采用RT-PCR、RT-半巢式PCR(seminested PCR)和RT-环介导等温扩增(LAMP)三种分子生物学方法分别检测了牡蛎中经粪便污染的诺如病毒。三种方法所采用的特异性引物均针对诺如病毒高度保守的N/S结构域。结果显示:一步法RT-PCR较两步法结果...采用RT-PCR、RT-半巢式PCR(seminested PCR)和RT-环介导等温扩增(LAMP)三种分子生物学方法分别检测了牡蛎中经粪便污染的诺如病毒。三种方法所采用的特异性引物均针对诺如病毒高度保守的N/S结构域。结果显示:一步法RT-PCR较两步法结果理想但仍不能有效去除食品中的PCR反应抑制物。RT-半巢式PCR和RT-LAMP的特异性和敏感性都远远优于RT-PCR,但是RT-半巢式PCR操作繁琐费时。RT-LAMP扩增程序简单、反应时间短,且不需要精密的温度循环装置,在产物中加入SYBR Green Ⅰ染料后可用肉眼直接判断反应结果。因此,RT-LAMP有望发展成为快速检测牡蛎中诺如病毒的有效手段。展开更多
文摘采用RT-PCR、RT-半巢式PCR(seminested PCR)和RT-环介导等温扩增(LAMP)三种分子生物学方法分别检测了牡蛎中经粪便污染的诺如病毒。三种方法所采用的特异性引物均针对诺如病毒高度保守的N/S结构域。结果显示:一步法RT-PCR较两步法结果理想但仍不能有效去除食品中的PCR反应抑制物。RT-半巢式PCR和RT-LAMP的特异性和敏感性都远远优于RT-PCR,但是RT-半巢式PCR操作繁琐费时。RT-LAMP扩增程序简单、反应时间短,且不需要精密的温度循环装置,在产物中加入SYBR Green Ⅰ染料后可用肉眼直接判断反应结果。因此,RT-LAMP有望发展成为快速检测牡蛎中诺如病毒的有效手段。
