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单细胞扩增前引物延伸多基因位点检测研究
被引量:
3
1
作者
袁淑慧
金帆
黄荷凤
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
2002年第3期145-148,共4页
目的 :考察单细胞扩增前引物延伸 (PEP)全基因组扩增 ,后续巢式 PCR同步检测β地中海贫血突变基因 CD17、nt- 2 8及连锁基因 (ATTTT)、18和 2 1号染色体短串联重复序列 D18S5 1、D2 1S11和 D2 1S14 11、囊性纤维病 CFΔ F5 0 8及连锁基...
目的 :考察单细胞扩增前引物延伸 (PEP)全基因组扩增 ,后续巢式 PCR同步检测β地中海贫血突变基因 CD17、nt- 2 8及连锁基因 (ATTTT)、18和 2 1号染色体短串联重复序列 D18S5 1、D2 1S11和 D2 1S14 11、囊性纤维病 CFΔ F5 0 8及连锁基因 (GATT)、杜氏肌营养不良症 DMD基因外显子 17和 4 8以及 Y染色体性别决定基因 SRY的可行性。方法 :显微操作获取单个淋巴细胞和胚胎细胞 ,PEP全基因组扩增 ,后续特异性巢式 PCR,检测上述 10个基因位点的单细胞扩增成功率、假阳性率、假阴性率。结果 :上述 10个位点的单个淋巴细胞扩增成功率、假阳性率和假阴性率分别为 89.5 %、0 .4 8%和 2 .5 0 % ,单个胚胎细胞扩增成功率和假阳性率分别为 85 .5 6 %和 3.0 %。结论 :单细胞 PEP后续巢式 PCR同步检测上述 10个基因位点有较高的扩增成功率和很低的假阳性率和假阴性率 ,具有应用于植入前遗传学诊断的实际可行性。
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关键词
单细胞扩增前引物延伸
多基因位点检测
PEP
淋巴
细胞
卵裂球
基因诊断
Β地中海贫血
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职称材料
改良扩增前引物延伸技术检测痕量DNA
被引量:
3
2
作者
陈玲
王慧君
刘超
《医学研究生学报》
CAS
2007年第4期442-442,444,共2页
关键词
改良的
扩
增
前
引物
延伸
反应
全基因组
扩
增
痕量DNA检测
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职称材料
简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究
被引量:
1
3
作者
王晶
乔龙
+3 位作者
孙海翔
胡娅莉
李洁
李朝军
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第16期6675-6677,共3页
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模...
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模板对扩增产物的均匀性及特异性的影响。[结果]以新鲜的淋巴细胞为模板与以冷藏的淋巴细胞为模板相比,扩增产物的均匀性相当,特异性上新鲜细胞较好。细胞裂解后立即进行扩增的效果在产物的均匀性及特异性方面均明显优于冻存的细胞裂解物。[结论]对单细胞应用DOP-PCR方法进行全基因组扩增时,应尽量选取新鲜细胞进行裂解,裂解后避免冻存以保证扩增的均匀性及特异性。
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关键词
单细胞
简并寡核苷酸
引物
PCR
基因
扩
增
全基因组
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职称材料
单细胞PCR技术的研究进展
4
作者
吴国华
朱宝长
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2002年第6期7-8,共2页
快速、准确、敏感和可靠的单细胞PCR技术是开展法医学、古微生物学、种植前遗传学诊断 (PGD)等的前提。综述一些常用的单细胞PCR策略 ,并对这些技术的研究进展作一些介绍。
关键词
单细胞
PCR技术
研究进展
引物
延伸
预
扩
增
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职称材料
题名
单细胞扩增前引物延伸多基因位点检测研究
被引量:
3
1
作者
袁淑慧
金帆
黄荷凤
机构
浙江大学医学院附属妇产科医院
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
2002年第3期145-148,共4页
基金
浙江省自然科学基金 (30 0 4 6 7)
浙江省医药卫生科研基金 (2 0 0 0 - A0 6 3)
文摘
