单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录子蛋白读码框2真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达 被引量：4

1

作者 杨慧兰 赵举峰 +3 位作者 樊建勇 周翠 黄小晏 齐维 《医学研究生学报》 CAS 2008年第9期899-903,I0001,共6页

目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录子蛋白读码框2(LAT ORF2)基因,构建真核表达载体并在真核细胞中表达,用于进一步研究LAT介导的HSV-2潜伏及激活感染机制。方法:以构建成功的pVAX-LAT重组质粒为模板,根据GenBank中HSV-2LATO... 目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录子蛋白读码框2(LAT ORF2)基因,构建真核表达载体并在真核细胞中表达,用于进一步研究LAT介导的HSV-2潜伏及激活感染机制。方法:以构建成功的pVAX-LAT重组质粒为模板,根据GenBank中HSV-2LATORF2基因的核苷酸序列设计引物,并在引物的5′端分别引入KpnⅠ和PstⅠ酶切位点。用PCR特异性扩增LAT基因ORF2片段,PCR产物纯化回收后经KpnⅠ、PstⅠ双酶切,再次回收后产物与同样经双酶切的pcDNA 6/myc-His B质粒进行连接,Amp抗性筛选阳性重组子,双酶切及测序鉴定连接产物。在脂质体介导下瞬时转染Vero细胞,用RT-PCR及SDS-PAGE检测其在Vero细胞中的表达。结果:重组质粒经KpnⅠ和PstⅠ双酶切获得预期大小的两条片段,测序表明ORF2正确,RT-PCR及SDS-PAGE显示转染了重组质粒的Vero细胞内有目的基因及其编码蛋白的表达。结论:成功构建了ORF2-pcDNA6/myc-His B重组质粒,并可在Vero细胞内有效表达。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒2型 潜伏相关转录子 开放读码框 重组载体

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单纯疱疹病毒2型感染与非淋菌性尿道炎的病因关系 被引量：1

2

作者 王万卷 王颖娟 +3 位作者 王秀莹 李红敏 王晓鹏 陈丽 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期469-470,共2页

目的探讨非淋菌性尿道炎(NGU)患者单纯疱疹病毒2型(HSV2)感染的流行病学状况及实验室诊断方法。方法实验分为NGU患者组和健康对照组。免疫快速测定法(C-C快速法)检测沙眼衣原体(CT),培养法检测解脲支原体(UU),血清酶联免疫吸附法(ELISA... 目的探讨非淋菌性尿道炎(NGU)患者单纯疱疹病毒2型(HSV2)感染的流行病学状况及实验室诊断方法。方法实验分为NGU患者组和健康对照组。免疫快速测定法(C-C快速法)检测沙眼衣原体(CT),培养法检测解脲支原体(UU),血清酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清HSV2抗体,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测尿道分泌物HSV2。结果NGU患者组的CT、UU感染率分别为23.27%和30.91%。NGU患者组和健康对照组的HSV2IgGI、gM、HSV2DNA阳性率分别为38.18%/18.03%、10.91%/1.64%、19.63%/4.92%,两组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。NGU患者组无CT、UU、阴道毛滴虫、念珠菌感染的HSV2阳性率为33.33%,与对照组相比差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论HSV2是NGU的重要病原体之一。FQ-PCR法作为HSV感染的实验室诊断技术具有很好的临床应用价值。 展开更多

关键词 非淋菌性尿道炎 单纯疱疹病毒2型 血清学酶联免疫吸附实验 荧光定量聚合酶链反应

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单纯疱疹病毒2型DNA提取及ICP10启动子基因获得和纯化 被引量：1

