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黄芪多糖对半滑舌鳎生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响
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作者 郝爽 尤宏争 +5 位作者 姜巨峰 谷德贤 阚峥 马林 罗鑫 张楠 《饲料研究》 北大核心 2025年第8期46-53,共8页
试验旨在探究黄芪多糖(APS)对半滑舌鳎生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验分为两部分,第一部分是离体细胞免疫诱导试验,分别以含有10、100、1000 mg/L APS的细胞培养液孵育半滑舌鳎离体外周血白细胞,测定免疫细胞活性及免疫相... 试验旨在探究黄芪多糖(APS)对半滑舌鳎生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验分为两部分,第一部分是离体细胞免疫诱导试验,分别以含有10、100、1000 mg/L APS的细胞培养液孵育半滑舌鳎离体外周血白细胞,测定免疫细胞活性及免疫相关基因体外诱生表达水平;第二部分是在体养殖试验,选取240尾半滑舌鳎随机分为4组,每组3个重复,每个重复20尾鱼,对照组(C组)投喂基础饲料,试验组分别在基础饲料中添加0.1%(A1组)、0.2%(A2组)和0.4%(A3组)的APS,试验期28 d。结果显示:相比对照组,1000 mg/L的APS可以显著提高细胞的氧呼吸爆发活性(P<0.05),作用12、24、48 h时对离体细胞白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平均显著上调(P<0.05)。投喂APS 28 d后,A2组、A3组半滑舌鳎的末重、增重率和特定生长率显著高于C组(P<0.05)。A3组半滑舌鳎第7、21天时的血清超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均显著高于其他组(P<0.05),血清干扰素(IFN)含量显著高于C组(P<0.05);第21、28天时血清溶菌酶(LZM)活性显著高于其他组(P<0.05)。A2组第7天时的SOD和CAT活性显著低于C组(P<0.05),血清补体3(C3)含量显著高于C组(P<0.05)。各试验组试验期间鱼体脾白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA相对表达水平均显著高于C组(P<0.05);第21天,A3组头肾、血液IL-1β、IL-8m RNA相对表达水平显著高于其他组(P<0.05)。第7、14、21天,A2和A3组鱼体脾IL-8 mRNA相对表达水平均显著高于C组(P<0.05)。第28天,各试验组鱼体血液Toll样受体2(TLR2)mRNA相对表达水平显著高于C组(P<0.05);第7、21天,A2、A3组头肾TLR2 mRNA相对表达水平显著高于C组(P<0.05);第7、14天,A3组脾中TLR2 mRNA相对表达水平于显著高于其他组(P<0.05)。研究表明,APS对半滑舌鳎离体外周血白细胞具有免疫刺激作用,饲料中添加APS可以提高生长性能、抗氧化及免疫功能,添加量为0.4%时效果最佳。 展开更多
关键词 舌鳎 黄芪多糖 生长性能 抗氧化能力 免疫功能
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北方地区半滑舌鳎生态育苗实用技术
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作者 张传涛 孙祥山 +5 位作者 黄经献 李利 王松 张世奎 曹金凤 章彦华 《科学养鱼》 2025年第7期64-65,共2页
半滑舌鳎隶属鲽形目、舌鳎科、舌鳎属,俗名龙利鱼、鳎米鱼、牛舌头和鞋底鱼等,主要分布于我国黄海、渤海近海区,具有个体大、生长速度快以及肉味鲜美等特点,是我国传统名贵鱼。笔者经过多年半滑舌鳎苗种繁育实践,探索出一条半滑舌鳎生... 半滑舌鳎隶属鲽形目、舌鳎科、舌鳎属,俗名龙利鱼、鳎米鱼、牛舌头和鞋底鱼等,主要分布于我国黄海、渤海近海区,具有个体大、生长速度快以及肉味鲜美等特点,是我国传统名贵鱼。笔者经过多年半滑舌鳎苗种繁育实践,探索出一条半滑舌鳎生态育苗技术路线,现将技术要点总结如下,以供参考。 展开更多
关键词 生长速度快 苗种繁育 舌鳎 渤海 生态育苗 黄海
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基于机器学习的半滑舌鳎投饵量预测模型研究
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作者 佘诗怡 田云臣 郑杰 《天津农学院学报》 2025年第1期69-76,共8页
为解决半滑舌鳎养殖中适宜投饲量确定的问题,许多研究者通过收集大量实验数据制定投饲率表,然而投饲率表法存在精细程度不足和依赖人工经验等问题,不利于实现养殖投饲过程的标准化和自动化。为克服这一问题,本文通过收集养殖企业实际养... 为解决半滑舌鳎养殖中适宜投饲量确定的问题,许多研究者通过收集大量实验数据制定投饲率表,然而投饲率表法存在精细程度不足和依赖人工经验等问题,不利于实现养殖投饲过程的标准化和自动化。为克服这一问题,本文通过收集养殖企业实际养殖记录数据,采用机器学习方法构建半滑舌鳎投饵量预测模型。模型以与半滑舌鳎摄食相关的29项信息作为特征,首先采用Pearson相关系数、Spearman相关系数和Kendall相关系数进行相关性分析,其次采用主成分分析法进行数据降维,再次将降维的数据集按7∶2∶1随机划分为训练集、验证集和测试集,分别用于训练模型、调整模型参数和评估模型性能。为探讨基于不同算法构建机器学习模型对投饵量的预测效果,在训练集上分别构建了BP神经网络、支持向量机和随机森林模型,其中BP神经网络模型在测试集上的平均绝对误差(MAE)为0.210,均方根误差(RMSE)为0.301,决定系数(R^(2))为0.802;支持向量机模型在测试集上的MAE为0.248,RMSE为0.370,R^(2)为0.701;随机森林模型在测试集上的MAE为0.106,RMSE为0.185,R^(2)为0.925。结果表明,在三种模型中,基于随机森林的投饵量预测模型预测结果最优,最适合执行养殖中的投饲量确定工作,有利于实现投饲过程的标准化和自动化。 展开更多
