单核细胞增多性李斯特菌主要毒力因子研究进展 被引量：18

1

作者 江玲丽 陈健舜 方维焕 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期733-735,F0003,共4页

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 毒力因子 巨噬细胞 人兽共患 上皮细胞 病原菌 食源性 胃肠炎

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鲜活农产品中单核细胞增多性李斯特菌快速检测技术的研究进展 被引量：4

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作者 关棣锴 胡文忠 +1 位作者 姜爱丽 萨仁高娃 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期361-364,368,共5页

单核细胞增多性李斯特菌是一种食源性致病菌,其引发的李斯特菌病致死率高达30%。本文综述了单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)的生物学特性和毒力因子,着重介绍了单核细胞增多性李斯特菌基于分子生物学、免疫学等技术的... 单核细胞增多性李斯特菌是一种食源性致病菌,其引发的李斯特菌病致死率高达30%。本文综述了单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)的生物学特性和毒力因子,着重介绍了单核细胞增多性李斯特菌基于分子生物学、免疫学等技术的几种快速检测方法,旨在为单核细胞增多性李斯特菌的深入研究提供参考。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 快速检测 进展

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TaqMan探针法荧光定量PCR检测鲜切甜瓜中单核细胞增多性李斯特菌的研究 被引量：3

3

作者 关棣锴 胡文忠 +1 位作者 朴永哲 冯可 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期297-300,共4页

根据多条单核细胞增多性李斯特菌的hly基因序列,设计了1对简并引物和1条TaqMan探针,建立荧光定量PCR快速检测单核细胞增多性李斯特菌的方法,对该方法的特异性、灵敏度进行了验证,并采用该法对染菌的鲜切甜瓜进行了检测。结果表明,该方... 根据多条单核细胞增多性李斯特菌的hly基因序列,设计了1对简并引物和1条TaqMan探针,建立荧光定量PCR快速检测单核细胞增多性李斯特菌的方法,对该方法的特异性、灵敏度进行了验证,并采用该法对染菌的鲜切甜瓜进行了检测。结果表明,该方法具有较好的特异性,对质粒标准品的灵敏度为1.12×102copies/μL,对染菌的鲜切甜瓜中单核细胞增多性李斯特菌的最低检出限为6.28×102cfu/mL。该方法可为快速检测鲜切果蔬病原微生物污染度及其控制奠定技术基础。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 hly基因 荧光定量PCR TAQMAN探针 鲜切甜瓜

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单核细胞增多性李氏杆菌人工感染绵羊试验 被引量：2

4

作者 剡根强 马勋 +4 位作者 屈勇刚 田晶华 王晓兰 蒋建军 沈文 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期297-298,共2页

将从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经静脉接种于健康美利奴绵羊 3只 ,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化 ,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增多性李氏杆菌 ,从而证明了该分离株单核细胞... 将从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经静脉接种于健康美利奴绵羊 3只 ,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化 ,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增多性李氏杆菌 ,从而证明了该分离株单核细胞增多性李氏杆菌具有较强的致病性。 展开更多

关键词 绵羊 单核细胞增多性李氏杆菌 人工感染 致病性

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单核细胞增多性李斯特脑膜脑炎1例 被引量：2

5

作者 卢爱丽 招远祺 +3 位作者 乔利军 高红霞 康妮妮 钱彩文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期114-114,共1页

患者男,63岁。2014年10月9日上午出现发热、头痛、颈项痛,下午至我院。既往有慢性阻塞性肺疾病病史,反复应用广谱抗生素,发病前到过农村。查血常规：WBC 16.74×10^9/L,胸片提示左下肺轻度炎症,颅脑CT未见异常。

关键词 单核细胞增多性 脑膜脑炎 慢性阻塞性肺疾病 广谱抗生素 反复应用 颅脑CT 颈项痛 发病前

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绵羊和青贮料中单核细胞增多性李氏杆菌的分离鉴定 被引量：6

6

作者 杨霞 王静梅 +2 位作者 陈宏伟 张淑琴 王耀峰 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第4期334-336,共3页