3

作者 李雷生 《济宁医学院学报》 2006年第4期1-3,共3页

目的用单纯疱疹病毒2型DNA,扩增并纯化得到ICP10启动子基因。方法培养vero细胞并接种HSV-2,获得大量HSV-2。用酚:氯仿提取病毒DNA,用PCR方法获得病毒ICP10启动子基因,并用UNIQ-10柱试剂盒纯化PCR产物。结果接种病毒的vero细胞出现病变,... 目的用单纯疱疹病毒2型DNA,扩增并纯化得到ICP10启动子基因。方法培养vero细胞并接种HSV-2,获得大量HSV-2。用酚:氯仿提取病毒DNA,用PCR方法获得病毒ICP10启动子基因,并用UNIQ-10柱试剂盒纯化PCR产物。结果接种病毒的vero细胞出现病变,病变为“”,收集细胞,反复冻融3次,使细胞裂解,获得大量HSV-2。经PCR扩增获得641bp大小的目的基因片段。电泳显示片断大小符合。结论获得的ICP10启动子基因,经过测序正确后,可以和其他基因连接,用于进一步研究。 展开更多

关键词 人单纯疱疹病毒2型 启动子ICP10 PCR

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不同人群单纯疱疹病毒2型IgG抗体的检测情况分析 被引量：3

4

作者 梅淑清 徐刚 乌日娜 《岭南皮肤性病科杂志》 2007年第4期221-223,共3页

目的:了解珠海市一般人群、无症状可疑生殖器疱疹患者及有症状可疑生殖器疱疹患者血清单纯疱疹病毒2型(HSV-2)IgG抗体感染水平。方法:应用酶标仪对一般人群、无症状可疑患者、有症状可疑患者三组人群进行HSV-2IgG抗体检测,分析三组人群H... 目的:了解珠海市一般人群、无症状可疑生殖器疱疹患者及有症状可疑生殖器疱疹患者血清单纯疱疹病毒2型(HSV-2)IgG抗体感染水平。方法:应用酶标仪对一般人群、无症状可疑患者、有症状可疑患者三组人群进行HSV-2IgG抗体检测,分析三组人群HSV-2的感染率,并比较无症状与有症状可疑生殖器疱疹患者血清学的状况。结果:在96名一般人员中HSV-2IgG抗体阳性率13.54%,175例无症状可疑患者HSV-2IgG抗体阳性率57.1%,174例有症状可疑患者HSV-2IgG抗体阳性率72.41%。结论:HSV-2IgG抗体对无症状可疑患者和中、后期及复发有症状患者具有协助诊断的意义。 展开更多

关键词 生殖器疱疹 单纯疱疹病毒2型 IGG抗体

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475例单纯疱疹病毒2型基因检测结果分析 被引量：7

5

作者 杨勇 孙伟 吴保华 《中国医药科学》 2014年第14期34-36,共3页

目的：了解广州新塘地区疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒2型的感染情况，为临床诊断治疗提供依据。方法采用实时荧光定量RT-PCR方法对我院门诊475例疑似生殖器疱疹患者进行单纯疱疹病毒2型病毒核酸检测。结果（1）在475例疑似生殖器疱... 目的：了解广州新塘地区疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒2型的感染情况，为临床诊断治疗提供依据。方法采用实时荧光定量RT-PCR方法对我院门诊475例疑似生殖器疱疹患者进行单纯疱疹病毒2型病毒核酸检测。结果（1）在475例疑似生殖器疱疹患者中270例单纯疱疹病毒2型检测阳性，总阳性率为56.84%（270/475），其中男性154例阳性，阳性率为61.16%（154/256）；女性阳性116例，阳性率为52.97%（116/219），男女发病率比较二者差异无统计学意义。（2）四个年龄段即＜20岁，20～40岁，41～60岁，＞60岁，它们的阳性率分别为29.63%（8/27）、70.23%（184/262）、46.94%（69/147）、23.08%（9/39）；20～40岁年龄段发病率70.23%，明显高于其他3个年龄段组，组间差异有统计学意义。结论新塘地区单纯疱疹病毒2型感染率为56.84%，20~40岁病毒核酸检出率最高，但感染率无性别差异；实时荧光定量RT-PCR方法在单纯疱疹病毒2型的检测中具有灵敏度高，方便快捷等优点，可对疑似生殖器疱疹患者进行早期正确诊断以避免漏诊及误诊的发生，值得临床应用。 展开更多

