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半夏凝集素基因的克隆及转基因烟草对蚜虫的抑制作用 被引量:8
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作者 张正英 令利军 +2 位作者 王红梅 李淑洁 李静雯 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期21-25,共5页
采用同源序列克隆方法,通过设计特异性引物从甘肃西和半夏叶片基因组DNA中克隆到1条1069bp的半夏凝集素基因pta,与以同科内植物的mRNA为模板扩增得到的凝集素基因序列的同源性很高,达到98%以上,功能区完整,具有1条信号肽和3个甘... 采用同源序列克隆方法,通过设计特异性引物从甘肃西和半夏叶片基因组DNA中克隆到1条1069bp的半夏凝集素基因pta,与以同科内植物的mRNA为模板扩增得到的凝集素基因序列的同源性很高,达到98%以上,功能区完整,具有1条信号肽和3个甘露糖结合区,GenBank登录号AY725425。用该基因替换pBI121载体的GUS基因,正向插入35S启动子之下,构建了植物表达载体pBI—pta。通过农杆菌介导法转化烟草,从20株Kan抗性植株中得到PCR检测阳性植株14株,证明pta已整合到烟草基因组中。对随机挑取的7株PCR阳性植株进行了抗蚜虫(Myzus persicae)筛选试验,结果表明:不同株系蚜口密度抑制率在22.5%~89.4%,平均蚜口密度抑制率56.2%。 展开更多
关键词 同源克隆 半夏凝集素基因(pta) 表达载体构建 蚜虫抗性
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半夏凝集素基因在水稻中的转化及筛选 被引量:3
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作者 崔彦芹 李尚伟 +3 位作者 张丽萍 杜娟 李云峰 查仁明 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期1419-1422,共4页
为了获得转基因抗虫水稻,将半夏凝集素基因pta导入水稻,并进行鉴定和筛选。在抗虫基因pta的5'端加2×35S启动子,两端分别添加HindⅢ和Spe I酶切位点,并进行人工合成。将pta与植物表达载体p1301连接,经双酶切和测序鉴定。结果表... 为了获得转基因抗虫水稻,将半夏凝集素基因pta导入水稻,并进行鉴定和筛选。在抗虫基因pta的5'端加2×35S启动子,两端分别添加HindⅢ和Spe I酶切位点,并进行人工合成。将pta与植物表达载体p1301连接,经双酶切和测序鉴定。结果表明:重组表达载体p1301-pta构建成功;载体p1301-pta转化农杆菌LBA4404后用浸染法将pta基因导入水稻恢复系辐恢838中,对转化再生植株进行GUS染色以及GUS和pta基因的PCR鉴定后,共得到16株转基因阳性植株。 展开更多
关键词 半夏凝集素基因 水稻 表达载体构建 基因植株
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半夏凝集素基因对小麦的遗传转化研究 被引量:3
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作者 李淑洁 张正英 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期191-196,共6页
为了拓宽农杆菌介导的小麦遗传转化的受体基因型,同时改良小麦品种的抗蚜特性,以甘肃省主推春小麦品种陇春22和优良品系9614的幼胚为转基因受体材料,以预培养4d的幼胚愈伤组织为受体,以含有半夏凝集素基因的C58c1农杆菌菌株为供体,将重... 为了拓宽农杆菌介导的小麦遗传转化的受体基因型,同时改良小麦品种的抗蚜特性,以甘肃省主推春小麦品种陇春22和优良品系9614的幼胚为转基因受体材料,以预培养4d的幼胚愈伤组织为受体,以含有半夏凝集素基因的C58c1农杆菌菌株为供体,将重组质粒pBI pta导入小麦,建立了农杆菌介导的小麦遗传转化体系。经G418 25mg.L-1抗性筛选、PCR检测共获得转基因植株7株,其中9614的4株,陇春22的3株;采用荧光定量PCR分析得出转基因植株中单拷贝的有1株,2个拷贝的1株,3个拷贝和4个拷贝的各有2株,1株没有得到扩增。对整合有2个拷贝半夏凝集素基因的陇春22-20转基因小麦的T1代植株进行了PCR检测,其中有50%的植株扩增出目的基因,50%没有扩增出目的基因,初步说明T1代植株中外源基因得到了遗传。 展开更多
关键词 小麦(Triticumaestivum L.) 半夏凝集素基因 农杆菌介导 遗传转化 Real-timePCR分析
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转半夏凝集素基因抗蚜棉花材料对棉蚜的控制效果 被引量:3
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作者 雒珺瑜 崔金杰 吴冬梅 《中国棉花》 北大核心 2010年第9期12-14,共3页