本文结合国标方法(GB4789.30 94)对健康绵羊和青贮料进行LM的分离,用常规生化试验和分子生物学方法对分离菌进行互映鉴定。从155只绵羊的鼻腔中分离到7株LM,阳性率为4.5%;从47份青贮料中共分离到5株LM,阳性率为10.64%,且从2份霉变青贮... 本文结合国标方法(GB4789.30 94)对健康绵羊和青贮料进行LM的分离,用常规生化试验和分子生物学方法对分离菌进行互映鉴定。从155只绵羊的鼻腔中分离到7株LM,阳性率为4.5%;从47份青贮料中共分离到5株LM,阳性率为10.64%,且从2份霉变青贮料中检出1株LM,霉变青贮料中LM阳性率高达50%。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李氏杆菌(LM) 分离 鉴定

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新疆部分地区绵羊及青贮饲草中单核细胞增多性李氏杆菌的调查 被引量：2

7

作者 杨霞 剡根强 +1 位作者 王静梅 盛金良 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第8期19-20,共2页

关键词 新疆 绵羊 青贮饲草 单核细胞增多性李氏杆菌 分离 李氏杆菌病

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鹧鸪单核细胞增多性李氏杆菌的分离鉴定 被引量：1

8

作者 高轩 校海霞 +3 位作者 马新英 宋臣峰 李潭清 阎广强 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期69-72,共4页

2000年冬,从河北省某鹧鸪养殖场送检的病死鹧鸪中分离到3株革兰氏阳性球杆菌。应用细菌学检验方法,对此分离菌进行了培养特性观察和生化特性分析等,并结合流行病学调查、临床症状和病理剖检变化,将其鉴定为单核细胞增多性李氏杆菌。致... 2000年冬,从河北省某鹧鸪养殖场送检的病死鹧鸪中分离到3株革兰氏阳性球杆菌。应用细菌学检验方法,对此分离菌进行了培养特性观察和生化特性分析等,并结合流行病学调查、临床症状和病理剖检变化,将其鉴定为单核细胞增多性李氏杆菌。致病性试验表明,分离菌具有较强的致病性。选用敏感药物治疗后,病情得到了有效地控制。 展开更多

关键词 鹧鸪 单核细胞增多性李氏杆菌 分离 鉴定

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单核细胞增多性李氏杆菌人工感染绵羊试验 被引量：1

9

作者 剡根强 马勋 +4 位作者 屈勇刚 田晶华 王晓兰 蒋建军 沈文 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2001年第z1期197-198,共2页

将从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经静脉接种于健康美利奴绵羊 3只 ,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化 ,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增多性李氏杆菌 ,从而证明了该分离株单核细胞... 将从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经静脉接种于健康美利奴绵羊 3只 ,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化 ,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增多性李氏杆菌 ,从而证明了该分离株单核细胞增多性李氏杆菌具有较强的致病性。 展开更多

关键词 绵羊 单核细胞增多性李氏杆菌 人工感染

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绵羊单核细胞增多性李氏杆菌带菌情况的调查研究 被引量：2

10

作者 王一明 张海兰 杨菊清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期174-176,共3页

对伊犁部分地区健康绵羊的鼻拭子、肛拭子、青贮、土壤进行检测,共检测280个样本,经培养特性、生化特性鉴定,并针对单核细胞增多性李氏杆菌高度保守的hly基因设计的特异性引物进行PCR扩增,同时对扩增产物进行分析,结果有5株分离株为单... 对伊犁部分地区健康绵羊的鼻拭子、肛拭子、青贮、土壤进行检测,共检测280个样本,经培养特性、生化特性鉴定,并针对单核细胞增多性李氏杆菌高度保守的hly基因设计的特异性引物进行PCR扩增,同时对扩增产物进行分析,结果有5株分离株为单核细胞增多性李氏杆菌,分布率达1.78%。ERIC-PCR结果表明,此5株单核细胞增多性李氏杆菌与标准单核细胞增多性李氏杆菌对照株指纹图谱有差异,属于不同基因型。 展开更多

关键词 绵羊 单核细胞增多性李氏杆菌 带菌情况

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单核细胞增多性李斯特菌对小鼠血脑屏障通透性的影响 被引量：2

