目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度,HE染色...目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度,HE染色法检测缺血脑组织神经细胞损伤状况和炎症细胞浸润程度;高效液相色谱法检测急性期小鼠脑组织Hcy表达;免疫组织化学染色、Western blot、real time RT-PCR法检测小鼠脑组织MCP-1表达。Transwell小室检测巨噬细胞迁移程度,TUNEL法检测Hcy对内皮细胞影响;利用MCP-1中和抗体观察对巨噬细胞迁移的影响。结果:与假手术组比较,模型组小鼠右侧大脑半球梗死明显,缺血脑组织损伤严重,神经细胞死亡并伴有大量炎症细胞浸润;Hcy水平显著升高,MCP-1蛋白和mRNA表达均明显增加。Hcy刺激小鼠脑血管内皮细胞后可诱导NF-κB(p65)入核,促进巨噬细胞迁移,促进内皮细胞凋亡,给予NF-κB(p65)抑制剂后MCP-1生成减少;MCP-1中和抗体明显抑制巨噬细胞迁移。结论:Hcy、MCP-1与脑缺血再灌注炎性反应相关,且Hcy可能通过NF-κB通路促进MCP-1表达,发挥诱导巨噬细胞浸润作用,加重脑缺血损伤。展开更多
目的探讨半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3在无菌性股骨头坏死(avascular/aseptic necrosis of femoral head,ANFH)进展过程中的表达及意义。方法21例(22髋)ANFH取股骨头病灶周围骨松质,其中早期ANFH组(6髋),中期ANFH组(8髋),晚期ANFH...目的探讨半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3在无菌性股骨头坏死(avascular/aseptic necrosis of femoral head,ANFH)进展过程中的表达及意义。方法21例(22髋)ANFH取股骨头病灶周围骨松质,其中早期ANFH组(6髋),中期ANFH组(8髋),晚期ANFH组(8髋);另取19例(19髋)新鲜股骨颈骨折的股骨头对应部位骨松质为对照组。采用原位末端标记(TUNEL)法、空骨陷窝计数法检测细胞凋亡水平,比色法检测股骨头组织Caspase-3活性。结果骨陷窝空虚百分率(F=45.43,P=0.000)、成骨细胞凋亡率(F=120.86,P=0.000)等凋亡指标均随ANFH临床分期进展而显著升高,ANFH早、中期组显著高于对照组(q=18.899,P<0.05;q=6.398,P<0.05),但并不随着ANFH病变进展而增强,而呈现进行性下降;ANFH晚期组Caspase-3活性与对照组Caspase-3活性无统计学差异(q=2.021,P>0.05)。Caspase-3活性与细胞凋亡率统计学相关性不显著(r=0.126,P=0.425)。结论在ANFH进展过程中,Caspase-3可能不是细胞凋亡的主要执行分子;Caspase-3在ANFH进展中可能发挥非凋亡作用。展开更多
目的：探讨长期失神经支配环杓后肌形态学及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）表达水平的变化，为晚期喉神经修复选择时限提供参考。方法45例不同时间喉返神经损伤患者的环杓后肌标本按神经损伤时间分为3组：3～6个月（18例）、7...目的：探讨长期失神经支配环杓后肌形态学及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）表达水平的变化，为晚期喉神经修复选择时限提供参考。方法45例不同时间喉返神经损伤患者的环杓后肌标本按神经损伤时间分为3组：3～6个月（18例）、7～12个月（15例）、13～24个月（12例）；取行喉全切除术喉癌患者未受肿瘤侵犯侧的正常环杓后肌标本作为正常对照组（12例），各组标本均通过 H E染色观察肌肉形态，通过免疫组化染色、Western blot观察环杓后肌Caspase－3表达的变化趋势。结果随着失神经时间的延长，环杓后肌肌纤维细胞有不同程度的变性，肌细胞核内移、集中，呈串珠状排列。失神经各组Caspase－3在肌细胞核均有表达，3～6个月组表达量最高，其他各组逐渐下降，而对照组基本无表达。Western blot结果显示，对照组、失神经3～6个月、7～12个月、13～24个月组Caspase－3的相对表达量分别为1．30±0．03、20．78±0．11、11．33±0．43、3．14±0．17，失神经3～6个月组为对照组的21倍，7～12个月组为对照组的11倍，13～24个月组为对照组的3倍。结论失神经支配1年内是喉肌凋亡较严重时期，以后凋亡速度减慢，喉神经修复应尽量在1年内进行。展开更多