采用田间小区系统调查和室内生物测定相结合的方法,研究了转半夏凝集素基因抗蚜棉花材料对棉蚜的控制效果。田间鉴定结果表明,在苗蚜发生高峰期,6个转基因抗蚜材料对棉蚜的抗性不同,蚜指减退率也有较大的差异;其中09-2和09-4的抗性较好... 采用田间小区系统调查和室内生物测定相结合的方法,研究了转半夏凝集素基因抗蚜棉花材料对棉蚜的控制效果。田间鉴定结果表明,在苗蚜发生高峰期,6个转基因抗蚜材料对棉蚜的抗性不同,蚜指减退率也有较大的差异;其中09-2和09-4的抗性较好,接近抗性2级水平。室内生物测定结果表明,和亲本对照相比,除09-2和09-4材料的棉蚜单雌产仔量略增加外,其它材料均减少,其中09-1、09-4、09-8的棉蚜产仔量差异达极显著水平。生命表参数表明,和对照材料相比,不同材料的净增值率、平均世代周期、内禀增长率、周限增长率和种群加倍时间均有不同程度的变化。总体来说,09-2和09-4材料对棉蚜有较好的控制效果。 展开更多
关键词 半夏凝集素基因抗蚜棉花 棉蚜 控制效果
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农杆菌介导半夏凝集素基因对油菜的遗传转化
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作者 李淑洁 王红梅 张正英 《甘肃农业科技》 2008年第6期13-15,共3页
以3~4d苗龄的甘蓝型油菜品种陇油2号带柄子叶为转化受体材料,通过农杆菌LBA4404介导将半夏凝集素抗虫基因(pta)导入,获得抗卡那霉素的抗性植株3株。实验中还对影响油菜遗传转化的外源激素种类和配比进行了研究,结果表明,在预培... 以3~4d苗龄的甘蓝型油菜品种陇油2号带柄子叶为转化受体材料,通过农杆菌LBA4404介导将半夏凝集素抗虫基因(pta)导入,获得抗卡那霉素的抗性植株3株。实验中还对影响油菜遗传转化的外源激素种类和配比进行了研究,结果表明,在预培养阶段1.0mg/L 2,4-D与0.2mg/L6-BA配合使用比单独使用2,4-D效果好,在幼苗分化阶段2.5mg/L6-BA、0.1mg/L NAA和0.5mg/L GA3配合使用有促进芽分化、抑制根分化的作用。 展开更多
关键词 农杆菌 半夏凝集素基因 油菜 介导 遗传转化
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农杆菌介导pta和sb 401基因共转化水稻的研究(英文) 被引量:3
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作者 起登凤 邹良平 +3 位作者 李平 王世全 李双成 尹福强 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期79-82,共4页
利用农杆菌介导法,将半夏凝集素(pta)基因和高赖氨酸蛋白(sb401)基因导入水稻中,经潮霉素抗性筛选,得到70株独立再生植株。通过PCR检测,从中筛选出18株转基因植株。对这些转基因植株当代进行Southern blotting分析表明:pta基因和sb... 利用农杆菌介导法,将半夏凝集素(pta)基因和高赖氨酸蛋白(sb401)基因导入水稻中,经潮霉素抗性筛选,得到70株独立再生植株。通过PCR检测,从中筛选出18株转基因植株。对这些转基因植株当代进行Southern blotting分析表明:pta基因和sb401基因已经共转化并整和到受体基因组中。对转基因植株后代的叶片进行RT-PCR分析表明:pta基因在转录水平上得到了有效的表达。测定10株T0转基因植株成熟种子的赖氨酸和总蛋白质量分数表明,与对照相比,赖氨酸和总蛋白的提高率分别为8.48%~35.34%和4.55%~32.74%,表明sb401基因在大部分转基因植株成熟种子中的蛋白质水平上得到了比较有效的表达。 展开更多
关键词 半夏凝集素基因 高赖氨酸蛋白基因 赖氨酸含量
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白肋烟转基因育种研究 被引量:1
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作者 林国平 戚华雄 +4 位作者 查中萍 王毅 肖宗友 周永碧 黄文昌 《湖北农业科学》 北大核心 2005年第6期14-16,共3页
利用农杆菌介导法将具有广谱抗病的葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GO)基因及抗虫半夏凝集素(Pinella Ternata Agglutinin,PTA)基因转化到烟草中,并研究了影响转化和抗性植株再生的一些因素。结果表明,基因型是影响转化和抗性植株再生的... 利用农杆菌介导法将具有广谱抗病的葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GO)基因及抗虫半夏凝集素(Pinella Ternata Agglutinin,PTA)基因转化到烟草中,并研究了影响转化和抗性植株再生的一些因素。结果表明,基因型是影响转化和抗性植株再生的关键因素,试验所用的3个品种KY14、KY8959、TN90中,KY14转化效率最高。用于烟草转化的侵染时间以15min为宜,共培养时间以2d最佳。PCR分子检测表明,外源GO基因及PTA基因已转入到烟草KY14中。淀粉-碘化钾显色反应检测到了转基因植株产生的过氧化氢,证实GO基因已经在烟草中发挥功能。 展开更多
关键词 白肋烟 葡萄糖氧化酶基因 半夏凝集素基因 根癌农杆菌 过氧化氢
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