山羊子宫中LHR基因片段的克隆及半定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：3

1

作者 申颖 王慧 +3 位作者 王树迎 王立芹 侯衍猛 黄丽波 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第2期6-10,共5页

【目的】进一步研究处于发情周期不同阶段的济宁青山羊子宫中黄体生成素受体（LHR）mRNA表达量的变化，为探讨其对山羊生殖内分泌机制的作用规律提供理论依据。【方法】以GAPDH为内参照基因，从济宁青山羊的子宫组织中提取总RNA，用RT—... 【目的】进一步研究处于发情周期不同阶段的济宁青山羊子宫中黄体生成素受体（LHR）mRNA表达量的变化，为探讨其对山羊生殖内分泌机制的作用规律提供理论依据。【方法】以GAPDH为内参照基因，从济宁青山羊的子宫组织中提取总RNA，用RT—PCR方法扩增目的基因，进行克隆测序，并对半定量RT—PCR反应体系进行了优化。【结果】获得了济宁青山羊LHR mRNA的部分序列，长度约为286bp，与已报道的GenBank中羊的I。HRmRNA（序列号为AF379199）41～326bp序列同源性为100％。以此基因片段的阳性克隆为基础优化的半定量RT—PCR体系为：LHR基因的适宜循环数为30个，内参照GAPDH基因的循环数为26个，Mg^2＋浓度均为1．5mmol／L。【结论】克隆了山羊LHRmRNA的部分序列，并建立了优化的半定量RT—PCR体系。 展开更多

关键词 半定量rt—pcr LHR MRNA 基因克隆 山羊

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半定量RT-PCR技术的研究及应用 被引量：12

2

作者 金凤媚 薛俊 +1 位作者 郏艳红 刘仲齐 《天津农业科学》 CAS 2008年第1期10-13,共4页

介绍了半定量逆转录多聚合酶链式反应(RT-PCR)技术的原理和实验过程中潜在的问题,并且讨论了该技术在实际中的应用。

关键词 半定量rt—pcr 反应参数 应用

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利用半定量RT-PCR检测烟碱生物合成的方法 被引量：2

3

作者 马雷 戚元成 刘卫群 《江西农业学报》 CAS 2009年第8期12-13,共2页

将水培65 d的烟株进行打顶处理,测定打顶和不打顶烟株上部叶的烟碱含量。分别提取根中总RNA,利用腐胺-N-甲基转移酶(PMT)基因特异引物进行actin做内参的半定量RT-PCR,分析打顶前后PMT转录水平。结果表明,上部烟叶烟碱含量和腐胺-N-甲基... 将水培65 d的烟株进行打顶处理,测定打顶和不打顶烟株上部叶的烟碱含量。分别提取根中总RNA,利用腐胺-N-甲基转移酶(PMT)基因特异引物进行actin做内参的半定量RT-PCR,分析打顶前后PMT转录水平。结果表明,上部烟叶烟碱含量和腐胺-N-甲基转移酶基因表达量的变化趋势是一致的。 展开更多

关键词 烟碱 腐胺-N-甲基转移酶(PMT) 半定量rt—pcr

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半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达 被引量：6

4

作者 卢建雄 臧荣鑫 +3 位作者 潘和平 杨具田 陈粉粉 杨公社 《中兽医医药杂志》 2005年第6期16-18,共3页

在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次... 在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次数等参数,以及引物对间的扩增竞争,建立了检测脂肪细胞生脂相关基因mRNA表达的半定量多重RT-PCR体系。结果显示,RT-PCR产物经电泳后,β-actin及生脂基因电泳带清晰,与预期产物大小一致,引物对间无扩增竞争,其扩增效率和特异性与单重RT-PCR体系相同,实验重复性好。因此,该方法和体系可用于快速、灵敏、可靠地检测特异基因mRNA的表达。 展开更多

关键词 原代培养脂肪细胞 生脂基因 半定量rt—pcr

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半定量RT-PCR法检测Wee1基因在水稻胚乳发育过程中的表达模式

