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有肾脏意义单克隆免疫球蛋白血症继发lgA血管炎并导致小肠坏死1例
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作者 丁艳 李超然 +5 位作者 黄文生 朱林忠 王丽芳 马豆豆 张娟 石连杰 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1101-1105,共5页
意义未明的单克隆免疫球蛋白血症(monoclonalgammopathy of undetermined significance,MGUS)被认为是一种癌前病变,在欧美地区50岁以上人群的发病率为3.2%,其诊断需要符合血清M蛋白<30g/L、骨髓单克隆浆细胞<10%、不存在浆细胞... 意义未明的单克隆免疫球蛋白血症(monoclonalgammopathy of undetermined significance,MGUS)被认为是一种癌前病变,在欧美地区50岁以上人群的发病率为3.2%,其诊断需要符合血清M蛋白<30g/L、骨髓单克隆浆细胞<10%、不存在浆细胞增殖相关的终末器官损害^([1-2])。当MGUS患者合并肾损伤时(除外高血压、糖尿病等其他原因),称为有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白血症(monoclonal gam-mopathy of renal significance,MGRS)^([3])。 展开更多
关键词 具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白血症 IgA血管炎 消化道出血
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血清游离轻链在单克隆球蛋白血症中的临床意义
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作者 卢慧 张炜 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期155-158,共4页
目的:探讨血清游离轻链(sFLC)在单克隆免疫球蛋白血症(MG)患者中的表达水平及其临床意义。方法:收集98例MG患者和30例健康志愿者外周血,采用免疫比浊法检测sFLC水平,并分析sFLC对MG患者的诊断、疾病严重程度以及疗效评估的价值。结果:98... 目的:探讨血清游离轻链(sFLC)在单克隆免疫球蛋白血症(MG)患者中的表达水平及其临床意义。方法:收集98例MG患者和30例健康志愿者外周血,采用免疫比浊法检测sFLC水平,并分析sFLC对MG患者的诊断、疾病严重程度以及疗效评估的价值。结果:98例MG患者中,男性58例,女性40例;具有肾脏意义的单克隆球蛋白血症(MGRS)45例,意义未明的单克隆球蛋白血症(MGUS)33例,血液系统肿瘤20例;Ig G型58例,Ig A型26例,Ig M型7例,轻链型5例,不分泌型2例;κ型35例,λ型63例;肾功能异常53例,肾功能正常45例。MG患者外周血中sFLC-κ和sFLC-λ表达水平相比对照组均显著升高(P<0.01)。血液系统肿瘤患者sFLC-κ和sFLC-λ表达水平显著高于MGRS和MGUS患者(P<0.05),而MGRS患者又显著高于MGUS患者(P<0.05)。肾功能异常者sFLC-κ和sFLC-λ表达水平显著高于肾功能正常者(P<0.01)。sFLC-κ和sFLC-λ与MG患者的球蛋白(r=0.392,r=0.435)、β2-微球蛋白水平呈正相关(r=0.403,r=0.468),在伴肾功能异常的患者中,与血肌酐水平亦呈正相关(r=0.586,r=0.631),与年龄、性别、白蛋白、乳酸脱氢酶、血钙等指标均未见明显相关性。经过治疗,患者sFLC-κ和sFLC-λ的表达水平均显著下降(P<0.01)。结论:sFLC水平在MG患者中显著升高,是一个可以快速检测、敏感度高,有助于疾病类型诊断、病情严重程度判定和疗效评估的新指标。 展开更多
关键词 血清游离轻链 单克隆球蛋白血症 诊断 疗效
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增生性肾小球肾炎伴单克隆免疫球蛋白沉积患者的临床病理特点及预后 被引量:1
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作者 鲁瑞 陈叶 +5 位作者 王頔 赵丽娟 周美兰 柏明 何丽洁 孙世仁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第24期3468-3475,共8页
目的分析增生性肾小球肾炎伴单克隆免疫球蛋白沉积(PGNMID)患者的临床病理特点、治疗和预后。方法回顾性分析经肾活检诊断为PGNMID患者的临床资料、肾脏病理、治疗及预后情况。根据肾脏缓解情况,分为缓解组和未缓解组。对比两组之间人... 目的分析增生性肾小球肾炎伴单克隆免疫球蛋白沉积(PGNMID)患者的临床病理特点、治疗和预后。方法回顾性分析经肾活检诊断为PGNMID患者的临床资料、肾脏病理、治疗及预后情况。根据肾脏缓解情况,分为缓解组和未缓解组。对比两组之间人口统计学、实验室数据。结果共纳入28例患者,分为缓解组(n=16)和未缓解组(n=12),男女比例4:3,临床表现为蛋白尿(100%)、血尿(82.1%)、肾功能不全(28.6%)、低补体C3和(或)C4血症(32.1%)。1例(3.6%)患者检测到血清单克隆免疫球蛋白,5例(17.9%)患者血清游离轻链比值异常。肾脏组织病理学免疫荧光以IgG3沉积为主的共24例,以IgG3κ型最多见(17例),IgG1共4例。光镜下,有24例(85.7%)表现为MPGN,3例(10.7%)表现为EPGN,1例(3.6%)表现为MGN;电镜下可见电子致密物大多沉积在系膜区、内皮下,少数伴上皮下沉积。