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半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂普鲁司特调节SK-N-SH细胞分化 被引量:5
1
作者 彭芳 方三华 +3 位作者 郑晓亮 张纬萍 卢韵碧 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第2期123-129,共7页
目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-S... 目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-SH细胞CysLT1和CysLT2受体的表达;用免疫荧光法观察神经元分化标记物微管相关蛋白(MAP-2)的表达。结果:免疫印迹显示,SK-N-SH表达CysLT1受体和CysLT2受体,CysLT2受体表达较多。形态学结果显示,维A酸、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞发生形态学改变,表现为胞体变小,有明显的突起生长;而LTD4无明显作用。免疫荧光结果显示,在对照组和普鲁司特组MAP-2主要分布于胞体;在维甲酸组MAP-2除了分布于胞体外,还分布于突起。普鲁司特增加MAP-2阳性细胞数。结论:CysLT1受体拮抗剂普鲁司特参与SK-N-SH细胞分化的调节。 展开更多
关键词 白三烯类/治疗应用 受体 白三烯 神经母细胞瘤/病理学 白三烯受体 白三烯D4 普鲁司特 SK—N—SH细胞 细胞分化
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新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定 被引量:5
2
作者 戚玲玲 卢韵碧 +8 位作者 史文珍 赵春贞 张咏梅 陈丽萍 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期357-361,共5页
目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR1... 目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右。结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求。 展开更多
关键词 受体 白三烯 GPR17 白三烯受体 多克隆抗体
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鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化 被引量:6
3
作者 骆江云 张壮 +8 位作者 余舒莹 赵冰 赵春贞 王欣欣 方三华 张纬萍 张丽慧 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期131-138,共8页
目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏... 目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性。用新制备的抗体以Western blotting检测鱼藤酮(0.01~1μmol/L,作用24 h)损伤BV2细胞过程中,BV2细胞上CysLT1受体的表达变化,并以RT-PCR检测验证CysLT1受体mRNA表达水平,同时以免疫组化观察CysLT1受体的亚细胞分布变化。结果:ELISA测定显示,制备的兔抗小鼠CysLT1受体抗体的效价大于1/32728,对CysLT1受体的特异性强,对CysLT2受体和GPR17基本无交叉反应。Western blotting和RT-PCR显示,鱼藤酮作用BV2细胞24 h剂量依赖性诱导CysLT1受体mRNA及蛋白水平表达升高;免疫组化显示在鱼藤酮诱导BV2细胞损伤过程中,随鱼藤酮剂量增加,CysLT1受体发生核移位。结论:制备的CysLT1受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blotting和免疫组化检测的要求;CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的BV2细胞损伤。 展开更多
关键词 受体 白三烯 抗体 鱼藤酮/药理学 白三烯受体 多克隆抗体 BV2小胶质细胞
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5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体及组胺/组胺受体与脑疾病 被引量:5
4
作者 魏尔清 陈忠 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第2期105-110,共6页
脑疾病的神经生物学基础研究,对于疾病防治和脑功能认识都有积极意义。脑疾病涉及面极广,其中,相关的神经调质及其受体近年来受到关注。例如,在脑缺血与外伤等损伤性病变中,脑内5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体系统有明显变化;癫痫、痴呆... 脑疾病的神经生物学基础研究,对于疾病防治和脑功能认识都有积极意义。脑疾病涉及面极广,其中,相关的神经调质及其受体近年来受到关注。例如,在脑缺血与外伤等损伤性病变中,脑内5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体系统有明显变化;癫痫、痴呆等病变中,脑内组胺系统发挥重要的调节作用。深入研究这些变化特点,有助于认识脑疾病发生机制,并研制出新的治疗药物。 展开更多