5

作者 华树海 姜孝成 +1 位作者 张春来 Adrain Slater 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第3期83-87,共5页

通过半定量RT-PCR研究Wee1基因在水稻胚乳中的表达模式.结果发现Wee1基因的表达伴随水稻种子胚乳的整个发育过程.在所检测的几个时期中,授粉后第4 d(4 days after pollination,4 DAP)的胚乳中Wee1基因表达量最大;以后随着发育的进行,其... 通过半定量RT-PCR研究Wee1基因在水稻胚乳中的表达模式.结果发现Wee1基因的表达伴随水稻种子胚乳的整个发育过程.在所检测的几个时期中,授粉后第4 d(4 days after pollination,4 DAP)的胚乳中Wee1基因表达量最大;以后随着发育的进行,其表达量逐渐降低,直至15 DAP的胚乳中仍有微弱表达. 展开更多

关键词 Wee1 半定量rt—pcr 基因表达 胚乳发育

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半定量PCR检测口腔鳞状细胞癌凋亡蛋白酶活化因子的表达 被引量：1

6

作者 李春艳 高文信 +3 位作者 张茹慧 王林 赵静辉 李艳秋 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期879-881,共3页

目的:探讨凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)基因的表达与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系。方法:用半定量RT-PCR的方法检测18例正常口腔黏膜组织和32例OSCC组织中APAF1的表达情况。结果:OSCC组织中APAF1的表达显著低于正常口腔黏膜(P<0.01)。... 目的:探讨凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)基因的表达与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系。方法:用半定量RT-PCR的方法检测18例正常口腔黏膜组织和32例OSCC组织中APAF1的表达情况。结果:OSCC组织中APAF1的表达显著低于正常口腔黏膜(P<0.01)。结论:APAF1基因可能与OSCC的发生、发展有关,可作为OSCC诊断的检测指标。 展开更多

关键词 凋亡蛋白酶活化因子1 口腔鳞状细胞癌 基因表达 半定量rt—pcr

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2个番木瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆与分析 被引量：1

7

作者 申艳红 陈晓静 +2 位作者 李荣荣 卢秉国 何玮毅 《热带作物学报》 CSCD 2011年第5期861-865,共5页

采用RT-PCR扩增获得了2个番木瓜果实多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因cDNA和DNA全长序列,将其命名为CpPGIP1和CpPGIP2。CpPGIP1基因全长为984 bp,编码325个氨基酸;CpPGIP2基因全长为1 025 bp,编码326个氨基酸。2基因均没有内含子序列... 采用RT-PCR扩增获得了2个番木瓜果实多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因cDNA和DNA全长序列,将其命名为CpPGIP1和CpPGIP2。CpPGIP1基因全长为984 bp,编码325个氨基酸;CpPGIP2基因全长为1 025 bp,编码326个氨基酸。2基因均没有内含子序列,核苷酸序列有66.54%的相似性,氨基酸序列有63.53%的相似性。2基因均含有植物PGIP基因编码蛋白特有的亮氨酸重复保守序列LXXLXXLXXLXLXXNXLXGXIPXX。对PGIP基因在不同成熟度番木瓜果实表达量分析发现,2基因4个时期均有表达,而且基本呈现同一表达趋势,绿色期表达量最高,随着果实成熟表达量逐渐降低。 展开更多

关键词 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP) 基因克隆 半定量rt—pcr

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镉胁迫对拟南芥幼苗形态生理和错配修复相关基因表达的影响研究 被引量：13

8

作者 韩艳萍 刘宛 +3 位作者 李艳芝 李培军 张巧丽 郭艳丽 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1246-1252,共7页