关键词 机器学习 舌鳎 投饵量
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一株半滑舌鳎源鳗弧菌的分离鉴定及药敏试验
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作者 顾颖 梁晨 +5 位作者 李长剑 伏光辉 卢璐 王超 叶仁智 孙苗苗 《河北渔业》 2025年第6期37-41,共5页
从患病半滑舌鳎体内分离获得一株优势菌株ST7,通过形态特征、生理生化以及16s rRNA分子方法鉴定为鳗弧菌。此外,对分离菌进行了30种抗生素的药敏试验,结果显示分离菌ST7对哌拉西林、麦迪霉素、多黏菌素B、复方新诺明(TMP/SMZ)、环丙沙... 从患病半滑舌鳎体内分离获得一株优势菌株ST7,通过形态特征、生理生化以及16s rRNA分子方法鉴定为鳗弧菌。此外,对分离菌进行了30种抗生素的药敏试验,结果显示分离菌ST7对哌拉西林、麦迪霉素、多黏菌素B、复方新诺明(TMP/SMZ)、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、多西环素、米诺环素、四环素、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶、氯霉素和呋喃唑酮等抗生素高度敏感。 展开更多
关键词 舌鳎(Cynoglossus semilaevis) 鳗弧菌(Vibrio anguillarum) 分离鉴定 药敏试验
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半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)黑色素富集激素基因的克隆和表达 被引量:4
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作者 徐永江 朱学武 +4 位作者 柳学周 史学营 史宝 王滨 李斌 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期81-90,共10页
为研究黑色素富集激素基因(MCH)表达调控与半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)无眼侧黑化性状的关系,通过分子克隆获得了半滑舌鳎pMCH2,通过NCBI获得了pMCH1 cDNA序列,分析了pMCH mRNA的组织表达特性,探索了脑垂体和皮肤中的p MCH mRNA... 为研究黑色素富集激素基因(MCH)表达调控与半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)无眼侧黑化性状的关系,通过分子克隆获得了半滑舌鳎pMCH2,通过NCBI获得了pMCH1 cDNA序列,分析了pMCH mRNA的组织表达特性,探索了脑垂体和皮肤中的p MCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系。结果显示,pMCH1 cDNA序列长476 bp,编码134个氨基酸,与鲽形目、鲤形目和鲈形目鱼类的pMCH1氨基酸聚为1个进化分支。pMCH2 cDNA序列全长为626 bp,编码147个氨基酸,与鲽形目和鲀形目鱼类的pMCH2氨基酸聚为1个进化分支。2种MCH mRNA在垂体中表达量最高,同时,MCH1 mRNA在除肌肉外的其他组织中均可检测到表达;MCH2 mRNA在脑、有眼侧皮肤、无眼侧正常皮肤、性腺和鳃组织中也可检测到较高表达。MCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系分析显示,脑垂体和皮肤中MCH1 mRNA表现出相似的表达变化趋势,都是10%黑化组的表达量最高,而后随黑化程度加大显著降低。对于MCH2而言,无眼侧正常鱼和无眼侧50%黑化鱼的脑垂体中都具有较高的MCH2 mRNA表达水平,但在无眼侧10%黑化组和无眼侧80%黑化组,其表达水平显著降低。皮肤中MCH2表现出随黑化程度加大而显著升高的趋势。本研究结果可为认识MCH基因与半滑舌鳎无眼侧黑化性状的表达调控关系提供基础资料。 展开更多
关键词 舌鳎 黑色素富集激素 无眼侧黑化 表达调控
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半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)消化道显微与超微结构 被引量:2
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作者 李斌 柳学周 +2 位作者 徐永江 史宝 朱学武 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期150-158,共9页
采用解剖学、组织切片、电镜观察和2种染色技术研究了半滑舌鳎(Cynoglossus semilavis)消化道的组织结构特征。半滑舌鳎消化道可分为口咽腔、食道、食道胃、前肠、后肠5部分,观察了各部分消化道的显微和超微结构,测定了消化道各部分的... 采用解剖学、组织切片、电镜观察和2种染色技术研究了半滑舌鳎(Cynoglossus semilavis)消化道的组织结构特征。半滑舌鳎消化道可分为口咽腔、食道、食道胃、前肠、后肠5部分,观察了各部分消化道的显微和超微结构,测定了消化道各部分的黏膜褶皱数、黏膜褶皱高度、肌肉层(纵肌和环肌)厚度、黏液细胞相对密度等指标。结果显示,半滑舌鳎不具备结构特征明显的胃,摄食后,食道后部与肠道连接部形成一个囊状膨大结构,称之为食道胃;食道前部开始出现杯状黏液细胞,整个食道以Ⅲ型黏液细胞为主,食道胃中黏液细胞以Ⅲ型为主,前肠黏液细胞以Ⅳ型为主,后肠黏液细胞以Ⅱ型为主。研究结果为认识半滑舌鳎消化与吸收生理机制及研制人工养殖用饲料提供参考资料。 展开更多