随访时间3~56个月,截至末次随访,共有5例患者进入ESRD,其中2例患者因心血管事件死亡,1例行腹膜透析,1例行血液透析,1例行肾脏替代治疗前准备。随访1、2、3年肾脏总缓解率分别为32.1%、57.1%、64.2%。缓解组的年龄(44±17.35)岁,男8例(50%),女8例(50%);未缓解组的年龄(59.83±18.09)岁,男8例(66.7%),女4例(33.3%);未缓解组的年龄、nT-proBNP、肌钙蛋白I、尿素氮均高于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05);肾脏完全缓解的5例患者中,2例治疗方案为BD(硼替佐米联合地塞米松),1例为Dara单抗,其余2例为激素联合免疫抑制剂。结论PGNMID患者临床常表现为蛋白尿、血尿、肾功能不全;光镜下主要表现为MPGN,IgG3κ是最常见的亚型。基于硼替佐米的治疗可获得较好的血液学及肾脏缓解率,Dara单抗可能是治疗PGNMID安全且有效的药物,最佳治疗方案有待进一步探索。 展开更多
关键词 增生性肾小球肾炎伴单克隆免疫球蛋白沉积 单克隆免疫球蛋白沉积 肾小球肾炎 硼替佐米 达雷妥尤单抗
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中性粒细胞明胶酶相关运载蛋白、T细胞免疫球蛋白粘蛋白受体1、血管细胞黏附分子-1和激活素A升高在新诊断多发性骨髓瘤患者中的意义研究
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作者 陈飞 王金英 +9 位作者 于海搏 李新 张佳佳 申曼 詹晓凯 汤然 范斯斌 赵凤仪 张天宇 黄仲夏 《中国全科医学》 北大核心 2025年第22期2740-2749,2761,共11页
背景多发性骨髓瘤(MM)是一种恶性浆细胞病,近半数患者在就诊时存在MM相关肾损害(KI),与患者死亡率增加有关。早期识别和治疗KI,有可能逆转肾功能,改善患者生存状况。中性粒细胞明胶酶相关运载蛋白(NGAL)、T细胞免疫球蛋白粘蛋白受体1(TI... 背景多发性骨髓瘤(MM)是一种恶性浆细胞病,近半数患者在就诊时存在MM相关肾损害(KI),与患者死亡率增加有关。早期识别和治疗KI,有可能逆转肾功能,改善患者生存状况。中性粒细胞明胶酶相关运载蛋白(NGAL)、T细胞免疫球蛋白粘蛋白受体1(TIM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和激活素A与细胞增殖、侵袭和KI等病理过程相关。上述指标有希望成为MM相关KI早期诊断的指标。目的探讨新型生物标志物NGAL、TIM-1、VCAM-1和激活素A在新诊断MM(NDMM)合并KI的病情演变、分期和预后中的意义。方法选取2017年1月—2022年2月首都医科大学附属北京朝阳医院石景山院区血液科住院的70例NDMM患者,包括62例症状性MM和8例冒烟型MM(SMM);同时纳入12例意义未明单克隆丙种球蛋白血症(MGUS)患者、7例肾脏意义的单克隆免疫球蛋白血症(MGRS)患者及20例健康对照(HC)。收集纳入者的临床资料及MGUS、MGRS、NDMM患者骨髓穿刺活检、M蛋白检查、影像学检查结果;应用酶联免疫吸附法检测尿NGAL(uNGAL)、尿TIM-1(uTIM-1)、血清TIM-1(sTIM-1)、尿VCAM-1(uVCAM-1)、尿激活素A水平。根据疾病状态将研究对象分为MGUS组、MGRS组、NDMM组和HC组,根据KI情况将患者分为MGUS组、MGRS组、KI组和非肾损伤(NKI)组,KI组依据动态疾病治疗状态分为治疗前MM亚组、治疗后达到部分治疗反应(PR)以上(>PR)亚组、复发MM亚组。各指标的相关性采用Spearman秩相关分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线以分析各指标对NDMM合并KI的诊断价值,计算最佳截断值;依据各指标的最佳截断值分为高于最佳截断值组及低于最佳截断值组,采用Kaplan-Meier方法分析各指标在高于最佳截断值组和低于最佳截断值组的总生存期(OS);并采用COX比例风险回归分析NDMM合并KI患者全因死亡的影响因素。结果NDMM组的uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、sTIM-1和尿激活素A水平高于MGUS组和HC组(P<0.05),MGRS组的uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、sTIM-1和尿激活素A水平高于MGUS组(P<0.05),KI组的uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、sTIM-1和尿激活素A水平高于NKI组(P<0.05),治疗前MM亚组、复发MM亚组的uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、sTIM-1和尿激活素A水平高于>PR亚组(P<0.05)。uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、sTIM-1及尿激活素A与肌酐、β2-微球蛋白、R-ISS分期呈正相关(P<0.05),与估算肾小球滤过率呈负相关(P<0.05)。uNGAL、uTIM-1、sTIM-1、尿激活素A与24 h尿轻链水平呈正相关(P<0.05),uNGAL、uTIM-1与克隆性浆细胞比例呈正相关(P<0.05)。根据ROC曲线得出诊断MM相关KI的uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、尿激活素A最佳截断值分别为14.774 ng/mL、1.978 ng/mL、144.400 ng/mL、33.730 pg/mL。Kaplan-Meier结果显示,高于uNGAL、uTIM-1、sTIM-1、uVCAM-1、尿激活素A各自最佳截断值的患者OS更差(P<0.05);多因素COX比例风险回归分析结果显示,uNGAL、R-ISS分期是NDMM合并KI患者全因死亡的影响因素(P<0.05)。结论uNGAL、uTIM-1、uVCAM-1、尿激活素A可能与MM病情进展和KI有关,是肾小管损伤的早期标志物,有利于MM合并KI患者的早期诊治,且与R-ISS分期、24 h尿轻链、克隆性浆细胞比例等肿瘤负荷指标和MM患者总体生存相关。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 肾损伤 预后 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白 T细胞免疫球蛋白蛋白受体1 血管细胞黏附分子1 激活素A 免疫球蛋白轻链
