鲨鱼单域抗体融合蛋白的克隆表达、稳定性及检测性能研究

1

作者 贾成雨 刘畅 +3 位作者 林洪 曹立民 王凯强 隋建新 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第3期117-124,共8页

目的探究鲨鱼单域抗体融合蛋白的克隆表达及其性能。方法通过大肠杆菌表达系统高效表达鲨鱼单域抗体融合蛋白2E6-SUMO;以传统的免疫球蛋白G(immolunoglobulin G,IgG)抗体为对照,对其热稳定性及酸碱稳定性进行研究;并以2E6-SUMO为识别元... 目的探究鲨鱼单域抗体融合蛋白的克隆表达及其性能。方法通过大肠杆菌表达系统高效表达鲨鱼单域抗体融合蛋白2E6-SUMO;以传统的免疫球蛋白G(immolunoglobulin G,IgG)抗体为对照,对其热稳定性及酸碱稳定性进行研究;并以2E6-SUMO为识别元件,建立间接竞争酶联免疫吸附法,并应用于水产品中恩诺沙星残留的检测。结果2E6-SUMO的可溶性表达量为1.67mg/L,与传统的IgG抗体相比,2E6-SUMO具有更好的热稳定性和酸碱稳定性;建立了基于2E6-SUMO检测恩诺沙星的间接竞争酶联免疫吸附法,半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为42.08ng/mL,检出限为3.84ng/mL,线性范围为9.94~376.17 ng/mL;鱼肉基质对2E6-SUMO没有显著干扰,加标样品的回收率在83.33%~123.06%之间。结论鲨鱼单域抗体融合蛋白实现了高效表达,表现出更好的稳定性,可作为一种新型特异性免疫元件用于水产品中药物残留的免疫检测。本研究为鲨鱼单域抗体融合蛋白的应用提供了参考。 展开更多

关键词 单域抗体 恩诺沙星 稳定性 酶联免疫吸附法 水产品

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基于单域专网的5G智能安全帽及管理平台的应用

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作者 余杰 《广播电视网络》 2024年第8期93-95,共3页

本文主要研究了单域专网在5G智能安全帽中的应用,介绍了5G专网的关键技术和组网架构,对专网设备UPF的放置位置做了比较,并且从工程实施角度阐述了5G智能安全帽的专网建设方案及管理平台的搭建,实现了5G智能安全帽数据都在专网传输,不接... 本文主要研究了单域专网在5G智能安全帽中的应用,介绍了5G专网的关键技术和组网架构,对专网设备UPF的放置位置做了比较,并且从工程实施角度阐述了5G智能安全帽的专网建设方案及管理平台的搭建,实现了5G智能安全帽数据都在专网传输,不接入互联网的目标。 展开更多

关键词 单域专网 智能安全帽 管理平台

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抗AFB_1单域重链抗体文库淘选方法的研究 被引量：9

3

作者 刘夏 许杨 +1 位作者 涂追 何庆华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期950-955,共6页

比较两种从噬菌体展示文库中淘选抗黄曲霉毒素B1单域重链抗体的方法,并为淘选针对小分子物质的单域重链抗体提供参考。采用固相淘选技术,以黄曲霉毒素B1人工抗原为靶分子,淘选天然单域重链抗体库,分别采用Gly-HCl法和AFB1竞争法洗脱结... 比较两种从噬菌体展示文库中淘选抗黄曲霉毒素B1单域重链抗体的方法,并为淘选针对小分子物质的单域重链抗体提供参考。采用固相淘选技术,以黄曲霉毒素B1人工抗原为靶分子,淘选天然单域重链抗体库,分别采用Gly-HCl法和AFB1竞争法洗脱结合噬菌体,对洗脱物进行滴度测定,以回收率和富集度为指标,对两种洗脱方法进行比较。采用phage-ELISA法鉴定噬菌体克隆,并对阳性克隆进行交叉反应分析以及序列测定。滴度测定结果显示,Gly-HCl法回收率比竞争法高5～10倍。分别随机挑取20个单克隆进行phage-ELISA鉴定,其中,Gly-HCl洗脱法未获得阳性克隆,AFB1竞争洗脱法得到8个阳性克隆。序列测定结果显示,这8个克隆均编码单域重链抗体。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 单域重链抗体 噬菌体展示 天然文库

