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产单葡萄糖醛酸甘草次酸菌株的筛选及发酵条件的优化 被引量:3
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作者 郭立纯 赵伟 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第16期88-94,共7页
从甘草土壤中筛选纯化得到一株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶(β-D-glucuronidase,β-GUS)的菌株,采用常温室压等离子体诱变技术(ARTP)对原始菌株进行诱变,筛选得到高产突变菌株。经传代10次培养验证该菌株遗传性状稳定。通过菌落形态、显微镜... 从甘草土壤中筛选纯化得到一株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶(β-D-glucuronidase,β-GUS)的菌株,采用常温室压等离子体诱变技术(ARTP)对原始菌株进行诱变,筛选得到高产突变菌株。经传代10次培养验证该菌株遗传性状稳定。通过菌落形态、显微镜制片观察和ITS序列比较确定菌株为蓝状真菌属,命名为Talaromyces sp.02。对其进行发酵产酶优化,确定发酵产酶的工艺。结果表明,以5 g/L的甘草酸为诱导剂,3 g/L的硝酸钠为氮源,初始p H 5.5,发酵温度30℃,10%的接种量,发酵144 h,在此条件下,该菌株可水解甘草酸(Glycyrrhizin,GL)生成单葡萄糖醛酸甘草次酸(Glycyrrhetinic acid monoglucuronide,GAMG),产量可达4.03 g/L,且几乎无副产物甘草次酸的生成,其发酵产率可达到87.88%,葡萄糖醛酸苷酶的酶活为162.20 U/m L,是原始复筛菌株的3.23倍,是一株具有开发前景和应用潜力的葡萄糖醛酸苷酶生产菌株。 展开更多
关键词 甘草 甘草 葡萄糖甘草 β-D-葡萄糖苷酶 蓝状真菌属 发酵条件优化
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微生物转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸甘草酸 被引量:11
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作者 王云 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期151-151,160,共2页
通过研究筛选得到一株微生物能够高效转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸甘草酸,转化率约为90%。
关键词 微生物 转化 甘草 葡萄糖甘草
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亲水性离子液体[EMIM]BF_4对固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化活性的影响 被引量:8
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作者 曹红 孙倩 +2 位作者 李春 李开雄 李军 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1873-1879,共7页
以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法制备固定化β-葡萄糖醛酸苷酶;以1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIM]BF4)/缓冲溶液均相体系为介质,研究了亲水性离子液体[EMIM]BF4对固定化酶生物催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)... 以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法制备固定化β-葡萄糖醛酸苷酶;以1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIM]BF4)/缓冲溶液均相体系为介质,研究了亲水性离子液体[EMIM]BF4对固定化酶生物催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的影响.实验结果表明,当均相体系中[EMIM]BF4的体积分数为16%,pH为5.4,反应温度为50℃及摇床转速为200 r/min时,酶活力达到最高,并且明显优于纯缓冲溶液体系中的最高酶活.重复利用性实验结果表明,与纯缓冲液介质体系相比,固定化酶在含亲水性离子液体[EMIM]BF4的均相介质中表现出较好的操作稳定性.表观动力学参数和活化能数据表明,亲水性离子液体[EMIM]BF4在催化体系中能够增强酶和底物GL的亲和力,有效稳定酶-底物的过渡态,并降低反应活化能,而使固定化β-葡萄糖醛酸苷酶表现出较高的催化活性. 展开更多
关键词 亲水性离子液体 1-乙-3-甲咪唑四氟硼 固定化β-葡萄糖苷酶 催化活性 甘草 单葡萄糖醛酸基甘草次酸
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酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究(Ⅱ)——能水解甘草苷糖醛酸基酶的提纯与酶性质研究 被引量:13
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作者 鱼红闪 吴少杰 +1 位作者 金凤燮 郭勇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期5-12,共8页
