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不完全佐剂与降植烷在生产单克隆抗体腹水中的对比研究
1
作者
谭瀞澜
邢淑贤
+3 位作者
赵育莹
孙精明
符春艳
杨佳文
《单克隆抗体通讯》
CAS
CSCD
1989年第1期97-98,共2页
按常规方法用降植烷(Pristane)作为生产单克隆抗体(McAb)腹水的诱发剂，由于降植烷需要进口、有致癌作用．而且诱生腹水的能力也不够理想，为此，作者寻找其它诱生剂以代替降植烷，经过初选之后，确定用不完全佐剂(IFA)与降植烷进行对...
按常规方法用降植烷(Pristane)作为生产单克隆抗体(McAb)腹水的诱发剂，由于降植烷需要进口、有致癌作用．而且诱生腹水的能力也不够理想，为此，作者寻找其它诱生剂以代替降植烷，经过初选之后，确定用不完全佐剂(IFA)与降植烷进行对比研究。现将结果报告如下：
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关键词
不完全佐剂
降植烷
生产
单克隆抗体腹水
对比研究
诱发剂
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职称材料
GRP78单抗多抗的制备鉴定及其免疫学检测方法的建立
2
作者
阳媛
夏露露
+3 位作者
师悦嫄
魏杰
汪德强
牛司强
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期817-823,共7页
目的:制备与鉴定抗GRP78兔多克隆抗体与腹水型单克隆抗体,进一步建立可检测GRP78蛋白的双抗夹心ELISA方法。方法:利用课题组前期已经成功构建的pW28-GRP78重组质粒,IPTG诱导表达后经过Ni2+-NTA亲和层析柱分离纯化获得高纯度GRP78重组蛋...
目的:制备与鉴定抗GRP78兔多克隆抗体与腹水型单克隆抗体,进一步建立可检测GRP78蛋白的双抗夹心ELISA方法。方法:利用课题组前期已经成功构建的pW28-GRP78重组质粒,IPTG诱导表达后经过Ni2+-NTA亲和层析柱分离纯化获得高纯度GRP78重组蛋白;获得的GRP78蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,辛酸-硫酸铵沉淀后DEAE离子交换层析法纯化;制备GRP78腹水型单克隆抗体并鉴定其亚型,Protein G亲合柱纯化;采用Western blot、免疫荧光、免疫组化等方法对获得的GRP78兔多抗与鼠单抗进行鉴定;建立一个可检测GRP78蛋白的双抗夹心ELISA免疫学方法。结果:高效获得高纯度GRP78重组蛋白,成功制备兔多抗,同时获取8株腹水型单克隆抗体,选择效价最高的McAb-1用于后续双抗夹心ELISA实验,McAb-1为G2a型;进一步的鉴定结果表明制备的抗体皆具有良好免疫反应性及特异性;单抗作为捕获抗体,多抗作为检测抗体,HRP标记的羊抗兔酶标二抗,成功建立可检测人GRP78的双抗夹心ELISA方法,检测下限为152.3 ng/mL。结论:成功获取了高效价、高灵敏度及高特异性的GRP78兔多抗及腹水型鼠单抗,并在此基础上建立了可检测人GRP78蛋白的双抗体夹心ELISA检测系统,为GRP78的进一步研究奠定重要基础,具有良好的临床应用前景。
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关键词
GRP78
多
克隆
抗体
腹水
型
单克隆
抗体
鉴定
双抗夹心ELISA
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职称材料
题名
不完全佐剂与降植烷在生产单克隆抗体腹水中的对比研究
1
作者
谭瀞澜
邢淑贤
赵育莹
孙精明
符春艳
杨佳文
机构
哈尔滨医科大学免疫学研究室
齐齐哈尔医学院
黑龙江省医药工业研究所
出处
《单克隆抗体通讯》
CAS
CSCD
1989年第1期97-98,共2页
文摘
按常规方法用降植烷(Pristane)作为生产单克隆抗体(McAb)腹水的诱发剂，由于降植烷需要进口、有致癌作用．而且诱生腹水的能力也不够理想，为此，作者寻找其它诱生剂以代替降植烷，经过初选之后，确定用不完全佐剂(IFA)与降植烷进行对比研究。现将结果报告如下：
关键词
不完全佐剂
降植烷
生产
单克隆抗体腹水
对比研究
诱发剂
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
GRP78单抗多抗的制备鉴定及其免疫学检测方法的建立
2
作者
阳媛
夏露露
师悦嫄
魏杰
汪德强
牛司强
机构
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断重点实验室
重庆医科大学附属第一医院检验科
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期817-823,共7页
基金
重庆市教委科学技术研究资助项目(编号:KJ1702022)
重庆市卫计委2016年医学科研面上资助项目(编号:2016MSX001)。
文摘
目的:制备与鉴定抗GRP78兔多克隆抗体与腹水型单克隆抗体,进一步建立可检测GRP78蛋白的双抗夹心ELISA方法。方法:利用课题组前期已经成功构建的pW28-GRP78重组质粒,IPTG诱导表达后经过Ni2+-NTA亲和层析柱分离纯化获得高纯度GRP78重组蛋白;获得的GRP78蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,辛酸-硫酸铵沉淀后DEAE离子交换层析法纯化;制备GRP78腹水型单克隆抗体并鉴定其亚型,Protein G亲合柱纯化;采用Western blot、免疫荧光、免疫组化等方法对获得的GRP78兔多抗与鼠单抗进行鉴定;建立一个可检测GRP78蛋白的双抗夹心ELISA免疫学方法。结果:高效获得高纯度GRP78重组蛋白,成功制备兔多抗,同时获取8株腹水型单克隆抗体,选择效价最高的McAb-1用于后续双抗夹心ELISA实验,McAb-1为G2a型;进一步的鉴定结果表明制备的抗体皆具有良好免疫反应性及特异性;单抗作为捕获抗体,多抗作为检测抗体,HRP标记的羊抗兔酶标二抗,成功建立可检测人GRP78的双抗夹心ELISA方法,检测下限为152.3 ng/mL。结论:成功获取了高效价、高灵敏度及高特异性的GRP78兔多抗及腹水型鼠单抗,并在此基础上建立了可检测人GRP78蛋白的双抗体夹心ELISA检测系统,为GRP78的进一步研究奠定重要基础,具有良好的临床应用前景。
关键词
GRP78
多
克隆
抗体
腹水
型
单克隆
抗体
鉴定
双抗夹心ELISA
Keywords
GRP78
polyclonal antibody
ascites monoclonal antibody
identification
double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay
分类号
R392.ll [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
不完全佐剂与降植烷在生产单克隆抗体腹水中的对比研究
谭瀞澜
邢淑贤
赵育莹
孙精明
符春艳
杨佳文
《单克隆抗体通讯》
CAS
CSCD
1989
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
GRP78单抗多抗的制备鉴定及其免疫学检测方法的建立
阳媛
夏露露
师悦嫄
魏杰
汪德强
牛司强
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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职称材料
已选择
0
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引证文献
统计分析
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