以拟南芥为供试材料,从形态指标、生理指标、分子指标3个层次研究了镉(Cd)的毒理效应,筛选Cd敏感生物标记物。分子指标的研究以18SrRNA为看家基因,错配修复基因MutS2homolog(atMSH2),atMSH3,atMSH7,细胞增殖核抗原1和2(atPCNA1和atPCNA2... 以拟南芥为供试材料,从形态指标、生理指标、分子指标3个层次研究了镉(Cd)的毒理效应,筛选Cd敏感生物标记物。分子指标的研究以18SrRNA为看家基因,错配修复基因MutS2homolog(atMSH2),atMSH3,atMSH7,细胞增殖核抗原1和2(atPCNA1和atPCNA2)为检测目的基因,采用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术研究Cd胁迫对上述错配修复相关基因表达的影响。结果表明,不同浓度(0、0.125、0.25、1.0、3.0mg·L-1)Cd处理7d后,根长随Cd胁迫强度的增加而降低;0.125mg·L-1Cd处理下,地上部可溶性蛋白含量显著增加,而在0.25、1.0和3.0mg·L-1Cd时降低,但仍高于对照;幼苗叶片数、地上部鲜重、叶绿素含量变化与对照相比差异均不显著。地上部atMSH2,atPCNA1,atPCNA2基因表达量的变化与Cd胁迫浓度呈明显的倒U字型关系,分别在0.125,0.25和0.125mg·L-1Cd时达到最大值。以上结果表明,地上部可溶性蛋白含量变化与上述3个错配修复相关基因表达量的改变趋势相符,且均对Cd污染胁迫较敏感,可以作为检测Cd污染及其相关生物学效应的潜在生物标记物。 展开更多

关键词 镉 错配修复基因 细胞增殖核抗原基因 生物标记物 半定量rt—pcr

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不同基因型小麦在水培体系下的磷胁迫反应研究 被引量：12

9

作者 杨秀君 刘顺通 +3 位作者 王明凤 乔帅 许君 郑文明 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期109-112,117,共5页

采用改进的Hoagland培养基,优化建立了小麦温室水培体系,对不同基因型小麦在水培条件下对磷饥饿胁迫的生理反应进行了研究.结果表明:1)在研究建立的小麦水培体系中,小麦植株生长正常并对磷饥饿胁迫条件做出发育形态建成水平的反应;半定... 采用改进的Hoagland培养基,优化建立了小麦温室水培体系,对不同基因型小麦在水培条件下对磷饥饿胁迫的生理反应进行了研究.结果表明:1)在研究建立的小麦水培体系中,小麦植株生长正常并对磷饥饿胁迫条件做出发育形态建成水平的反应;半定量RT-PCR分析显示在此体系中小麦磷响应基因也在转录水平上产生显著变化;2)在水培条件下不同基因型小麦对磷饥饿胁迫的反应总体上表现在根轴长度和根冠比有所提高,但不同基因型小麦的反应特点有差异;对这些反应特征的分子机理的深入分析可为有效筛选磷高效小麦新种质以及发掘磷高效基因资源提供线索. 展开更多

关键词 小麦 磷胁迫 水培体系 根冠比 半定量rt—pcr

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SFRP1基因表达与大肠肿瘤发生的关系研究 被引量：7

10

作者 孙蕾娜 辛芝 +3 位作者 潘毅 战忠利 孙保存 杨毅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期323-326,335,共5页

目的:探讨SFRP1与大肠癌发生的关系。方法:运用半定量RT-PCR方法及免疫组化方法检测SFRP1、β-catenin、E-cad在正常大肠粘膜、大肠腺瘤以及大肠腺癌中的表达。结果:大肠腺癌、腺瘤组织的β-catenin、E-cad胞膜表达不同程度缺失,β-cate... 目的:探讨SFRP1与大肠癌发生的关系。方法:运用半定量RT-PCR方法及免疫组化方法检测SFRP1、β-catenin、E-cad在正常大肠粘膜、大肠腺瘤以及大肠腺癌中的表达。结果:大肠腺癌、腺瘤组织的β-catenin、E-cad胞膜表达不同程度缺失,β-catenin呈胞质和胞核异位表达,腺瘤β-catenin的异位表达率为87.5%,低于大肠腺癌(100%,P<0.05)。大肠腺瘤β-catenin、E-cad胞膜表达缺失率分别为37.5%、37.5%,低于大肠腺癌(58.8%、76.4%,P均<0.05)。半定量RT-PCR显示,SFRP1基因在大肠腺瘤、大肠腺癌组织中的表达水平均明显低于大肠正常组织的对照组,且大肠腺癌组织中SFRP1基因的表达水平低于大肠腺瘤(P<0.05)。结论:SFRP1基因下调使其拮抗Wnt途径的功能削弱,导致Wnt的持续存在,其下游基因β-catenin、E-cad异常表达,从而导致大肠粘膜细胞获得恶变潜能。故SFRP1可能为预防大肠肿瘤的发生、大肠肿瘤的早期诊断提供新思路,并为防治大肠肿瘤提供新靶标和实验依据。 展开更多

