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半巢式RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒
被引量：
3
1
作者
粟智平
杨益娥
+3 位作者
邓丛良
李金庆
王颖
段效辉
《现代农业科技》
2015年第18期145-147,共3页
根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime ...
根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Realtime PCR等方法高。结果表明:该方法检测灵敏度可达0.06 fg/μL植物总RNA。
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关键词
南芥菜花叶病毒(ArMV)
半巢式rt—remtimepcr
检测
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职称材料
半巢式RT-Realtime PCR检测番茄丛矮病毒
被引量：
2
2
作者
粟智平
杨益娥
+3 位作者
赵伟铎
李金庆
邓丛良
尹伟力
《现代农业科技》
2015年第18期148-150,共3页
番茄丛矮病毒(ToBSV)是我国进境植物检疫对象,也是进境种子苗木等必检项目。该病毒能侵染番茄、曼陀罗、葡萄、豇豆等20余科120余种植物。该研究根据ToBSV全基因组中p33蛋白基因,设计引物和Taq Man探针,建立了半巢式实时PCR检测ToBSV的...
番茄丛矮病毒(ToBSV)是我国进境植物检疫对象,也是进境种子苗木等必检项目。该病毒能侵染番茄、曼陀罗、葡萄、豇豆等20余科120余种植物。该研究根据ToBSV全基因组中p33蛋白基因,设计引物和Taq Man探针,建立了半巢式实时PCR检测ToBSV的新方法。该研究巧妙地融合了巢式PCR和Taq Man探针技术,第二步半巢式-RT-Realtime PCR既进一步放大了第一步检测信号,也是对第一步PCR产物的确认,与单一的巢式PCR或Realtime PCR等方法相比其检测的准确性、灵敏度更高。该方法检测灵敏度可达50 fg/μL植物总RNA。
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关键词
番茄丛矮病毒(ToBSV)
半
巢式
rt—
RealtimePCR
检测
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职称材料
进境大豆种子中烟草环斑病毒的快速检测
被引量：
5
3
作者
闻伟刚
崔俊霞
盛蕾
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期748-751,共4页
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产...
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产物。该产物经半巢式PCR进一步验证得到206 bp特异性片段,经测序及同源性比较表明,片段序列与GenBank中登录的TRSV外壳蛋白基因部分序列存在92%～96%的同源性,而未见与其它基因序列存在同源性。同时,大豆种子样品经DAS-ELISA复核检测结果显示TRSV阳性反应。因此,判定该批进境大豆种子携带TRSV。
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关键词
大豆
烟草环斑病毒
快速检测
rt—
PCR
半
巢式
PCR
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职称材料
题名
半巢式RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒
被引量：
3
1
作者
粟智平
杨益娥
邓丛良
李金庆
王颖
段效辉
机构
烟台出入境检验检疫局
湖南省会同县农业局
北京出入境检验检疫局
出处
《现代农业科技》
2015年第18期145-147,共3页
基金
国家973研课题(2011CB932800)
烟台市科学技术发展计划项目(2008324)
+1 种基金
山东检验检疫局科研项目(SK201305)
山东检验检疫局科研项目(SK2011)
文摘
根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Realtime PCR等方法高。结果表明:该方法检测灵敏度可达0.06 fg/μL植物总RNA。
关键词
南芥菜花叶病毒(ArMV)
半巢式rt—remtimepcr
检测
Keywords
Arabis mosaic virus （ArMV）
Semi-Nested
rt
-Realtime PC R
dectection
分类号
S41-30 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
半巢式RT-Realtime PCR检测番茄丛矮病毒
被引量：
2
2
作者
粟智平
杨益娥
赵伟铎
李金庆
邓丛良
尹伟力
机构
烟台出入境检验检疫局
湖南省会同县农业局
北京出入境检验检疫局
出处
《现代农业科技》
2015年第18期148-150,共3页
基金
烟台市科学技术发展计划项目(2008324)
国家973研课题(2011CB932800)
+1 种基金
山东检验检疫局科研项目(SK201305)
山东检验检疫局科研项目(SK2011)
文摘
番茄丛矮病毒(ToBSV)是我国进境植物检疫对象,也是进境种子苗木等必检项目。该病毒能侵染番茄、曼陀罗、葡萄、豇豆等20余科120余种植物。该研究根据ToBSV全基因组中p33蛋白基因,设计引物和Taq Man探针,建立了半巢式实时PCR检测ToBSV的新方法。该研究巧妙地融合了巢式PCR和Taq Man探针技术,第二步半巢式-RT-Realtime PCR既进一步放大了第一步检测信号,也是对第一步PCR产物的确认,与单一的巢式PCR或Realtime PCR等方法相比其检测的准确性、灵敏度更高。该方法检测灵敏度可达50 fg/μL植物总RNA。
关键词
番茄丛矮病毒(ToBSV)
半
巢式
rt—
RealtimePCR
检测
Keywords
tomato bushy stunt virus（ToBSV ）
semi-Nested
rt
-Realtime PCR
dectectlon
分类号
S41-30 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
进境大豆种子中烟草环斑病毒的快速检测
被引量：
5
3
作者
闻伟刚
崔俊霞
盛蕾
机构
宁波出入境检验检疫局
出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期748-751,共4页
基金
宁波出入境检验检疫局科技项目(甬K34-2006)
文摘
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产物。该产物经半巢式PCR进一步验证得到206 bp特异性片段,经测序及同源性比较表明,片段序列与GenBank中登录的TRSV外壳蛋白基因部分序列存在92%～96%的同源性,而未见与其它基因序列存在同源性。同时,大豆种子样品经DAS-ELISA复核检测结果显示TRSV阳性反应。因此,判定该批进境大豆种子携带TRSV。
关键词
大豆
烟草环斑病毒
快速检测
rt—
PCR
半
巢式
PCR
Keywords
Soybean
Tobacco ringspot virus
Rapid detection
rt
-PCR
Semi-nested PCR
分类号
S41-31 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
半巢式RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒
粟智平
杨益娥
邓丛良
李金庆
王颖
段效辉
《现代农业科技》
2015
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
半巢式RT-Realtime PCR检测番茄丛矮病毒
粟智平
杨益娥
赵伟铎
李金庆
邓丛良
尹伟力
《现代农业科技》
2015
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
进境大豆种子中烟草环斑病毒的快速检测
闻伟刚
崔俊霞
盛蕾
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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职称材料
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