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草鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量:9
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作者 郝贵杰 沈锦玉 +2 位作者 徐洋 姚嘉贇 潘晓艺 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期808-810,共3页
目的:研制抗草鱼免疫球蛋白IgM的单克隆抗体(mAb)并进行免疫学特性分析。方法:制备草鱼免疫球蛋白IgM,以其为抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,3~4次免疫后取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA法对杂交瘤进行筛选,并鉴定mAb的生物学... 目的:研制抗草鱼免疫球蛋白IgM的单克隆抗体(mAb)并进行免疫学特性分析。方法:制备草鱼免疫球蛋白IgM,以其为抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,3~4次免疫后取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA法对杂交瘤进行筛选,并鉴定mAb的生物学特性。结果:各株阳性克隆经3次亚克隆后,共获得5株抗草鱼IgM的mAbs,分别命名为4B3、2B11、4D5、3F2和4E6,它们的细胞上清ELISA效价为1∶3200~1∶6400,其中4D5的细胞上清及腹水效价分别为1∶6400和1∶256000,经亚类鉴定结果表明5株mAb均为IgG1。交叉反应结果表明5株mAb均不与台湾甲鱼、泰国甲鱼、日本甲鱼和中华鳖的血清反应,除mAb4B3外,其余4株均与草鱼、青鱼、鲢鱼、鳊鱼和花鱼骨的血清有明显的交叉反应,而与鲫鱼、鳗鱼的血清只有微弱的反应。mAb4B3只与草鱼和青鱼的血清有反应,而与其他鱼类血清反应很弱。免疫印迹实验结果表明mAb4D5能在变性条件下识别草鱼IgM的重链。ELISA检测mAb4D5对草鱼IgM的敏感性达10μg/L。结论:制备的抗草鱼IgMmAb可用于草鱼免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断等,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 间接ELISA 单克隆抗体 BALB/C小鼠
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弥漫性大B细胞性非霍奇金淋巴瘤利妥昔单克隆抗体联合化疗后免疫球蛋白的变化 被引量:12
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作者 王全顺 赵瑜 +4 位作者 王书红 李红华 黄文荣 高春记 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期676-679,共4页
利妥昔(rituximab,RTX)单克隆抗体能够迅速减少循环血液中B细胞的数量,导致血液免疫球蛋白减少。有关RTX引起的低免疫球蛋白血症也一直缺乏系统研究,为此我们研究了RTX联合CHOP方案治疗B细胞淋巴瘤血免疫球蛋白水平的变化。2004年1月至2... 利妥昔(rituximab,RTX)单克隆抗体能够迅速减少循环血液中B细胞的数量,导致血液免疫球蛋白减少。有关RTX引起的低免疫球蛋白血症也一直缺乏系统研究,为此我们研究了RTX联合CHOP方案治疗B细胞淋巴瘤血免疫球蛋白水平的变化。2004年1月至2009年12月我院收治的采用CHOP和R-CHOP治疗的18岁以上成年人初治CD20阳性弥漫性大B细胞非霍奇金淋巴瘤共122例,根据治疗方案的不同分为CHOP和R-CHOP两个组,记录两组病人各阶段免疫球蛋白水平的变化,剔除治疗前免疫球蛋白水平异常的病例后进行分析。结果显示,6个疗程结束后R-CHOP组82例基线免疫球蛋白正常的病人中,IgG水平比基线值下降超过20%的病人,占85.4%,低于正常值下限者占47.6%;IgA水平较基线值下降超过20%的病人同样占85.4%,低于正常值下限者占48.8%;IgM水平较基线值下降超过20%的病人占87.8%,低于正常值下限者占52.4%。CHOP组共24例治疗前后免疫球蛋白水平无显著变化。结论 :低免疫球蛋白血症是RTX联合CHOP方案化疗的常见并发症,免疫球蛋白血症水平多在停止治疗1年左右恢复至正常水平,少数病人免疫球蛋白的减少甚至可以持续2年以上。 展开更多
关键词 淋巴瘤 免疫球蛋白血症 利妥昔单克隆抗体 化疗
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奥尼罗非鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用 被引量:4
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作者 郝贵杰 潘晓艺 +3 位作者 徐洋 姚嘉赟 尹文林 沈锦玉 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期7-11,共5页
