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SOCE调控亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的研究
1
作者 李思瑶 季子崴 +6 位作者 李蕾 张靖淇 岳柏晨 尹玉凤 徐闯 杨威 张冰冰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3907-3917,共11页
[目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细... [目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细胞。取亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞分为3组,分别为Hyp、毒胡萝卜素(thapsigarsin,TG)处理组(Hyp+TG)和2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-aminoethyl diphenylborinate,2-APB)处理组(Hyp+2-APB组)。通过流式细胞术检测细胞内Ca^(2+)水平,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测SOCE相关因子mRNA和蛋白表达量;通过激光共聚焦和免疫荧光检测单核巨噬细胞吞噬和黏附情况,并检测单核巨噬细胞吞噬和黏附因子的表达。[结果]流式细胞术检测结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平极显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中钙离子释放激活的钙通道蛋白1 (calcium release activated calcium modulator 1,ORAI1)、基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)、STIM2、选择素L(selectin L,SELL)、ORA I2、ORAI3以及吞噬因子髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。Western blotting结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中ORAI2、ORAI3、STIM2、ORAI1和STIM1蛋白表达量极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。同时,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞吞噬和黏附能力显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。TG处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),ORAI1、ORAI3、STIM1、STIM2和ORAI2蛋白表达水平显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力均显著或极显著增强(P<0.05;P<0.01)。2-APB处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),ORAI2、STIM2、ORAI1、ORAI3和STIM1蛋白表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力极显著或显著减弱(P<0.01;P<0.05)。[结论]TG激活SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平升高,细胞吞噬和黏附能力增强;2-APB抑制SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平降低,细胞的吞噬和黏附功能减弱,表明SOCE参与调控单核巨噬细胞的吞噬和黏附作用。 展开更多
关键词 钙池操控的钙内流(SOCE) 单核巨噬细胞 吞噬 黏附
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猪骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法建立及应用
2
作者 张伟 李俊辉 +4 位作者 潘晓梅 曹剑 唐慧芬 毛丽萍 贺笋 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期50-59,共10页
