半胱氨酸天冬氨酸酶在过氧化氢诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡中的表达 被引量：4

1

作者 王凯军 姚克 +2 位作者 徐雯 吴仁毅 戴南平 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第6期502-505,共4页

目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase 3)在氧化损伤致大鼠晶状体上皮细胞凋亡过程中的表达及意义。方法 离体大鼠晶状体于MEM培养液中培养,实验组加入终浓度为2 mmol/L的过氧化氢(H2O2),对照组不加H2O2,观察培养过程中两组晶状体混浊程... 目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase 3)在氧化损伤致大鼠晶状体上皮细胞凋亡过程中的表达及意义。方法 离体大鼠晶状体于MEM培养液中培养,实验组加入终浓度为2 mmol/L的过氧化氢(H2O2),对照组不加H2O2,观察培养过程中两组晶状体混浊程度;透射电镜下观察晶状体上皮细胞超微结构改变;免疫组织化学方法测定细胞中caspase 3表达。 结果在H2O2作用下随培养时间延长,品状体混浊度加重,伴随晶状体上皮细胞凋亡增加;caspase 3表达量随细胞凋亡及晶状体混浊度的增加而增加。结论 晶状体上皮细胞凋亡是氧化损伤诱发白内障模型的细胞学基础;caspase 3可能参与晶状体上皮细胞凋亡和白内障的形成,在白内障的发病机制中占有重要地位。 展开更多

关键词 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸酶 透射电镜 过氧化氢 晶状体上皮细胞 免疫组化 动物实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

半胱氨酸天冬氨酸酶3在遗传性视网膜变性中的表达(英文)

2

作者 杜 鹃 朱秀安 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第4期307-311,共5页

目的 观察半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase 3）mRNA在RCS大鼠视网膜中的表达,分析caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO对视细胞凋亡的影响。方法 应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测RCS大鼠出生后不同时间视网膜中caspase3 mRNA的表达。... 目的 观察半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase 3）mRNA在RCS大鼠视网膜中的表达,分析caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO对视细胞凋亡的影响。方法 应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测RCS大鼠出生后不同时间视网膜中caspase3 mRNA的表达。应用TUNEL方法检测玻璃体内注射Ac-DEVD-CHO后视细胞凋亡的改变。结果RCS大鼠出生后14天至60天视网膜 caspase 3 mRNA均有表达,25天水平明显升高,达到高峰。SD大鼠视网膜15至60天的表达量无明显差异,与RCS大鼠14天水平接近。caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO能显著抑制视细胞凋亡。结论 caspase 3可能在 RCS大鼠视网膜变性视细胞凋亡中起关键作用。 展开更多

关键词 遗传性视网膜变性 半胱氨酸天冬氨酸酶3 信使核糖核酸

在线阅读 下载PDF 职称材料

丁酸诱导结肠癌细胞凋亡机制的实验研究 被引量：1

3

作者 燕敏 陈尔真 +2 位作者 曹伟新 费旭峰 陈雪华 《肠外与肠内营养》 CAS 2005年第5期268-271,275,共5页

目的:探讨膳食纤维在结肠中的酵解产物丁酸(butyrate)诱导人结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法:人传代结肠癌细胞株SW 1116经不同浓度(0、2、3、4、7和10 mmol/L)丁酸处理后,在不同时段(6、24、48和72 h)分别收集细胞,用RT-PCR和W estern ... 目的:探讨膳食纤维在结肠中的酵解产物丁酸(butyrate)诱导人结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法:人传代结肠癌细胞株SW 1116经不同浓度(0、2、3、4、7和10 mmol/L)丁酸处理后,在不同时段(6、24、48和72 h)分别收集细胞,用RT-PCR和W estern B lotting检测肿瘤细胞bcl-2和bax基因及其蛋白表达的变化,并用流式细胞仪和荧光定量法分别测定其p53蛋白浓度和caspase-3活性的变化。结果:实验过程中,肿瘤细胞的bc l-2 mRNA及其蛋白均无表达,但随着培养液中丁酸浓度的不断增加和培养时间的延长,其bax mRNA及其蛋白的表达则逐渐增强,同时伴有p53蛋白浓度和caspase-3活性的增加。结论:丁酸以p53依赖方式通过上调肿瘤细胞bax mRNA及其蛋白的表达而诱导SW 1116细胞凋亡。 展开更多