采用饱和硫酸铵盐析和Sephadex G-200柱层析方法制备奥尼罗非鱼Oreochromis niloticus×O.aureus(体质量为500~1 000 g)免疫球蛋白(IgM),以其为抗原免疫8周龄的BALB/c小鼠,免疫3~4次后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELIS... 采用饱和硫酸铵盐析和Sephadex G-200柱层析方法制备奥尼罗非鱼Oreochromis niloticus×O.aureus(体质量为500~1 000 g)免疫球蛋白(IgM),以其为抗原免疫8周龄的BALB/c小鼠,免疫3~4次后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA方法对杂交瘤进行筛选。结果表明:阳性克隆经3次亚克隆后,共获得6株针对罗非鱼IgM的单克隆抗体(mAb),分别命名为1C10、1C2、1G11、2C2、2F9和4B3,所有单抗均为IgG类,各株杂交瘤的细胞上清ELISA效价为1∶800~1∶3 200;制备4B3和1G11的腹水单抗,ELISA效价分别为1∶102 400和1∶6 400。免疫印迹试验结果表明,mAb 4B3能在变性条件下识别罗非鱼IgM的重链,约在相对分子质量85 000左右。用ELISA检测4B3对罗非鱼IgM的敏感性,IgM灵敏度为10μg/L。利用所制备的单抗4B3建立了评价无乳链球菌Streptococcus agalactiae灭活疫苗免疫罗非鱼血清抗体水平的三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)方法,结果表明:腹腔注射和浸泡免疫无乳链球菌灭活疫苗14 d后,两种免疫方式的罗非鱼血清抗无乳链球菌的抗体比对照组稍有增加;免疫21 d后,两种免疫方式的罗非鱼血清抗体均有明显增加;免疫35 d后增加更为显著,达到最高峰,注射组效价达1∶2 560,浸泡组达1∶640;免疫56 d后抗体开始下降,直到第98天还维持在明显高于对照组的抗体水平。本研究表明,所制备的罗非鱼IgM mAb可用于评价罗非鱼疫苗免疫效果及抗体产生规律等,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 奥尼罗非鱼 免疫球蛋白 间接ELISA 单克隆抗体 BALB C小鼠
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40岁以上人群中意义未明单克隆免疫球蛋白血症的发病情况分析 被引量:7
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作者 张瑞 王亮 +3 位作者 张正昊 庞楠楠 赵佳林 曲建华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期623-628,共6页
目的:了解40岁以上人群中意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)在不同年龄、性别、民族的分布情况及危险因素。方法:收集2017年7月到2017年9月在新疆医科大学第一附属医院健康体检中心健康体检596人(年龄≥40岁,男性310例,女性286例,汉族... 目的:了解40岁以上人群中意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)在不同年龄、性别、民族的分布情况及危险因素。方法:收集2017年7月到2017年9月在新疆医科大学第一附属医院健康体检中心健康体检596人(年龄≥40岁,男性310例,女性286例,汉族488例,维吾尔族108例)。根据年龄将健康体检人群分为40-59、60-79和≥80岁3组,记录所有人的年龄、性别、族别。首先采用毛细管血清蛋白电泳对所有样本筛查,如果电泳图谱发现疑似单克隆条带,再进行血清免疫固定电泳明确蛋白类型。结果:596例被筛查人群中MGUS发病24例(4.027%),40-59、60-79和≥80岁组人群MGUS发病率分别为1.762%、2.929%和10%,各组间差异均有统计学意义(P <0.05);男性发病率(5.806%)明显高于女性(2.097%)(χ2=5.177,P <0.05)。二元Logistic回归分析显示,年龄≥80岁及男性因素是MGUS发病的独立危险因素(P<0.01,OR=4.188,95%CI:1.814-9.673及P <0.05,OR=2.605,95%CI:1.009-6.725)。发病人群蛋白类型Ig G(66.7%)多于Ig A(29.2%),并且差异有统计学意义(χ~2=21.375,P <0.05),而Kappa与Lambda轻链型人群的MGUS发病率无明显差异(P> 0.05)。结论:年龄的增长及性别为男性可能增加MGUS的发病率,Ig G是MGUS发病中最常见的免疫球蛋白类型,因此要做好早期筛查。 展开更多
关键词 意义未明单克隆免疫球蛋白血症 发病率 M蛋白
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类风湿关节炎合并单克隆免疫球蛋白病临床特征及预后分析 被引量:3
9
作者 杨月 陆松松 +3 位作者 陈龙 温磊 贾园 栗占国 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期1147-1152,共6页