选择不同细胞因子和培养基,比较4种培养基和细胞因子对猪骨髓细胞分化为单核巨噬细胞数量和增殖能力的影响,筛选出猪骨髓细胞诱导单核巨噬细胞的最佳培养条件。结果显示,在含10%胎牛血清的DME/F12培养基中添加粒细胞-巨噬细胞集落刺激因... 选择不同细胞因子和培养基,比较4种培养基和细胞因子对猪骨髓细胞分化为单核巨噬细胞数量和增殖能力的影响,筛选出猪骨髓细胞诱导单核巨噬细胞的最佳培养条件。结果显示,在含10%胎牛血清的DME/F12培养基中添加粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)(40 ng/mL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)(50 ng/mL)能够诱导骨髓细胞诱分化成大量单核巨噬细胞,细胞数量与对照组差异显著(P<0.05),并且诱导细胞中有针对单核巨噬细胞的特异性抗原(CD64)表达,单核巨噬细胞纯度为77.57%左右。诱导后的细胞中检测到针对单核巨噬细胞的特异性Nramp1基因。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能够在细胞中大量增殖,与未诱导的骨髓细胞差异显著(P<0.05)。以上结果表明,DME-F12培养基添加GM-CSF和L929细胞上清液能够显著增强猪骨髓细胞诱导分化成单核巨噬细胞的能力,并且能够获得高纯度、高密度、高活率的单核巨噬细胞。 展开更多
关键词 猪 骨髓 单核巨噬细胞 体外培养
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小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)的培养及其在诱导破骨细胞中的应用 被引量：24
3
作者 许丹 律颖 +4 位作者 朱小语 陈晓文 冯金秋 范爱琴 许雅君 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1355-1360,共6页
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)是通过Abelson鼠白血病病毒诱导BALB/c小鼠产生肿瘤后得到的细胞株。RAW264.7细胞在医学研究中应用十分普遍:它是许多白血病相关研究模型的常用细胞株;在微生物学、免疫学等研究中也十分常用;同时... 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)是通过Abelson鼠白血病病毒诱导BALB/c小鼠产生肿瘤后得到的细胞株。RAW264.7细胞在医学研究中应用十分普遍:它是许多白血病相关研究模型的常用细胞株;在微生物学、免疫学等研究中也十分常用;同时也是小鼠源性破骨前体细胞,可通过特定细胞因子的诱导在体外获得成熟破骨细胞,因此也成为许多骨骼疾病研究的体外模型。但RAW264.7细胞形态和分化状态多变,在实际培养中较难把握,给科研工作带来了一定困难。科研工作者在RAW264.7细胞的培养方法、细胞的形态及分化状态等方面始终观点不一,对于用RAW264.7细胞在体外诱导获得破骨细胞的方法也有许多差别。本文结合文献资料及实践,探索了RAW264.7细胞的培养条件,冻存、复苏、传代方法,以及用核因子κB受体活化因子配基(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)诱导其成为成熟破骨细胞的技术关键;旨在总结RAW264.7细胞的培养及诱导其分化为破骨细胞的经验教训,探讨RAW264.7细胞的培养和在体外用RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞的方法、技巧,供广大科研工作者借鉴。 展开更多
关键词 RAW264.7 单核巨噬细胞 破骨细胞 RANKL 细胞分化
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ERK通路在单核巨噬细胞集落刺激因子调控成纤维细胞血管内皮生长因子表达中的作用 被引量：6
4
作者 李晓光 方勇 +3 位作者 姚敏 胡孝辉 徐鹏 俞为荣 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1334-1337,共4页
目的研究单核巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)对成纤维细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,初步探讨细胞外信号调节激酶(ERK)通路对此过程的调控作用。方法在对数生长期人皮肤成纤维细胞培养液中添加GMCSF和(或)ERK通路特异性抑制剂(PD9... 目的研究单核巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)对成纤维细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,初步探讨细胞外信号调节激酶(ERK)通路对此过程的调控作用。