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glmU基因单功能敲除对大肠杆菌生产氨基葡萄糖的影响
被引量：
2
1
作者
董瑞真
李丕武
+2 位作者
石凤
李康
汪俊卿
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018年第4期23-27,共5页
大肠杆菌中的glmU是葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶/葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶双功能基因。同源单交换方法敲除大肠杆菌中葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶单结构域基因glmU,即利用重叠PCR将葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶结构域内603bp序列与抗性基因amp...
大肠杆菌中的glmU是葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶/葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶双功能基因。同源单交换方法敲除大肠杆菌中葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶单结构域基因glmU,即利用重叠PCR将葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶结构域内603bp序列与抗性基因ampR连接,经过末端单酶切(HindⅢ)后电转化至大肠杆菌(E.coli)BL21感受态细胞中,经同源臂单交换,将抗性基因ampR整合至glmU基因内部,实现该结构域功能失活的同时,保留葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶功能域活性。通过发酵实验分析glmU单结构域缺失在大肠杆菌中对氨基葡萄糖生产的影响。结果表明,发酵20h后重组菌的氨基葡萄糖产量为1 049.6mg/L,为原始菌E.coliBL21氨基葡萄糖产量103.34mg/L的10.2倍。表明glmU是影响大肠杆菌产生氨基葡萄糖的关键基因,敲除glmU基因可增加氨基葡萄糖积累。
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关键词
氨基葡萄糖
glmU
基因
大肠杆菌
单功能基因敲除
同源单交换
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题名
glmU基因单功能敲除对大肠杆菌生产氨基葡萄糖的影响
被引量：
2
1
作者
董瑞真
李丕武
石凤
李康
汪俊卿
机构
齐鲁工业大学生物工程学院山东省微生物工程重点实验室
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018年第4期23-27,共5页
基金
山东省自然科学基金(ZR2016CB04)
文摘
大肠杆菌中的glmU是葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶/葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶双功能基因。同源单交换方法敲除大肠杆菌中葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶单结构域基因glmU,即利用重叠PCR将葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶结构域内603bp序列与抗性基因ampR连接,经过末端单酶切(HindⅢ)后电转化至大肠杆菌(E.coli)BL21感受态细胞中,经同源臂单交换,将抗性基因ampR整合至glmU基因内部,实现该结构域功能失活的同时,保留葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶功能域活性。通过发酵实验分析glmU单结构域缺失在大肠杆菌中对氨基葡萄糖生产的影响。结果表明,发酵20h后重组菌的氨基葡萄糖产量为1 049.6mg/L,为原始菌E.coliBL21氨基葡萄糖产量103.34mg/L的10.2倍。表明glmU是影响大肠杆菌产生氨基葡萄糖的关键基因,敲除glmU基因可增加氨基葡萄糖积累。
关键词
氨基葡萄糖
glmU
基因
大肠杆菌
单功能基因敲除
同源单交换
Keywords
glucosamine
gene glmU
Escherichia coli
single function knockout
homologous single exchange
分类号
TS201.1 [轻工技术与工程—食品科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
glmU基因单功能敲除对大肠杆菌生产氨基葡萄糖的影响
董瑞真
李丕武
石凤
李康
汪俊卿
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018
2
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