以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目的,对新分离筛选的甘M-2和甘M-6霉菌产的β-葡萄糖醛酸苷酶进行了分离提纯和酶学方面的研究。结果表明,两株菌产的β-葡萄糖醛酸苷酶被60%饱和硫酸铵沉淀较好,经DEAE-Cel... 以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目的,对新分离筛选的甘M-2和甘M-6霉菌产的β-葡萄糖醛酸苷酶进行了分离提纯和酶学方面的研究。结果表明,两株菌产的β-葡萄糖醛酸苷酶被60%饱和硫酸铵沉淀较好,经DEAE-CeluoseDE52离子交换层析柱梯度洗脱,得到纯酶,提纯倍数分别为10.67和6.15倍,收率分别为33.0%和24.2%,其中甘M-2菌产β-葡萄糖醛酸苷酶只能将甘草苷水解成甘草次酸(GA);甘M-6菌产β-葡萄糖醛酸苷酶水解甘草苷主要变成甜度很高的单葡萄糖醛酸基甘草苷(GAMG);两种酶在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳都得到电泳单点,其酶蛋白相对分子质量分别为60000和42000;酶反应最适pH分别为5.0和6.0,最适温度均为40℃,均在pH4.0~8.0和20~70℃范围内相对稳定。 展开更多
关键词 甜素 葡萄糖 甘草 葡萄糖苷酶
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酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究(Ⅰ)——能水解甘草苷糖醛酸基酶的微生物的选择与产酶的研究 被引量:10
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作者 鱼红闪 吴少杰 +1 位作者 金凤燮 郭勇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期10-15,共6页
以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目标,研究了9种新菌株能产水解甘草苷糖醛酸基的β-葡萄糖醛酸苷酶产率。结果:细菌甘E-1、霉菌甘M-3和甘M-6等产β-葡萄糖醛酸苷酶较好,产率分别为56.73U/ml、42.52... 以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目标,研究了9种新菌株能产水解甘草苷糖醛酸基的β-葡萄糖醛酸苷酶产率。结果:细菌甘E-1、霉菌甘M-3和甘M-6等产β-葡萄糖醛酸苷酶较好,产率分别为56.73U/ml、42.52U/ml和31.26U/ml,产酶最佳培养时间分别为细菌18h和霉菌48h。酶解甘草苷的最佳反应条件为:pH6,反应时间为12h,反应温度为40℃。 展开更多
关键词 甜味剂 甘草 葡萄糖 葡萄糖苷酶
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离子液体[BMIM]BF_4对甘草酸及其衍生物色谱行为的影响 被引量:4
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作者 郑兰兰 曹红 +2 位作者 唐明翔 欧阳巧凤 张馨 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期815-819,共5页
将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIM]BF。)加入到高效液相色谱流动相中,研究其对甘草酸(GL)及其衍生物甘草次酸(GA)和单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)色谱行为的影响。结果显示,加入离子液体后的流动相能够明显改善... 将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIM]BF。)加入到高效液相色谱流动相中,研究其对甘草酸(GL)及其衍生物甘草次酸(GA)和单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)色谱行为的影响。结果显示,加入离子液体后的流动相能够明显改善色谱峰形、减少峰拖尾、增大峰面积和峰高、提高检测灵敏度,并缩短GL,GA及GAMG3种化合物的同时检测时间,提高检测效率。优化色谱条件为:InertSustain C18(4.6mm×250mmi.d.,5μm)反相色谱柱为分离柱,柱温40℃;甲醇-1.0mmol/L[BMIM]BF4(体积比81:19,乙酸调至pH3.0)为流动相,流速0.7mL/min,进样体积20μL,检测波长251nm。GL,GA及GAMG在5.00—100mg/L范围内线性关系良好(r≥0.9998),检出限分别为0.02,0.04,0.09mg/L;加标回收率分别为100.1%,98.0%,98.2%,RSD为0.18%~0.43%。同时测定GL生物转化体系中3种组分,结果满意。 展开更多
关键词 离子液体 [BMIM]BF4 高效液相色谱法 甘草 甘草 单葡萄糖醛酸基甘草次酸
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丙烯酸-2,4,6-三硝基苯乙酯的合成及热分解 被引量:2
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作者 刘强强 金波 +3 位作者 彭汝芳 舒远杰 楚士晋 董海山 《含能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期579-582,共4页
以TNT、甲醛为原料,在弱碱性条件下反应合成得到2,4,6-三硝基苯乙醇(PicCH2CH2OH);PicCH2CH2OH在浓硫酸催化下和丙烯酸在甲苯中回流反应24h,合成得到丙烯酸-2,4,6-三硝基苯乙酯,产率为62%。采用紫外可见光谱(UV-Vis)、核磁共振氢谱(1HN... 以TNT、甲醛为原料,在弱碱性条件下反应合成得到2,4,6-三硝基苯乙醇(PicCH2CH2OH);PicCH2CH2OH在浓硫酸催化下和丙烯酸在甲苯中回流反应24h,合成得到丙烯酸-2,4,6-三硝基苯乙酯,产率为62%。采用紫外可见光谱(UV-Vis)、核磁共振氢谱(1HNMR)、红外光谱(FTIR)、质谱(MS)以及元素分析等对产物结构进行了表征。利用热重分析(TG)对产物热稳定性进行了研究,采用Kissinger方法和Ozawa方法计算其热分解活化能Ea分别为99.78,102.96kJ·mol-1。 展开更多
关键词 有机化学 2 4 6-三硝苯乙醇 丙烯-2 4 6-三硝苯乙酯 热稳定性 活化能