方法在对数生长期人皮肤成纤维细胞培养液中添加GMCSF和(或)ERK通路特异性抑制剂(PD98059)进行干预,实验分为空白对照组、PD98059组、GMCSF组及PD98059+GMCSF组。收集各组细胞及培养上清液,采用RT-PCR技术和Western blotting方法分别检测各组人皮肤成纤维细胞内VEGFmRNA和蛋白表达;ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白分泌水平。结果与空白对照组和PD98059组比较,GMCSF组人皮肤成纤维细胞内VEGFmRNA和蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中VEGF蛋白质量体积浓度明显升高(P<0.05);而在GMCSF+PD98059组中,人皮肤成纤维细胞内和细胞培养上清液中相应指标表达水平均显著低于GMCSF组(P<0.05)。结论 GMCSF可促进人皮肤成纤维细胞VEGF表达,ERK通路在此过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 单核巨噬细胞集落刺激因子 细胞外信号调节激酶通路 血管内皮生长因子 成纤维细胞
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白细胞介素37对动脉粥样硬化患者单核巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2的抑制作用 被引量：7
5
作者 朱静和 钱雷 +2 位作者 蒋凤 谢迎弟 于建秀 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期873-875,共3页
目的探讨白细胞介素(IL)37对动脉粥样硬化(AS)患者单核巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的抑制作用。方法选取2018年12月~2019年5月滨海县人民医院就诊的AS患者96例为AS组和健康体检者40例为对照组,收集受试者一般临床资料,检测血清... 目的探讨白细胞介素(IL)37对动脉粥样硬化(AS)患者单核巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的抑制作用。方法选取2018年12月~2019年5月滨海县人民医院就诊的AS患者96例为AS组和健康体检者40例为对照组,收集受试者一般临床资料,检测血清IL-37和Lp-PLA2水平。2组均随机选择7例,分离培养外周血单核细胞,将对照组来源细胞分为空白1组(A组)、氧化型LDL(ox-LDL)组(B组)及IL-37+ox-LDL组(C组),将AS组来源细胞分为空白2组(D组)、AS+ox-LDL组(E组)及AS+IL-37+ox-LDL组(F组),检测各组单核细胞凋亡率和单核细胞中Lp-PLA2 mRNA水平。结果对照组与AS组性别、年龄及HDL-C比较,无统计学差异(P>0.05)。与对照组比较,AS组体质量指数、单核细胞、TC、TG、LDL-C及血清Lp-PLA2和Lp-PLA2 mRNA表达明显升高(P<0.01),AS组血清IL-37和IL-37 mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义[(4.41±0.92)ng/L vs(5.04±1.03)ng/L,4.25±2.11 vs 5.28±1.88,P<0.01]。IL-37+ox-LDL刺激培养外周血单核细胞48 h后,B组较A组,E组较D组单核细胞凋亡率及Lp-PLA2 mRNA表达明显升高(P<0.05);C组较B组,F组较E组单核细胞凋亡率及Lp-PLA2 mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-37对ox-LDL诱导的单核/巨噬细胞Lp-PLA2表达可能具有抑制作用。 展开更多
关键词 白细胞介素类 动脉粥样硬化 单核巨噬细胞系统 单核细胞 细胞凋亡
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类风湿关节炎单核巨噬细胞极化表型分析及临床意义 被引量：7
6
作者 黄自坤 李雪 罗清 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期605-609,共5页