关键词 SFRP1 大肠癌 免疫组织化学 半定量rt—pcr

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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16的表达规律及体外重组表达 被引量：7

11

作者 董照明 赵萍 +3 位作者 王凌燕 李游山 张艳 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期236-242,共7页

家蚕(Bombyxmori)的丝腺是丝蛋白合成分泌的场所,存在多种丝氨酸蛋白酶抑制剂。为探究家蚕丝蛋白的合成和保护机制,采用半定量RT-PCR的方法调查家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16在家蚕不同发育时期和5龄第5天幼虫各个组织器官中的表... 家蚕(Bombyxmori)的丝腺是丝蛋白合成分泌的场所,存在多种丝氨酸蛋白酶抑制剂。为探究家蚕丝蛋白的合成和保护机制,采用半定量RT-PCR的方法调查家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16在家蚕不同发育时期和5龄第5天幼虫各个组织器官中的表达特征,结果表明家蚕serpin16基因仅在4眠-5龄第6天的发育期表达,并且仅在丝腺中特异表达,其中在中部丝腺前区转录水平最高,而在中部丝腺中区和后区的转录水平较低;进一步构建pGEX-4T-1-serpin16原核表达载体,并转化至大肠杆菌(Eschevichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导获得融合蛋白,纯化后得到单一的目的蛋白。家蚕serpin16基因在幼虫丝腺的特异表达模式提示其可能与家蚕的吐丝过程密切相关,推测该基因在维持丝腺稳定的泌丝环境中发挥重要作用。 展开更多

关键词 家蚕 丝腺 丝氨酸蛋白酶抑制剂 半定量rt—pcr 原核表达

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灵芝漆酶基因转录Cu^(2+)诱导特性及其启动子的克隆与序列分析 被引量：5

12

作者 欧阳翔 吴婧 +2 位作者 丁一新 李玉祥 赵明文 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期36-40,共5页

以Cu2+为诱导物检测了灵芝漆酶同工酶基因的转录特性,并对其启动子进行了克隆及序列分析。研究发现:灵芝漆酶基因在Cu2+的作用下表达量出现明显差异,其中以在发酵液中添加3.0 mmol.L-1Cu2+、诱导时间为6 d时,漆酶基因的mRNA表达量最高... 以Cu2+为诱导物检测了灵芝漆酶同工酶基因的转录特性,并对其启动子进行了克隆及序列分析。研究发现:灵芝漆酶基因在Cu2+的作用下表达量出现明显差异,其中以在发酵液中添加3.0 mmol.L-1Cu2+、诱导时间为6 d时,漆酶基因的mRNA表达量最高。根据GenBank中已报道的灵芝漆酶基因的序列信息,经PCR扩增获得了灵芝漆酶5′端长879bp的基因特异序列,进而通过self-formed adaptor PCR(SEFA-PCR)方法,扩增得到灵芝漆酶基因起始密码子上游长832bp的启动子序列。分析表明,该启动子区域除分布有TATA-box、CAAT-box及GC-box等基本的转录起始元件外,还存在多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括4个MRE元件、4个STRE元件、11个HSE元件和5个氮因子结合位点等。 展开更多

关键词 灵芝 漆酶 半定量rt—pcr self-formed ADAPTOR pcr 转录调控

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氧气胁迫对长双歧杆菌葡萄糖代谢关键酶基因表达的影响 被引量：6