关键词 5-脂氧酶 白三烯受体 组胺 组胺受体 脑疾病 脑损伤 癫痫
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半胱氨酰白三烯受体1参与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的调节 被引量:2
5
作者 余舒莹 赵冰 +5 位作者 张霞燕 张晓燕 王艳芳 张丽慧 卢韵碧 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期139-145,共7页
目的:观察半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的关系。方法:鱼藤酮及CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特处理PC12细胞后,以MTT方法检测PC12细胞活性变化;以Western blotting检测鱼藤酮处理前后,PC12细胞CysLT1受体的表达变... 目的:观察半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的关系。方法:鱼藤酮及CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特处理PC12细胞后,以MTT方法检测PC12细胞活性变化;以Western blotting检测鱼藤酮处理前后,PC12细胞CysLT1受体的表达变化;不同浓度鱼藤酮处理24 h及3μmol/L鱼藤酮处理不同时间,以免疫细胞化学方法观察CysLT1受体分布变化。结果:鱼藤酮(0.3~30μmol/L)可诱导PC12细胞损伤,孟鲁司特(1、5μmol/L)可显著减轻鱼藤酮诱导的细胞损伤。1~10μmol/L鱼藤酮作用PC12细胞24 h及3μmol/L鱼藤酮处理3 h和24 h,均可诱导CysLT1受体蛋白水平表达升高。鱼藤酮能浓度和时间依赖性引起CysLT1受体从细胞核移位到细胞浆。结论:CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤。 展开更多
关键词 PC12细胞/超微结构 鱼藤酮/药理学 剂量效应关系 药物 白三烯拮抗剂/药理学 受体 白三烯/药物作用 白三烯
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半胱氨酰白三烯受体CysLT1R在大肠癌组织中的表达及临床意义 被引量:2
6
作者 张世强 唐采白 陈卫花 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第3期177-179,247,共4页
目的研究半胱氨酰白三烯受体(CysLT1R)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法选取46例大肠癌、32例癌旁组织、15例腺瘤性息肉手术切除标本,采用免疫组织化学法检测各组织中CysLT1R的表达水平。结果 CysLT1R在... 目的研究半胱氨酰白三烯受体(CysLT1R)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法选取46例大肠癌、32例癌旁组织、15例腺瘤性息肉手术切除标本,采用免疫组织化学法检测各组织中CysLT1R的表达水平。结果 CysLT1R在大肠癌组织、癌旁组织及腺瘤性息肉中的阳性表达率分别为67.39%,40.62%,40.0%,癌组织中CysLT1R的阳性表达率高于癌旁组织、腺瘤性息肉组织(P<0.05)。大肠癌组织中CysLT1R的表达程度与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移及临床分期有关(均P<0.05)。结论 CysLT1R表达与大肠癌分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有关。CysLT1R可能参与大肠癌发生发展。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 白三烯受体 免疫组织化学
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半胱氨酰白三烯受体与脑损伤关系的研究进展 被引量:12
7
作者 张丽慧 赵建波 +2 位作者 王艳芳 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2008年第3期315-320,共6页
近年来发现,半胱氨酰白三烯CysLT1和CysLT2受体参与整体水平脑缺血和脑外伤后神经损伤。CysLT1受体调节脑缺血后血脑屏障通透性增高、血管性脑水肿,介导星形胶质细胞增殖及炎症反应;CysLT2受体调节脑缺血后AQP4表达增加、细胞性脑水肿,... 近年来发现,半胱氨酰白三烯CysLT1和CysLT2受体参与整体水平脑缺血和脑外伤后神经损伤。CysLT1受体调节脑缺血后血脑屏障通透性增高、血管性脑水肿,介导星形胶质细胞增殖及炎症反应;CysLT2受体调节脑缺血后AQP4表达增加、细胞性脑水肿,介导星形胶质细胞损伤;新发现的GPR 17也与脑缺血损伤有密切关系。加深CysLT受体在脑损伤及神经保护中作用的认识,将为CysLT受体作为药物靶点筛选和开发防治脑损伤的药物提供新的途径。 展开更多