目的探讨类风湿关节炎(RA)患者和骨关节炎(OA)患者的单核巨噬细胞极化表型以及临床意义,以阐明其在RA和OA发生和发展中的作用。方法应用流式细胞仪检测28例RA患者和20例OA外周血单核细胞表面以及28例RA患者和6例OA患者关节腔积液巨噬细... 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者和骨关节炎(OA)患者的单核巨噬细胞极化表型以及临床意义,以阐明其在RA和OA发生和发展中的作用。方法应用流式细胞仪检测28例RA患者和20例OA外周血单核细胞表面以及28例RA患者和6例OA患者关节腔积液巨噬细胞表面极化指标表达水平,比较RA组和OA组之间单核细胞表面以及RA组和OA组之间巨噬细胞表面极化指标表达水平,并分析RA患者关节腔积液巨噬细胞表面极化指标与实验室检查数据的相关性。两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析。结果 (1)RA组外周血单核细胞CD163、CD206、CD40、CD64和HLA-DR表达的平均荧光强度(MFI)显著高于OA组(P<0.05)。(2)RA组关节腔积液巨噬细胞CD206、CD40、CD86和HLA-DR表达的MFI显著高于RA组外周血单核细胞(P<0.05);RA组关节腔积液巨噬细胞CD206、CD40和CD64表达百分率显著高于外周血(P<0.05);RA患者组关节腔积液巨噬细胞CD163表达百分率低于外周血单核细胞(P<0.05)。(3)RA组关节腔积液巨噬细胞HLA-DR表达百分率显著高于OA组(P<0.05);RA组关节腔积液巨噬细胞CD163表达百分率低于OA组(P<0.05)。(4)RA患者关节腔积液巨噬细胞上CD163表达百分率与ACPA的含量呈正相关性(rs=0.428,P=0.042)。结论 RA患者外周血单核细胞极化指标表达异常,呈现M1和M2混合型;RA患者关节腔积液巨噬细胞极化指标表达异常,呈现为M1型,并且与自身抗体抗环瓜氨酸多肽抗体相关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 单核巨噬细胞 极化
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单核巨噬细胞对HSV－1的抵抗及LPS、BCG对其的影响 被引量：3
7
作者 季晓辉 姚堃 +1 位作者 李焕娣 周瑶玺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期155-158,共4页
以ＨＳＶ－１接种人单核细胞系Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞，通过病毒感染滴度测定，间接荧光抗体试验检测病毒抗原及多聚酶链反应检测病毒基因，在体外实验中研究了单核巨噬细胞对ＨＳＶ－１的抗性及其影响因素。结果证实，Ｕ９３７和... 以ＨＳＶ－１接种人单核细胞系Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞，通过病毒感染滴度测定，间接荧光抗体试验检测病毒抗原及多聚酶链反应检测病毒基因，在体外实验中研究了单核巨噬细胞对ＨＳＶ－１的抗性及其影响因素。结果证实，Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞均能逐步清除ＨＳＶ－１，从感染中恢复；１０～２０μｇ／ｍｌＬＰＳ处理细胞能削弱细胞的抗性、促进病毒基因表达，而５μｇ／ｍｌＢＣＧ能增强细胞的抗性、加速病毒的灭活和清除。 展开更多
关键词 单核巨噬细胞 单纯疱疹病毒 LPS BCG
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GITR/GITRL信号系统在单核巨噬细胞免疫调节中的作用 被引量：6
8
作者 魏思东 杨慷 龚建平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1207-1209,共3页
关键词 糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR) 单核巨噬细胞 免疫调节
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氧化型低密度脂蛋白对单核巨噬细胞株U937表达Siglec-1蛋白及分泌细胞因子的影响 被引量：2
9
作者 熊怡淞 吴韦霖 +3 位作者 张玲珍 周运恒 韩志君 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期33-36,共4页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的致动脉粥样硬化(AS)作用是否通过上调单核巨噬细胞表面Siglec-1的表达发挥作用。方法制备ox-LDL并用不同浓度刺激人巨噬细胞株U937,48h后收集细胞和培养上清液,分别用流式细胞仪和RT-PCR检测不同浓... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的致动脉粥样硬化(AS)作用是否通过上调单核巨噬细胞表面Siglec-1的表达发挥作用。方法制备ox-LDL并用不同浓度刺激人巨噬细胞株U937,48h后收集细胞和培养上清液,分别用流式细胞仪和RT-PCR检测不同浓度ox-LDL刺激后Siglec-1蛋白和Siglec-1mRNA的表达水平,并用ELISA试剂盒测定培养上清液中MIP-1α、MCP-1和IL-8的浓度。结果与对照组相比,ox-LDL能刺激U937细胞表面Siglec-1蛋白和Siglec-1mRNA表达升高(P<0.01),培养上清液中MIP-1α、MCP-1和IL-8的表达升高(P<0.01),并呈浓度依赖性。结论ox-LDL的致AS作用可能部分是通过上调单核巨噬细胞表面Siglec-1蛋白表达而活化巨噬细胞,分泌细胞因子和趋化因子诱导更多巨噬细胞和淋巴细胞的活化参与粥样斑块中的炎症反应。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 氧化型低密度脂蛋白 SIGLEC-1 细胞因子类 单核巨噬细胞