关键词 舌鳎 消化道 食道胃 黏液细胞 组织学
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GnIH多肽对半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)下丘脑生殖相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 刘权 王滨 +3 位作者 柳学周 徐永江 史宝 刘增新 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期56-62,共7页
本研究首次通过下丘脑离体孵育的方法研究促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)多肽对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)下丘脑中生殖相关基因的表达调控。研究结果显示,tsGnIH-1促进了gnrh2和gnih的表达,对gnrh3... 本研究首次通过下丘脑离体孵育的方法研究促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)多肽对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)下丘脑中生殖相关基因的表达调控。研究结果显示,tsGnIH-1促进了gnrh2和gnih的表达,对gnrh3和kiss2的表达无影响;tsGnIH-2抑制了gnrh3的表达,对gnrh2、kiss2和gnih的表达无影响。GnIH多肽对生殖相关基因的不同调控表明同一前体蛋白编码的不同GnIH多肽在生殖调控中的作用不尽相同。本研究结果增加了对GnIH参与鱼类生殖调控机制的认识,为深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 舌鳎 促性腺激素抑制激素 促性腺激素释放激素 下丘脑 生殖相关基因
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半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)新型膜孕激素受体基因(mPRL)在卵母细胞成熟过程中的表达特征 被引量:2
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作者 史宝 柳学周 +3 位作者 徐涛 李晓妮 徐永江 张金勇 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期10-17,共8页
为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)人工育苗技术的水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(mPR-like,mPRL)基因的表达特征和作用机制进行了研究。应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现半滑舌鳎mPRL m... 为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)人工育苗技术的水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(mPR-like,mPRL)基因的表达特征和作用机制进行了研究。应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现半滑舌鳎mPRL mRNA相对表达量的最高值出现在性成熟阶段卵巢的Ⅴ时相卵母细胞。原位杂交分析mPRL mRNA在繁殖相关组织的细胞学定位,发现mPRL mRNA分布在半滑舌鳎性成熟阶段卵巢的卵母细胞膜上;在脑的神经元和垂体内分散的细胞中,mPRL mRNA阳性信号较强。制备半滑舌鳎mPRL的多克隆抗体,采用Western blotting方法检测半滑舌鳎mPRL蛋白在不同组织的表达特征,发现mPRL蛋白的表达量在卵巢、脑、垂体中相对较高,在肝脏、头肾、肾脏中表达量相对较少。免疫组化结果显示,半滑舌鳎mPRL蛋白在卵巢、脑和垂体的细胞学定位与mPRL mRNA定位一致。应用实时定量PCR和Western blotting方法检测促性腺激素调控下半滑舌鳎不同时相卵母细胞mPRL基因mRNA和蛋白的表达变化,结果显示,促性腺激素对半滑舌鳎卵母细胞中mPRL基因mRNA和蛋白表达都有一定的上调作用,特别是对Ⅴ时相卵母细胞中mPRL mRNA和蛋白的表达量提升明显;发现表达量与促性腺激素调控作用具有剂量依存关系。半滑舌鳎mPRL在繁殖相关组织的表达特征表明其通过脑–垂体–卵巢轴参与繁殖调控,同时也揭示了mPRL介导卵母细胞成熟机制。 展开更多
关键词 舌鳎 新型膜孕激素受体 卵母细胞成熟 MRNA表达 蛋白表达
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半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)gnrh2基因克隆、组织分布及卵巢成熟过程中表达分析 被引量:2
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作者 王滨 柳学周 +3 位作者 刘权 赵明 徐永江 史宝 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期63-72,共10页