关键词 生殖器疱疹 单纯疱疹病毒2型 RT-PCR

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东莞市男性高危人群单纯疱疹病毒2型血清流行病学研究 被引量：1

6

作者 黄远忠 董正蓉 +1 位作者 张红 马丹晓 《中国实用医药》 2015年第6期38-39,共2页

目的了解广东省东莞市男性高危人群单纯疱疹病毒2型感染流行状况及其危险影响因素。方法对278例研究对象在知情同意下接受问卷调查并抽取血清样本,对其单纯疱疹病毒2型血清免疫球蛋白G(Ig G)抗体采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。结果男... 目的了解广东省东莞市男性高危人群单纯疱疹病毒2型感染流行状况及其危险影响因素。方法对278例研究对象在知情同意下接受问卷调查并抽取血清样本,对其单纯疱疹病毒2型血清免疫球蛋白G(Ig G)抗体采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。结果男性高危人群总的血清单纯疱疹病毒2型抗体阳性率37.4%(95%CI,29.4,45.4)。结论流行病学调查结果显示男性高危人群单纯疱疹病毒2型感染率高,未发现其独立影响因子。 展开更多

关键词 男性高危人群 单纯疱疹病毒2型 流行病学

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单纯疱疹病毒2型以及其核酸扩增荧光检测研究进展 被引量：1

7

作者 张吕良 《华夏医学》 CAS 2008年第6期1250-1252,共3页

关键词 单纯疱疹病毒2型 病原学特征 核酸扩增荧光检测

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感染2型单纯疱疹病毒对人宫颈上皮细胞自噬活性及IFN-β、IL-6表达的影响 被引量：3

8

作者 谢春 朱海东 +1 位作者 马红英 李静 《山东医药》 CAS 2018年第4期45-47,共3页

目的探讨2型单纯疱疹病毒(HSV-2)对人宫颈上皮细胞HCE自噬及干扰素β(IFN-β)、IL-6表达的影响。方法将体外培养的人宫颈上皮细胞HCE分为观察组和对照组,观察组用Vero细胞病毒接种HSV-2,对照组正常培养不进行处理。收集对照组和观察组感... 目的探讨2型单纯疱疹病毒(HSV-2)对人宫颈上皮细胞HCE自噬及干扰素β(IFN-β)、IL-6表达的影响。方法将体外培养的人宫颈上皮细胞HCE分为观察组和对照组,观察组用Vero细胞病毒接种HSV-2,对照组正常培养不进行处理。收集对照组和观察组感染HSV-2后1、4、11、18、22 h的细胞,采用免疫荧光法(FITC)检测各组细胞荧光强度,采用Western blotting法检测各组细胞LC3Ⅱ表达量;收集对照组和观察组感染HSV-2后1、4、11、18、22 h的细胞,采用ELISA法检测上清液IFN-β、IL-6。结果感染HSV-2后观察组细胞荧光强度、LC3Ⅱ表达量及上清液IL-6、IFN-β水平迅速升高,与对照组相比,P均<0.05。至感染后4 h观察组细胞荧光强度、LC3Ⅱ表达量及上清液IL-6、IFN-β水平均达到峰值,然后缓慢下降。结论感染HSV-2可以提高人宫颈上皮细胞自噬活性及IFN-β、IL-6表达,且感染早期效果较强。 展开更多

关键词 2型单纯疱疹病毒 宫颈上皮细胞 自噬 干扰素Β 白细胞介素6

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性病门诊患者生殖器疱疹临床患病率和2型单纯疱疹病毒感染率及其影响因素 被引量：3

