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华蟾毒精和羟基华蟾毒精的人肠内细菌代谢研究 被引量:24
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作者 杨秀伟 邢增涛 +3 位作者 崔景荣 范玉林 赵锐 李向高 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期199-204,共6页
目的 :研究人肠内细菌对蟾酥中主要成分华蟾毒精和羟基华蟾毒精的代谢。方法 :采用体外人肠内细菌粗酶与华蟾毒精和羟基华蟾毒精温孵法 ;根据波谱学和化学数据鉴定代谢产物的结构 ;根据原形化合物和代谢产物的体外抑制人癌细胞系 (HCT 8... 目的 :研究人肠内细菌对蟾酥中主要成分华蟾毒精和羟基华蟾毒精的代谢。方法 :采用体外人肠内细菌粗酶与华蟾毒精和羟基华蟾毒精温孵法 ;根据波谱学和化学数据鉴定代谢产物的结构 ;根据原形化合物和代谢产物的体外抑制人癌细胞系 (HCT 8、KB、BGC、BIU和HeLa)的生长评价其抗肿瘤活性。结果 :华蟾毒精可由人肠内细菌代谢产生去乙酰基华蟾毒精 ;羟基华蟾毒精可由人肠内细菌代谢产生去乙酰基羟基华蟾毒精 ;原形化合物具有强抑制人癌细胞生长的活性 ,而其代谢产物无活性。结论 展开更多
关键词 华蟾毒精 羟基华蟾毒精 肠杆菌 肠球菌 抗肿瘤 代谢
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华蟾毒精气雾剂的研制 被引量:5
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作者 王隶书 程东岩 刘永宏 《中成药》 CAS CSCD 1998年第4期1-2,共2页
以从中药蟾酥中提取分离的单体──华蟾毒精为原料药,制备了华蟾毒精气雾剂,并对其质量标准进行了详细研究。
关键词 华蟾毒精 气雾剂 质量标准
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华蟾毒精通过Wnt/β-catenin信号通路抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的机制研究 被引量:7
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作者 陈丹 李晓武 +1 位作者 张伟斌 吴敏华 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第4期167-171,I0023,共6页
目的探讨华蟾毒精抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。方法使用1.0μmol/L华蟾毒精处理后,检测人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力和迁徙能力。华蟾毒精处理后,通过高通量测序和信号通路富集分析人结直肠癌SW-480细胞... 目的探讨华蟾毒精抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。方法使用1.0μmol/L华蟾毒精处理后,检测人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力和迁徙能力。华蟾毒精处理后,通过高通量测序和信号通路富集分析人结直肠癌SW-480细胞中异常的信号通路。通过实时荧光定量PCR、免疫印迹和分子对接分析华蟾毒精改变人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。结果华蟾毒精处理后,人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力在2、3、4 d时显著下降(P<0.05)。同时,人结直肠癌SW-480细胞的迁移能力显著下降。高通量和信号通路富集分析发现华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后Wnt/β-catenin信号通路中的基因被影响最多。华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后,发现Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后,分离细胞的细胞核和细胞浆发现β-catenin在细胞浆中聚集,很少入核。同时,华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后,磷酸化的β-catenin的蛋白增加。通过分子对接发现华蟾毒精与β-catenin的第332位氨基酸T具有潜在的结合能力。通过CRISPR/CAS9技术敲除人结直肠癌SW-480细胞中的β-catenin,并在敲除了β-catenin的SW-480细胞中分别构建野生型β-catenin和突变型β-catenin T332A持续表达的稳转细胞系。华蟾毒精处理具有野生型β-catenin和突变型β-catenin的人结直肠癌SW-480细胞后,发现在野生型β-catenin细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著下降(P<0.05),而在突变型β-catenin细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著上升(P<0.05)。同时,使用华蟾毒精处理突变型β-catenin的人结直肠癌SW-480细胞后,人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力和细胞迁移能力无显著变化。结论华蟾毒素通过结合β-catenin第332位苏氨酸,增加了β-catenin的磷酸化,抑制了β-catenin进入细胞核的量,降低了Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的转录,最终抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力。 展开更多