为了研究下丘脑神经肽促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone 2,GnRH2)在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵巢成熟过程中的生理作用,本研究通过RT-PCR及RACE方法获得了半滑舌鳎GnRH2全长cDNA序列;通过实时荧光定量PCR(qP... 为了研究下丘脑神经肽促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone 2,GnRH2)在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵巢成熟过程中的生理作用,本研究通过RT-PCR及RACE方法获得了半滑舌鳎GnRH2全长cDNA序列;通过实时荧光定量PCR(qPCR)对gnrh2 mRNA的组织分布以及卵巢成熟过程中的时空表达特性进行了分析。结果显示,半滑舌鳎GnRH2全长c DNA序列为538 bp(不包括polyA尾),其中,5'非编码区(Untranslated region,UTR)为154 bp,3'UTR为126 bp,开放阅读框(Open reading frame,ORF)为258 bp,编码85个氨基酸的前体多肽,其分子量及等电点分别为9.69 k Da和8.55。GnRH2前体多肽由信号肽、GnRH2十肽、酶切位点(GKR)以及GnRH相关肽共4部分组成。序列比对分析发现,GnRH2在鱼类中同源性极高,尤其是十肽(QHWSHGWYPG)在所有硬骨鱼类中完全相同。半滑舌鳎GnRH2与鲈形目同源性最高(89.41%–90.59%),其次为鲽形目、鲑形目和鲀形目(78.82%–85.88%),与鲤形目同源性最低(61.18%–71.76%)。gnrh2 mRNA主要在脑中表达,在垂体及其他外周组织中表达量极低。此外,组织学分析显示,半滑舌鳎卵巢发育共分为5个时期(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ期)。在卵巢成熟过程中,脑gnrh2 mRNA表达量在卵黄生成期(Ⅲ期)显著性增加,达到峰值;随后表达量急剧下降,在成熟期(Ⅴ期)达到最小值;在排卵后期(Ⅵ期)又显著性增加。然而,在卵巢成熟过程中,垂体gnrh2 mRNA表达量在卵黄生成后期(Ⅳ期)显著性降低,随后在成熟期(Ⅴ期)有所增加,但在排卵后期(Ⅵ期)又急剧下降。上述研究结果表明,脑GnRH2可能参与了半滑舌鳎卵巢发育过程。 展开更多
关键词 舌鳎 促性腺激素释放激素2 基因克隆和表达 卵巢成熟
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GH/IGF-Ⅰ轴对半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)卵巢发育的调控作用 被引量:2
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作者 徐永江 柳学周 +4 位作者 石莹 王滨 史宝 张凯 蓝功岗 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期73-80,共8页
为深入认识半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生殖调控机制,研究了生长轴(GH/IGF-Ⅰaxis)对半滑舌鳎卵巢发育调控的作用及可能机制;分析了卵巢不同发育时期垂体中的生长激素(GH),脑、性腺和肝脏中的类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA的表... 为深入认识半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生殖调控机制,研究了生长轴(GH/IGF-Ⅰaxis)对半滑舌鳎卵巢发育调控的作用及可能机制;分析了卵巢不同发育时期垂体中的生长激素(GH),脑、性腺和肝脏中的类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA的表达水平变化;检测了卵巢不同发育期,血清GH、IGF-Ⅰ、雌二醇(E2)、睾酮(T)的表达水平变化,并分析了生长因子与性腺指数(GSI)、E2和T表达变化的关系。结果显示,垂体GH mRNA表达水平在Ⅳ期卵巢时显著升高,至Ⅴ期时达峰值,随后(Ⅵ期)显著降低,垂体GH mRNA表达水平与GSI、血清GH与IGF-Ⅰ表达水平呈显著正相关。血清GH与垂体GH mRNA表达水平表现出相似的变化趋势。肝脏IGF-ⅠmRNA表达水平在Ⅳ期和Ⅴ期卵巢时较低,但Ⅵ期时又显著升高,其与脑IGF-ⅠmRNA及血清IGF-Ⅰ表达水平呈显著正相关,而与血清E2和T表达水平呈显著负相关。脑IGF-ⅠmRNA表达水平自Ⅱ期卵巢开始显著升高,至Ⅳ期时达峰值,并与血清IGF-Ⅰ表达水平呈显著负相关。卵巢IGF-ⅠmRNA表达水平自Ⅱ期开始显著升高,并在Ⅳ期时达峰值,但在Ⅴ期时明显下降,并保持至Ⅵ期,与血清E2表达水平呈显著正相关,而与血清IGF-Ⅰ表达水平呈显著负相关。血清IGF-Ⅰ变化趋势与肝脏IGF-ⅠmRNA相似。结果揭示了GH、IGF-Ⅰ在转录和血清水平上以协同或者拮抗的方式共同参与了半滑舌鳎卵巢发育的过程,其作用途径可能与性类固醇激素的合成与分泌有关,表明GH/IGF-Ⅰ轴对卵巢发育具有重要的调控作用,为深入认识半滑舌鳎卵巢发育的调控机制提供了新的思路和素材。 展开更多
关键词 舌鳎 生长激素(GH) 类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ) 卵巢发育 调控机制
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膜孕激素受体(mPRα)在半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)卵母细胞成熟过程中的表达特征 被引量:1
