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应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病
被引量：
6
1
作者
林锋强
胡奇林
+4 位作者
陈少莺
欧阳岁东
陈仕龙
朱小丽
程晓霞
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期107-109,共3页
参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚...
参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300 bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1 fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测.
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关键词
半套式rt-pcr
诊断
番鸭呼肠孤病毒
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职称材料
半套式RT-PCR检测动物狂犬病病毒的研究
2
作者
袁颖烁
赵敬慧
+4 位作者
宋菲菲
刘晔
张守峰
张乐萃
扈荣良
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2013年第5期13-16,共4页
基于我国流行的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)均属基因I型,本研究根据GenBank公布的31株RV N基因全序列,选取保守区域设计2对引物,建立了一种检测RV的半套式聚合酶链式反应(Semi-nested RT-PCR),并对引物的灵敏性、敏感性和特异性进行检...
基于我国流行的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)均属基因I型,本研究根据GenBank公布的31株RV N基因全序列,选取保守区域设计2对引物,建立了一种检测RV的半套式聚合酶链式反应(Semi-nested RT-PCR),并对引物的灵敏性、敏感性和特异性进行检测。将该方法检测的36份新鲜脑组织样品,与荧光抗体染色法(FAT)进行比较,并将PCR结果为阳性的新鲜样品室温下放置腐败后进行检测。结果显示,该方法灵敏度检测可达到0.01TCID50/mL。对检测呈阳性的病料进行序列分析,全部为狂犬病病毒;检测犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬腺病病毒(CAV)、伪狂犬病病毒(PRV)等非狂犬病病毒,结果均为阴性,表明该引物特异性较高。该方法与FAT检测结果完全一致,并能从腐败样品中检出RV,更适用于腐败样品的检测,具有快速、准确的特点,可广泛应用于广大基层狂犬病的诊断及试验研究。
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关键词
狂犬病病毒
半套式rt-pcr
诊断
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职称材料
题名
应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病
被引量：
6
1
作者
林锋强
胡奇林
陈少莺
欧阳岁东
陈仕龙
朱小丽
程晓霞
机构
福建省农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期107-109,共3页
基金
福建省自然科学基金(B0510032)
福建省科技项目(2001Z061)
文摘
参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300 bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1 fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测.
关键词
半套式rt-pcr
诊断
番鸭呼肠孤病毒
Keywords
semi-nested
rt-pcr
diagnosis
muscovy duck reovirus
分类号
S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
半套式RT-PCR检测动物狂犬病病毒的研究
2
作者
袁颖烁
赵敬慧
宋菲菲
刘晔
张守峰
张乐萃
扈荣良
机构
青岛农业大学动物科技学院
军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2013年第5期13-16,共4页
基金
国家公益性行业(农业)科研专项经费资助(201203056)
文摘
基于我国流行的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)均属基因I型,本研究根据GenBank公布的31株RV N基因全序列,选取保守区域设计2对引物,建立了一种检测RV的半套式聚合酶链式反应(Semi-nested RT-PCR),并对引物的灵敏性、敏感性和特异性进行检测。将该方法检测的36份新鲜脑组织样品,与荧光抗体染色法(FAT)进行比较,并将PCR结果为阳性的新鲜样品室温下放置腐败后进行检测。结果显示,该方法灵敏度检测可达到0.01TCID50/mL。对检测呈阳性的病料进行序列分析,全部为狂犬病病毒;检测犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬腺病病毒(CAV)、伪狂犬病病毒(PRV)等非狂犬病病毒,结果均为阴性,表明该引物特异性较高。该方法与FAT检测结果完全一致,并能从腐败样品中检出RV,更适用于腐败样品的检测,具有快速、准确的特点,可广泛应用于广大基层狂犬病的诊断及试验研究。
关键词
狂犬病病毒
半套式rt-pcr
诊断
Keywords
Rabies Virus（RV）
Semi-nested
rt-pcr
Diagnosis
分类号
S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病
林锋强
胡奇林
陈少莺
欧阳岁东
陈仕龙
朱小丽
程晓霞
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
6
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职称材料
2
半套式RT-PCR检测动物狂犬病病毒的研究
袁颖烁
赵敬慧
宋菲菲
刘晔
张守峰
张乐萃
扈荣良
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2013
0
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