关键词 华蟾毒精 WNT Β-CATENIN 结直肠癌 SW-480
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华蟾毒精对胃腺癌细胞MGC-803作用的研究 被引量:1
4
作者 王小亮 宋颖 +5 位作者 田秀丽 何忠梅 王珊 张瑾 邓旭明 宋宇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期48-51,共4页
研究华蟾毒精(cinobufagin,CBG)体外对人胃腺癌细胞MGC-803的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。MTT法测定CBG对胃腺癌MGC-803细胞的生长抑制情况;采用光镜观察CBG对人胃腺癌细胞MGC-803形态的影响;流式细胞术检测CBG对MGC-803细... 研究华蟾毒精(cinobufagin,CBG)体外对人胃腺癌细胞MGC-803的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。MTT法测定CBG对胃腺癌MGC-803细胞的生长抑制情况;采用光镜观察CBG对人胃腺癌细胞MGC-803形态的影响;流式细胞术检测CBG对MGC-803细胞的抑制作用、细胞周期及细胞早期凋亡的影响。一定浓度范围内CBG对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;光镜下可见细胞形态明显发生变化,细胞变圆,分泌颗粒增多,细胞折光性下降,大部分细胞脱壁;流式细胞仪检测MGC-803细胞,G1期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。CBG对MGC-803细胞的抑制作用与诱导其细胞阻滞及凋亡密切相关。 展开更多
关键词 华蟾毒精 抗肿瘤 凋亡 周期阻滞
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华蟾毒精对小鼠免疫细胞活性的影响 被引量:8
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作者 李敬双 孟显华 +2 位作者 刘天明 郝璐 于洋 《现代畜牧兽医》 2014年第6期12-15,共4页
为观察华蟾毒精(CBG)对小鼠免疫细胞活性的影响,本研究采用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能以及小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤作用。结果显示,CBG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原(Con A或LPS... 为观察华蟾毒精(CBG)对小鼠免疫细胞活性的影响,本研究采用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能以及小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤作用。结果显示,CBG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原(Con A或LPS)作用能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖,CBG单独作用可以显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,并能够显著提高小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤作用,表明CBG能够提高小鼠免疫细胞的活性。 展开更多
关键词 华蟾毒精 小鼠 免疫细胞 影响
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双波长薄层扫描法测定风油精中华蟾毒精的含量 被引量:4
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作者 王莉华 陈贞女 杨玉梅 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期279-281,共3页
应用双波长薄层扫描法测定了风油精中蟾酥的含量。特别对蟾酥中含量较高的华蟾毒精进行了定量测定。薄层色谱条件:固定相为硅胶GF254,展开剂为苯-丙酮(7:3);λs=280nm,λR=335nm;回收率为100.6%;... 应用双波长薄层扫描法测定了风油精中蟾酥的含量。特别对蟾酥中含量较高的华蟾毒精进行了定量测定。薄层色谱条件:固定相为硅胶GF254,展开剂为苯-丙酮(7:3);λs=280nm,λR=335nm;回收率为100.6%;RSD为3.9%(n=5)。本法准确简便,也可供其它含蟾酥制剂进行定量分析。 展开更多
关键词 风油 蟾酥 华蟾毒精 双波长薄层扫描法
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华蟾毒精对B16及RMA-S细胞主要组织相容性复合体Ⅰ类分子及其相关基因表达的影响
7
作者 张瑾 史祺云 +3 位作者 程莎 曹淑芳 常豪 宋宇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期71-75,共5页