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作者 李晓妮 柳学周 +2 位作者 史宝 徐永江 张金勇 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期25-33,共9页
通过实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)雌性性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中膜孕激素受体(mPRα)的表达,通过qRT-PCR和Western blotting方法检测促性腺激素(HCG)对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表... 通过实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)雌性性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中膜孕激素受体(mPRα)的表达,通过qRT-PCR和Western blotting方法检测促性腺激素(HCG)对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表达的影响,同时,采用原位杂交、免疫组化和Western blotting方法研究雌性性成熟半滑舌鳎mPRα mRNA和蛋白在各组织中的表达。对半滑舌鳎性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中mPRα mRNA的定量研究结果显示,在成熟时期半滑舌鳎Ⅴ时相卵母细胞的mPRα mRNA表达量最高。HCG对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表达的影响研究结果显示,20 IU/ml HCG比10 IU/ml HCG对成熟时期半滑舌鳎卵母细胞mPRα mRNA和蛋白表达的促进作用更明显,进一步证明mPRα介导孕激素参与了卵母细胞成熟的调控。对mPRα组织表达的定量和定位研究中,Western blotting结果显示,在半滑舌鳎的卵巢、垂体、脑、头肾、肾、肝脏组织中均有mPRα蛋白表达,且在脑、垂体和卵巢中表达量较高,表明mPRα在不同组织中都发挥着一定的作用,且在内分泌相关组织如脑、垂体和卵巢中的作用更明显。原位杂交和免疫组化结果显示,mPRα mRNA和蛋白表达明显定位在卵母细胞膜上,且在其他组织的外周和管腔结构表达。本研究为进一步研究mPRα在膜上的信号转导机制提供了理论基础和形态学依据。 展开更多
关键词 膜孕激素受体 舌鳎 原位杂交 免疫组化 WESTERN BLOTTING 实时荧光定量PCR
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孕酮受体膜组分1基因在性成熟雌性半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)的组织学定位定量分析
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作者 张金勇 史宝 +1 位作者 柳学周 徐永江 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期48-55,共8页
运用Western blotting、免疫组化和原位杂交方法检测性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)孕酮受体膜组分1(Progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)蛋白和mRNA在不同组织的分布和表达特征。原位杂交结果发现,PGRMC1 mRN... 运用Western blotting、免疫组化和原位杂交方法检测性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)孕酮受体膜组分1(Progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)蛋白和mRNA在不同组织的分布和表达特征。原位杂交结果发现,PGRMC1 mRNA主要分布在成熟的卵母细胞膜上,在脑组织神经元和分散的垂体细胞中也有表达。利用制备的半滑舌鳎PGRMC1多克隆抗体,对不同组织中的PGRMC1蛋白表达量进行Western blotting检测,发现在半滑舌鳎卵巢、脑、肝脏中PGRMC1蛋白表达量相对较高,在垂体、头肾、肾也有表达,但表达量相对较少。免疫组化结果表明,半滑舌鳎PGRMC1蛋白在成熟的卵母细胞膜上显著表达,进一步证明PGRMC1为卵膜上的受体基因,推测其主要在卵膜上行使相关的生理功能。研究结果为探究PGRMC1在半滑舌鳎卵母细胞成熟过程中的生理功能提供了重要参考。 展开更多
关键词 舌鳎 孕酮受体膜组分1 卵母细胞成熟 表达分析
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促性腺激素调控半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)卵母细胞孕酮受体膜组分1的表达特征
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作者 张金勇 柳学周 +1 位作者 史宝 徐永江 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期42-47,共6页