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对一个CDR区发生突变的改形抗CD28重链单域抗体的研究 被引量：4

4

作者 程巨龙 王祥斌 +5 位作者 刘晶 顾莹 张众 方敏 姚新生 黄华梁 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第4期11-15,共5页

在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较... 在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较发现 ,该改形抗体在CDR2区 53位缺失Ala氨基酸残基 ;而在 65a位上插入一个Arg氨基酸残基。在CDR3区缺少Asp95,Lys96,Gly97,Tyr98氨基酸残基。在FR3区缺少Lys82a ,Ser82b ,Leu82c氨基酸残基。由于该序列发生的突变较大 ,作者进一步对其进行了研究。该改形抗CD2 8VH 单域抗体基因与人c myc及人IgG3’CL绞链区基因在大肠杆菌中融合表达。融合表达包涵体经复性 ,纯化处理后 ,仍具有较高与人CD2 8分子结合活性。 展开更多

关键词 CD28 改形抗体 单域抗体 突变体 免疫学活性 基因工程 基因疗法 T细胞

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半巢式PCR法构建天然噬菌体单域重链抗体文库 被引量：3

5

作者 涂追 许杨 +1 位作者 何庆华 陶勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第19期299-303,共5页

目的:构建天然噬菌体单域重链抗体文库,淘选可应用于食品安全检测的单域重链抗体。方法:以未经免疫的健康羊驼(Lama pacos)外周血为起始材料,提取RNA反转录为cDNA,根据重链抗体保守序列设计引物,通过半巢式PCR法扩增获得全套重链抗体可... 目的:构建天然噬菌体单域重链抗体文库,淘选可应用于食品安全检测的单域重链抗体。方法:以未经免疫的健康羊驼(Lama pacos)外周血为起始材料,提取RNA反转录为cDNA,根据重链抗体保守序列设计引物,通过半巢式PCR法扩增获得全套重链抗体可变区编码基因,将其克隆至噬菌粒pHEN1,电转化大肠杆菌TG1得到初级抗体库,辅助噬菌体KM13感染后得到噬菌体展示库。采用固相淘选法分别对3种人工抗原进行淘选。结果:单域重链抗体编码基因得到有效扩增,经10次电转化获得初级文库,命名为SNAL,实际库容量达到1.6×107个独立克隆,菌落PCR鉴定结果表明,克隆效率约为87%,辅助噬菌体救援后得到的展示文库命名为SNA-PDL,滴度达1013CFU/mL。对3种不同人工抗原DON-MBSA、NOR-BSA和AFB1-OVA的淘选均有富集现象。结论:构建了天然噬菌体单域重链抗体文库,文库的多样性较好,可以用于后续淘选。 展开更多

关键词 单域重链抗体 VHH抗体 噬菌体文库 羊驼 半抗原

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抗人γ-精浆蛋白V_H单域抗体基因的构建、表达及空间构象分析 被引量：4

6

作者 袁建林 王智 +3 位作者 武国军 王禾 王栋 郝晓柯 《西安医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期197-200,共4页