9

作者 李雪 《中国实用医药》 2015年第35期102-103,共2页

目的探讨辽西地区性病门诊患者生殖器疱疹临床患病率和2型单纯疱疹病毒感染率及其影响因素。方法 582例于规范化皮肤性病科门诊就诊的患者,患者进行生殖器疱疹诊断,检测2型单纯疱疹病毒(HSV-2)血清学Ig G抗体,并进行问卷调查。结果经临... 目的探讨辽西地区性病门诊患者生殖器疱疹临床患病率和2型单纯疱疹病毒感染率及其影响因素。方法 582例于规范化皮肤性病科门诊就诊的患者,患者进行生殖器疱疹诊断,检测2型单纯疱疹病毒(HSV-2)血清学Ig G抗体,并进行问卷调查。结果经临床诊断,152例患者确诊为生殖器疱疹,患病率为26.1%;2型单纯疱疹病毒感染患者198例,感染率为34.0%,其中女性感染率为22.3%,男性感染率为11.6%。女性、自由职业以及民工2型单纯疱疹病毒感染率较高。结论性病门诊中,2型单纯疱疹病毒感染率较高,职业和性别是2型单纯疱疹病毒感染的重要影响因素,HSV-2抗体检测具有重要价值。 展开更多

关键词 生殖器疱疹 2型单纯疱疹病毒 影响因素

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人单纯疱疹病毒加强型绿色荧光蛋白真核表达系统的构建及表达 被引量：6

10

作者 李雷生 于红 张文卿 《医学研究生学报》 CAS 2006年第7期583-585,i0010,共4页

目的:构建人单纯疱疹病毒2型(HSV-2)加强型绿色荧光蛋白(EGFP)真核表达系统,用于HSV感染的快速诊断。方法:通过PCR扩增HSV-2启动子ICP10目的基因片段,克隆至真核表达载体pEGFP-1,构建重组质粒pICP10-EGFP,脂质体法转染Vero细胞,经G418... 目的:构建人单纯疱疹病毒2型(HSV-2)加强型绿色荧光蛋白(EGFP)真核表达系统,用于HSV感染的快速诊断。方法:通过PCR扩增HSV-2启动子ICP10目的基因片段,克隆至真核表达载体pEGFP-1,构建重组质粒pICP10-EGFP,脂质体法转染Vero细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞株Vero-ICP10-EGFP。以不同量的HSV-2感染Vero-ICP10-EGFP细胞,分别于感染后6、8和10 h,于倒置荧光显微镜下检测EGFP荧光。同时以人巨细胞病毒和柯萨奇病毒感染Vero-ICP10-EGFP细胞,检测其特异性。结果:构建的重组质粒pICP10-EGFP经DNA测序鉴定,表明重组正确。重组质粒pICP10-EGFP转染Vero细胞后,经G418长期筛选建立稳定转染细胞株Vero-ICP10-EGFP,感染HSV-2后6 h,倒置荧光显微镜下即可检测到EGFP荧光。人巨细胞病毒和柯萨奇病毒感染Vero-ICP10-EGFP细胞后6、10和24 h,均未检测到特异性荧光。结论:成功构建了HSV-EGFP真核表达系统,其具有早期、快速、灵敏等优点,特异性较高,可望用于HSV感染的快速诊断。 展开更多

关键词 人单纯疱疹病毒2型 绿色荧光蛋白 启动子ICP10

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中药香菊胶囊对初发性生殖器疱疹豚鼠模型的影响 被引量：1