目的研究类风湿关节炎(RA)合并单克隆免疫球蛋白病(MG)患者的临床特征、治疗及预后。方法 2010-2017年我院11例RA合并MG患者作为试验组,以同期入院,年龄、性别匹配的33例未合并MG的RA患者为对照组进行病例对照研究。正态分布计量资料比... 目的研究类风湿关节炎(RA)合并单克隆免疫球蛋白病(MG)患者的临床特征、治疗及预后。方法 2010-2017年我院11例RA合并MG患者作为试验组,以同期入院,年龄、性别匹配的33例未合并MG的RA患者为对照组进行病例对照研究。正态分布计量资料比较采用t检验、非正态分布采用Mann-Whitney U检验;计数资料比较采用χ~2检验或Fisher确切概率法;危险因素分析采用单因素比较及多因素Logistic回归分析。结果试验组脾大(27.3%vs.3.0%,P=0.043)和低免疫球蛋白血症(54.5%vs.6.1%,P=0.001)发生率、血沉[(89.9±30.5)mm/h vs.(56.1±28.4)mm/h,P=0.002]及24 h尿蛋白[0.3(3.2)mg/d vs.0.1(0.1)mg/d,P=0.030]均高于对照组,差异有统计学意义。初诊多发性骨髓瘤(MM)1例、意义未明的单克隆免疫球蛋白病(MGUS)8例,未确诊2例。MGUS患者随访期间1例发展为MM、1例出现肾小管间质浆细胞浸润所致肾功能不全。结论 RA患者可合并MG,以MGUS最为常见,也可发生恶性转化。合并脾大、血沉快、低免疫球蛋白血症和肾脏受累者需高度警惕以便及时诊治。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 单克隆免疫球蛋白 意义未明的单克隆免疫球蛋白 M蛋白 多发性骨髓瘤
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南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性 被引量:4
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作者 张小萍 魏静 邱艳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期379-384,共6页
采用PEG沉淀结合Sepharose-4B柱层析法分离纯化了健康非免疫状态下南方鲇血清免疫球蛋白,在SDS-PAGE电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的分子量分别约为77 kD和27 kD。应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了4个南方鲇免疫球蛋白特异性的单... 采用PEG沉淀结合Sepharose-4B柱层析法分离纯化了健康非免疫状态下南方鲇血清免疫球蛋白,在SDS-PAGE电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的分子量分别约为77 kD和27 kD。应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了4个南方鲇免疫球蛋白特异性的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体亚级份测定,其中IgG1有2株,IgG2a有1株,IgG2b有1株;抗体滴度为104—106,有三株单抗具有Western-blot反应特性,识别南方鲇免疫球蛋白的重链。4株单抗都能特异地识别南方鲇、鲇的免疫球蛋白,而与鲫、草鱼、罗非鱼、斑点叉尾、光泽黄颡鱼血清以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应。单克隆抗体F4-A12对纯化的南方鲇免疫球蛋白的检测灵敏度为31 ng。实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点,可用于南方鲇免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 南方鲇 免疫球蛋白 单克隆抗体
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抗紫红笛鲷血清免疫球蛋白单克隆抗体的制备 被引量:6
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作者 冯娟 胡超群 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期14-21,共8页
采用蛋白A sephrose亲和层析法,分离提纯了紫红笛鲷Lutjanusargentimaculatus的血清免疫球蛋白(Ig),并制备了抗紫红笛鲷血清Ig分子的单克隆抗体。经间接ELISA、免疫印迹(westernblotting)的检测和鉴定,得到抗紫红笛鲷Ig分子重链的单抗6... 采用蛋白A sephrose亲和层析法,分离提纯了紫红笛鲷Lutjanusargentimaculatus的血清免疫球蛋白(Ig),并制备了抗紫红笛鲷血清Ig分子的单克隆抗体。经间接ELISA、免疫印迹(westernblotting)的检测和鉴定,得到抗紫红笛鲷Ig分子重链的单抗6株,分别为IgG11株、IgG23株、IgG2a1株、IgG31株。这6株抗紫红笛鲷Ig的单抗各有1株与同为鲈形目的青石斑鱼Epinephelusawoara和尖吻鲈Latescalcarifer的Ig分子有很弱的交叉反应,而同鲽形目的牙鲆Paralichthysolivaceus的Ig分子没有交叉反应,具有较强的种间特异性;同时揭示,同目不同属的鱼类血清Ig之间的相似度较低,不同目之间的相似度极低。 展开更多
关键词 血清 紫红笛鲷 免疫球蛋白 单克隆抗体 海水鱼疾病 免疫应答机制 免疫防治
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大菱鲆免疫球蛋白M(IgM)单克隆抗体的制备与特性鉴定 被引量:3
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作者 王蔚芳 李青梅 +4 位作者 柴书军 甘玲玲 洪磊 郭军庆 雷霁霖 《中国工程科学》 北大核心 2014年第9期16-20,共5页