11

作者 郑德良 马勋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期449-451,共3页

为研究小鼠感染单核细胞增多性李斯特菌(LM)90SB2株后血脑屏障通透性的变化,本实验采用ELISA方法检测小鼠血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)的水平和甲酰胺-紫外分光光度法检测脑组织中伊文思蓝(EB)的含量。结果显示:MBP于感染后4 h开始升高,10 ... 为研究小鼠感染单核细胞增多性李斯特菌(LM)90SB2株后血脑屏障通透性的变化,本实验采用ELISA方法检测小鼠血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)的水平和甲酰胺-紫外分光光度法检测脑组织中伊文思蓝(EB)的含量。结果显示:MBP于感染后4 h开始升高,10 h后维持较高水平,10 h、24 h、48 h、120 h和144 h各时间点与对照组比较均有显著性差异(p<0.05);EB在感染后24 h之内无明显增加,24 h后有较大幅度升高,并且与对照组比较存在显著性差异(p<0.05);但72 h后开始缓慢下降。表明小鼠感染LM后会导致血脑屏障通透性一定程度的升高。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 血脑屏障 髓鞘碱性蛋白 伊文思蓝

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单核细胞增多性李斯特菌LIPI-1全基因克隆与序列分析 被引量：1

12

作者 谭炳乾 何启盖 +1 位作者 肖军 陈焕春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期627-633,共7页

参考GenBank中单核细胞增多性李斯特菌(LM)第I毒力岛(LIPI-1)有关基因序列设计引物,分段扩增、克隆了分离菌株XFL0605LIPI-1毒力岛全基因序列,序列全长8 558 bp,包括完整的prfA、plcA、hly、mpl、actA和plcB6个基因。对LIPI-1编码的6个... 参考GenBank中单核细胞增多性李斯特菌(LM)第I毒力岛(LIPI-1)有关基因序列设计引物,分段扩增、克隆了分离菌株XFL0605LIPI-1毒力岛全基因序列,序列全长8 558 bp,包括完整的prfA、plcA、hly、mpl、actA和plcB6个基因。对LIPI-1编码的6个毒力基因进行序列分析,各毒力基因反映的进化关系不尽一致,表明李斯特菌株在获得外源性毒力基因方面具有不同步性,各毒力基因来源也不尽相同。应用相应软件对各毒力基因编码蛋白的信号肽、跨膜区进行预测,确定了基因序列中调控蛋白PrfA结合区核苷酸序列。分析并确认了hlyA基因及推导氨基酸序列PEST基序和C端保守11肽序列。研究还发现LM菌株XFL0605actA基因编码604个氨基酸,缺失了105 bp富脯氨酸重复片段编码碱基,只有2个E/DFPPPPXD/E重复序列。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 李斯特菌第I毒力岛 prfA基因簇 遗传进化分析

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不同来源单核细胞增多性李氏杆菌inlB和actA基因的克隆测序分析及基因缺失株的毒力试验 被引量：1

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作者 赵新斐 尚文婧 +1 位作者 王静梅 剡根强 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第5期32-38,共7页

根据GeneBank上发表的单核细胞增多性李氏杆菌(Listeria monocytogenes,LM)的内化素B(internalin B,inlB)和肌动蛋白A(actin A,actA)基因设计特异性引物,对5株不同来源的健康绵羊单核细胞增多性李氏杆菌和一株临床分离的单核细胞增多性... 根据GeneBank上发表的单核细胞增多性李氏杆菌(Listeria monocytogenes,LM)的内化素B(internalin B,inlB)和肌动蛋白A(actin A,actA)基因设计特异性引物,对5株不同来源的健康绵羊单核细胞增多性李氏杆菌和一株临床分离的单核细胞增多性李氏杆菌的inlB及actA基因进行PCR扩增,克隆测序分析其序列,并对2株部分基因缺失的单增李氏杆菌进行小鼠攻毒试验。结果表明:5株健康绵羊分离株单增李氏杆菌与临床分离株有较高的同源性,并且发现2株部分基因缺失的单增李氏杆菌;小鼠攻毒试验表明缺失株毒力有降低,但是不明显。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李氏杆菌 内化素B 肌动蛋白A 克隆测序

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表达绿色荧光蛋白重组单核细胞增多性李斯特菌的构建(英文)

14

作者 柯春林 宋厚辉 +2 位作者 江玲丽 张桂芝 方维焕 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期638-644,共7页