试验旨在考察华蟾毒精(CBG)单体对B16和RMA-S细胞MHC-Ⅰ类分子及其相关基因表达的影响。通过MTT法检测CBG对B16和RMA-S细胞生长的影响;流式细胞术检测CBG对B16和RMA-S细胞表面MHC-Ⅰ分子表达的影响;荧光定量PCR检测CBG对B16和RMA-S细胞... 试验旨在考察华蟾毒精(CBG)单体对B16和RMA-S细胞MHC-Ⅰ类分子及其相关基因表达的影响。通过MTT法检测CBG对B16和RMA-S细胞生长的影响;流式细胞术检测CBG对B16和RMA-S细胞表面MHC-Ⅰ分子表达的影响;荧光定量PCR检测CBG对B16和RMA-S细胞蛋白酶体相关基因(LMP2、LMP7)和ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白(TAP1、TAP2)基因mRNA表达的影响。结果显示,CBG对B16和RMA-S细胞MHC-Ⅰ表达的影响均不显著(P>0.05),但高浓度CBG可不同程度提高LMP2、LMP7、TAP1、TAP2基因mRNA表达水平。结果表明,CBG可能具有通过上调LMP2、LMP7、TAP1、TAP2基因表达水平来增强肿瘤自身免疫原性的潜能。 展开更多
关键词 华蟾毒精 主要组织相容性复合体I类分子 肿瘤免疫原性
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基于p38MAPK、AMPK探讨华蟾毒精杀伤人肝癌细胞的机制 被引量:3
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作者 曹秀 向远彩 +2 位作者 邓程凤 代荣阳 刘友平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期596-602,共7页
目的 研究华蟾毒精对肝癌细胞系SK-Hep1和HepG2细胞凋亡、DNA损伤的影响及作用机制。方法 取对数生长期肝癌细胞,采用不同浓度(5、10、25、50 nmol/L)华蟾毒精,或干扰p38MAPK/AMPK+华蟾毒精(50 nmol/L)处理肝癌细胞,乳酸脱氢酶(LDH)法... 目的 研究华蟾毒精对肝癌细胞系SK-Hep1和HepG2细胞凋亡、DNA损伤的影响及作用机制。方法 取对数生长期肝癌细胞,采用不同浓度(5、10、25、50 nmol/L)华蟾毒精,或干扰p38MAPK/AMPK+华蟾毒精(50 nmol/L)处理肝癌细胞,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞毒性,Western blot法检测凋亡标志蛋白PARP、DNA损伤标志蛋白γ-H2AX以及p-p38MAPK、p-AMPK蛋白表达。结果 与对照组比较,华蟾毒精处理后肝癌细胞PARP、γ-H2AX、p-p38MAPK及p-AMPK蛋白表达均呈现剂量和时间依赖性增加(P<0.05),可引起肝癌细胞死亡(P<0.05);下调p38MAPK基因表达后,华蟾毒精诱导的肝癌细胞PARP、γ-H2AX蛋白表达均降低(P<0.05),但p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);下调AMPK基因表达后,华蟾毒精诱导的肝癌细胞PARP、γ-H2AX以及p-p38MAPK蛋白表达均升高(P<0.05),肝癌细胞死亡率增加(P<0.05)。结论 华蟾毒精可同时激活肝癌细胞中p38MAPK和AMPK表达;激活的p38MAPK可促进华蟾毒精诱导的肝癌细胞凋亡和DNA损伤;而激活的AMPK可抑制华蟾毒精诱导的肝癌细胞凋亡和DNA损伤;人肝癌细胞中华蟾毒精激活p38MAPK的力度大于AMPK,最终达到杀伤肿瘤的作用。 展开更多
关键词 华蟾毒精 肝癌细胞 凋亡 DNA损伤 P38MAPK AMPK
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华蟾毒精对小鼠巨噬细胞功能的影响 被引量:1
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作者 孟显华 于洋 +3 位作者 郝璐 刘天明 付越 李敬双 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第8期61-65,共5页
【目的】阐明华蟾毒精(CBG)对巨噬细胞功能的影响,为CBG的开发和利用提供理论依据。【方法】利用Balb/c小鼠制备与纯化腹腔巨噬细胞,采用不同质量浓度(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L)CBG作用于巨噬细胞,采用MTT法检测CBG对巨噬细胞吞噬金黄色葡... 【目的】阐明华蟾毒精(CBG)对巨噬细胞功能的影响,为CBG的开发和利用提供理论依据。【方法】利用Balb/c小鼠制备与纯化腹腔巨噬细胞,采用不同质量浓度(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L)CBG作用于巨噬细胞,采用MTT法检测CBG对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的影响;采用Griess法检测CBG对巨噬细胞分泌NO的影响;采用ELISA法检测CBG对巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α和GM-CSF的影响。【结果】CBG质量浓度为1.0,1.5和2.0mg/L组均能极显著提高巨噬细胞的吞噬功能;CBG质量浓度为0.5 mg/L组能显著促进巨噬细胞NO的分泌,而1.0,1.5和2.0mg/L CBG组均能极显著促进巨噬细胞NO的分泌;CBG质量浓度为1.0,1.5和2.0mg/L组均能极显著促进巨噬细胞IL-6的分泌;1.0mg/L CBG组能显著促进巨噬细胞TNF-α的分泌,1.5和2.0mg/L CBG组均能极显著促进巨噬细胞TNF-α的分泌;CBG质量浓度为0.5,1.0,1.5和2.0mg/L组均能极显著促进巨噬细胞GM-CSF的分泌。【结论】CBG能提高巨噬细胞的吞噬功能和分泌功能,说明CBG具有良好的抗炎、抗肿瘤和提高免疫等作用。 展开更多