目的 :考察单细胞扩增前引物延伸 (PEP)全基因组扩增 ,后续巢式 PCR同步检测β地中海贫血突变基因 CD17、nt- 2 8及连锁基因 (ATTTT)、18和 2 1号染色体短串联重复序列 D18S5 1、D2 1S11和 D2 1S14 11、囊性纤维病 CFΔ F5 0 8及连锁基因 (GATT)、杜氏肌营养不良症 DMD基因外显子 17和 4 8以及 Y染色体性别决定基因 SRY的可行性。方法 :显微操作获取单个淋巴细胞和胚胎细胞 ,PEP全基因组扩增 ,后续特异性巢式 PCR,检测上述 10个基因位点的单细胞扩增成功率、假阳性率、假阴性率。结果 :上述 10个位点的单个淋巴细胞扩增成功率、假阳性率和假阴性率分别为 89.5 %、0 .4 8%和 2 .5 0 % ,单个胚胎细胞扩增成功率和假阳性率分别为 85 .5 6 %和 3.0 %。结论 :单细胞 PEP后续巢式 PCR同步检测上述 10个基因位点有较高的扩增成功率和很低的假阳性率和假阴性率 ,具有应用于植入前遗传学诊断的实际可行性。
关键词
单细胞扩增前引物延伸
多基因位点检测
PEP
淋巴
细胞
卵裂球
基因诊断
Β地中海贫血
Keywords
Lymphocyte
Blastomere
Gene diagnosis
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
改良扩增前引物延伸技术检测痕量DNA
被引量:
3
2
作者
陈玲
王慧君
刘超
机构
南方医科大学法医学研究所
广州市刑事科学技术研究所
出处
《医学研究生学报》
CAS
2007年第4期442-442,444,共2页
基金
公安部应用创新计划基金资助项目(批准号:2005YYCX57136)
广州市重大科技攻关基金资助项目(批准号:2005Z1-E0051)
关键词
改良的
扩
增
前
引物
延伸
反应
全基因组
扩
增
痕量DNA检测
分类号
R556.61 [医药卫生—血液循环系统疾病]
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职称材料
题名
简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究
被引量:
1
3
作者
王晶
乔龙
孙海翔
胡娅莉
李洁
李朝军
机构
南京师范大学生命科学院
南京市鼓楼医院生殖中心
南京市鼓楼医院妇产科
南京市鼓楼医院遗传室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第16期6675-6677,共3页
基金
南京市科技局社会发展重大项目(200504025)
文摘
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模板对扩增产物的均匀性及特异性的影响。[结果]以新鲜的淋巴细胞为模板与以冷藏的淋巴细胞为模板相比,扩增产物的均匀性相当,特异性上新鲜细胞较好。细胞裂解后立即进行扩增的效果在产物的均匀性及特异性方面均明显优于冻存的细胞裂解物。[结论]对单细胞应用DOP-PCR方法进行全基因组扩增时,应尽量选取新鲜细胞进行裂解,裂解后避免冻存以保证扩增的均匀性及特异性。
关键词
单细胞
简并寡核苷酸
引物
PCR
基因
扩
增
全基因组
Keywords
Single cell
Degenerate oligonucleotide primered PCR
Gene amplification
Whole genome
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
单细胞PCR技术的研究进展
4
作者
吴国华
朱宝长
机构
首都师范大学生物系
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2002年第6期7-8,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目 (39970 553)
文摘
快速、准确、敏感和可靠的单细胞PCR技术是开展法医学、古微生物学、种植前遗传学诊断 (PGD)等的前提。综述一些常用的单细胞PCR策略 ,并对这些技术的研究进展作一些介绍。
关键词
单细胞
PCR技术
研究进展
引物
延伸
预
扩
增
Keywords
single cell
primer-extension preamplification(PEP)
PCR
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单细胞扩增前引物延伸多基因位点检测研究
袁淑慧
金帆
黄荷凤
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
2002
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
改良扩增前引物延伸技术检测痕量DNA
陈玲
王慧君
刘超
《医学研究生学报》
CAS
2007
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究
王晶
乔龙
孙海翔
胡娅莉
李洁
李朝军
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
单细胞PCR技术的研究进展
吴国华
朱宝长
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2002
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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