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PaCLR介导PaLECT2激活脂多糖刺激的香鱼(Plecoglossus altivelis)单核巨噬细胞功能 被引量：2
10
作者 史雨红 马海玲 +2 位作者 梁亚芳 陈航 陈炯 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期583-588,共6页
香鱼(Plecoglossus altivelis)白细胞衍生趋化因子2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2,PaLECT2)可以激活香鱼头肾来源的单核巨噬细胞(monocytes/macrophages,MO/MΦ),提高细菌感染后香鱼存活率。进一步研究显示,PaLECT2与香鱼C型凝... 香鱼(Plecoglossus altivelis)白细胞衍生趋化因子2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2,PaLECT2)可以激活香鱼头肾来源的单核巨噬细胞(monocytes/macrophages,MO/MΦ),提高细菌感染后香鱼存活率。进一步研究显示,PaLECT2与香鱼C型凝集素受体(C-type lectin receptor,PaCLR)相互作用可激活静息状态下香鱼MO/MΦ,增强其免疫活性。在前期基础上,本研究通过抗体封闭实验检测PaCLR是否介导PaLECT2激活LPS刺激的MO/MΦ功能。结果显示,重组PaLECT2成熟肽(rPaLECT2m)显著提高了LPS刺激的香鱼MO/MΦ细胞因子的表达,并增强了其吞噬能力和杀菌活性。封闭PaCLR显著抑制了rPaLECT2m激活LPS刺激的香鱼MO/MΦ细胞因子表达、吞噬和杀菌功能。因此,PaCLR介导PaLECT2可以激活病理状态香鱼MO/MΦ。这一认识进一步揭示了LECT2在病理状态的鱼类巨噬细胞调控和炎症反应中的作用及机制。 展开更多
关键词 LECT2 C型凝集素受体 单核巨噬细胞功能 脂多糖刺激
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肾小管间质纤维化与单核巨噬细胞的关系 被引量：7
11
作者 郭华 邹万忠 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期503-507,共5页
目的 :探讨肾小管间质纤维化与单核巨噬细胞 (MC/MP)的关系。方法 :结扎大鼠一侧肾静脉 ,连续饲养2 5d ,制作大鼠肾小管间质纤维化模型。每 5天杀检取材。HE、PAS、PASM、Masson等染色方法观察MC/MP的聚集和肾小管间质纤维化病变 ;免疫... 目的 :探讨肾小管间质纤维化与单核巨噬细胞 (MC/MP)的关系。方法 :结扎大鼠一侧肾静脉 ,连续饲养2 5d ,制作大鼠肾小管间质纤维化模型。每 5天杀检取材。HE、PAS、PASM、Masson等染色方法观察MC/MP的聚集和肾小管间质纤维化病变 ;免疫组化和双重免疫组化观察肾间质MC/MP的聚集与增生 ;原位杂交、免疫组化观察单核细胞化学吸引蛋白质 1(MCP 1)、巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)在肾内的表达分布。Westernblot检测病变肾脏MCP 1的表达。对不同时间点肾小管变性、肾小管间质纤维化程度、肾间质MC/MP聚集的数量及其中的增生比例、MCP 1和M CSF的表达进行评估分析。结果 :肾静脉结扎侧表现为肾小管变性萎缩、间质中MC/MP浸润、细胞外基质沉积等肾小管间质纤维化的典型病变。病变早期肾间质中有明显的MC/MP聚集 ,后期减少。表达增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)的单核细胞占一定比例 ,单核细胞的增生比例与聚集高度相关。原位杂交、免疫组化和Westernblot显示 ,病变肾组织中MCP 1、M CSFmRNA的表达主要位于变性的肾小管上皮细胞胞浆中 ,病变早期强 ,后期减弱。肾小管上皮细胞MCP 1和M CSF的表达与肾间质MC/MP的聚集高度相关。肾间质MC/MP的聚集与肾小管变性高度相关。结论 :肾小管间质? 展开更多