将编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因融合到单核细胞增多性李斯特菌actA基因启动子和信号肽下游,应用同源重组技术构建了含gfp的重组李斯特菌突变株.PCR扩增及其产物的酶切鉴定均证实目的基因gfp融合到李斯特菌基因组中.荧光显微镜下可见重... 将编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因融合到单核细胞增多性李斯特菌actA基因启动子和信号肽下游,应用同源重组技术构建了含gfp的重组李斯特菌突变株.PCR扩增及其产物的酶切鉴定均证实目的基因gfp融合到李斯特菌基因组中.荧光显微镜下可见重组菌体发绿色荧光.SDS-PAGE电泳和免疫印迹结果显示重组李斯特菌表达的GFP分子量约为28 kD,与预计的分子量大小一致.重组菌对鸡胚和小鼠的毒力以及对体外培养细胞的侵袭力均低于野生型李斯特菌.该重组菌可用于研究李斯特菌的致病机理和食品加工过程中微生物污染控制的指示性细菌. 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 同源重组 绿色荧光蛋白 外源基因表达

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单核细胞增多性李斯特菌iap基因的克隆、表达与p60蛋白的纯化 被引量：3

15

作者 吕添 武海涛 +1 位作者 曹正茂 王小红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期157-161,共5页

以单增李斯特菌基因组DNA为模板,利用自行设计的引物,通过PCR法扩增出单增李斯特菌的iap基因。在iap基因的5'端和3'端分别引入EcoRⅠ和XhoⅠ2个酶切位点将其克隆到pMD-18T载体上,构建克隆载体pMD-18T-iap。经测序正确后,将iap... 以单增李斯特菌基因组DNA为模板,利用自行设计的引物,通过PCR法扩增出单增李斯特菌的iap基因。在iap基因的5'端和3'端分别引入EcoRⅠ和XhoⅠ2个酶切位点将其克隆到pMD-18T载体上,构建克隆载体pMD-18T-iap。经测序正确后,将iap基因克隆至表达载体pET-28a上构建表达质粒pET-28a-iap。在IPTG诱导下,携带pET-28a-iap的E.coliBL21(DE3)高效表达分子质量约为60kD的可溶性蛋白及包涵体形式的蛋白,其中可溶性蛋白占总p60蛋白含量的76.3%左右。诱导表达的可溶性蛋白通过Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在95.6%以上的重组p60蛋白,其提取率为68.3%左右。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 iap基因 克隆 表达 p60蛋白 纯化

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单核细胞增多性李斯特菌p60蛋白表达条件的优化 被引量：3

16

作者 吕添 曹正茂 +1 位作者 武海涛 王小红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第23期160-163,共4页

在成功构建重组表达载体pET-28a-p60和获得重组宿主菌E.coliBL21(DE3)的基础上,对重组宿主菌E.coliBL21(DE3)进行表达p60蛋白条件的优化研究。结果表明:将重组大肠杆菌培养至OD600nm达0.7～0.8左右时,加入浓度为1mmol/L的异丙基-β-D-... 在成功构建重组表达载体pET-28a-p60和获得重组宿主菌E.coliBL21(DE3)的基础上,对重组宿主菌E.coliBL21(DE3)进行表达p60蛋白条件的优化研究。结果表明:将重组大肠杆菌培养至OD600nm达0.7～0.8左右时,加入浓度为1mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),在摇床温度为25℃,转速为150r/min条件下诱导表达6h,可得到重组表达的p60蛋白占总蛋白的比例为42.32%,其中可溶性蛋白占总p60蛋白的比例为85.36%左右,为p60蛋白诱导表达的最优条件。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 p60蛋白 表达条件 优化

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新疆部分地区绵羊及其环境中单核细胞增多性李氏杆菌分布状况的调查 被引量：2

17

作者 王一明 张海兰 +2 位作者 李静 王静梅 剡根强 《家畜生态学报》 2008年第3期90-92,共3页

对新疆生产建设兵团农五师84团、90团,农八师新业羊场及142团羊场健康绵羊的鼻拭、肛拭、粪便、青贮、以及圈舍周围环境土壤、水源进行检测,从检测的220个样本中分离得到9株革兰氏阳性、两端钝圆,有时呈弧形,多单个或排列成"V"... 对新疆生产建设兵团农五师84团、90团,农八师新业羊场及142团羊场健康绵羊的鼻拭、肛拭、粪便、青贮、以及圈舍周围环境土壤、水源进行检测,从检测的220个样本中分离得到9株革兰氏阳性、两端钝圆,有时呈弧形,多单个或排列成"V"字形或"Y"字形的球杆菌,经培养特性、生化鉴定和PCR方法鉴定,9株均为单核细胞增多性李氏杆菌,分布率达4.0%。 展开更多

