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人端粒酶逆转录酶启动子调控腺病毒介导胸苷激酶基因治疗人膀胱癌的动物实验研究被引量：5: 1; 作者连文峰林向阳 +6 位作者张素英王春仙杨永安于洋宫香宇陈艳军张敏《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第18期1058-1061,共4页; 目的:探讨带有人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HSV-tk)基因的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV-tk结合无毒的环氧鸟苷(GCV)对人膀胱癌的治疗作用。方法:建立人膀胱癌细胞株253JBALB/C裸小鼠移植瘤模型,采用Ad-hTERT-... 展开更多; 关键词膀胱肿瘤单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因腺病毒人端粒酶逆转录酶启动子; 在线阅读下载PDF 职称材料

HSV对Carbocyclic Oxetanocin G的耐药性及耐药病毒的胸腺嘧啶核苷激酶的活性研究: 2; 作者胡楠龚启荣《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第5期498-500,共3页; 目的探讨治疗疱疹病毒性角膜炎的新药CarbocyclicoxetanocinG(C.OXTG)耐药性的产生情况及产生耐药性的机制。方法将1型单纯疱疹病毒(HSV1)接种于非洲绿猴肾细胞,在含10μmol/LC.OXTG的环境中连续培养20代,通过空斑抑制试验测定各代病毒... 展开更多; 关键词 Carbocyclic Oxetanocin G 耐药性单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核侍激酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

EB病毒特异的胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：3: 3; 作者陈尚武朱振宇 +2 位作者陈瑞君黄迪马涧泉《中山医科大学学报》 CSCD 1996年第4期256-259,共4页; ３０℃培养基因工程菌，迅速转移至４２℃培养４ｈ诱导重组质粒中外源ＥＢ病毒胸苷激酶（ＥＢＶＴＫ）基因的表达。菌体蛋白作十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析表明，重组蛋白分子大小与ＥＢＶＴＫ分子大小... 展开更多; 关键词疱疹病毒 4型胸腺嘧啶激酶基因大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

猫疱疹病毒Ⅰ型环介导等温扩增检测方法的建立被引量：5: 4; 作者冀中豪任文陟 +2 位作者郝杨张铭锦高巍《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期71-76,共6页; 建立一种环介导等温扩增(LAMP)检测方法,实现对猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)的快速、准确、简便检测。根据Gen Bank中FHV-1的TK基因设计引物,优化反应条件,通过琼脂糖凝胶电泳和SYBR GreenⅠ染色观察分析扩增效果。该方法特异性好,敏感性检测... 展开更多; 关键词环介导等温扩增猫疱疹病毒Ⅰ型 SYBR GreenⅠ 胸腺嘧啶激酶基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达被引量：1: 5; 作者岳殿超李宝金 +3 位作者徐辉雄张泷涓王瑛吕明德《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期591-594,共4页; 【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中... 展开更多; 关键词 AFP启动子 HEPG2细胞靶向表达单纯疱疹病毒-胸腺嘧啶激酶1; 在线阅读下载PDF 职称材料

HSV-tk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤的体外抗肿瘤效应被引量：5: 6; 作者李涛张虹 +4 位作者王骞梁峰李伟李贵刚卢运萍《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期533-537,共5页; 目的　研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 /更昔洛韦 (herpessimplexvirusthymidinekinase /gancyclovir,HSV tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制。方法　应用脂质体... 展开更多; 关键词 HSV—tk/GCV 自杀基因系统视网膜母细胞瘤体外抗肿瘤效应基因疗法胸腺嘧啶核苷激酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种嵌合型调控元件在肿瘤靶向基因治疗中的应用: 7; 作者周培杰高维强方煜翔《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期255-262,共8页; 肿瘤靶向基因治疗成功的关键是调控治疗基因在肿瘤细胞中特异、高效地表达。首次构建一种嵌合型表达调控元件,旨在转录水平、转录后水平和翻译水平上实现联合调控目的基因在肿瘤细胞中特异性表达。体外实验表明,在前列腺癌细胞系LNCa P... 展开更多; 关键词肿瘤靶向基因治疗嵌合型表达调控条件绿色荧光蛋白单纯疱疹病毒-1胸腺激酶前列腺癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人端粒酶逆转录酶启动子调控腺病毒介导胸苷激酶基因治疗人膀胱癌的动物实验研究被引量：5: 1; 作者连文峰林向阳张素英王春仙杨永安于洋宫香宇陈艳军张敏; 机构保定市第三医院泌尿外科; 出处《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第18期1058-1061,共4页; 文摘目的:探讨带有人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HSV-tk)基因的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV-tk结合无毒的环氧鸟苷(GCV)对人膀胱癌的治疗作用。