采用qRT-PCR方法分析性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)不同发育时期卵巢卵母细胞的孕酮受体膜组分1(PGRMC1)mRNA的表达,研究发现,在发育Ⅳ期的卵巢,处于第Ⅳ时相的卵母细胞PGRMC1 mRNA表达量最高(P<0.05);在发育Ⅴ期的卵巢,... 采用qRT-PCR方法分析性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)不同发育时期卵巢卵母细胞的孕酮受体膜组分1(PGRMC1)mRNA的表达,研究发现,在发育Ⅳ期的卵巢,处于第Ⅳ时相的卵母细胞PGRMC1 mRNA表达量最高(P<0.05);在发育Ⅴ期的卵巢,成熟期卵母细胞的PGRMC1 mRNA表达量最高(P<0.05)。采用不同浓度促性腺激素(HCG)处理卵巢发育Ⅴ期半滑舌鳎不同时相的卵母细胞,并通过q RT-PCR和Western blotting技术对其表达量变化进行检测。结果显示,20 IU/ml HCG对PGRMC1 mRNA和蛋白表达的调控作用比10 IU/ml HCG作用更明显,表明PGRMC1 mRNA和蛋白表达对HCG调控作用存在剂量依存关系。HCG对半滑舌鳎不同时相的卵母细胞的调控作用效果不同,对第Ⅴ时相卵母细胞作用最明显(P<0.05),表明PGRMC1主要在卵母细胞成熟阶段发挥作用。PGRMC1对HCG调控作用的正向应答效应预示其参与了卵母细胞成熟调控,为进一步探讨PGRMC1在半滑舌鳎繁殖过程的功能提供重要基础资料。 展开更多
关键词 舌鳎 孕酮受体膜组分1(PGRMC1)基因 卵母细胞 HCG调控 表达分析
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半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)黑色素聚集素受体(MCHR)表达特性及其与无眼侧黑化的关系 被引量:3
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作者 史学营 柳学周 +4 位作者 石莹 徐永江 史宝 王滨 李斌 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第1期91-102,共12页
利用cDNA末端快速克隆技术(RACE)获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)2种黑色素聚集素受体(MCHR1和MCHR2)的cDNA全长序列,并采用定量PCR技术分析了MCHR mRNA的组织表达特性,研究了其与无眼侧黑化程度的关系。结果显示,半滑舌鳎MCHR1... 利用cDNA末端快速克隆技术(RACE)获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)2种黑色素聚集素受体(MCHR1和MCHR2)的cDNA全长序列,并采用定量PCR技术分析了MCHR mRNA的组织表达特性,研究了其与无眼侧黑化程度的关系。结果显示,半滑舌鳎MCHR1 cDNA序列全长为1685 bp,开放阅读框(ORF)长为1080 bp,编码359个氨基酸,与牙鲆(Paralichthys olivaceus)同源性高达83.3%。系统进化分析显示,半滑舌鳎MCHR1与鳉形目、鲽形目和鲈形目鱼类聚为1个小分支。MCHR2 cDNA序列全长为1626 bp,ORF长为1044 bp,编码347个氨基酸,与鲽形目同源性最高达到90%以上。系统进化分析显示,半滑舌鳎MCHR2与鲽形目、鲈形目鱼类聚为1个小分支。MCHR1 mRNA在鳃中表达量最高,而MCHR2 mRNA在有眼侧皮肤中表达量最高,性腺次之。另外,MCHR1和MCHR2 mRNA在其他组织中均检测到表达,这表明半滑舌鳎黑色素聚集素(MCH)可能通过内分泌方式和各组织中的MCHR介导参与生理调控。不同黑化面积表达分析显示,在无眼侧黑化发生早期,脑垂体中MCHR1 mRNA显著升高,在无眼侧50%黑化组达到峰值,皮肤中MCHR1 mRNA在无眼侧10%黑化组显著升高,其后保持较高水平;脑垂体和皮肤中MCHR2 mRNA表达表现出一致的变化趋势,在无眼侧黑化发生早期都达到峰值,其后逐渐下降至相对较低水平。表明MCHR可能直接或通过其他信号通路参与了半滑舌鳎无眼侧黑化性状的调控过程。 展开更多
关键词 舌鳎 黑色素聚集素受体 基因克隆 表达调控 无眼侧黑化
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维生素E对半滑舌鳎垂体α-生育酚转移蛋白基因表达的影响 被引量:1
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作者 霍欢欢 李会涛 +2 位作者 王蔚芳 刘宝良 臧涛 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第1期60-69,共10页
生育酚转移蛋白(α-tocopherol transfer protein,α-TTP)是一种可以结合维生素E的蛋白,在协助机体转运和调控维生素E含量等方面起到重要作用。维生素E能够影响鱼类垂体中生长和繁殖相关激素的分泌,这是否与α-TTP有关,值得进一步探讨... 生育酚转移蛋白(α-tocopherol transfer protein,α-TTP)是一种可以结合维生素E的蛋白,在协助机体转运和调控维生素E含量等方面起到重要作用。维生素E能够影响鱼类垂体中生长和繁殖相关激素的分泌,这是否与α-TTP有关,值得进一步探讨。本实验旨在探究维生素E对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)垂体α-TTP基因表达的影响。在基础饲料中分别添加维生素E(DL-α-生育酚乙酸酯)0、200、400、800和1600 mg/kg,对半滑舌鳎成鱼(464.0±2.6)g进行持续60 d的养殖实验;另外,在L-15培养基中添加0、18和54μmol/L的维生素E,对半滑舌鳎垂体细胞进行为期3 d的体外原代培养实验。分别取垂体组织和垂体原代细胞,克隆α-TTP基因,并通过实时荧光定量PCR分析α-TTP基因相对表达量。结果显示,α-TTP基因全长3964 bp,编码293个氨基酸;α-TTP基因在半滑舌鳎各组织均有表达,其中,在脾脏中表达最高,其次是肾脏,在胃中表达量最低;α-TTP基因表达量随着饲料中维生素E含量的增加而呈先升高后下降的变化趋势,400 mg/kg组显著高于其他各组(P<0.05);随着细胞培养液中维生素E浓度的升高,α-TTP基因相对表达量显著增加。综上所述,本研究首次报道维生素E能够影响垂体中α-TTP基因的表达,饲料中添加400 mg/kg的维生素E能够显著促进半滑舌鳎垂体α-TTP基因的表达。本研究为探讨α-TTP在介导维生素E影响鱼类生长与繁殖方面的潜在机制提供新思路。 展开更多