目的　扩增出抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)单克隆抗体 (mAb)的重链可变区 (VH)单域抗体基因 ,并进行原核表达及空间构象分析。方法　从分泌抗γ SmmAb的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA ,经RT PCR扩增VH 单域抗体基因 ,将其克隆到融合蛋白表达... 目的　扩增出抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)单克隆抗体 (mAb)的重链可变区 (VH)单域抗体基因 ,并进行原核表达及空间构象分析。方法　从分泌抗γ SmmAb的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA ,经RT PCR扩增VH 单域抗体基因 ,将其克隆到融合蛋白表达载体 pGEX 4T 1中进行表达 ,并利用计算机软件对表达产物进行空间构象分析。结果　VH 单域抗体基因全长 363bp ,含起始码和终止码。将其克隆到 pGEX 4T 1内 ,转化大肠杆菌DH5α ,获得高效表达 ,表达量占全菌总蛋白质的 38% ,以包涵体形式存在。经初步纯化和复性后 ,用谷胱甘肽 (GST)亲和色谱纯化 ,再经凝血酶水解获得抗γ SmVH 单域抗体。竞争结合抑制实验证明 ,该表达产物具有前列腺癌细胞亲和活性。空间构象分析结果显示 ,该抗体具有完整的抗原结合位点。结论　构建成功抗γ Sm的VH 单域抗体 ,为进一步临床应用奠定基础。 展开更多

关键词 人γ-精浆蛋白 单域抗体 克隆 表达 前列腺癌

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抗人γ-精浆蛋白V_H单域抗体/人p53四价功能域融合基因的构建及空间构象分析 被引量：2

7

作者 武国军 王智 +3 位作者 王栋 袁建林 王禾 郝晓柯 《西安医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第6期505-509,共5页

目的　构建抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)重链可变区 (VH)单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因 ,并进行空间构象分析。方法　选用人IgG3上游铰链区作为抗体和人p5 3四价功能域之间连接的linker。利用回归PCR法扩增人IgG3上游铰链区与人p5 3... 目的　构建抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)重链可变区 (VH)单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因 ,并进行空间构象分析。方法　选用人IgG3上游铰链区作为抗体和人p5 3四价功能域之间连接的linker。利用回归PCR法扩增人IgG3上游铰链区与人p5 3四价功能域融合基因 ,并在融合基因 5’端和 3’端引入SalⅠ与HindⅢ酶切位点 ,将融合基因克隆入 pUC1 9载体中构建pUC1 9/IgG3 /p5 3克隆载体。将抗人γ SmVH 单域抗体克隆入 pUC1 9/IgG3 /p5 3载体中 ,构建抗人γ SmVH 单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因。经酶切鉴定及序列测定证实后 ,利用计算机软件进行空间构象分析。结果　获得了抗人γ SmVH 单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因 ,基因全长 5 2 8bp ,可编码 1 76个氨基酸 ,与已发表的抗人γ SmVH 单域抗体、人IgG3上游铰链区和人p5 3四价功能域基因cDNA序列一致。计算机软件分析结果显示 ,融合基因表达产物可自动装配成四聚体抗体 ,并具有四条长的、柔性好的多肽 ,可确保每个抗体空间构象的独立性。结论　构建成功四价抗人γ SmVH 单域抗体 ,为进一步临床应用奠定基础。 展开更多

关键词 人γ-精浆蛋白 单域抗体 p53四价功能域 融合基因

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单域抗体在有害小分子检测领域的研究进展 被引量：2

8

作者 刘明刚 杨慧娟 +4 位作者 白宇琛 窦磊娜 于雪芝 王战辉 沈建忠 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第19期7804-7812,共9页

单域抗体(single-domain antibody,sdAb)是指由抗体或新抗原受体单一可变结构域构成的具有抗原结合活性的基因工程抗体。近年来,药物、毒素、污染物等小分子物质残留引发的食品安全、环境安全事件层出不穷,引发广泛的社会关注。单域抗... 单域抗体(single-domain antibody,sdAb)是指由抗体或新抗原受体单一可变结构域构成的具有抗原结合活性的基因工程抗体。近年来,药物、毒素、污染物等小分子物质残留引发的食品安全、环境安全事件层出不穷,引发广泛的社会关注。单域抗体的研究为食品中的小分子有害化合物免疫分析开辟了一个崭新而有前景的领域。sdAb与传统的兔多克隆抗体、鼠单克隆抗体相比,具有分子量小、稳定性强、易表达、易体外进化等诸多优点。因此,国内外学者对sdAb在生物医学和靶标检测等领域的研究不断深入,其应用也逐渐增多。本文主要综述了小分子(分子量<1000 Da)靶标sdAb的结构特征、主要特性、识别机制以及抗体开发,分析了 sdAb在食品小分子有害化合物快速检测领域的应用潜力,以期为克服传统抗体改造困难、稳定性差等问题提供新的抗体制备策略和参考。 展开更多