方法:建立人膀胱癌细胞株253JBALB/C裸小鼠移植瘤模型,采用Ad-hTERT-HSV-tk裸鼠尾静脉注射,腹腔注射GCV治疗并观察结果。通过常规病理切片观察肿瘤破坏情况及安全性;通过TUNEL染色进一步观察肿瘤的凋亡情况,免疫组化法测定增值细胞核抗原(PCNA)。结果:Ad-hTERT-HSV-tk/GCV治疗组,显示出明显的肿瘤抑制作用,其肿瘤体积、重量显著低于各对照组(P<0.05),抑瘤率明显。Ad-hTERT-HSV-tk/GCV治疗组凋亡指数高于其它各组,而增殖指数却明显低于其它各组。结论:Ad-hTERT-HSV-tk/GCV系统对裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,可以靶向性转入人膀胱癌细胞,治疗效果显著。; 关键词膀胱肿瘤单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因腺病毒人端粒酶逆转录酶启动子; Keywords Bladder neoplasm Adenovirus hTERT Carcinoma HSV-TK gene; 分类号 R737.14 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HSV对Carbocyclic Oxetanocin G的耐药性及耐药病毒的胸腺嘧啶核苷激酶的活性研究: 2; 作者胡楠龚启荣; 机构江苏省南通医学院附属医院眼科; 出处《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第5期498-500,共3页; 基金江苏省科委社会发展基金资助(BS200070); 文摘目的探讨治疗疱疹病毒性角膜炎的新药CarbocyclicoxetanocinG(C.OXTG)耐药性的产生情况及产生耐药性的机制。方法将1型单纯疱疹病毒(HSV1)接种于非洲绿猴肾细胞,在含10μmol/LC.OXTG的环境中连续培养20代,通过空斑抑制试验测定各代病毒株对C.OXTG的敏感性,测定野生HSV1、培养20代后的HSV1的耐药性及其生物克隆株的胸腺嘧啶核苷激酶的活性。结果HSV1在含C.OXTG的环境中连续传代培养4代后,便出现了耐药性。培养20代后的病毒株及其克隆株的ED50为野生株的10倍,且病毒的TK酶活性远远低于野生病毒株。结论HSV1在含C.OXTG的环境中很快产生耐药性且耐药病毒株缺乏TK酶活性。; 关键词 Carbocyclic Oxetanocin G 耐药性单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核侍激酶; Keywords Carbocyclic Oxetanocin G resistance HSV-1 thymidine kinase; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名EB病毒特异的胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：3: 3; 作者陈尚武朱振宇陈瑞君黄迪马涧泉; 机构中山医科大学生化教研室中山医科大学肿瘤研究所; 出处《中山医科大学学报》 CSCD 1996年第4期256-259,共4页; 基金国家教委博士点基金; 文摘３０℃培养基因工程菌，迅速转移至４２℃培养４ｈ诱导重组质粒中外源ＥＢ病毒胸苷激酶（ＥＢＶＴＫ）基因的表达。菌体蛋白作十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析表明，重组蛋白分子大小与ＥＢＶＴＫ分子大小的理论值６７ｋｕ相符，占菌体总蛋白的６％以上。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明重组蛋白可与混合ＮＰＣ病人血清中ＥＢＶＴＫ特异性抗体反应，呈现良好的抗原性。以３ＨｄＴ为底物测定菌体总蛋白的ＴＫ比活性，结果提示，重组蛋白具有胸苷激酶活性。研究为ＥＢＶＴＫ在ＮＰＣ诊断中的应用打下了基础。; 关键词疱疹病毒 4型胸腺嘧啶激酶基因大肠杆菌; 分类号 R378.21 [医药卫生—病原生物学] R394.8 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猫疱疹病毒Ⅰ型环介导等温扩增检测方法的建立被引量：5: 4; 作者冀中豪任文陟郝杨张铭锦高巍; 机构吉林大学动物科学学院; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期71-76,共6页; 基金国家科技支撑计划项目(2015BAI07B02) 吉林省科技发展计划项目(20170623093-09TC); 文摘建立一种环介导等温扩增(LAMP)检测方法,实现对猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)的快速、准确、简便检测。根据Gen Bank中FHV-1的TK基因设计引物,优化反应条件,通过琼脂糖凝胶电泳和SYBR GreenⅠ染色观察分析扩增效果。该方法特异性好,敏感性检测实验表明该检测方法最低能够检测到的模版是101copies/μL,是PCR检测方法灵敏度的10倍。金属浴、烘箱、恒温水浴锅与PCR仪四种不同的扩增反应仪器均可达到LAMP的要求,扩增出梯形条带。建立了针对FHV-1的LAMP检测方法,该种检测方法具有高特异性的扩增引物,对检测的仪器、反应条件及检测人员技术要求比较宽松,从扩增开始到通过SYBR GreenⅠ实现的结果可视化解读所用时间不到1 h,实现了快速、准确、简便检测FHV-1的目的。; 关键词环介导等温扩增猫疱疹病毒Ⅰ型 SYBR GreenⅠ 胸腺嘧啶激酶基因; Keywords loop-mediated isothermal amplification feline herpes virus Ⅰ SYBR Green Ⅰ thymidine kinase （TK） gene detection method; 分类号 Q939.47 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达被引量：1: 5; 作者岳殿超李宝金徐辉雄张泷涓王瑛吕明德; 机构中山大学附属第一医院影像医学部广州市第八人民医院肝胆外科中山大学附属第一医院外科实验室中山大学附属第一医院超声科．广东广州; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期591-594,共4页; 基金国家自然科学基金(30300082) 国家自然科学基金(30470467) 广东省自然科学基金(04009360); 文摘【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK。对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子。RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61～83ku大小的特异性条带。【结论】人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功。; 关键词 AFP启动子 HEPG2细胞靶向表达单纯疱疹病毒-胸腺嘧啶激酶1; Keywords alpha-fetoprotein promoter HepG2 cells targeting expression herpes simplex virus thymidine kinase type 1; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HSV-tk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤的体外抗肿瘤效应被引量：5: 6; 作者李涛张虹王骞梁峰李伟李贵刚卢运萍; 机构华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科新加坡国立大学生物系武汉大学化学系华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期533-537,共5页; 文摘目的　研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 /更昔洛韦 (herpessimplexvirusthymidinekinase /gancyclovir,HSV tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制。方法　应用脂质体将pCMV/hytk IRES hrGFP质粒导入HXO Rb44细胞株。用潮霉素筛选出阳性细胞克隆并命名为HXO Rb44/tk。RT PCR鉴定hytk基因在HXO Rb44/tk细胞中的转录结果。比较HXO Rb44和HXO Rb44/tk细胞的形态特征及生长特性。通过MTT法检测GCV对不同比例HXO Rb44/tk和HXO Rb44混合细胞的杀伤作用 (“旁观者效应”)。并通过上清移换实验研究旁观者效应发生的机制。结果　HXO Rb44/tk细胞经RT PCR可检测出 5 30bp的hytk基因片段。HXO Rb44/tk和HXO Rb44细胞的形态特征及生长特性无明显差异。HXO Rb44/tk细胞仅占很低比例时即可观察到明显的旁观者效应 ,而GCV作用的HXO Rb44/tk细胞上清对HXO Rb44细胞无杀伤作用。结论　HSV tk基因转移联合GCV治疗可作为Rb基因治疗的一种有效方法。; 关键词 HSV—tk/GCV 自杀基因系统视网膜母细胞瘤体外抗肿瘤效应基因疗法胸腺嘧啶核苷激酶; Keywords retinoblastoma gene therapy thymidine kinase; 分类号 R739.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种嵌合型调控元件在肿瘤靶向基因治疗中的应用: 7; 作者周培杰高维强方煜翔; 机构上海交通大学医学院附属仁济医院仁济-MedX临床干细胞研究中心癌基因及相关基因国家重点实验室上海交通大学生物医学工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期255-262,共8页; 基金国家自然科学基金项目(81301857 81130038); 文摘肿瘤靶向基因治疗成功的关键是调控治疗基因在肿瘤细胞中特异、高效地表达。首次构建一种嵌合型表达调控元件,旨在转录水平、转录后水平和翻译水平上实现联合调控目的基因在肿瘤细胞中特异性表达。体外实验表明,在前列腺癌细胞系LNCa P中,该调控元件可将报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和荧光素酶(luciferase)的肿瘤表达特异性分别提高420%和480%。体外细胞存活实验表明,运用该元件调控单纯疱疹病毒-1胸腺激酶(HSV-1 TK)的表达能特异性杀伤LNCa P细胞,验证了该元件可成功用于治疗基因的肿瘤靶向表达。; 关键词肿瘤靶向基因治疗嵌合型表达调控条件绿色荧光蛋白单纯疱疹病毒-1胸腺激酶前列腺癌; Keywords tumor-specific targeting therapy embedded expression regulatory element EGFP HSV-1 TK prostate cancer; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人端粒酶逆转录酶启动子调控腺病毒介导胸苷激酶基因治疗人膀胱癌的动物实验研究	连文峰林向阳张素英王春仙杨永安于洋宫香宇陈艳军张敏	《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HSV对Carbocyclic Oxetanocin G的耐药性及耐药病毒的胸腺嘧啶核苷激酶的活性研究	胡楠龚启荣	《眼科研究》 CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	EB病毒特异的胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达	陈尚武朱振宇陈瑞君黄迪马涧泉	《中山医科大学学报》 CSCD	1996	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猫疱疹病毒Ⅰ型环介导等温扩增检测方法的建立	冀中豪任文陟郝杨张铭锦高巍	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2018	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达	岳殿超李宝金徐辉雄张泷涓王瑛吕明德	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	HSV-tk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤的体外抗肿瘤效应	李涛张虹王骞梁峰李伟李贵刚卢运萍	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	一种嵌合型调控元件在肿瘤靶向基因治疗中的应用	周培杰高维强方煜翔	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料