关键词 维生素E 舌鳎 垂体 α-生育酚转移蛋白(α-TTP)
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半滑舌鳎生物钟相关基因克隆及在卵巢发育成熟过程中表达特征分析 被引量:1
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作者 晏科文 马晓东 +3 位作者 史宝 程汉良 王重女 赵新宇 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第3期101-116,共16页
为阐明生物钟相关基因在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵巢成熟过程中的作用及机制,采集性成熟半滑舌鳎不同发育期的卵巢组织提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对5个核心生物钟基因Clock1a、Bmal1a、Cry1a、Cry2和Per... 为阐明生物钟相关基因在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵巢成熟过程中的作用及机制,采集性成熟半滑舌鳎不同发育期的卵巢组织提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对5个核心生物钟基因Clock1a、Bmal1a、Cry1a、Cry2和Per2的编码区(CDS)序列进行克隆和序列分析。结果显示,Clock1a的CDS序列编码712个氨基酸,序列中有功能性结构域PASD1和PAS11。Bmal1a的CDS序列编码626个氨基酸,序列中有功能性结构域PASD3和PAS11。Cry1a和Cry2的CDS序列分别编码631个、669个氨基酸,序列中均有功能性结构域FAD7。Per2的CDS序列编码1415个氨基酸,序列中有功能性结构域PeriodC和PAS11。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析5个生物钟基因mRNA在性成熟半滑舌鳎卵巢不同发育期的表达特性,发现5个生物钟基因存在性腺发育周年表达规律,且在卵巢Ⅱ期和Ⅲ期相对高表达(P<0.05),在卵巢Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ期相对低表达,这说明生物钟基因对半滑舌鳎的卵巢发育成熟起到重要的调节作用。研究结果为进一步探究生物钟基因调控半滑舌鳎卵巢发育成熟的机制提供了重要参考,为提高半滑舌鳎的繁育效率提供了理论基础。 展开更多
关键词 生物钟基因 舌鳎 卵巢 周年表达规律
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半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)克隆及其组织分布和时序表达分析
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作者 吴茵茵 温思怡 +1 位作者 韩卓然 孙敬锋 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期231-238,共8页
为了分析半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)的分子生物学特征、组织分布特点以及感染海藻希瓦氏菌后的时序表达规律,通过RT-PCR、生物信息学网站、qRT-PCR技术对半滑舌鳎SNAP29基因进行了扩增、生信分析和表达特征研究。结果表明,... 为了分析半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)的分子生物学特征、组织分布特点以及感染海藻希瓦氏菌后的时序表达规律,通过RT-PCR、生物信息学网站、qRT-PCR技术对半滑舌鳎SNAP29基因进行了扩增、生信分析和表达特征研究。结果表明,半滑舌鳎SNAP29基因CDS区长度为789 bp,编码262个氨基酸,理论等电点(pI)为5.39,分子质量为29.71781 ku,有2个典型的SNARE结构域;二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成,二级结构和三级结构基本一致;多序列比对结果显示,半滑舌鳎与欧洲鲈鱼SNAP29基因相似性最高;SNAP29基因在健康半滑舌鳎所测的各组织中均有表达,在鳃组织中表达最高,在脑组织中表达量最低;利用海藻希瓦氏菌人工感染半滑舌鳎后,SNAP29基因在肠道组织、心脏组织和脑组织中表达量主要呈现上调趋势,在肝脏、头肾、脾脏组织中主要呈现下调表达,SNAP29基因在健康半滑舌鳎组织中均有表达;海藻希瓦氏菌感染半滑舌鳎的肠道、脑、心脏、肝脏、头肾、脾脏组织中SNAP29基因呈现差异表达。综上,SNAP29可能参与机体免疫应答过程或病理生理过程。 展开更多
关键词 舌鳎 SNAP29 基因克隆 QRT-PCR 海藻希瓦氏菌
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采用期望最大化算法的半滑舌鳎性逆转性状高效遗传解析