11

作者 杨励 常瑛 张美芳 《西部中医药》 2017年第9期19-21,共3页

目的:探讨中药香菊胶囊对生殖器疱疹(GH)豚鼠模型的影响。方法:选取Hartley雌性豚鼠30只,随机选取其中5只作为正常对照组,其余25只以人工感染单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的方式建立GH动物模型,并随机分为模型对照组、阿昔洛韦组和香菊胶囊... 目的:探讨中药香菊胶囊对生殖器疱疹(GH)豚鼠模型的影响。方法:选取Hartley雌性豚鼠30只,随机选取其中5只作为正常对照组,其余25只以人工感染单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的方式建立GH动物模型,并随机分为模型对照组、阿昔洛韦组和香菊胶囊高、中、低剂量组,各组分别灌胃给药及给生理盐水后观察豚鼠发病情况和病程变化情况。结果:香菊胶囊治疗后GH豚鼠的皮损严重程度和消退时间较对照组明显降低,其中高剂量组效果最好,类似于阿昔洛韦组的用药效果,低剂量组效果最弱,中剂量组效果居中。香菊胶囊各剂量组豚鼠阴道内病毒滴度与阿昔洛韦组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:香菊胶囊能够抗HSV-2增殖,在豚鼠体内具有良好的抗HSV-2感染所致GH的作用。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒 2型 动物模型 香菊胶囊

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HSV-2的生物信息学分析及其Oligo探针设计 被引量：1

12

作者 赵海全 马文丽 +2 位作者 莫小阳 张亚莉 郑文岭 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第35期21-22,共2页

目的设计单纯疱疹病毒2型(HSV-2)诊断芯片的O ligo探针。方法利用BLA ST软件对HSV-2的DNA序列进行序列比对,得到有意义的特异序列;用生物学软件O ligo6.0设计特异性高、Tm值相近、长度均一的O ligo探针。结果获得13条60-m er O ligo探... 目的设计单纯疱疹病毒2型(HSV-2)诊断芯片的O ligo探针。方法利用BLA ST软件对HSV-2的DNA序列进行序列比对,得到有意义的特异序列;用生物学软件O ligo6.0设计特异性高、Tm值相近、长度均一的O ligo探针。结果获得13条60-m er O ligo探针。结论利用BLA ST系统和生物学软件O ligo6.0设计HSV-2诊断芯片的探针,可为后期打印成DNA芯片,用于HSV-2的检测打下基础。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒2型 生物芯片 Oligo探针 BLAST软件

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复发性生殖器疱疹患者NK细胞数检测及其意义 被引量：4

13

作者 林兰英 叶冬桂 陈保国 《浙江临床医学》 2005年第11期1146-1146,共1页

关键词 复发性生殖器疱疹 NK细胞数 患者 细胞免疫功能低下 其意义 单纯疱疹病毒2型 原发性生殖器疱疹 HIV复制 检测 感染机率

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HSV-2的生物信息学分析及其探针设计的探讨

14

作者 张建华 王海涛 张芳琳 《山西医科大学学报》 CAS 2008年第7期582-584,共3页

目的利用生物信息学分析单纯疱疹病毒2型(HSV-2)基因序列的特点,设计HSV-2诊断芯片的Oligo探针。方法利用Matlab7.0和ANTHEPROTV5对HSV-2序列进行分析,并通过BLAST软件对HSV-2的DNA序列进行序列比对,得到有意义的特异序列;用生物学软件O... 目的利用生物信息学分析单纯疱疹病毒2型(HSV-2)基因序列的特点,设计HSV-2诊断芯片的Oligo探针。方法利用Matlab7.0和ANTHEPROTV5对HSV-2序列进行分析,并通过BLAST软件对HSV-2的DNA序列进行序列比对,得到有意义的特异序列;用生物学软件Oligo6.0设计特异性高、Tm值相近、长度均一的Oligo探针。结果利用Matlab7.0和ANTHEPROTV5分析HSV-2二级结构的分布以及其理化性质,同时生物学软件Oligo6.0获得13条60-merOligo探针。结论通过生物信息学设计HSV-2诊断芯片的探针,可为后期打印成DNA芯片,用于HSV-2的检测打下基础。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒2型 MATLAB7.0 BLAST Oligo探针