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双三氟甲烷磺酰亚胺类离子液体对产紫青霉菌株全细胞催化特性的影响 被引量:1
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作者 张馨 李扬 +3 位作者 曹红 欧阳巧凤 郑兰兰 李春 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1870-1875,共6页
研究了双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子Tf_2N^-分别与5种不同阳离子组成的离子液体对产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响.结果表明,[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌的生长有促进作用,[... 研究了双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子Tf_2N^-分别与5种不同阳离子组成的离子液体对产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响.结果表明,[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌的生长有促进作用,[Py_(14)]Tf_2N,[Bmim]Tf_2N,[BPy]Tf_2N和[P_(6,4,4,4)]Tf_2N 4种离子液体对产紫青霉菌的生长则均有不同程度的抑制.代谢活力保留值R的测定结果表明,[P_(6,4,4,4)]Tf_2N和[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌体细胞表现出相对较高的生物相容性;5种离子液体对菌体细胞的细胞膜透性均有改善作用.全细胞催化反应数据显示,最优离子液体为[P_(y14)]Tf_2N,当其加入量为25%,反应84 h后,单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)产率高达95.38%.5种离子液体对产紫青霉菌的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响不仅与阴离子Tf_2N^-有关,阳离子的组成、结构和性质也发挥重要的作用. 展开更多
关键词 双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子 阳离子 离子液体 产紫青霉菌 单葡萄糖醛酸基甘草次酸
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微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞的制备及其催化性能研究
9
作者 黄晓林 曹红 +3 位作者 欧阳巧凤 沈瑞麟 李春 吴廷华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期156-161,169,共7页
采用海藻酸钠(SA)-羧甲基纤维素钠(CMC)液芯微胶囊技术制备微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3),研究其制备条件及其催化性能,考察不同因素对微囊化细胞直径、机械强度、破损率、催化活性的影响。结果表明,在羧甲基纤维... 采用海藻酸钠(SA)-羧甲基纤维素钠(CMC)液芯微胶囊技术制备微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3),研究其制备条件及其催化性能,考察不同因素对微囊化细胞直径、机械强度、破损率、催化活性的影响。结果表明,在羧甲基纤维素钠的浓度为1.4%、海藻酸钠的浓度为1.2%、Ca Cl2的浓度为1.0%、固化过程Ca Cl2浓度为0.5%及加菌量为3.0%的条件下,制得的微囊化细胞在重复利用9次后,相对活性仍达到56.9%,显示出较好的机械强度和操作稳定性。本文为高效生物转化甘草酸合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)提供了技术支持。 展开更多
关键词 微囊化 产紫青霉细胞 甘草 单葡萄糖醛酸基甘草次酸
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固芯液化技术对微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞使用性能的影响 被引量:1
10
作者 蔡静晓 曹红 +6 位作者 叶海 罗婷 杨露 王娜 刘进 刘瑞麟 李春 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2016年第10期69-76,共8页
以微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3)催化甘草酸(GL)定向合成具有更高生物利用度、甜度以及安全性的单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)为目的,研究固芯液化技术对微囊化细胞使用性能的影响。结果显示,液芯微囊化细胞的生... 以微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3)催化甘草酸(GL)定向合成具有更高生物利用度、甜度以及安全性的单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)为目的,研究固芯液化技术对微囊化细胞使用性能的影响。结果显示,液芯微囊化细胞的生长情况和传质性能明显优于固芯微囊化细胞,并在第1批次催化反应中,液芯微囊化细胞的相对活性达到98.7%,比固芯微囊化细胞(72.7%)要高。9批次重复利用实验表明,与固芯微囊化细胞相比,液芯微囊化细胞的相对活性较高,而机械强度和操作稳定性要稍显逊色。此外,固芯液化的技术与条件对微囊化细胞发挥最佳催化效果至关重要。 展开更多
关键词 固芯液化技术 微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞 使用性能 甘草 单葡萄糖醛酸基甘草次酸
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