关键词 华蟾毒精 巨噬细胞 吞噬功能 分泌功能
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华蟾毒精对小鼠免疫功能影响的体外研究
10
作者 宋宇 姜峰 +4 位作者 王大成 朱仝飞 韩小虎 赵文杰 邓旭明 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第10期1189-1189,共1页
AIM: To investigate the immunoregulatory effects of cinobufagin from the chloroform extract of Venenum Bufonis, a famous traditional Chinese medicine in vitro. METHODS: Proliferation of the splenic lymphocytes in Balb... AIM: To investigate the immunoregulatory effects of cinobufagin from the chloroform extract of Venenum Bufonis, a famous traditional Chinese medicine in vitro. METHODS: Proliferation of the splenic lymphocytes in Balb/c mice was measured by MTT assay. The metaboilic level and phagotrophic activity of PMΦ were also determined by MTT assay. The expressions of CD4 and CD8 and cell cycle of the splenic lymphocytes were detected by flow cytometry. RESULTS: Administration of cinobufagin or coadministration with Con A or LPS increased the cell proliferation and the percentage of S phase cells in the splenic lymphocytes at a dose-dependent manner(P<0.05 or P<0.01). Cinobufagin also enhanced the metabolic capability of MTT and the phagocytosis function of PMΦ(P<0.05 or P<0.01). In addition, it was found that the single administration of cinobufagin or coadministration with Con A or LPS also could increase expressions of CD4 and CD8 in T lymphocytes(P<0.05 or P<0.01). CONCLUSION: Single administration of cinobufagin or coadministration with Con A or LPS could enhance the reactive ability to the splenic lymphocytes and PMΦ in mice. The data indicate that the immunoregulatory effect of cinobufagin is related to the increased expression of CD4+ and CD8+ in DP (double positive) phenotype and S phase cells of T lymphocytes. 展开更多
关键词 华蟾毒精 小鼠 免疫功能 体外研究
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中药对vMDV型强毒诱发的免疫抑制鸡免疫增强作用的研究 被引量:6
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作者 宋依 李敬双 +2 位作者 安妮 冯慧慧 于洋 《饲料研究》 CAS 2016年第24期6-10,30,共6页
试验探讨华蟾毒精、黄芪、党参、银杏果肉、淫羊藿及甘草组成的中药提取物对MDV-Ⅰ型强毒(vMDV)诱发的免疫抑制鸡只免疫增强作用,为开发中药免疫增强剂提供依据。试验分别用315只1日龄海兰褐仔公鸡和315只1日龄无特定病原体(SPF)白来航... 试验探讨华蟾毒精、黄芪、党参、银杏果肉、淫羊藿及甘草组成的中药提取物对MDV-Ⅰ型强毒(vMDV)诱发的免疫抑制鸡只免疫增强作用,为开发中药免疫增强剂提供依据。试验分别用315只1日龄海兰褐仔公鸡和315只1日龄无特定病原体(SPF)白来航雏鸡感染vMDV诱发免疫抑制,检测华蟾毒精和中药提取物对鸡只的免疫增强作用。试验结果显示,华蟾毒精和中药提取物均可显著提高新城疫病红细胞凝集抑制试验(NDV HI)和禽流感H5亚型病毒红细胞凝集抑制试验(H5-AIV HI)抗体滴度(P<0.05),说明华蟾毒精和中药提取物对vMDV诱发免疫抑制状态下的鸡只具有免疫增强作用。 展开更多
关键词 华蟾毒精 中药提取物 免疫抑制 MDV-I型强 体液免疫
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