关键词 丁酸 结肠癌 细胞凋亡 BCL-2/BAX MRNA 半胱氨酸天冬氨酸酶-3

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输方法的建立 被引量：1

4

作者 朱飞艳 赵耀博 +7 位作者 赵红芳 魏太云 程文杰 刘凯 保岳宵 娄亚玲 魏红江 徐凯祥 《器官移植》 北大核心 2025年第2期272-279,共8页

目的 建立基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输的方法。方法 以8基因修饰猪为实验动物,肾脏获取前通过血液学检查猪的健康状况,影像学检查肾脏血管结构。肾脏获取后对猪肾脏进行灌注,将猪肾打包后放入粘贴“器官运输专用”标识的... 目的 建立基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输的方法。方法 以8基因修饰猪为实验动物,肾脏获取前通过血液学检查猪的健康状况,影像学检查肾脏血管结构。肾脏获取后对猪肾脏进行灌注,将猪肾打包后放入粘贴“器官运输专用”标识的低温保存箱中,与运输部门沟通运输流程后跨省运输。采用苏木素-伊红(HE)染色、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)荧光染色和酶联免疫吸附试验(ELISA)评估猪肾病理损伤情况。结果 术前检查8基因修饰猪的血清肌酐73.2μmol/L、血尿素氮2.8 mmol/L、血红蛋白116 g/L,均在正常范围内,提示肾功能正常;CT造影显示猪肾脏无病变,血管无扩张、狭窄或过早分支的情况;从8基因修饰猪获取左、右肾时间共计(125±10)min,出血量为(20±2)mL,热缺血时间分别为3 min和7 min;左、右肾灌注修整时间分别为36 min和41 min,灌注后双肾色白质润;冷保存运输时间为8 h,HE染色结果显示肾脏保存至8 h时部分肾小球发生皱缩,周围肾小管管腔向内轻微凹陷肿胀并有部分内膜脱落,有微小空泡形成;肾脏组织中半胱氨酸天冬氨酸酶3信使RNA水平在冷保存2 h后随时间延长逐渐升高(P<0.05);TUNEL荧光染色显示冷保存至8 h仅有少量细胞凋亡,这与0 h相比无差异(P>0.05)。ELISA结果显示保存液乳酸脱氢酶(LDH)和肌酐含量保持相对稳定,但肾损伤分子1(KIM-1)含量随保存时间延长逐渐升高,提示猪肾脏有轻微损伤。结论 通过建立基因修饰供体猪的肾脏获取、灌注、保存和运输方法,可有效可靠地将基因修饰猪肾脏用于异种肾脏移植。 展开更多

关键词 肾脏 异种移植 基因修饰猪 获取 灌注 保存 运输 半胱氨酸天冬氨酸酶3

在线阅读 下载PDF 职称材料

马齿苋多糖干预大鼠溃疡性结肠炎Caspase-3 Caspase-8表达的研究 被引量：29

5

作者 潘锋 张涛 陈建永 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第8期1639-1641,共3页

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜上皮细胞凋亡及其凋亡关键酶Caspase-3、Caspase-8的表达,以及马齿苋多糖对上述指标的影响,探讨马齿苋多糖干预溃疡性结肠炎的效应机制。方法:48只雄性SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、治疗组,... 目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜上皮细胞凋亡及其凋亡关键酶Caspase-3、Caspase-8的表达,以及马齿苋多糖对上述指标的影响,探讨马齿苋多糖干预溃疡性结肠炎的效应机制。方法:48只雄性SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、治疗组,对照组,每组12只。用5%2,4,6TNBs100mg/kg灌肠建立大鼠UC模型,第3天开始,除正常组外,各组分别给予等剂量0.9%氯化钠、马齿苋多糖,惠迪(美沙拉嗪)处理,连续给药7天后处死动物。应用HE染色结合肉眼评价各组大鼠组织病理学变化;应用TUNEL染色技术检测结肠上皮细胞凋亡率;应用免疫组化染色技术检测Caspase-3、Caspase-8阳性表达。结果:结肠组织形态学评分表明,治疗组与对照组比较,无统计学意义(P>0.05);治疗组与模型组相比,有统计学意义(P<0.01)。治疗组结肠黏膜上皮细胞凋亡呈下降趋势,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,无统计学意义(P>0.05)。治疗组Caspase-3、Caspase-8蛋白阳性表达减少,与模型组比较,有统计学意义(P>0.05);与对照组比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:马齿苋多糖可能通过下调结肠黏膜上皮细胞凋亡关键调控酶Caspase-3、Caspase-8的表达,延缓肠上皮细胞凋亡,促进肠黏膜屏障修复,发挥缓解溃疡性结肠炎的效应。 展开更多

