淋巴瘤疫苗表达质粒pTARGET/MCP3-scFv-EGFP和pTARGET/scFv-EGFP。所构建的重组表达质粒为下一步的抗B细胞淋巴瘤基因疫苗的体内动物实验奠定了基础。; 关键词 B细胞淋巴瘤单链可变区片段趋化因子增强型绿色荧光蛋白独特型DNA疫苗; Keywords B cell lymphoma single-chain variable fragment chemotatic factor EGFP idiotypic DNA vaccine; 分类号 R733.1 [医药卫生—肿瘤] R392.27 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名融合蛋白anti-HER2-ScFv-GFP在昆虫细胞中的表达及其靶向结合乳腺癌细胞的功能分析被引量：3: 5; 作者高国辉王金丹黄奇迪杨纪峰杨水兵包兵兵张羽胡孝渠; 机构温州医学院生命科学院生命科学院附属第一医院肿瘤外科仁济学院; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1034-1040,共7页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30801118/C160403) 浙江省自然科学基金资助项目(No.Y207301) 温州市科技局资助项目((No.Y20090293No.Y2003A138); 文摘目的:利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达获得携带绿色荧光蛋白(GFP)的抗人表皮生长因子受体2(HER2)的单链抗体可变区片段(ScFv),分析其靶向结合乳腺癌细胞表面受体HER2的功能。方法:构建融合基因anti-HER2-ScFv-GFP,重组获得真核表达载体重组子pFAST Bac-to-Bac HT A/anti-HER2-ScFv-GFP,转化DH10Bac,收集重组病毒bacmid,分别转染、感染粉纹夜蛾细胞Tn-5B1-4,SDS-PAGE及Westernblotting分析融合蛋白表达产物。Ni2+-NTA亲和层析法纯化anti-HER2-ScFv-GFP融合蛋白后分别滴入乳腺癌细胞HER2阳性的SKBR3和HER2阴性的MCF7,对比携带绿色荧光的抗HER2单链抗体靶向结合乳腺癌细胞表面HER2受体情况。结果:获得长度约1 539 bp的融合基因anti-HER2-ScFv-GFP,感染重组病毒的Tn-5B1-4细胞膜附近有明显绿色荧光,SDS-PAGE、Western blotting法检测到60 kD的特异性条带。结合实验显示HER2阳性的SKBR3细胞表面有明显绿色荧光,而HER2阴性的MCF7细胞表面荧光易被洗脱。结论:在Tn-5B1-4中成功表达携带绿色荧光的融合蛋白anti-HER2-ScFv-GFP,该携带绿色荧光的抗HER2单链抗体具有靶向结合乳腺癌细胞表面HER2受体的效能。; 关键词抗HER2单链抗体可变区片段绿色荧光蛋白融合基因表达; Keywords anti-HER2-ScFv Green fluorescent protein Fusion gene expression; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合抗原受体修饰T细胞真的对卵巢癌有杀伤作用吗?: 6; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期F0002-F0002,共1页; 文摘卵巢癌的标准治疗方案以外科手术治疗为主，辅以顺铂和紫杉烷联合化疗，中位生存期仅为18个月。因此，亟需寻找更有效的卵巢癌治疗手段。陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院全军临床病理学研究所余时沧教授研究团队以间皮素作为T细胞表面稳定表达可特异性识别肿瘤相关抗原，采用人源化抗人间皮素单链可变区片段，与T细胞活化分子CD3ξ；链及共刺激分子CD28构建嵌合抗原受体融合基因，在保证嵌合抗原受体修饰T细胞特异性识别肿瘤抗原、增强T细胞活化和续存能力、避免脱靶效应的同时，减少了宿主抗异基因体液免疫应答。; 关键词 T细胞活化抗原受体卵巢癌杀伤作用嵌合修饰第三军医大学单链可变区片段; 分类号 R737.31 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选	吴国球刘乃丰赵桂琴范小波张臣王明虹	《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	一种可溶性单抗ScFv片段的表达及鉴定	钟小林高会广吉清黄刚	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建	王潇王秀敏管庆丰滕达姚军虎王建华	《中国饲料》北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	融合型B细胞淋巴瘤独特型DNA疫苗表达质粒的构建	王福旭张颜赵冰潘崚张学军罗建民董作仁	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	融合蛋白anti-HER2-ScFv-GFP在昆虫细胞中的表达及其靶向结合乳腺癌细胞的功能分析	高国辉王金丹黄奇迪杨纪峰杨水兵包兵兵张羽胡孝渠	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	嵌合抗原受体修饰T细胞真的对卵巢癌有杀伤作用吗?		《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料