关键词 单域抗体 纳米抗体 小分子 免疫分析

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穿膜肽与抗猪流行性腹泻病毒膜蛋白单域抗体融合表达和入胞活性分析 被引量：2

9

作者 李丽 张辛铭 +3 位作者 尹双辉 张涛涛 杨顺利 薛慧文 《动物医学进展》 北大核心 2021年第6期8-13,共6页

为获得能自主进入细胞的单域抗体(sdAb),将抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)膜蛋白(M)的sdAb与一种细胞穿膜肽(TAT)融合表达,并纯化重组TAT-sdAb蛋白。用ELISA方法检测TAT-sdAb与M蛋白的结合活性,免疫荧光试验验证其穿Vero细胞膜活性、最适作... 为获得能自主进入细胞的单域抗体(sdAb),将抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)膜蛋白(M)的sdAb与一种细胞穿膜肽(TAT)融合表达,并纯化重组TAT-sdAb蛋白。用ELISA方法检测TAT-sdAb与M蛋白的结合活性,免疫荧光试验验证其穿Vero细胞膜活性、最适作用时间和剂量,并将TAT-sdAb与胞内PEDV进行共定位研究。结果证实,sdAb与TAT融合表达不影响其与M蛋白的结合活性,在使用剂量为50μg/mL、作用3 h时,能明显观察到其进入Vero细胞,并与胞内的PEDV呈现共定位分布。结果表明,融合TAT的sdAb具有抗原结合活性和穿膜活性,为基于单域抗体的药物研发提供了理论基础,为PEDV感染细胞的动态过程研究提供了可靠工具。 展开更多

关键词 细胞穿膜肽 流行性腹泻病毒 膜蛋白 单域抗体

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条纹斑竹鲨的抗乙肝表面抗原的单域抗体筛选与重组抗体活性探究 被引量：2

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作者 王婵 钟波 +2 位作者 吕正兵 王磊 陈剑清 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2022年第1期115-122,共8页

对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达... 对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达以及纯化重组单域抗体,通过ELISA和细胞水平检测重组单域抗体的活性。结果表明:通过生物信息学分析筛选出2条特异性序列,在16℃、0.5 mmol/L诱导剂条件下可获得2 mg/mL以上的重组蛋白;ELISA检测显示均与HBsAg具有较好的结合力,细胞水平活性分析得到Anti-HBsAg-S1具有较好的病毒抑制效果和生物学活性。该研究结果为其他抗原的特异性抗体筛选提供理论参考。 展开更多

关键词 单域抗体 条纹斑竹鲨 乙肝表面抗原 新抗原受体可变区 重组表达

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白鲢肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶单域抗体文本库构建及淘选 被引量：1

11

作者 周文锦 屈跃宽 +2 位作者 张 林洪 隋建新 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期87-94,共8页

鱼肉中的肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)在加工过程中可降解肌原纤维,引起鱼糜制品的凝胶劣化。一种新型特异性高的鲨源抗体——单域抗体(single-domain antib odies,sdAbs),能直接与抗原结合并... 鱼肉中的肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)在加工过程中可降解肌原纤维,引起鱼糜制品的凝胶劣化。一种新型特异性高的鲨源抗体——单域抗体(single-domain antib odies,sdAbs),能直接与抗原结合并抑制酶的活性。研究主要完成了针对MBSP单域抗体制备的前期工作:文本库建立及淘选过程,以克隆表达的MBSP为抗原免疫铰口鲨鱼(nurse shark,Ginglymostoma cirratum),构建鲨鱼单域抗体文本库,并从中淘选针对MBSP的特异性单域抗体噬菌粒,最终得到31个能与MBSP特异性结合的噬菌粒,为获得抗MBSP单域抗体鉴定了基础,以期抑制或消除MBSP的活性,解决现有鱼糜制品凝胶劣化的问题。 展开更多