关键词 肾小管 间质纤维化 单核巨噬细胞 病理学
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一种简单的分离、培养及鉴定小鼠外周血单核巨噬细胞方法的建立 被引量：3
12
作者 杨琳 田蕾 +1 位作者 谢杰施 李丽英 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期610-613,共4页
目的在L929条件培养基的作用下体外分离、培养小鼠外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定。方法密度梯度离心法分离小鼠外周血单核巨噬细胞,用L929条件培养基培养7 d。采用免疫荧光的方法检测F4/80的表达以及细胞的吞噬作用,用流式细胞术进一... 目的在L929条件培养基的作用下体外分离、培养小鼠外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定。方法密度梯度离心法分离小鼠外周血单核巨噬细胞,用L929条件培养基培养7 d。采用免疫荧光的方法检测F4/80的表达以及细胞的吞噬作用,用流式细胞术进一步检测细胞吞噬率。结果用L929条件培养基诱导培养7 d后小鼠外周血单核细胞表达F4/80,加入细胞吞噬珠之后,在不同时间点用荧光显微镜可以看到红色荧光颗粒聚集在小鼠外周血单核巨噬细胞核周围,用流式细胞仪检测细胞的吞噬率为24.8%±0.79%。结论该方法是一种简单、易操作的体外分离培养和鉴定小鼠外周血单核巨噬细胞的方法。 展开更多
关键词 小鼠 外周血单核巨噬细胞 分离培养 鉴定
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hucMSCs源性外泌体对单核巨噬细胞生长及炎性因子IL-8、IL-12分泌水平的影响 被引量：2
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作者 丁娟 徐正阳 +3 位作者 柴烁 王珏 张强 李玉云 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期19-22,28,共5页
目的初步探讨人脐带间充质干细胞(hucMSCs)来源的外泌体(exosome)对单核巨噬细胞生长及炎性因子IL-8、IL-12分泌的影响。方法将hucMSCs来源的exosome与单核巨噬细胞(THP-1细胞株)共培养,利用MTT法和Annexin V-FIFC/PI双染法检测共培养后... 目的初步探讨人脐带间充质干细胞(hucMSCs)来源的外泌体(exosome)对单核巨噬细胞生长及炎性因子IL-8、IL-12分泌的影响。方法将hucMSCs来源的exosome与单核巨噬细胞(THP-1细胞株)共培养,利用MTT法和Annexin V-FIFC/PI双染法检测共培养后THP-1细胞的增殖及凋亡情况;PCR法和ELISA法分别检测THP-1细胞炎性因子IL-8、IL-12的mRNA及蛋白的表达情况。结果 MTT及流式细胞术检测结果显示hucMSCs来源的exosome对THP-1细胞具有促进增殖和抑制凋亡的作用,PCR及ELISA方法结果显示,exosome能够降低THP-1细胞IL-8、IL-12 mRNA及蛋白的表达水平。结论 hucMSCs源性exosome能够影响单核巨噬细胞的生长,并降低炎性因子IL-8、IL-12的分泌水平,而这可能是微环境中间充质干细胞调控单核巨噬细胞的机制之一。 展开更多
关键词 炎症微环境 单核巨噬细胞 人脐带间充质干细胞 外泌体
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水牛外周血单核巨噬细胞的培养与鉴定 被引量：2
14
作者 沈前程 林莹 +4 位作者 王树艳 张为宇 黄维义 郑威 王华俊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第8期31-35,共5页
本试验旨在为阐明水牛感染大片吸虫的免疫机理提供单核巨噬细胞材料。经过密度梯度离心分离,贴壁法培养水牛外周血单核巨噬细胞,以MTT法检测培养4、24、48、72、96、120、144、168、192h时贴壁单核巨噬细胞的相对存活数量,结果显示贴壁... 本试验旨在为阐明水牛感染大片吸虫的免疫机理提供单核巨噬细胞材料。经过密度梯度离心分离,贴壁法培养水牛外周血单核巨噬细胞,以MTT法检测培养4、24、48、72、96、120、144、168、192h时贴壁单核巨噬细胞的相对存活数量,结果显示贴壁细胞体外培养72、96、120h时,细胞数量相对稳定,组间差异不显著(P<0.05)。贴壁72h的细胞通过倒置显微镜、瑞氏染色观察,结果显示其具备单核巨噬细胞的典型形态特征;酸性磷酸酶、非特异性酯酶染色阳性率分别为(72.8±0.5)%和(84.6±0.4)%,显示其具备单核巨噬细胞酶化学特性;贴壁细胞表达单核巨噬细胞特异性表面抗原MHCⅡ;墨汁的吞噬率为(87.5±0.6)%,表明该细胞具有单核巨噬细胞的吞噬功能。结果表明贴壁法分离,5%BSA的DMEM培养水牛外周血单核巨噬细胞,培养72h贴壁细胞具备单核巨噬细胞特征,在细胞数量相对稳定期(72、96、120h)可以进行相应的试验研究。 展开更多