应用细胞工程技术研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的单克隆抗体并分析其免疫学特性。小鼠骨髓瘤细胞NS0与经IgM免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,经过反复有限稀释法克隆,筛选获得4株抗大菱鲆IgM的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别... 应用细胞工程技术研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的单克隆抗体并分析其免疫学特性。小鼠骨髓瘤细胞NS0与经IgM免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,经过反复有限稀释法克隆,筛选获得4株抗大菱鲆IgM的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为B1D1、D5C2、E1B2和F4A1。经小鼠腹水扩大生产后,单抗效价为1∶1.024×106检测灵敏度为32 ng/mL。Western blot分析表明,获得的单抗与IgM重链区特异性结合。交叉结果显示,单抗与大菱鲆血清呈强阳性反应,与褐牙鲆、红鳍东方鲀、许氏平鲉、六线鱼、鲈鱼均呈微弱阳性反应,而与半滑舌鳎、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鳙鱼的血清无交叉反应。本研究制备的大菱鲆IgM单克隆抗体效价高、灵敏度高、特异性强,适合用于大菱鲆免疫学相关研究和生产实际应用。 展开更多
关键词 大菱鲆 免疫球蛋白M 单克隆抗体 BALB/C小鼠
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抗牛免疫球蛋白G单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2
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作者 王丽威 刘金 +2 位作者 武俊瑞 乌日娜 岳喜庆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期110-116,共7页
采用杂交瘤技术从90株融合株中筛选得到分泌抗牛免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)单克隆抗体的2F6、5E3、9C6、9H8四个细胞株。其抗体亚型均为IgG1型,腹水单克隆抗体的效价可达5.12×10~6;5E3、9H8识别牛IgG重链Fc片段,2F6识别牛... 采用杂交瘤技术从90株融合株中筛选得到分泌抗牛免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)单克隆抗体的2F6、5E3、9C6、9H8四个细胞株。其抗体亚型均为IgG1型,腹水单克隆抗体的效价可达5.12×10~6;5E3、9H8识别牛IgG重链Fc片段,2F6识别牛IgG轻链Fab片段,9C6识别牛IgG重链Fab片段;9C6与牛IgG1和牛IgG2反应,与山羊IgG、绵羊IgG、兔IgG、牛IgM、牛乳酪蛋白、牛乳β-乳球蛋白、牛乳铁蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵清白蛋白、鱼明胶的交叉反应率均小于1%;9C6亲合力常数达牛乳8.92×10~8 L/mol。 展开更多
关键词 免疫球蛋白G(IgG) 单克隆抗体 杂交瘤 交叉反应 亲合力
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外源重组蛋白制备鹅免疫球蛋白轻链特异性多克隆抗体 被引量:2
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作者 王君伟 郭永丽 高明春 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期60-63,共4页
采用RT-PCR方法扩增鹅免疫球蛋白轻链恒定区编码序列(GoIgCL),构建原核表达载体pET30a-IgCL,在RosettaTM(DE3)pLysS宿主菌中表达鹅免疫球蛋白轻链恒定区重组蛋白rGoCL,以纯化后rGoCL作为免疫原制备兔抗GoIgL多克隆抗体,对多抗进行鉴定... 采用RT-PCR方法扩增鹅免疫球蛋白轻链恒定区编码序列(GoIgCL),构建原核表达载体pET30a-IgCL,在RosettaTM(DE3)pLysS宿主菌中表达鹅免疫球蛋白轻链恒定区重组蛋白rGoCL,以纯化后rGoCL作为免疫原制备兔抗GoIgL多克隆抗体,对多抗进行鉴定分析。结果表明,rGoCL在大肠杆菌中获得可溶性表达,可代替天然分离的轻链作为免疫原制备轻链特异性抗体,多抗效价为1 204 800。研究为鹅免疫球蛋白的蛋白结构、功能分析以及鹅免疫诊断试剂研发奠定基础。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 轻链恒定区 重组蛋白 克隆抗体
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欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 冯建军 郭松林 林鹏 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期81-89,共9页
