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多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用
被引量：
2
1
作者
徐小洁
张文红
+3 位作者
康磊
韩锋产
颜真
阎小君
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期572-574,579,共4页
目的:建立用多聚抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)包被磁珠制备单表位抗体的方法。方法:通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP,将其作为免疫原免疫小鼠,获得多克隆抗血清。将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠(immu...
目的:建立用多聚抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)包被磁珠制备单表位抗体的方法。方法:通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP,将其作为免疫原免疫小鼠,获得多克隆抗血清。将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠(immunomagnetic beads,IB),通过IB从多克隆抗血清中纯化单表位抗体,荧光偏振(fluorescence polarization,FP)法鉴定抗体的特异性,SDS-PAGE鉴定抗体纯度,紫外分光光度法测定其回收率。结果:合成的MAP具有较强的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗体滴度高达1∶12800。MAP制备免疫磁珠的最佳包被浓度为100mg/L,包被效率最高可达79%。应用MAP免疫磁珠从抗血清中纯化得到的单表位抗体,经鉴定与其他抗原表位无反应性,其纯度为95%,抗体的回收率为5.8%。结论:MAP包被的磁珠可快速分离纯化出针对某一抗原表位的特异性抗体,其性质类似单克隆抗体。这一方案在快速制备少量高特异性抗体中具有广阔的应用前景。
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关键词
多聚抗原肽
免疫磁珠
单表位抗体
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题名
多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用
被引量：
2
1
作者
徐小洁
张文红
康磊
韩锋产
颜真
阎小君
机构
第四军医大学全军基因诊断技术研究所国家肿瘤生物重点实验室
西安交通大学医学院免疫学及病原微生物学系
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期572-574,579,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2002AA230231)
文摘
目的:建立用多聚抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)包被磁珠制备单表位抗体的方法。方法:通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP,将其作为免疫原免疫小鼠,获得多克隆抗血清。将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠(immunomagnetic beads,IB),通过IB从多克隆抗血清中纯化单表位抗体,荧光偏振(fluorescence polarization,FP)法鉴定抗体的特异性,SDS-PAGE鉴定抗体纯度,紫外分光光度法测定其回收率。结果:合成的MAP具有较强的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗体滴度高达1∶12800。MAP制备免疫磁珠的最佳包被浓度为100mg/L,包被效率最高可达79%。应用MAP免疫磁珠从抗血清中纯化得到的单表位抗体,经鉴定与其他抗原表位无反应性,其纯度为95%,抗体的回收率为5.8%。结论:MAP包被的磁珠可快速分离纯化出针对某一抗原表位的特异性抗体,其性质类似单克隆抗体。这一方案在快速制备少量高特异性抗体中具有广阔的应用前景。
关键词
多聚抗原肽
免疫磁珠
单表位抗体
Keywords
multiple antigen peptides （MAP）
immunomagnetic beads （IB）
single-epitope antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用
徐小洁
张文红
康磊
韩锋产
颜真
阎小君
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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