关键词 单核巨噬细胞 大片吸虫 水牛 细胞培养 鉴定
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静脉免疫球蛋白对新生儿脐带血单核巨噬细胞吞噬功能的影响 被引量：2
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作者 王美红 陈同辛 +1 位作者 朱亚忠 李庆生 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期630-633,共4页
目的通过研究静脉免疫球蛋白(IVIG)对脐带血单核巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨IVIG对新生儿的免疫抑制作用。方法将分离培养后新生儿脐带血和成人外周血单核巨噬细胞与异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC_dextran)孵育,利用流式细胞技术检... 目的通过研究静脉免疫球蛋白(IVIG)对脐带血单核巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨IVIG对新生儿的免疫抑制作用。方法将分离培养后新生儿脐带血和成人外周血单核巨噬细胞与异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC_dextran)孵育,利用流式细胞技术检测单核巨噬细胞的FITC_dextran阳性细胞比率和相对荧光密度。结果加入IVIG处理培养的新生儿脐带血和成人外周血单核巨噬细胞的FITC_dextran阳性细胞比率和相对荧光密度均明显降低,但是新生儿脐带血降低更明显。结论IVIG可以明显抑制脐带血单核巨噬细胞的吞噬功能,此种抑制作用可能与IVIG抑制脐带血单核巨噬细胞表面的某些受体有关。 展开更多
关键词 新生儿 静脉免疫球蛋白 单核巨噬细胞 吞噬功能
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脂氧素抑制脂多糖诱导的单核巨噬细胞向树突状样细胞分化 被引量：1
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作者 张力 叶笃筠 +3 位作者 吴萍 金胜威 袁萍 周晓燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1663-1663,共1页
目的:脂氧素是天然免疫/炎症反应中的重要"刹车信号",具有促进炎症及时缓解的独特功能;但其对特异性免疫应答有何调节作用尚缺乏直接证据,为此,本研究观察了脂氧素对脂多糖诱导的单核巨噬细胞向树突状样细胞分化过程的影响.
关键词 单核巨噬细胞 脂多糖诱导 细胞分化 脂氧素 树突状 RAW264.7细胞 Giemsa染色 特异性免疫应答 表面共刺激分子
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二氧化钛纳米颗粒对小鼠单核巨噬细胞超微结构影响的电镜研究 被引量：1
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作者 汤莹 于洋 +4 位作者 雷长海 范晓燕 羊富光 许珊 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期539-542,共4页
目的:应用电镜观察二氧化钛纳米颗粒(nano-TiO2)对小鼠单核巨噬细胞超微结构的影响。方法:将不同浓度的nano-TiO2溶液加入小鼠单核巨噬细胞(Rawcell)中,在37℃、5%CO2的细胞培养箱中孵育4h,收集细胞,制样后在透射电镜下观察小鼠单核巨... 目的:应用电镜观察二氧化钛纳米颗粒(nano-TiO2)对小鼠单核巨噬细胞超微结构的影响。方法:将不同浓度的nano-TiO2溶液加入小鼠单核巨噬细胞(Rawcell)中,在37℃、5%CO2的细胞培养箱中孵育4h,收集细胞,制样后在透射电镜下观察小鼠单核巨噬细胞超微结构的改变。结果:电镜下,nano-TiO2的粒径为20～35nm。致密的nano-TiO2通过内吞进入细胞,当浓度超过200μg/mL时,细胞胞质空泡内吞噬有大量成簇的致密颗粒,细胞核固缩,染色质浓缩、边集,出现早期细胞凋亡改变。 展开更多
关键词 二氧化钛纳米颗粒(nano-TiO2) 小鼠单核巨噬细胞 电镜 超微结构 细胞凋亡
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表达Tie2单核巨噬细胞在肿瘤进展中的作用 被引量：2