关键词 白三烯受体 脑疾病 脑损伤
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半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定 被引量:6
8
作者 陈丽萍 赵春贞 +8 位作者 史文珍 戚玲玲 卢韵碧 张咏梅 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期591-597,共7页
目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot... 目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。 展开更多
关键词 酸/遗传 受体 白三烯/遗传 白三烯受体 CysLT2受体 多克隆抗体
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半胱氨酰白三烯受体调节脑内炎症病变的研究展望 被引量:5
9
作者 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期117-122,共6页
脑内炎症是脑缺血、退行性脑变性疾病等病变的主要特点之一,小胶质细胞是主要的炎症细胞,小胶质细胞激活对于慢性神经功能损伤有重要的影响。半胱氨酰白三烯受体(CysLT1和CysLT2受体以及GPR17)参与这些过程的调节,并且,不同亚型之间可... 脑内炎症是脑缺血、退行性脑变性疾病等病变的主要特点之一,小胶质细胞是主要的炎症细胞,小胶质细胞激活对于慢性神经功能损伤有重要的影响。半胱氨酰白三烯受体(CysLT1和CysLT2受体以及GPR17)参与这些过程的调节,并且,不同亚型之间可能存在相互调节作用。随着这方面研究的深入,将为开发新型治疗药物奠定基础。 展开更多
关键词 炎症 白三烯 受体 白三烯 脑缺血 退行性脑变性疾病 小胶质细胞
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白细胞介素-18与重型病毒性肝炎的相关性及N-乙酰半胱氨酸疗效的研究 被引量:1
10
作者 潘红英 娄国强 +6 位作者 赵年丰 童永喜 吴惟一 卢德荣 俞秀丽 吴锡铭 王宇芳 《抗感染药学》 2003年第3期10-14,共5页
目的 探讨白细胞介素-18(IL-18)在重型病毒性肝炎(重肝)早期中的作用以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)治疗重肝对IL-18水平的影响,为重肝提供新的治疗方法。方法 采用夹心酶联免疫吸咐法(ELISA)分析65例重肝患者血清IL-18、γ-干扰素(γ-IFN)、... 目的 探讨白细胞介素-18(IL-18)在重型病毒性肝炎(重肝)早期中的作用以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)治疗重肝对IL-18水平的影响,为重肝提供新的治疗方法。方法 采用夹心酶联免疫吸咐法(ELISA)分析65例重肝患者血清IL-18、γ-干扰素(γ-IFN)、一氧化氮(NO)和可溶性细胞间粘附分子-1(SICAM-1)的水平表达,以及动态变化;通过NAC治疗(29)例与综合治疗(36例)的自身治疗前、后及治疗后两组中疗效的对比,观察TL-18、γ-IFN、NO和SICAM-1水平表达的变化及相关性。结果重肝患者血清上述四项指标水平较正常对照组有非常显著性差异。NAC治疗组血清上述四项指标自身治疗前、后比较有非常显著性意义。对NAC治疗组四项指标与SB、PA相关性分析发现,治疗后四项指标与SB改变呈显著正相关,与PA改变呈显著负相关。结论 IL-18等细胞物质与重肝具有相关性。NAC可降低上述物质的水平,可用于治疗重肝。 展开更多
关键词 重型病毒性肝炎 白细胞介素-18 Γ-干扰素 一氧化氮 可溶性细胞间粘附分子-1 N-
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氟伐他汀对同型半胱氨酸诱导的凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1表达的影响
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作者 赵颖 赵兴山 +1 位作者 孙华毅 胡文兰 《中国医药导报》 CAS 2016年第18期169-172,共4页
目的探讨氟伐他汀对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)信使核糖核酸(m RNA)表达的影响。方法分离培养HUVECs,分为正常对照组、Hcy刺激组:100μmol/L Hcy与细胞孵育24 h,3种不同浓... 目的探讨氟伐他汀对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)信使核糖核酸(m RNA)表达的影响。方法分离培养HUVECs,分为正常对照组、Hcy刺激组:100μmol/L Hcy与细胞孵育24 h,3种不同浓度的氟伐他汀干预组:分别以不同浓度的氟伐他汀(0.1、1、10μmol/L)预孵育细胞24 h,再与100μmol/L Hcy共同培养24 h,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测LOX-1 m RNA的表达。结果 Hcy显著诱导HUVECs LOX-1 m RNA的表达,氟伐他汀抑制Hcy诱导的LOX-1 m RNA的表达,并呈现一定剂量依赖性。结论 Hcy可能通过LOX-1介导其内皮损伤作用,氟伐他汀可能通过减少LOX-1过度表达发挥其抗动脉粥样硬化作用。 展开更多