关键词 马齿苋多糖 溃疡性结肠炎 半胱氨酸天冬氨酸酶-3 半胱氨酸天冬氨酸酶-8

在线阅读 下载PDF 职称材料

牵张性脊髓损伤后神经细胞中Caspase-3表达及其作用的实验研究 被引量：16

6

作者 刘雷 裴福兴 +2 位作者 唐康来 杨柳 李起鸿 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2005年第5期296-299,i001,共5页

目的:观察大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓神经细胞中半胱氨酸天冬氨酶3(Caspase-3)的表达及其在神经细胞凋亡中的作用.方法:大鼠脊髓T13～L2经牵张损伤,皮层体感诱发电位监测P1-N1波幅下降至术前波幅70%后维持10min,分别于术后6h、1、4、7、1... 目的:观察大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓神经细胞中半胱氨酸天冬氨酶3(Caspase-3)的表达及其在神经细胞凋亡中的作用.方法:大鼠脊髓T13～L2经牵张损伤,皮层体感诱发电位监测P1-N1波幅下降至术前波幅70%后维持10min,分别于术后6h、1、4、7、14、21d处死取材.采用流式细胞仪、原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组织化学检测等方法观察大鼠脊髓神经细胞中Caspase-3表达变化及神经细胞凋亡情况,测定Caspase-3活性.结果:脊髓损伤后神经细胞凋亡率、TUNEL阳性细胞数、Caspase-3免疫组织化学阳性表达及Caspase-3活性测定均较空白对照组及椎板切除组显著升高(P＜0.05或0.01),前三项指标改变趋势大致相同,均为术后7d达高峰,而Caspase-3活性则术后4d达高峰.结论:大鼠牵张性脊髓损伤后神经细胞中Caspase-3表达增高、Caspase-3活性增强,是检测神经细胞凋亡的早期生物学指标,对认识脊髓损伤机制具有一定的意义. 展开更多

关键词 牵张性 脊髓损伤 半胱氨酸天冬氨酸酶3 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎caspase-3影响的研究 被引量：8

7

作者 谢建群 张涛 +6 位作者 郑昱 马贵同 陆雄 薛筠 施斌 徐海珍 袁建业 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期340-343,共4页

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控关键酶caspase-3的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓(马齿苋、青黛、三七、五倍子)治疗溃疡病性结肠炎的作用机制。方法:64只SD大鼠随机分为4组,分别为正常... 目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控关键酶caspase-3的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓(马齿苋、青黛、三七、五倍子)治疗溃疡病性结肠炎的作用机制。方法:64只SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、SASP组、清肠栓组,每组各16只。除正常组外,其余大鼠用5%2,4,6-三硝基苯磺酸100 mg/kg灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型后,分别予0.9%生理盐水、SASP、清肠栓处理7 d后,处死大鼠。运用电镜,免疫组化染色、RT-PCR、Western-blot等技术,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞caspase-3的表达。结果:清肠栓组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡呈上升趋势;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上caspase-3的表达率上升,与模型蛆相比(P<0.01)。结论:清肠栓可能增加结肠黏膜淋巴细胞凋亡效应酶caspase-3表达,诱导结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡,降低淋巴细胞毒作用,缓解大鼠溃疡性结肠炎效应。 展开更多

