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非洲猪瘟病毒pE120R蛋白单克隆抗体的制备
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作者 刘传霞 王晓 +5 位作者 李雪雯 鲍苗菲 李婷婷 陈欣 翁长江 郑君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期388-394,共7页
本研究旨在表达非洲猪瘟病毒(ASFV)衣壳蛋白pE120R,并制备单克隆抗体,为其功能研究提供材料。以pCAGGS-Flag-pE120R为模板扩增pE120R基因片段,构建原核表达质粒pGEX-6p1-pE120R。将其转化BL21(DE3)感受态细胞后经IPTG诱导表达为可溶性pE... 本研究旨在表达非洲猪瘟病毒(ASFV)衣壳蛋白pE120R,并制备单克隆抗体,为其功能研究提供材料。以pCAGGS-Flag-pE120R为模板扩增pE120R基因片段,构建原核表达质粒pGEX-6p1-pE120R。将其转化BL21(DE3)感受态细胞后经IPTG诱导表达为可溶性pE120R蛋白,采用GST Beads纯化pE120R蛋白,免疫BALB/c小鼠,然后取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,采用间接ELISA方法筛选获得了1株能够稳定分泌pE120R单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果表明,成功构建了原核表达质粒pGEX-6p1-pE120R,并获得较高纯度的pE120R蛋白。Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验结果显示,pE120R单抗能特异性识别HEK293T细胞转染质粒表达的Flag-pE120R蛋白和肺泡巨噬细胞(PAMs)感染ASFV后表达的pE120R蛋白。该单抗的结合位点在30~60aa区域,并且该单抗亚类鉴定重链为IgG2a。本研究成功表达并纯化了可溶性的pE120R蛋白;制备了抗pE120R的单抗隆抗体,该抗体具有良好的特异性,为深入探讨ASFV pE120R蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 pE120R蛋白 原核表达 单抗隆抗体
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氟罗沙星单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 刘艳霞 谭建华 《中国兽药杂志》 2010年第10期29-33,共5页
采用碳二亚胺(EDC)法将氟罗沙星(FLE)与载体蛋白BSA、OVA分别偶联合成人工抗原BSA-FLE、OVA-FLE,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法和紫外分析法对合成的人工抗原进行了鉴定。BSA-FLE用作免疫抗原免疫Balb/C小鼠,OVA-FLE用作检测抗原包被酶标板... 采用碳二亚胺(EDC)法将氟罗沙星(FLE)与载体蛋白BSA、OVA分别偶联合成人工抗原BSA-FLE、OVA-FLE,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法和紫外分析法对合成的人工抗原进行了鉴定。BSA-FLE用作免疫抗原免疫Balb/C小鼠,OVA-FLE用作检测抗原包被酶标板检测抗体效价。免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合获得了5株(4F11、2C3、8G2、3C1、2G8)稳定分泌抗FLE抗体的杂交瘤细胞株,抗体亚型鉴定均为IgG1。将3C1接种小鼠制备腹水,用辛酸-硫酸铵法对腹水进行纯化,纯化后腹水效价1∶1 024 000。抗体分子量160.766 KD,亲和常数为8.57×108M-1。 展开更多
关键词 氟罗沙星 单抗隆抗体
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氨甲喋呤-人血清白蛋白-单抗79结合物的制备及其体外细胞毒作用 被引量:2
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作者 刘晓坤 殷惠君 沈倍奋 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第5期602-607,共6页
本研究采用间接连接法,应用异型双功能连接剂SPDP,形成以酰胺键和二硫键连接的氮甲喋吟-人血清白蛋白-单抗79(MTX-HSA-McAb79)结合物。其中McAb79与HSA克分子比有效地控制在1:1~2,且结合物的纯度及产率均较高,有一定的制备价值。 对靶... 本研究采用间接连接法,应用异型双功能连接剂SPDP,形成以酰胺键和二硫键连接的氮甲喋吟-人血清白蛋白-单抗79(MTX-HSA-McAb79)结合物。其中McAb79与HSA克分子比有效地控制在1:1~2,且结合物的纯度及产率均较高,有一定的制备价值。 对靶细胞Nalm-6的体外细胞毒试验结果表明:MTX-HSA-McAb 79的杀伤活性显著强于MTX-HSA-nIgG,但较游离MTX的杀伤活性为弱。且MTX-HSA-McAb 79的杀伤作用依赖于McAb 79与靶抗原CALLA的抗原抗体反应。 展开更多
关键词 单克抗体 血清白蛋白 单抗隆抗体
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Avastin在眼科的应用研究进展 被引量:9
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作者 冯斐 赵培泉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第3期231-233,共3页
抗癌新药Bevacizumab(商品名Avastin)是一种重组人类单克隆抗体,2004年2月26日获美国食品和药品管理局批准上市,用于一线治疗晚期结直肠癌。近年来Avastin在临床治疗年龄相关性黄斑变性、黄斑囊样水肿以及糖尿病视网膜病变等新生血管性... 抗癌新药Bevacizumab(商品名Avastin)是一种重组人类单克隆抗体,2004年2月26日获美国食品和药品管理局批准上市,用于一线治疗晚期结直肠癌。近年来Avastin在临床治疗年龄相关性黄斑变性、黄斑囊样水肿以及糖尿病视网膜病变等新生血管性眼病方面效果明显,但还需大样本的进一步临床治疗研究。本文就Avastin在眼科的应用研究进展作一综述。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 单抗隆抗体 AVASTIN
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