关键词 氟伐他汀 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 同型 内皮细胞 动脉粥样硬化
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半胱氨酰白三烯受体2拮抗剂筛选方法的建立及化合物初筛 被引量:4
12
作者 蔡蓓蕾 黄雪琴 +5 位作者 董晓武 方三华 卢韵碧 张纬萍 胡永洲 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期598-604,共7页
目的:建立半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2受体)拮抗剂筛选的细胞模型及方法,初筛系列合成化合物。方法:选用高表达CysLT2受体的大鼠C6胶质瘤细胞,激动剂LTD4攻击后检测细胞内钙浓度变化,作为CysLT2受体拮抗剂的筛选方法,初步筛选有拮抗剂... 目的:建立半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2受体)拮抗剂筛选的细胞模型及方法,初筛系列合成化合物。方法:选用高表达CysLT2受体的大鼠C6胶质瘤细胞,激动剂LTD4攻击后检测细胞内钙浓度变化,作为CysLT2受体拮抗剂的筛选方法,初步筛选有拮抗剂活性的化合物。采用CysLT1/CysLT2受体非选择性拮抗剂Bay u9773和CysLT2受体选择性拮抗剂AP-100984作为参照。结果:RT-PCR鉴定表明C6细胞高表达CysLT2受体。LTD41μmol/L能显著升高C6细胞内钙,其作用约为阳性对照ATP的37.5%。CysLT2受体拮抗剂抑制LTD4诱导的C6细胞内钙升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。化合物中DXW-1、2、13、23、29、30能抑制LTD4诱导的细胞内钙升高。结论:LTD4诱导的C6细胞的钙信号变化可作为CysLT2受体拮抗剂的筛选方法;化合物DXW-1、2、13、23、29、30具有CysLT2受体拮抗活性。 展开更多
关键词 酸/遗传 受体 白三烯/遗传 白三烯 CysLT2受体 受体拮抗剂 钙离子 C6细胞
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半胱氨酰白三烯受体激动剂和拮抗剂对大鼠胶质瘤C6细胞分化的作用 被引量:1
13
作者 蔡蓓蕾 王欣欣 +6 位作者 余舒莹 黄雪琴 张霞燕 方三华 卢韵碧 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期139-144,共6页
目的:探讨半胱氨酰白三烯受体在大鼠胶质瘤C6细胞的分化中的作用。方法:以激动剂LTD4、CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特以及分化诱导剂forskolin处理C6细胞,观察细胞形态及GFAP蛋白表达变化。结果:Forskolin(10μmol/L)可诱导C6细胞形态变化及... 目的:探讨半胱氨酰白三烯受体在大鼠胶质瘤C6细胞的分化中的作用。方法:以激动剂LTD4、CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特以及分化诱导剂forskolin处理C6细胞,观察细胞形态及GFAP蛋白表达变化。结果:Forskolin(10μmol/L)可诱导C6细胞形态变化及GFAP蛋白表达(细胞分化),而LTD4(0.1~100 nmol/L)不能诱导这些变化;单用孟鲁斯特(1μmol/L)无明显作用,但与LTD4(100 nmol/L)合用可诱导C6细胞分化。结论:CysLT2受体可能参与调节大鼠胶质瘤C6细胞的分化。 展开更多
关键词 受体 白三烯 白三烯拮抗剂 乙酸盐类/药理学 大鼠胶质瘤C6细胞 细胞分化 白三烯受体 激动剂 拮抗剂
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N-乙酰半胱氨酸对紫外线损伤大鼠晶状体水通道蛋白-1的影响 被引量:1
14
作者 孙慧 刘丹 《国际眼科杂志》 CAS 2011年第12期2088-2090,共3页
目的:观察N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对紫外线(ultraviolet,UV)损伤的大鼠晶状体水通道蛋白-1(aquaporin protein-1,AQP-1)表达的影响。方法:将健康清洁级SD大鼠的离体透明晶状体随机分为3组,模型组用UV照射,药物组除照... 目的:观察N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对紫外线(ultraviolet,UV)损伤的大鼠晶状体水通道蛋白-1(aquaporin protein-1,AQP-1)表达的影响。方法:将健康清洁级SD大鼠的离体透明晶状体随机分为3组,模型组用UV照射,药物组除照射外另加入NAC,对照组均不采取以上处理。分别培养3,12,24h后观察大鼠晶状体的混浊程度和水化程度;Western-blot法观察AQP-1的表达情况。结果:对照组晶状体高水平表达AQP-1;模型组晶状体低表达AQP-1;药物组较模型组表达较高AQP-1。经统计学分析,模型组与对照组之间AQP-1的表达有显著性差异(P<0.01),模型组和药物组之间AQP-1的表达有显著性差异(3h时P<0.05,12和24h时P<0.01)。结论:UV照射能降低AQP-1的表达,导致白内障,而NAC能通过提高AQP-1的表达保护细胞免受UV损伤,从而减缓白内障的发生。 展开更多