关键词 清肠栓 溃疡性结肠炎 结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸酶一3

在线阅读 下载PDF 职称材料

甲钴胺对大鼠缺血-再灌注损伤神经细胞凋亡及Caspase-3 mRNA表达的影响 被引量：2

8

作者 苏建华 陈玉芳 +2 位作者 唐金荣 丁新生 肖杭 《医药导报》 CAS 2016年第6期574-578,共5页

目的探讨甲钴胺对缺血-再灌注大鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)mRNA表达的影响。方法将大鼠按随机原则分为假手术组、模型对照组、尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组,每组30只。假手术组与模型对照组分别灌胃给予0.9... 目的探讨甲钴胺对缺血-再灌注大鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)mRNA表达的影响。方法将大鼠按随机原则分为假手术组、模型对照组、尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组,每组30只。假手术组与模型对照组分别灌胃给予0.9%氯化钠溶液20 m L·kg^(-1)·d^(-1);尼莫地平组灌胃尼莫地平1 mg·kg^(-1)·d^(-1);甲钴胺小、大剂量组分别灌胃甲钴胺50,100μg·kg^(-1)·d^(-1),给药1周。采用线栓法栓塞大脑中动脉3 h制作大鼠脑缺血-再灌注模型;观察再灌注24 h后神经功能缺损评分,于6,12,24 h用TUNEL法检测顶叶皮质细胞凋亡、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Caspase-3 mRNA的表达。结果模型对照组神经功能缺损评分为(2.70±0.52)分,尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组分别为(1.30±0.51),(2.20±0.75),(1.30±0.81)分,与模型对照组比较,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与尼莫地平组比较,甲钴胺大剂量组差异无统计学意义(P>0.05),与甲钴胺小剂量组比较,甲钴胺大剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。尼莫地平组、甲钴胺小、大剂量组各时间点神经细胞凋亡较模型对照组明显减少;甲钴胺大剂量组24 h时较尼莫地平组差异有统计学意义(P<0.01);6~24 h较甲钴胺小剂量组差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。假手术组Caspase-3 mRNA少量表达,与假手术组比较,模型对照组6~24 h Caspase-3 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,尼莫地平组、甲钴胺大、小剂量组6~24 h Caspase-3 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与尼莫地平组比较,甲钴胺大、小剂量组各时间点Caspase-3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05),与甲钴胺小剂量组比较,甲钴胺大剂量组于24 h差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲钴胺对脑缺血-再灌注损伤保护机制与抑制Caspase-3 mRNA表达有关,且以大剂量效果较好。 展开更多

关键词 甲钴胺 脑缺血-再灌注 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸酶3

在线阅读 下载PDF 职称材料

二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化 被引量：9

9

作者 魏红霞 李陈广 +4 位作者 梁译丹 徐丽慧 潘浩 何贤辉 欧阳东云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期474-479,共6页

目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L^(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔... 目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L^(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔巨噬细胞大量产生;利用LPS+ATP处理激活炎症小体,采用碘化丙锭(PI)染色法检测二甲双胍对LPS+ATP诱导的腹腔巨噬细胞焦亡的影响,免疫印迹法检测该细胞胞内及上清中IL^(-1)β和caspase-1的表达水平;免疫荧光技术检测巨噬细胞P_2X_7嘌呤能ATP受体7(P_2X_7R)的亚细胞分布及荧光强度。结果单独二甲双胍不会导致LPS激活细胞发生焦亡,但二甲双胍呈剂量依赖性促进LPS+ATP诱导的细胞焦亡;免疫印迹法显示,在蛋白水平上,单独LPS(或LPS+二甲双胍)刺激不能诱导细胞释放成熟IL^(-1)β(17 ku)到细胞外;当加入ATP刺激后,成熟IL^(-1)β和活化caspase-1(10 ku)释放到胞外;而二甲双胍可以剂量依赖性地促进LPS激活、ATP刺激下腹腔巨噬细胞释放成熟IL^(-1)β和活化caspase-1的水平。结论二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化,提高caspase-1活化和成熟IL^(-1)β释放,促进炎症反应。 展开更多