13

作者 赵建云 马会勤 +2 位作者 肖满 左芳雷 陈尚武 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期220-224,280,共6页

双歧杆菌对氧气敏感,耐氧性成为其重要的性状及研究内容之一。实验采用半定量RT-PCR法对在4%氧气条件下培养的长双歧杆菌BBMN68的葡萄糖代谢中关键酶基因mRNA表达水平进行了比较和分析。结果表明,随着氧气浓度增加,长双歧杆菌BBMN68的... 双歧杆菌对氧气敏感,耐氧性成为其重要的性状及研究内容之一。实验采用半定量RT-PCR法对在4%氧气条件下培养的长双歧杆菌BBMN68的葡萄糖代谢中关键酶基因mRNA表达水平进行了比较和分析。结果表明,随着氧气浓度增加,长双歧杆菌BBMN68的生长逐渐受到抑制,在4%浓度胁迫条件下,葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖-6-磷酸异构酶、磷酸酮醇酶、转酮醇酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶在氧胁迫30min时的mRNA表达明显下降,60min及120min后,xfp和gap酶的mRNA表达量恢复到厌氧条件下的水平。研究了长双歧杆菌在氧气胁迫下菌体生长以及葡萄糖代谢中关键酶基因mRNA的变化情况,这些可能是细胞受到氧气胁迫的应激反应之一,推测葡萄糖代谢酶与长双歧杆菌耐氧性有一定关联。 展开更多

关键词 长双歧杆菌BBMN68 耐氧性 葡萄糖代谢酶 半定量rt—pcr

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温敏核不育系水稻株1S及其矮秆突变体SV14茎的蛋白质组学比较 被引量：4

14

作者 萧小鹃 杨远柱 +5 位作者 林建中 童春义 杨粤军 黄绿红 李彦 刘选明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期41-45,共5页

采用双向凝胶电泳对温敏核不育水稻株1S和其矮秆突变体SV14的茎(穗颈下第1节和第2节)蛋白进行了分离,通过银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了26个蛋白质点采用MAL-DI-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,最终有12个蛋白... 采用双向凝胶电泳对温敏核不育水稻株1S和其矮秆突变体SV14的茎(穗颈下第1节和第2节)蛋白进行了分离,通过银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了26个蛋白质点采用MAL-DI-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,最终有12个蛋白质点得到了可靠鉴定.其中在SV14中相对于株1S上调的仅有OSJNBa0039C07.13蛋白,其它蛋白均表现为下调.这些差异蛋白按照功能可分为4类:(1)能量代谢相关蛋白;(2)次生代谢相关蛋白;(3)调控蛋白;(4)未知蛋白.对光合系统Ⅱ氧延伸复合物蛋白质前体2,果糖二磷酸醛缩酶,UDP-葡糖醛酸脱羧酶对应的基因进行了半定量RT-PCR分析,发现这几个基因与蛋白质的表达不一致,可能是RNA发生了翻译后修饰而减少了蛋白表达量的结果.这些差异蛋白很可能与水稻矮化有关,为水稻矮秆基因的寻找提供了另一个有效途径. 展开更多

关键词 水稻 矮秆突变体 蛋白质组学 半定量rt—pcr

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猪泛素-B基因的克隆及组织表达谱分析 被引量：3

15

作者 谢水华 李加琪 +5 位作者 陈瑶生 张豪 王翀 梅盈洁 莫德林 李泽月 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期399-404,共6页