关键词 水通道蛋白-1 N- 白内障
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N-乙酰半胱氨酸对AGEs诱导的HK-2细胞IL-1β、IL-6的抑制作用
15
作者 毛瑞阳 刘毅 张媛元 《中国中西医结合肾病杂志》 2019年第7期607-608,共2页
目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(Nac)对终末糖基化产物(AGEs)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)的抑制作用。方法:将体外培养的HK-2细胞分成正常对照组(NG组)、AGEs组、药物干预组1(N1组)、药物干预组2(N2... 目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(Nac)对终末糖基化产物(AGEs)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)的抑制作用。方法:将体外培养的HK-2细胞分成正常对照组(NG组)、AGEs组、药物干预组1(N1组)、药物干预组2(N2组),培养72 h,应用反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qP CR)方法检测IL-1β和IL-6 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中细胞因子的蛋白浓度。蛋白质印迹法(Western blot)检测NF-κB/p65的含量。结果:NG组、AGEs组、N1组和N2组细胞内IL-1β和IL-6 mRNA和蛋白表达,以及NF-κB/p65含量差异均有统计学意义;与NG组比较,AGEs组细胞内IL-1β和IL-6mRNA和蛋白表达明显增加。N1、N2组较AGEs组表达水平下降,AGEs组NF-κB/p65含量高于其他组,差异均具有统计学意义(均P <0. 05)。结论:AGEs可诱导HK-2细胞表达IL-1β和IL-6,NF-κB信号通路可能参与了此过程。 展开更多
关键词 终末糖基化产物 N- 白细胞介素-1 白细胞介素-6 NF-κB
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N-乙酰半胱氨酸对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响及其与自噬的关系 被引量:3
16
作者 蔡江红 杨国辉 《山东医药》 CAS 2019年第17期40-43,共4页
目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响,并分析其与自噬的关系。方法 取24只雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、NAC组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预组。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,假手术组仅取出盲肠,... 目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响,并分析其与自噬的关系。方法 取24只雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、NAC组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预组。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,假手术组仅取出盲肠,不结扎、穿孔。NAC组于术后1、4、8、12、16、20h分别给予NAC20mg/kg皮下注射,3-MA干预组于术后1h给予自噬抑制剂3-MA10mg/kg腹腔注射;3-MA干预组、假手术组、模型组、NAC组各时间点用等量生理盐水皮下注射。24h后测算肺组织湿/干比重(W/D)评价肺水肿程度,采用HE染色观察肺组织病理变化,ELISA法测定肺组织中TNF-α、IL-6水平,Western blotting法检测肺组织自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin-1表达,qRT-PCR法检测肺组织LC3Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达。结果 与假手术组比较,模型组肺组织W/D增加,肺损伤评分升高,肺组织中TNF-α、IL-6表达升高,肺组织中LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白及mRNA表达升高(P均<0.05);与模型组比较,NAC组肺组织W/D下降,肺损伤评分降低,肺组织中TNF-α、IL-6表达下降,肺组织中LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白及mRNA表达下降(P均<0.05)。3-MA干预组上述指标与NAC组比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 NAC能够减轻脓毒症所致急性肺损伤引起的肺水肿,抑制肺组织炎症反应;其机制可能是通过抑制自噬来发挥肺保护作用。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肺损伤 N- 自噬 3-甲基腺嘌呤 微管相关蛋白1轻链3Ⅱ BECLIN-1