文摘目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度,HE染色法检测缺血脑组织神经细胞损伤状况和炎症细胞浸润程度;高效液相色谱法检测急性期小鼠脑组织Hcy表达;免疫组织化学染色、Western blot、real time RT-PCR法检测小鼠脑组织MCP-1表达。Transwell小室检测巨噬细胞迁移程度,TUNEL法检测Hcy对内皮细胞影响;利用MCP-1中和抗体观察对巨噬细胞迁移的影响。结果:与假手术组比较,模型组小鼠右侧大脑半球梗死明显,缺血脑组织损伤严重,神经细胞死亡并伴有大量炎症细胞浸润;Hcy水平显著升高,MCP-1蛋白和mRNA表达均明显增加。Hcy刺激小鼠脑血管内皮细胞后可诱导NF-κB(p65)入核,促进巨噬细胞迁移,促进内皮细胞凋亡,给予NF-κB(p65)抑制剂后MCP-1生成减少;MCP-1中和抗体明显抑制巨噬细胞迁移。结论:Hcy、MCP-1与脑缺血再灌注炎性反应相关,且Hcy可能通过NF-κB通路促进MCP-1表达,发挥诱导巨噬细胞浸润作用,加重脑缺血损伤。
文摘目的探讨半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3在无菌性股骨头坏死(avascular/aseptic necrosis of femoral head,ANFH)进展过程中的表达及意义。方法21例(22髋)ANFH取股骨头病灶周围骨松质,其中早期ANFH组(6髋),中期ANFH组(8髋),晚期ANFH组(8髋);另取19例(19髋)新鲜股骨颈骨折的股骨头对应部位骨松质为对照组。采用原位末端标记(TUNEL)法、空骨陷窝计数法检测细胞凋亡水平,比色法检测股骨头组织Caspase-3活性。结果骨陷窝空虚百分率(F=45.43,P=0.000)、成骨细胞凋亡率(F=120.86,P=0.000)等凋亡指标均随ANFH临床分期进展而显著升高,ANFH早、中期组显著高于对照组(q=18.899,P<0.05;q=6.398,P<0.05),但并不随着ANFH病变进展而增强,而呈现进行性下降;ANFH晚期组Caspase-3活性与对照组Caspase-3活性无统计学差异(q=2.021,P>0.05)。Caspase-3活性与细胞凋亡率统计学相关性不显著(r=0.126,P=0.425)。结论在ANFH进展过程中,Caspase-3可能不是细胞凋亡的主要执行分子;Caspase-3在ANFH进展中可能发挥非凋亡作用。
文摘目的：探讨长期失神经支配环杓后肌形态学及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）表达水平的变化，为晚期喉神经修复选择时限提供参考。方法45例不同时间喉返神经损伤患者的环杓后肌标本按神经损伤时间分为3组：3～6个月（18例）、7～12个月（15例）、13～24个月（12例）；取行喉全切除术喉癌患者未受肿瘤侵犯侧的正常环杓后肌标本作为正常对照组（12例），各组标本均通过 H E染色观察肌肉形态，通过免疫组化染色、Western blot观察环杓后肌Caspase－3表达的变化趋势。结果随着失神经时间的延长，环杓后肌肌纤维细胞有不同程度的变性，肌细胞核内移、集中，呈串珠状排列。失神经各组Caspase－3在肌细胞核均有表达，3～6个月组表达量最高，其他各组逐渐下降，而对照组基本无表达。Western blot结果显示，对照组、失神经3～6个月、7～12个月、13～24个月组Caspase－3的相对表达量分别为1．30±0．03、20．78±0．11、11．33±0．43、3．14±0．17，失神经3～6个月组为对照组的21倍，7～12个月组为对照组的11倍，13～24个月组为对照组的3倍。结论失神经支配1年内是喉肌凋亡较严重时期，以后凋亡速度减慢，喉神经修复应尽量在1年内进行。