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作者 宋禹昕 常中宇 +3 位作者 高进 赵云峰 杨润清 蒋丽 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2024年第4期531-539,共9页
为了解析半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)性逆转性状的分子遗传作用机制,定位筛选可用于性控育种的分子标记或侯选基因,本研究提出了一种期望最大化算法(Expectation-Maximization algorithm,EM),并基于该算法开展了半滑舌鳎性逆转性... 为了解析半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)性逆转性状的分子遗传作用机制,定位筛选可用于性控育种的分子标记或侯选基因,本研究提出了一种期望最大化算法(Expectation-Maximization algorithm,EM),并基于该算法开展了半滑舌鳎性逆转性状的全基因组关联分析。EM算法直接使用阈模型中隐含连续正态分布表型的期望作为因变量,用迭代最小二乘代替logit回归法的迭代重加权最小二乘,它具有比logit回归法更直观、更易于编程的优点。本研究采用显著主成分控制群体分层后,使用EM算法与logit回归对对半滑舌鳎数据进行GWAS(Genome-wide Association Study,GWAS)分析。结果显示,EM算法结果无明显的假阳性或假阴性,比logit回归法的检测效力更高。基于EM算法的全基因组关联分析共定位到13个与性逆转性状显著关联的QTN(quantitative trait nucleotide,QTN),其中3个QTN位于W染色体上,10个QTN位于Z染色体上。经过基因注释发现,上述定位获得的QTN位于LOC103396896、MALT1、ADGRD2、FBXl17、DMXl1、SMARCA2、DMRT1、LOC103397760、NEUR13和PDLIM5a基因区段内。当进行检索时发现,这些基因参与了其他物种中涉及性别决定或性腺发育等相关过程。本研究提供了一种基于EM算法的具有高检测效力的全基因组关联分析方法,同时也为半滑舌鳎的性逆转遗传机制解析和性控育种提供有效的理论指导。 展开更多
关键词 全基因组关联分析 舌鳎 性逆转 主成分 期望最大化算法 广义线性模型
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半滑舌鳎rimoc1基因在雌雄鱼中的差异表达 被引量:1
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作者 孙宇轩 张梦倩 +2 位作者 李璐 魏敏 徐文腾 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第4期34-42,共9页
动物中普遍存在性别生长二态性,这种现象在海水鱼中更为明显。半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)性成熟雌鱼体重显著高于雄鱼,雌性个体的生长速度比雄性快2~4倍。本研究旨在探究rimoc1基因在半滑舌鳎雌、雄鱼中的表达差异及与性别和生... 动物中普遍存在性别生长二态性,这种现象在海水鱼中更为明显。半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)性成熟雌鱼体重显著高于雄鱼,雌性个体的生长速度比雄性快2~4倍。本研究旨在探究rimoc1基因在半滑舌鳎雌、雄鱼中的表达差异及与性别和生长的关系。实时定量和原位杂交结果显示,rimoc1在雄性组织中未检测到表达,而在雌性组织中表达量最高的是卵巢和肌肉,在卵巢中表达相对稳定,在孵化后1.5年(1.5yph)和3yph的水平有所增加。在细胞系中通过si RNA干扰敲除rimoc1后,发现生长相关基因igf1、性别分化相关基因sox9b和foxl2的表达水平显著降低,而sox9a的表达升高。启动子活性分析显示,rimoc1启动子可能受到C/EBPdelta、Sox2和c-Jun等转录因子的调控。推测rimoc1可能在半滑舌鳎的性别分化和生长中发挥重要作用,为深入研究半滑舌鳎的性别生长二态性提供了基础。 展开更多
关键词 舌鳎 rimoc1 性别生长二态性 表达模式 启动子活性 RNA干扰
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一家典型海水工厂化循环水养殖系统运行效果分析——以半滑舌鳎为例 被引量:2
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作者 马国宁 田云臣 +3 位作者 胡金城 赵晴晴 隋金柱 郑杰 《天津农学院学报》 CAS 2024年第2期71-77,共7页
循环水养殖系统作为一种新型高密度养殖方式具有养殖水体环境可控、系统运行平稳、技术安全可靠、高度节水节地等优点。本文以天津市滨海新区某企业养殖半滑舌鳎为例,对循环水养殖系统的运行效果进行分析。结果表明:半滑舌鳎的养殖密度... 循环水养殖系统作为一种新型高密度养殖方式具有养殖水体环境可控、系统运行平稳、技术安全可靠、高度节水节地等优点。本文以天津市滨海新区某企业养殖半滑舌鳎为例,对循环水养殖系统的运行效果进行分析。结果表明:半滑舌鳎的养殖密度为(20~25)kg/m^(2),初始平均质量为5 g,利用循环水养殖系统养殖407 d,最终平均质量为1079 g,存活率为29.1%。通过水质检测分析,氨氮平均去除率为64%;亚硝酸盐平均去除率为58%;弧菌和细菌的灭杀率为99%;pH值保持在7.0~8.5;盐度维持在18~35。经济性分析结果表明,该海水工厂化循环水养殖系统的可行性和经济性良好,适宜在沿海地区大力推广。 展开更多
关键词 循环水养殖系统 运行效果 舌鳎
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