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应用N-乙酰-L-半胱氨酸合成紫色-近红外荧光发射的量子点 被引量:1
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作者 薛冰 邓大伟 +3 位作者 曹洁 郭静 张俊 顾月清 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期456-461,共6页
应用生物活性分子N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)作为配体,采用加热回流和水热合成法制备具有紫色-近红外荧光发射、高质量的水溶性碲化镉量子点(CdTe QD s),并通过紫外可见、荧光分光光度计表征量子点的光学性质,透射电镜(TEM)和粉末X... 应用生物活性分子N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)作为配体,采用加热回流和水热合成法制备具有紫色-近红外荧光发射、高质量的水溶性碲化镉量子点(CdTe QD s),并通过紫外可见、荧光分光光度计表征量子点的光学性质,透射电镜(TEM)和粉末X射线衍射(XRD)表征量子点结构。结果表明,以N-乙酰-L-半胱氨酸为配体可以合成出荧光量子产率为11%-62.4%、荧光发射峰在415-800 nm宽范围内可调的Zn1-xCdxSe和CdTe水溶性量子点。XRD结果表明量子点荧光发射峰与其粒径相关。这是首次应用单一配体——N-乙酰-L-半胱氨酸作为稳定剂,合成具有紫色近红外宽荧光发射的水溶性荧光量子点。用此方法制备的水溶性量子点具有较好的荧光量子产率、较窄的半峰宽以及较强的光稳定性。 展开更多
关键词 水溶性量子点 N--L- 紫色-近红外荧光发射 Zn1-xCdxSe量子点 CDTE量子点
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基于JAK/STAT信号通路探究重组人干扰素α-2b联合乙酰半胱氨酸治疗毛细支气管炎患儿喘息反复发作效果及机制 被引量:9
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作者 王鹏 田姜美子 《临床误诊误治》 CAS 2023年第3期95-99,共5页
目的 基于Janus激酶(JAK)/信号转导与转录活性因子(STAT)信号通路探究重组人干扰素α-2b联合乙酰半胱氨酸治疗毛细支气管炎患儿喘息反复发作效果及机制。方法 选取2020年3月—2022年2月收治的毛细支气管炎患儿156例,依据治疗方案不同分... 目的 基于Janus激酶(JAK)/信号转导与转录活性因子(STAT)信号通路探究重组人干扰素α-2b联合乙酰半胱氨酸治疗毛细支气管炎患儿喘息反复发作效果及机制。方法 选取2020年3月—2022年2月收治的毛细支气管炎患儿156例,依据治疗方案不同分为观察组和对照组2组各78例。观察组予重组人干扰素α-2b联合乙酰半胱氨酸治疗,对照组予乙酰半胱氨酸治疗。比较2组治疗7 d后临床效果及症状和体征消失时间、住院时间,治疗前及治疗7 d后JAK/STAT信号通路关键蛋白[干扰素调节因子9(IRF9)、信号转导与转录活性因子1(STAT1)和信号转导与转录活性因子2(STAT2)]表达及相关细胞因子[白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织型金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)]、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平,以及治疗期间不良反应发生率、治疗后6个月喘息复发率。结果 治疗7 d后,观察组总有效率、IRF9、STAT1、STAT2表达和Treg水平高于对照组;IL-6、MMP-9、TIMP-1和Th17水平低于对照组(P<0.01)。观察组咳嗽、喘憋、喘息、湿啰音消失时间及住院时间均短于对照组(P<0.01)。治疗期间,2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后6个月,观察组喘息复发率低于对照组(P<0.01)。结论 重组人干扰素α-2b联合乙酰半胱氨酸治疗毛细支气管炎患儿喘息反复发作效果显著,可促进症状、体征消失,加速康复进程,降低喘息反复发作风险;机制可能为其抑制IL-6释放,激活JAK/STAT信号通路,促使Th17向Treg转化,增强机体免疫应答,且调控MMP-9、TIMP-1表达,减轻支气管及肺损伤。 展开更多