从人泛素-B（Ubiquitin B，UbB）基因mRNA序列出发，在猪的ESTs库中进行同源性搜索，通过电子克隆和进一步RT-PCR方法从猪肌肉组织总RNA中扩增出泛素-B基因部分cDNA序列（GenBank登录号：EF688558），长894bp，其中在89～778bp处包含一... 从人泛素-B（Ubiquitin B，UbB）基因mRNA序列出发，在猪的ESTs库中进行同源性搜索，通过电子克隆和进一步RT-PCR方法从猪肌肉组织总RNA中扩增出泛素-B基因部分cDNA序列（GenBank登录号：EF688558），长894bp，其中在89～778bp处包含一个完整的开放阅读框，编码229个氨基酸。猪泛素-B基因由2个外显子和1个内含子构成（GenBank登录号：EF688559），内含子长657bp，符合GT-AG规则。序列分析结果表明：猪泛素-B基因与已报道的人、黑猩猩、小家鼠、大鼠、鸡等物种的泛素-B基因高度同源，同源性分别为92％、91％、91％、91％、89％，氨基酸序列同源性为100％。半定量RT-PCR结果表明：泛素-B基因在150日龄肥育猪心脏、肝脏、肾脏、小脑中的表达量较高，脾脏、肺脏、胃、膀胱、背最长肌、大脑次之，脂肪和下丘脑中的表达量最低，其在蓝塘与长白猪肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、膀胱、背最长肌等7个组织中的表达量存在差异。 展开更多

关键词 猪 泛素-B基因 半定量rt—pcr 序列分析 基因表达

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肠炎沙门氏菌诱导鸡Toll样受体2在组织中的分布 被引量：3

16

作者 吴双 左伟勇 +4 位作者 王永娟 王安平 洪伟鸣 黄文强 朱善元 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第12期237-238,262,共3页

为研究肠炎沙门氏菌诱导鸡Toll样受体2在脏器组织中的分布情况,4周龄SPF鸡口服肠炎沙门氏菌后,于感染后48 h时心脏采血分离外周血单核淋巴细胞并采集11种组织,常规方法抽提总RNA,以鸡β-actin基因为内参,采用半定量RT-PCR法检测各组织中... 为研究肠炎沙门氏菌诱导鸡Toll样受体2在脏器组织中的分布情况,4周龄SPF鸡口服肠炎沙门氏菌后,于感染后48 h时心脏采血分离外周血单核淋巴细胞并采集11种组织,常规方法抽提总RNA,以鸡β-actin基因为内参,采用半定量RT-PCR法检测各组织中鸡Toll样受体2(chTLR2)基因的表达情况。结果表明:chTLR2主要分布于免疫组织系统中,chTLR2t1没有chTLR2t2表达得广泛。说明chTLR2可能参与了肠炎沙门氏菌感染的天然免疫反应过程。 展开更多

关键词 鸡 TOLL样受体2 肠炎 沙门氏菌 半定量rt—pcr

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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-6在不同发育时期的表达分析 被引量：3

17

作者 俞燕芳 查宏贤 +5 位作者 王彦云 卫正国 李兵 陈玉华 许雅香 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期341-345,共5页

丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)是一类具有重要生理调控功能的蛋白酶超家族。为研究家蚕serpin-6基因(Bmserpin-6)在蚕体内的功能,利用半定量RT-PCR方法,分析该基因mRNA在家蚕不同发育时期的转录水平。Bmserpin-6基因在家蚕各个发育阶段均... 丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)是一类具有重要生理调控功能的蛋白酶超家族。为研究家蚕serpin-6基因(Bmserpin-6)在蚕体内的功能,利用半定量RT-PCR方法,分析该基因mRNA在家蚕不同发育时期的转录水平。Bmserpin-6基因在家蚕各个发育阶段均有表达,在4龄眠期、5龄6d、吐丝48h(化蛹前)和化蛹6d的转录水平较高,在5龄4d、吐丝初期和蛹末期的转录水平较低。Bmserpin-6基因在5龄期家蚕精巢和卵巢中的表达均呈现先下降后上升的趋势。研究结果表明,Bmserpin-6基因mRNA的转录具有明显的时空特异性,推测其在家蚕不同的变态发育期执行不同的功能。 展开更多

关键词 家蚕 丝氨酸蛋白酶抑制剂 基因转录 变态发育 半定量rt—pcr

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As(Ⅲ)胁迫对小麦发芽过程中木聚糖酶活性及基因表达动态变化的影响 被引量：2

18

作者 李丹丹 李春喜 +4 位作者 邵云 冯淑利 张黛静 张蓓蓓 姜丽娜 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期1873-1878,共6页