关键词 肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶 铰口鲨 单域抗体 噬菌体展示技术

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基于共享模型的工作流表单系统设计 被引量：16

12

作者 唐文忠 莫伟栋 《北京航空航天大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期391-395,共5页

表单是应用系统中信息传递的主要载体.分别分析了表单系统和工作流系统的运行过程,分析了传统表单工作流系统中表单与工作流的结合方式,研究了基于建模的方式对表单模型和工作流模型进行定义,并在建模过程中对二者进行结合,同时采用分... 表单是应用系统中信息传递的主要载体.分别分析了表单系统和工作流系统的运行过程,分析了传统表单工作流系统中表单与工作流的结合方式,研究了基于建模的方式对表单模型和工作流模型进行定义,并在建模过程中对二者进行结合,同时采用分域的方式对工作流表单进行划分并在同一流程模型中共享同一表单,并提出了一种基于共享模型的工作流表单系统的开发方法,该方法采用表单引擎和工作流引擎技术,分离表单数据和工作流数据的处理,按表单模型和流程模型的结合点定义使工作流引擎处理表单数据,对该方法的过程和特点也进行了详细的介绍. 展开更多

关键词 模型 工作流 表单 表单域

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区域分割包分类算法的优化实现 被引量：6

13

作者 颜天信 王永纲 +1 位作者 石江涛 戴雪龙 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2004年第6期80-88,共9页

包分类就是根据到达数据包的包头信息将包按一定规则进行分类的过程,包分类技术是下一代路由器、防火墙、QoS保证机制实现、网络信息检测等设备的关键技术.区域分割包分类算法是目前多种分类算法中较为有效的算法之一.根据给定分类规则... 包分类就是根据到达数据包的包头信息将包按一定规则进行分类的过程,包分类技术是下一代路由器、防火墙、QoS保证机制实现、网络信息检测等设备的关键技术.区域分割包分类算法是目前多种分类算法中较为有效的算法之一.根据给定分类规则集的特点对算法进行优化实现是区域分割包分类算法的核心研究内容,它包括高效率的区域优化分割准则和在分割后小区域内的单域化线性查找两部分.优化实现不仅保证算法具有良好的时间和空间性能,而且极大地降低了规则数增加对算泫性能的影响.仿真实验结果表明区域分割包分类算法在一定规则数范围内每秒能处理3～6M个IP包头,具有O(d)的时间复杂度(d为域的个数)和O(dN)的空间复杂度(N为规则数).区域分割包分类算法支持规则集的实时更新. 展开更多

关键词 通信技术 包分类 域分割 单域化线性查找 计算机仿真

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利用JSP实现基于Jswdk+Oracle的WEB数据库的访问 被引量：2

14

作者 石振国 《南通职业大学学报》 2000年第4期1-6,共6页

本文给出了JSP在Jswdk服务器下运行环境的构建过程和方法 ;并以一般表单域对象构成的JSP页面操作Oracle数据库为例 ,详细叙述了用JSP加SQL语句对数据库记录的“增加” ,”替换“ ,“删除”的操作过程 ;本文用JSP实现对web数据库访问的... 本文给出了JSP在Jswdk服务器下运行环境的构建过程和方法 ;并以一般表单域对象构成的JSP页面操作Oracle数据库为例 ,详细叙述了用JSP加SQL语句对数据库记录的“增加” ,”替换“ ,“删除”的操作过程 ;本文用JSP实现对web数据库访问的设计步骤方法同样适用于其他数据库。 展开更多