关键词 毛细支气管炎 喘息 重组人干扰素Α-2B 干扰素调节因子9 信号转导与转录活性因子1 白细胞介素-6 基质金属蛋白酶-9 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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支气管哮喘合并肺炎支原体感染患儿半胱氨酰白三烯、白细胞介素-6、外周血CD25水平及意义
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作者 龚玉勇 《河南医学研究》 CAS 2020年第25期4687-4689,共3页
目的探讨支气管哮喘合并肺炎支原体(MP)感染患儿半胱氨酰白三烯(CysLTs)、白细胞介素-6(IL-6)、外周血CD25水平及意义。方法选取2017年10月至2019年10月鹤壁市传染病医院收治的69例支气管哮喘患儿为研究对象,根据有无合并MP感染分为感染... 目的探讨支气管哮喘合并肺炎支原体(MP)感染患儿半胱氨酰白三烯(CysLTs)、白细胞介素-6(IL-6)、外周血CD25水平及意义。方法选取2017年10月至2019年10月鹤壁市传染病医院收治的69例支气管哮喘患儿为研究对象,根据有无合并MP感染分为感染组(36例)与非感染组(33例)。选取同期于鹤壁市传染病医院门诊进行体检的30例健康儿童为对照组。检测所有研究对象的外周血CD25水平及血清CysLTs、IL-6水平。采用logistic回归分析支气管哮喘合并MP感染的影响因素。采用Pearson相关性分析外周血CD25水平及血清CysLTs、IL-6水平之间的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)确定CysLTs、IL-6、外周血CD25水平预测支气管哮喘合并MP感染的价值。结果3组CysLTs、IL-6、外周血CD25水平比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。感染组CysLTs、IL-6、外周血CD25水平均高于非感染组和对照组(均P<0.05)。非感染组CysLTs、IL-6、外周血CD25水平均高于对照组(均P<0.05)。经logistic回归分析结果显示,CysLTs、IL-6、外周血CD25水平是支气管哮喘患儿合并MP感染的影响因素(均P<0.05)。CysLTs、IL-6、外周血CD25预测支气管哮喘患儿合并MP感染的价值较高,AUC>0.7。感染组CysLTs与IL-6呈正相关(r=0.969,P<0.001),CysLTs与CD25呈正相关(r=0.984,P<0.001),IL-6与CD25呈正相关(r=0.920,P<0.001)。结论CysLTs、IL-6、外周血CD25水平与支气管哮喘合并MP感染密切相关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 肺炎支原体 白三烯 白细胞介素-6 外周血CD25
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N-乙酰半胱氨酸腹腔注射对LPS诱导小鼠急性肺损伤的预防作用观察 被引量:3
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作者 冯艳 王荣丽 《山东医药》 CAS 2019年第33期44-47,共4页
目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)预先腹腔注射对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的预防作用及其机制探讨。方法30只BALB/c雌性小鼠,随机分为NAC 1、2、3组,模型组,对照组。NAC 1、2、3组分别腹腔注射100、200、300 mg/kg NAC,0.5 h后... 目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)预先腹腔注射对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的预防作用及其机制探讨。方法30只BALB/c雌性小鼠,随机分为NAC 1、2、3组,模型组,对照组。NAC 1、2、3组分别腹腔注射100、200、300 mg/kg NAC,0.5 h后小鼠鼻孔滴10μg LPS,模型组鼻腔滴入10μg LPS,对照组鼻腔滴入50μL PBS。各组小鼠于滴鼻处理后7 h处死,取出双肺,光镜下观察肺组织学变化,测定肺湿干重比(W/D),ELISA法检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),Western blotting法检测肺组织p-JNK蛋白。结果与模型组相比,NAC 1、2、3组肺泡间隔变窄及炎性细浸润减少,模型组肺泡间隔增宽及大量炎性细胞浸润。与对照组相比,模型组肺W/D及肺组织MPO活性,TNF-α、VCAM-1含量,p-JNK蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。与模型组相比,NAC 1、2、3组肺W/D及肺组织MPO活性,TNF-α、VCAM-1含量,p-JNK蛋白相对表达量降低(P均<0.05),且呈剂量依赖性降低。结论NAC能够有效预防LPS诱导的ALI小鼠肺损伤,可能是通过抑制JNK信号通路激活发挥作用的。 展开更多
关键词 N- 急性肺损伤 炎症信号通路 c-Jun-基末端激酶信号通路 髓过氧化物酶 肿瘤坏死因子-α 血管细胞黏附分子-1
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