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作者 吴丽 汪希鹏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期426-429,共4页
骨髓来源的髓系细胞在肿瘤的转移及血管生成的过程中发挥重要作用,其中一类表达Tie2的单核/巨噬细胞（Tie2＋monocyte/macrophage,TEM）是最近被发现,并引起关注的髓系细胞。在小鼠、人外周血和多个实体肿瘤组织等部位发现了TEMs的存在... 骨髓来源的髓系细胞在肿瘤的转移及血管生成的过程中发挥重要作用,其中一类表达Tie2的单核/巨噬细胞（Tie2＋monocyte/macrophage,TEM）是最近被发现,并引起关注的髓系细胞。在小鼠、人外周血和多个实体肿瘤组织等部位发现了TEMs的存在依据,并且通过与血管内皮细胞的相互作用,参与调节肿瘤微环境中血管的生成。 展开更多
关键词 肿瘤组织 TIE2 单核巨噬细胞 单核 巨噬细胞 血管内皮细胞 血管生成 髓系细胞 肿瘤微环境
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MACS法分选早孕期外周血和蜕膜组织单核巨噬细胞 被引量：1
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作者 肖云山 孙丽洲 林其德 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期547-550,共4页
目的:探寻有效,简捷的分选出纯度较高,生物活性保存良好的外周血和蜕膜组织单核巨噬细胞,用以研究妊娠早期单核巨噬细胞功能特征及其调控因素。方法:比较运用MACS法和传统方法分离、纯化妊娠早期外周血和蜕膜组织单核巨噬细胞的效果。结... 目的:探寻有效,简捷的分选出纯度较高,生物活性保存良好的外周血和蜕膜组织单核巨噬细胞,用以研究妊娠早期单核巨噬细胞功能特征及其调控因素。方法:比较运用MACS法和传统方法分离、纯化妊娠早期外周血和蜕膜组织单核巨噬细胞的效果。结果:经台盼兰染液检测细胞活性,传统贴壁法获得的单核细胞活性率为(92.50±0.57)%,MACS法获得的单核细胞活性率为(92.70±0.62)%,两者没有显著差异。传统贴壁法获得的巨噬细胞活性率为(82.40±0.64)%,MACS法获得的巨噬细胞活性率为(82.60±0.61)%,两者没有显著差异。经流式细胞仪检测细胞纯度,贴壁法获得的单核细胞纯度为(85.83±1.50)%,显著低于MACS法获得的单核细胞纯度(91.89±1.37)%。贴壁法获得的巨噬细胞纯度为(35.25±1.38)%,显著低于MACS法获得的巨噬细胞纯度(76.40±2.02)%(P<0.05)。结论:MACS方法分选得到的妊娠早期外周血单核细胞和蜕膜组织巨噬细胞纯度高,生物活性保存良好。MACS方法是一种有效,简捷的分离、纯化单核巨噬细胞的方法,运用此方法,有益于更确切的描述妊娠早期参与母胎界面免疫调控的职能细胞的作用及其调节方式。 展开更多
关键词 单核巨噬细胞 早孕 磁珠细胞分选
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肺炎衣原体对颈动脉粥样硬化斑块患者单核巨噬细胞脂质代谢的影响 被引量：1
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作者 曾庆娣 林爱翠 《海南医学院学报》 CAS 2017年第6期746-748,共3页
目的:研究肺炎衣原体对颈动脉粥样硬化斑块患者单核巨噬细胞脂质代谢的影响。方法:选择我院收治的90例颈动脉硬化患者为观察组,选择同期在我院进行健康体检的72例老年人群为对照组。对两组斑块形成的情况进行观察比较。对其进行胆固醇(... 目的:研究肺炎衣原体对颈动脉粥样硬化斑块患者单核巨噬细胞脂质代谢的影响。方法:选择我院收治的90例颈动脉硬化患者为观察组,选择同期在我院进行健康体检的72例老年人群为对照组。对两组斑块形成的情况进行观察比较。对其进行胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、和高密度脂蛋白(HDL-C)的测定。采取ELISA方法检测CP特异性IgG。对两组胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)、和高密度脂蛋白(HDL-C)血脂进行比较观察,并比较两组的CP IgG阳性率。结果:观察组的多发斑块、软斑以及混合斑明显多余对照组(P<0.05)。但是两组之间的硬斑没有显著性差异(P>0.05)。观察组的TC,LDL-C明显高于对照组,HDL-C明显低于对照组(P<0.05)。观察组CP IgG阳性率显著高于对照组(P<0.05)。结论:肺炎衣原体对颈动脉粥样硬化斑块患者单核巨噬细胞脂质代谢起着重要的影响作用。 展开更多
关键词 肺炎衣原体 颈动脉粥样硬化 单核巨噬细胞
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