通过RT-PCR技术克隆欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)Ig轻链基因cDNA全长序列,命名为AaIgL,其全长为1 016bp,开放阅读框为714bp,编码238个氨基酸。将该基因片段与pET-his载体连接构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,其表达产物经SDS... 通过RT-PCR技术克隆欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)Ig轻链基因cDNA全长序列,命名为AaIgL,其全长为1 016bp,开放阅读框为714bp,编码238个氨基酸。将该基因片段与pET-his载体连接构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,其表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析,结果表明新增的27ku蛋白条带与预期值相符,且与兔抗欧洲鳗鲡IgM血清发生特异性显色反应,证实了AaIgL基因能够在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达;实时荧光定量PCR检测结果发现:AaIgL在欧洲鳗鲡各组织中均有表达,其中脾脏的表达量最高,肾脏和心脏中也有较高的表达水平,而肝脏、肌肉、鳃以及肠中的表达量较低;欧洲鳗鲡经山羊IgG肌肉注射后脾脏和肾脏的AaIgL表达水平明显上升,其峰值分别为第7天和第14天,AaIgL在脾脏的表达量显著高于肾脏,但是第21天后均恢复至正常水平。以上结果表明,AaIgL在欧洲鳗鲡机体免疫防御中发挥重要作用,脾脏是AaIgL基因的主要表达器官。 展开更多
关键词 欧洲鳗鲡 免疫球蛋白轻链 原核表达 荧光定量PCR
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赤点石斑鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析 被引量:1
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作者 陈红燕 许斌福 +3 位作者 林能锋 刘晓东 陈强 林天龙 《福建农业学报》 CAS 2011年第5期687-690,共4页
赤点石斑鱼血清免疫球蛋白经饱和硫酸铵沉淀,Sephrose-4B柱提纯后免疫BALB/c小鼠。经细胞融合和抗体分泌细胞筛选,获得2株抗石斑鱼免疫球蛋白的单克隆抗体,分别命名为Mab-8D6和Mab-2D3,两株单抗的亚级份均为IgG1,腹水抗体的ELISA效价为1... 赤点石斑鱼血清免疫球蛋白经饱和硫酸铵沉淀,Sephrose-4B柱提纯后免疫BALB/c小鼠。经细胞融合和抗体分泌细胞筛选,获得2株抗石斑鱼免疫球蛋白的单克隆抗体,分别命名为Mab-8D6和Mab-2D3,两株单抗的亚级份均为IgG1,腹水抗体的ELISA效价为106,对纯化的石斑鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为62ng,其中Mab-2D3只与石斑鱼免疫球蛋白发生特异性结合,而Mab-8D6除了与石斑鱼免疫球蛋白产生反应外,还能与褐菖鲉、鲈鱼、大黄鱼等海水鱼血清免疫球蛋白发生交叉反应,与锦鲤、欧洲鳗鲡血清免疫球蛋白产生微弱交叉反应。2株单抗Western-blotting反应特性相同,都只能识别非变性非还原条件下790kD大小的石斑鱼免疫球蛋白,而不能识别在变性条件下石斑鱼免疫球蛋白的重链和轻链。以上结果表明,Mab-2D3和Mab-8D6两株单抗所对应的抗原表位不同,Mab-2D3特异性强,所对应的抗原表位是石斑鱼免疫球蛋白所特有的;而Mab-8D6交叉反应结果提示石斑鱼与被测的几种海水鱼的免疫球蛋白进化亲缘关系较近。 展开更多
关键词 赤点石斑鱼 免疫球蛋白 单克隆抗体
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乌鳢免疫球蛋白M重链和免疫球蛋白轻链的克隆与特征分析 被引量:1
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作者 贾伟章 周秀霞 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期79-84,共6页
应用RACE-PCR方法克隆并鉴定了乌鳢免疫球蛋白M(i mmunoglobulin M,Ig M)重链(H)和免疫球蛋白轻链(L)全长cDNA。乌鳢IgH cDNA全长1 912个核苷酸(nt),包含1 797 nt的开放阅读框,编码598个氨基酸(aa)。IgH恒定区(CH)均包含1对保守的半胱... 应用RACE-PCR方法克隆并鉴定了乌鳢免疫球蛋白M(i mmunoglobulin M,Ig M)重链(H)和免疫球蛋白轻链(L)全长cDNA。乌鳢IgH cDNA全长1 912个核苷酸(nt),包含1 797 nt的开放阅读框,编码598个氨基酸(aa)。IgH恒定区(CH)均包含1对保守的半胱氨酸残基形成链内二硫键,其中CH1区氨基末端存在保守的半胱氨酸残基与轻链形成链间二硫键,4个推测的N-糖基化位点(NXT和NXS)则分别位于CH1、CH2和CH4。序列比对发现乌鳢IgHCH1与CH2交界处氨基酸序列的插入使铰链区肽段较其他硬骨鱼IgH长,此外IgH CH4区羧基末端参与单体间聚合的半胱氨酸被赖氨酸替换,这反映乌鳢IgH分子结构的特异性。序列相似性比较显示乌鳢IgH与点带石斑鱼、黑鳍冰鱼、牙鲆、虹鳟的相似性依次为55%、50%、45%和36%,与斑马鱼类的相似性较低(为28%)。乌鳢IgL cDNA全长941 nt,包含729 nt的开放阅读框,编码242个aa。轻链可变区(VL)和恒定区(CL)均包含保守的半胱氨酸,形成链内和链间二硫键。序列比对分析表明乌鳢IgL与五条鰤和花狼IgL的相似性为78%和77%,而与斑点叉尾鮰和虹鳟的相似性仅为32%和31%。根据IgH和IgL恒定区氨基酸序列构建系统进化树,鱼类IgH形成硬骨鱼和软骨鱼两大分支,其中乌鳢IgH与河豚IgH的亲缘关系较近;硬骨鱼IgL系统树显示3个主要的分支:L1、L2和L3,乌鳢IgL位于L1分支的L1 A亚类。 展开更多
关键词 免疫球蛋白M 重链 轻链 克隆 乌鳢