关键词 JSP Jswdk服务器 WEB数据库 访问 表单域对象 SQL

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比喻手法在公益广告设计中的应用

15

作者 焦萍 《艺海》 2017年第9期100-102,共3页

通过比喻手法可以使深奥的、抽象的、需具备较高的文化水平才能理解的内容变得通俗易懂,使消费者更容易理解和接受,运用在公益广告中,可以使广告内容变得更加生动,增强作品的表现力,加强宣传力度。

关键词 比喻手法 公益广告设计 单域图像呈现式 双域图像呈现式

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新疆双峰驼纳米抗体噬菌体展示文库多样性的生物信息学分析

16

作者 冯亚宁 姜志强 +1 位作者 马晓玲 李江伟 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1533-1538,共6页

【目的】骆驼免疫系统中只存在重链抗体,其可变区VHH片段是最小的天然抗体片段。通过对双峰驼VHH基因进行序列分析,了解双峰驼VHH基因特征,分析VHH文库多样性组成。【方法】采用新疆双峰驼VHH特异引物扩增全部抗体基因片段,连接到M13噬... 【目的】骆驼免疫系统中只存在重链抗体,其可变区VHH片段是最小的天然抗体片段。通过对双峰驼VHH基因进行序列分析,了解双峰驼VHH基因特征,分析VHH文库多样性组成。【方法】采用新疆双峰驼VHH特异引物扩增全部抗体基因片段,连接到M13噬菌粒载体上,与p III蛋白融合表达在噬菌体表面,构建噬菌体展示文库。基因测序和菌落PCR方法,分析文库大小和阳性克隆插入率。NCBI-Ig GBLAST工具对抗体序列进行IMGT编号命名,Web Logo工具分析抗体保守序列分布频率,MEGA6软件对VHH序列进行同源性比对和系统进化树构建。【结果】利用免疫的新疆双峰驼淋巴细胞,构建了库容量为1.4×109的VHH抗体噬菌体展示文库。对91个随机挑选的文库TG1单菌落进行PCR。结果表明该文库VHH阳性插入率为97%,DNA测序表明文库多样性为97.8%。对91个克隆DNA测序结果进一步分析表明,这些基因中除2个为常规VH抗体外,其余均为重链VHH抗体。根据抗体序列中的特征氨基酸分布,将91个抗体序列划分为7个亚群。【结论】构建的新疆双峰驼VHH文库多样性较好,生物信息学分析揭示出文库中多样性克隆的分布和特征,有助于新疆双峰驼纳米抗体噬菌体展示文库的进一步构建。 展开更多

关键词 双峰驼 单域抗体 噬菌体展示文库 VHH序列 生物信息学分析

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基于AI能力的智能运维建设实践 被引量：1

17

作者 李红霞 杨洁艳 肖琦 《邮电设计技术》 2023年第7期81-86,共6页

为减轻一线维护工作量,引入了数字化和AI手段提升网络运营效率。基于故障树和AI能力,打造关键智能运维能力,从而解决各运维生产系统不具备故障自动定位和自动愈合的能力、跨专业故障定位难、排障周期长的问题。实施从基础的规则梳理,到... 为减轻一线维护工作量,引入了数字化和AI手段提升网络运营效率。基于故障树和AI能力,打造关键智能运维能力,从而解决各运维生产系统不具备故障自动定位和自动愈合的能力、跨专业故障定位难、排障周期长的问题。实施从基础的规则梳理,到告警和资源的采集,再到指令平台的搭建,经过跨域和单域全场景的调试,最终构建起的关键能力全部投入生产应用并取得显著效果。 展开更多