关键词 绵羊 单核细胞增多性李氏杆菌 分布

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应用两对引物PCR检测速冻食品中单核细胞增多性李斯特菌 被引量：10

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作者 陈倩 付萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第12期40-41,共2页

应用两对引物（HIY1—2及Inl1—2对50件速冻食品经两次增菌后因相吸附法提取DNA，分别PCR检测单增李斯特菌的溶血素基因和内化素基因。PCR法检测标本阳性率为12％，与常规检测方法对比，结果一致，大大缩短了检测时间。方法简便，省时... 应用两对引物（HIY1—2及Inl1—2对50件速冻食品经两次增菌后因相吸附法提取DNA，分别PCR检测单增李斯特菌的溶血素基因和内化素基因。PCR法检测标本阳性率为12％，与常规检测方法对比，结果一致，大大缩短了检测时间。方法简便，省时省力，对自食品中分离致病性单增李斯特菌，特别是食物中毒病原菌快速检测具有重要意义，同时提示速冻食品中单增李斯特菌污染问题不可忽视。发展特异敏感的PCR方法鉴定食品中单增李斯特菌是今后工作的发展方向。 展开更多

关键词 单核细胞增多性 李斯特菌 速冻食品 PCR 检测

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新疆部分地区绵羊及其环境中单核细胞增多性李氏杆菌的分离与鉴定 被引量：1

19

作者 王一明 张海兰 +2 位作者 蒋建军 王静梅 剡根强 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第6期716-718,共3页

本研究通过对新疆部分地区羊场健康绵羊的鼻拭、肛拭、粪便、青贮、以及圈舍周围环境中的土壤、水源进行检测,初步掌握此菌在这些地区的分布及污染情况。经镜检、生化鉴定和PCR方法鉴定,结果从220个样本中分离到9株单核细胞增多性李氏杆... 本研究通过对新疆部分地区羊场健康绵羊的鼻拭、肛拭、粪便、青贮、以及圈舍周围环境中的土壤、水源进行检测,初步掌握此菌在这些地区的分布及污染情况。经镜检、生化鉴定和PCR方法鉴定,结果从220个样本中分离到9株单核细胞增多性李氏杆菌,分布率达4.1%。 展开更多

关键词 绵羊及其环境 单核细胞增多性李氏杆菌 分离与鉴定

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单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因克隆与序列分析 被引量：1

20

作者 谭炳乾 何启盖 +1 位作者 肖军 陈焕春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期988-992,共5页

目的克隆单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因并进行序列比较分析。方法分别从参考菌株CCTC-CAB97021和分离菌株XFL0605中PCR扩增mpl全基因,连接到T克隆载体转化到受体菌DH5α中,经菌落PCR和提取质粒酶切鉴定,分别获得阳性克隆转化子后测序... 目的克隆单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因并进行序列比较分析。方法分别从参考菌株CCTC-CAB97021和分离菌株XFL0605中PCR扩增mpl全基因,连接到T克隆载体转化到受体菌DH5α中,经菌落PCR和提取质粒酶切鉴定,分别获得阳性克隆转化子后测序,运用DNAStar软件对测定核苷酸及推导AA序列与GenBank中李斯特菌属的部分菌株进行分析。结果成功克隆了单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因,所获得的mpl基因片段具有完整的ORF,均全长1533bp,编码510个氨基酸。对李斯特菌属mpl基因遗传性分析显示L.monocytogenes与L.seeligeri和L.ivanovii处于不同的分支,在L.monocytogenes种内分为两个群,表明mpl能够反应出这三种李斯特菌株的亲缘关系。结论单核细胞增多性李斯特菌mpl基因具有种的特异性。 展开更多

关键词 单核细胞增多性李斯特菌 金属蛋白酶 mpl基因 T载体

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