采用室内水培方法,研究了不同浓度As(Ⅲ)胁迫对小麦发芽过程中籽粒、幼根、幼叶3个部位在培养180h内木聚糖酶活性的动态变化。并以小麦稳定表达的肌动蛋白基因作为对照,利用半定量RT-PCR技术,对小麦木聚糖酶基因的表达进行了研究。结果... 采用室内水培方法,研究了不同浓度As(Ⅲ)胁迫对小麦发芽过程中籽粒、幼根、幼叶3个部位在培养180h内木聚糖酶活性的动态变化。并以小麦稳定表达的肌动蛋白基因作为对照,利用半定量RT-PCR技术,对小麦木聚糖酶基因的表达进行了研究。结果表明,小麦发芽过程中3个部位木聚糖酶活性平均值大小顺序为籽粒>幼芽>幼根。随着As(Ⅲ)浓度升高,籽粒中木聚糖酶活性呈现低促高抑的趋势,幼根和幼叶中木聚糖酶活性呈上升趋势。4个浓度As(Ⅲ)处理后木聚糖酶基因表达强度依次为25mg/L>5mg/L>0mg/L>0.1mg/L。 展开更多

关键词 As(Ⅲ)胁迫 小麦 木聚糖酶 木聚糖酶基因 肌动蛋白基因 半定量rt—pcr

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扁穗冰草转录因子基因的克隆和表达特性的分析 被引量：3

19

作者 张楠 朱维宁 +1 位作者 苏君艺 张林生 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1618-1622,共5页

根据禾本科转录因子cbf,dreb,myb基因已经报道的核酸序列保守区设计引物,使用RT-PCR技术首次在扁穗冰草(Agropyron cristatum)中克隆3个转录因子部分片段,分别将其命名为ACcbf,ACdreb,ACmyb。利用半定量RT-PCR技术研究这3个基因在冷胁... 根据禾本科转录因子cbf,dreb,myb基因已经报道的核酸序列保守区设计引物,使用RT-PCR技术首次在扁穗冰草(Agropyron cristatum)中克隆3个转录因子部分片段,分别将其命名为ACcbf,ACdreb,ACmyb。利用半定量RT-PCR技术研究这3个基因在冷胁迫及干旱胁迫下的表达趋势。结果表明,ACcbf基因对温度敏感,同时对干旱胁迫有一定程度的响应;ACdreb基因对冷胁迫和干旱胁迫都较为敏感;ACmyb基因则对干旱胁迫敏感,而对冷胁迫不敏感。 展开更多

关键词 扁穗冰草 转录因子 半定量rt—pcr 冷胁迫 干旱胁迫

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非生物胁迫下水稻OsMATE基因表达分析 被引量：2

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作者 张建军 胥华伟 +3 位作者 周晓垂 陈建东 王玉琪 彭新湘 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期435-439,共5页

从水稻(Oryza sativa L.)叶片中克隆到与高粱(Sorghum bicolor)SbMATE最相似的同源基因OsMATE,利用半定量RT-PCR分析了OsMATE在水稻不同组织、不同非生物胁迫以及抗铝和铝敏感水稻品种中的表达。结果表明,OsMATE在水稻根和叶中表达非常... 从水稻(Oryza sativa L.)叶片中克隆到与高粱(Sorghum bicolor)SbMATE最相似的同源基因OsMATE,利用半定量RT-PCR分析了OsMATE在水稻不同组织、不同非生物胁迫以及抗铝和铝敏感水稻品种中的表达。结果表明,OsMATE在水稻根和叶中表达非常低,叶鞘中几乎没有表达;铝、镉、砷、盐、铁、PEG6000、百草枯和ABA等非生物胁迫都可以诱导水稻根OsMATE的大量表达,而在水稻叶中,只有砷、盐和PEG6000可以少量诱导OsMATE的表达;并且铝毒胁迫下抗铝品种根中OsMATE的表达明显高于铝敏感品种。这说明非生物胁迫下OsMATE在水稻抗逆中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 水稻 OSMATE 半定量rt—pcr 非生物胁迫

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