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黄颡鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性 被引量:1
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作者 徐洋 蔺凌云 +4 位作者 尹文林 姚嘉赟 潘晓艺 袁雪梅 沈锦玉 《江苏农业科学》 2018年第9期174-176,共3页
采用饱和硫酸铵(SAS)盐析法结合Protein A亲和柱层析法提取了黄颡鱼血清免疫球蛋白,经SDS-PAGE测定该纯化蛋白重链和轻链的分子量分别约为73 ku和30 ku。应用杂交瘤单克隆抗体技术获得2株抗黄颡鱼免疫球蛋白的单抗杂交瘤细胞,分别命名为... 采用饱和硫酸铵(SAS)盐析法结合Protein A亲和柱层析法提取了黄颡鱼血清免疫球蛋白,经SDS-PAGE测定该纯化蛋白重链和轻链的分子量分别约为73 ku和30 ku。应用杂交瘤单克隆抗体技术获得2株抗黄颡鱼免疫球蛋白的单抗杂交瘤细胞,分别命名为B10-C3和F6-F2,并对这2株单抗的特性进行分析。2株单抗的亚级份测定均为IgG2a;腹水抗体效价为1∶(7.29×10~5);2株单抗具有Western-Blot反应特性,能识别黄颡鱼免疫球蛋白的重链;单抗F6-F2对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为20 ng,单抗B10-C3对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为39 ng;2株单抗都与黄颡鱼免疫球蛋白发生特异性结合,而与鲇鱼、鳗鲡、鲫鱼、草鱼、鳊鱼、鲈鱼、鳜鱼和白鱼等血清免疫球蛋白无交叉反应。上述结果表明,B10-C3和F6-F2这2株单抗具有高度灵敏和特异等特点,可用于黄颡鱼病原早期诊断和免疫应答水平监测,同时揭示了同目不同属的鲇鱼和黄颡鱼血清Ig之间的相似度较低。 展开更多
关键词 黄颡鱼 免疫球蛋白 单克隆抗体
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BXSB小鼠胸腺内单克隆免疫球蛋白分泌细胞的分离与鉴定 被引量:1
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作者 徐志伟 邓鸿业 +3 位作者 邓玉兰 黄大无 丁桂凤 尚红生 《北京医科大学学报》 CSCD 1993年第6期433-434,共2页
用杂交瘤技术从成年雄性BXSB小鼠胸腺细胞随机制备出1株分泌Ig的单克隆杂交瘤细胞,并对它们所产生的单克隆Ig类别及对自身抗原的反应性进行了鉴定。结果表明,杂交瘤细胞产生的单克隆Ig中,IgG类别的多于IgM类别,显示BXSB小鼠胸腺内产生各... 用杂交瘤技术从成年雄性BXSB小鼠胸腺细胞随机制备出1株分泌Ig的单克隆杂交瘤细胞,并对它们所产生的单克隆Ig类别及对自身抗原的反应性进行了鉴定。结果表明,杂交瘤细胞产生的单克隆Ig中,IgG类别的多于IgM类别,显示BXSB小鼠胸腺内产生各类Ig的浆细胞比例与正常小鼠胸腺内以产生IgM的浆细胞为主的情况不同。此外,BXSB小鼠胸腺内浆细胞产生的Ig仅少数为自身抗体。 展开更多
关键词 胸腺 单克隆 免疫球蛋白 分离 鉴定
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^(99m)Tc标记抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体在体亲梗死心肌放射免疫显像研究 被引量:1
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作者 武强 李小鹰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期175-177,共3页
为探讨99mTc标记抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体 (AMLCA)在体亲梗死心肌放射免疫显像的可行性 ,5只狗静脉注射99mTc AMLCA后 2、4、8、2 4h ,对血液标本和各脏器进行放射性测量和γ像机显像。对 2例心肌梗死狗进行在体99mTc AMLCA心血池... 为探讨99mTc标记抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体 (AMLCA)在体亲梗死心肌放射免疫显像的可行性 ,5只狗静脉注射99mTc AMLCA后 2、4、8、2 4h ,对血液标本和各脏器进行放射性测量和γ像机显像。对 2例心肌梗死狗进行在体99mTc AMLCA心血池显像和99mTc MIBI心肌灌注显像 ,并对其离体心脏进行γ显像和双感兴趣区双核素放射性测量。结果表明 ,注射后 2、4、8、2 4h ,血液99mTc AMLCA放射活性分别是 (5 1 5± 5 2 ) %、(2 7 3± 3 1) %、(12 3± 1 8) %和 (5 6± 0 6 ) % ,心脏放射性分别是 (11 2± 1 2 ) %、(6 7±1 5 ) %、(5 5± 0 9) %和 (2 8± 0 3) % ,注射 2h在体心脏γ显像最清晰 ,以后逐渐衰减 ,注射 2 4h心脏不再显像。心梗狗在体99mTc AML CA心血池显像与99mTc MIBI心肌灌注显像比较 ,前者放射浓聚区与后者放射缺损区吻合 ,其离体心脏γ显像放射性浓聚区TTC染色证实是梗死心肌 ,双感兴趣区双核素放射性测量表明 ,梗死心肌摄取99mTc AMLCA具有特异性。本研究提示 ,99mTc AMLCA在血中清除迅速且能被梗死心肌特异性摄取 ,在体99mTc AMLCA心血池显像能显示梗死心肌 ,99mTc 展开更多
关键词 球蛋白轻链 心肌梗死 放射免疫检测
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