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实时PCR检测HSV-2 DNA的方法学评价及应用

15

作者 邓念华 《成都医学院学报》 CAS 2008年第3期199-201,共3页

目的对本室利用TaqManMG技术建立的HSV-2实时定量PCR法进行方法学评价及临床应用。方法收集60名近期有流产史妇女的全血及血清标本，分别用FQ—PCR和ELISA法同时检测，并进行比较；另对FQ—PCR从重复性、灵敏度、线性范围、特异性几方... 目的对本室利用TaqManMG技术建立的HSV-2实时定量PCR法进行方法学评价及临床应用。方法收集60名近期有流产史妇女的全血及血清标本，分别用FQ—PCR和ELISA法同时检测，并进行比较；另对FQ—PCR从重复性、灵敏度、线性范围、特异性几方面进行方法学评价。结果对60份临床标本检测，ELISA法的阳性率为16．7％，FQ—PCR法的刚性率为31．7％，明显高于前者（P〈0．05）。FQ—PCR法的重复性较好[批内CV（变异系数）值为2．29％，批间CV值为4．76％]、线性范围好（4．75×10^1-10^6copies／μl，r=0．998）、灵敏度达到47．5copies／μl、特异性较好（对HSV—1、Vero细胞、巨细胞病毒、弓形虫等尢特异性扩增）。结论实时PCR测定HSV-2方法比传统的ELISA法更快速灵敏，是较有发展前途的新技术。 展开更多

关键词 实时定量PCR 单纯疱疹病毒2型 生殖器疱疹

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HSV-2疫苗评价方法研究进展

16

作者 朱小鹏 张雄飞 张伟 《山东医药》 CAS 2013年第8期94-96,共3页

单纯疱疹病毒2型（HSV-2）是疱疹病毒科的典型代表，属于α疱疹病毒亚科，主要引起腰部以下的皮肤疱疹和生殖器疱疹。近期研究发现，

关键词 单纯疱疹病毒2型 疫苗 免疫效果

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DNA核酸疫苗诱导小鼠免疫应答的作用 被引量：2

17

作者 王军阳 范桂香 +4 位作者 胜利 任会勋 雷艳君 孟兆俊 袁育康 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期249-251,共3页

目的　研究DNA核酸疫苗诱导机体免疫应答的能力 ,为揭示其诱导机制奠定基础。方法　采用本室构建的单纯疱疹病毒 2型 (HSV 2 )糖蛋白D的真核表达质粒 pcDNA gD2免疫小鼠 ,通过ELISA法动态检测特异性抗体的产生及小鼠外周血Th1型细胞因子... 目的　研究DNA核酸疫苗诱导机体免疫应答的能力 ,为揭示其诱导机制奠定基础。方法　采用本室构建的单纯疱疹病毒 2型 (HSV 2 )糖蛋白D的真核表达质粒 pcDNA gD2免疫小鼠 ,通过ELISA法动态检测特异性抗体的产生及小鼠外周血Th1型细胞因子IFN γ、IL 2的水平同时进行病毒攻击实验。结果　pcDNA gD2和HSV 2免疫组小鼠从第 2周开始产生特异性抗糖蛋白D抗体 ,第 4～ 5周达到高峰 ;外周血清中IFN γ、IL 2水平明显高于阴性对照组。病毒攻击实验显示 2周内 pcDNA gD2和HSV 2免疫组小鼠无一只死亡 ,而阴性对照组小鼠全部死亡。结论　pcDNA gD2真核表达质粒可以诱导小鼠产生特异性体液免疫和Th1型细胞免疫 。 展开更多

关键词 DNA核酸疫苗 免疫应答 单纯疱疹病毒2型感染 白细胞介素-2 Γ-干扰素 酶联免疫吸附法 免疫学

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奥平栓治疗慢性宫颈炎58例临床分析 被引量：3

18

作者 栾海燕 《中国实用医药》 2009年第19期185-185,共1页

关键词 慢性宫颈炎 奥平栓治疗 临床分析 单纯疱疹病毒2型 宫颈癌发生 宫颈糜烂 人乳头瘤病毒 干扰素栓

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