关键词 二甲双胍 细胞焦亡 腹腔巨噬细胞 白细胞介素-1Β 半胱氨酸天冬氨酸酶-1 炎症小体

在线阅读 下载PDF 职称材料

RCS大鼠视网膜中caspase 3 mRNA的表达 被引量：3

10

作者 杜鹃 朱秀安 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第1期5-8,共4页

目的观察半胱氨酸天冬氨酸酶３　（ｃａｓｐａｓｅ　３）　ｍＲＮＡ在ＲＣＳ大鼠视网膜中的表达，分析ｃａｓｐａｓｅ　３　ｍＲＮＡ表达与ＲＣＳ大鼠视网膜发育的关系。　方法应用逆转录－多聚酶连反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＲＣＳ大鼠... 目的观察半胱氨酸天冬氨酸酶３　（ｃａｓｐａｓｅ　３）　ｍＲＮＡ在ＲＣＳ大鼠视网膜中的表达，分析ｃａｓｐａｓｅ　３　ｍＲＮＡ表达与ＲＣＳ大鼠视网膜发育的关系。　方法应用逆转录－多聚酶连反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＲＣＳ大鼠出生后不同时间视网膜中ｃａｓｐａｓｅ　３　ｍＲＮＡ的表达。结果ＲＣＳ大鼠出生后１４～６０天视网膜ｃａｓｐａｓｅ　３　ｍＲＮＡ均有表达，２５天ｃａｓｐａｓｅ　３　ｍＲＮＡ水平明显升高，达到高峰。ＳＤ大鼠视网膜１５～６０天的表达量无明显差异，与ＲＣＳ大鼠１４天水平接近。结论ｃａｓｐａｓｅ　３　ｍＲＮＡ的表达升高可能对ＲＣＳ大鼠视网膜变性中细胞凋亡起着关键的作用。 展开更多

关键词 遗传性视网膜变性 半胱氨酸天冬氨酸酶3 信使核糖核酸 IRD CASPASE3 RCS大鼠 mRNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡及其相关调控因子变化的研究 被引量：3

11

作者 赵云 王凤君 +1 位作者 王裴 汪仕良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1631-1634,共4页

目的　探讨大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡情况及相关调控因子变化的关系。方法　Wistar大鼠按随机数字表法分为烧伤组与正常对照组。动物于伤后 6、12h、1、3、5d处死 ,流式细胞仪检测肠粘膜上皮细胞凋亡数 ,TUNEL法检测细胞凋亡形态学... 目的　探讨大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡情况及相关调控因子变化的关系。方法　Wistar大鼠按随机数字表法分为烧伤组与正常对照组。动物于伤后 6、12h、1、3、5d处死 ,流式细胞仪检测肠粘膜上皮细胞凋亡数 ,TUNEL法检测细胞凋亡形态学变化 ,RT PCR法检测肠粘膜bcl 2mRNA表达的变化 ,荧光法检测肠上皮细胞caspase 3酶活性。结果　烧伤后 6h至 5d肠上皮凋亡细胞数较正常组明显增加 ;TUNNEL检测显示 :烧伤后 6h阳性细胞数较正常组即有增加 ,伤后 1d表达最强 ,以后稍有减弱 ,但仍强于伤前 ;肠粘膜bcl 2mRNA表达在伤后 12h开始低于正常 ,至伤后 5d仍低于正常 ,烧伤后大鼠肠上皮细胞caspase 3的活性在伤后 1d明显升高 ,伤后 3d到峰值 ,然后迅速下降至正常范围内。caspase 3活性变化与细胞凋亡数呈显著的正相关 (r=0 5 6,P <0 0 5 ) ;烧伤后bcl 2mRNA的表达与细胞凋亡数呈显著负相关 (r =-0 72 ,P <0 0 5 )。结论　烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡增加 ,尤以伤后 1、3d最为明显 ,caspase 3 ,bcl 展开更多

关键词 烧伤 肠上皮细胞 细胞凋亡 天冬氨酸半胱氨酸酶-3 BCL-2

在线阅读 下载PDF 职称材料

问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响 被引量：1

12

作者 金丹丹 董海艳 +2 位作者 严杰 李立伟 毛亚飞 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第6期558-563,共6页

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋... 目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。 展开更多

关键词 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶/代谢 钩端螺旋体 问号/致病力 流式细胞术 细胞凋亡 信号传导/caspase

在线阅读 下载PDF 职称材料