关键词 跨域故障定界 单域自动诊断 自愈

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纳米抗体筛选和表达技术研究进展 被引量：7

18

作者 朱光 王译晨 +2 位作者 宋莎莎 张麦收 王加才 《中国动物检疫》 CAS 2021年第7期79-87,共9页

纳米抗体(nanobody,Nb)是在骆驼血清中发现的一种新型抗体,具有相对分子质量小、稳定性高、亲和力高、组织渗透性强以及可识别抗原缝隙表位、进一步改造和表达等特点。Nb筛选技术分为噬菌体展示、酵母双杂交、mRNA展示以及高通量测序和... 纳米抗体(nanobody,Nb)是在骆驼血清中发现的一种新型抗体,具有相对分子质量小、稳定性高、亲和力高、组织渗透性强以及可识别抗原缝隙表位、进一步改造和表达等特点。Nb筛选技术分为噬菌体展示、酵母双杂交、mRNA展示以及高通量测序和质谱分析等4种,它们都能够快速筛选到特异性Nb。对具有高度亲和力的Nb,多种表达系统均可以实现高效表达。其中:原核表达最常用,其操作相对简单、产量大、生产成本低,但要去除表达出的重组蛋白内毒素;酵母表达可以直接收集培养基上清纯化,杂蛋白含量少,但可能存在过度糖基化问题;植物宿主可以大量表达Nb,但基因操作过程繁琐,且分离纯化Nb相对困难;哺乳动物细胞生产抗体也是较常用的方式,但生产成本较高。针对每一种筛选方法和表达系统目前没有统一的评价标准,在选择时,应以实验室条件为基础,充分了解筛选对象的结构、功能和用途,根据不同目的选用。本文对Nb结构特点、筛选及表达以及在动物疫病防治中的应用展开论述,可为相关领域研究提供技术支持。 展开更多

关键词 纳米抗体 重链可变区 单域抗体 筛选技术 表达系统

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整体波场延拓法基准面校正与常规方法对比 被引量：1

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作者 刘文革 《西南石油大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期57-64,共8页

消除近地表对地震波场所造成的影响,常规的解决方法是静校正和波动方程基准面校正。当勘探区域近地表出现较大的地形起伏或速度横向变化时,波动方程基准面校正则成为唯一有效的选择。传统波动方程基准面校正在实现过程中需要在双域对炮... 消除近地表对地震波场所造成的影响,常规的解决方法是静校正和波动方程基准面校正。当勘探区域近地表出现较大的地形起伏或速度横向变化时,波动方程基准面校正则成为唯一有效的选择。传统波动方程基准面校正在实现过程中需要在双域对炮点、检波点分别进行延拓成像。为此,作者曾提出一种新的近地表问题解决方法——整体波场延拓法基准面校正(WEDD)。本文对WEDD方法和常规基准面校正方法在理论上进行了对比分析,并通过数值模拟讨论了各基准面校正方法的优缺点和适用范围。 展开更多

关键词 单域 波动方程 基准面校正 双平方根算子 静校正

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岩石异向性破裂韧度之研究

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作者 陈昭旭 杨振成 +1 位作者 柯明贤 涂峻嘉 《隧道建设》 2010年第S1期60-68,共9页

岩体地下工程和边坡工程中往往会发生模态Ⅲ型加载下的岩石破坏,模态III型破坏之应力强度因子的发展与研究有利于了解岩石破坏行为。在现今学者研究各种试验方法中,较多围绕在模态I、II型和I+II复合型裂缝破坏展开,对于模态III型裂缝破... 岩体地下工程和边坡工程中往往会发生模态Ⅲ型加载下的岩石破坏,模态III型破坏之应力强度因子的发展与研究有利于了解岩石破坏行为。在现今学者研究各种试验方法中,较多围绕在模态I、II型和I+II复合型裂缝破坏展开,对于模态III型裂缝破坏的研究还处于初级阶段。提出一套单域边界元素法(或称对偶边界元素法),结合异向性线弹性理论,藉以Fortran语言撰写成程序,针对异向性岩石于模态III型之破坏,探讨岩石中裂缝前缘之应力强度因子。主要讨论横向等向性材料在不同裂缝长度、材料宽度、材料层面倾角以及上述情况于不同之异向性程度的影响下,其应力强度因子KI、KII、KIII的变化,并以KIII值做进一步的讨论。 展开更多

关键词 对偶边界元素法 单域边界元素法 异向性岩石 裂缝前缘 应力强度因子 横向等向性

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