应用^(99m)Tc标记法测定半乳糖-聚羟乙谷氨酰胺在小鼠体内的生物分布 被引量：1

1

作者 张静夏 李群 +2 位作者 黄爱东 潘仕荣 王琴梅 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期69-71,共3页

采用二环己基碳二亚胺 (DCC)作缩合剂 ,4_二甲基氨基吡啶 (DMPA)作催化剂 ,将双官能团螯合剂二亚乙基三胺五乙酸 (DTPA) ,键合在化学合成的聚氨基酸材料聚羟乙谷氨酰胺 (PHEG)及拟糖蛋白半乳糖 -聚羟乙谷氨酰胺 (GAL -PHEG)上 ,用同位素... 采用二环己基碳二亚胺 (DCC)作缩合剂 ,4_二甲基氨基吡啶 (DMPA)作催化剂 ,将双官能团螯合剂二亚乙基三胺五乙酸 (DTPA) ,键合在化学合成的聚氨基酸材料聚羟乙谷氨酰胺 (PHEG)及拟糖蛋白半乳糖 -聚羟乙谷氨酰胺 (GAL -PHEG)上 ,用同位素 99mTc对其进行标记 ,将Tc -PHEG和Tc -GAL-PHEG注射到小鼠体内 ,研究其在小鼠心、肝、胃、肾等器官中的生物分布 ;研究结果表明Tc -GAL -PHEG在肝中的含量高于Tc-PHEG 。 展开更多

关键词 标记法 测定 半乳糖-聚羟乙谷氨酰胺 生物分布 锝99 放射性同位素 药物载体材料

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β-半乳糖苷酶的筛选及低聚半乳糖制备工艺优化研究 被引量：1

2

作者 刘思琪 郭玉娟 +1 位作者 刘彤 那治国 《中国乳品工业》 北大核心 2025年第2期51-58,共8页

β-半乳糖苷酶催化乳糖水解得到的低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),具有维持肠道菌群稳定、免疫调节和抗炎等生物功能。文章通过酶活力以及转糖苷活力的测定,确定乳酸克鲁维酵母来源的β-半乳糖苷酶制备GOS。通过单因素试验得... β-半乳糖苷酶催化乳糖水解得到的低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),具有维持肠道菌群稳定、免疫调节和抗炎等生物功能。文章通过酶活力以及转糖苷活力的测定,确定乳酸克鲁维酵母来源的β-半乳糖苷酶制备GOS。通过单因素试验得到不同的加酶量、反应时间、反应温度和反应pH对GOS产率有显著性影响,而不同的底物浓度影响不大。利用响应面试验优化GOS产率,获得该酶水解乳糖转化合成GOS的最佳工艺条件。结果表明:底物浓度200 mg/mL、加酶量0.030%、反应温度36.9℃、反应时间2.5 h、反应pH值6.7为最优条件。GOS产率可达(12.61±0.17)%。优化后的工艺参数可为GOS的定向合成提供理论依据。 展开更多

关键词 低聚半乳糖 Β-半乳糖苷酶 响应面 GOS产率

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源于奶酪的产β-半乳糖苷酶乳酸片球菌的筛选及其合成低聚半乳糖特性

3

作者 李欣 张秋涵 +4 位作者 马子尧 关波 胡有贞 李谞 倪永清 《食品工业科技》 北大核心 2025年第6期170-178,共9页

为了给益生性低聚半乳糖(GOS)的合成提供新的乳酸菌酶源,本研究从新疆传统奶酪中筛选具有高转糖苷活性的β-半乳糖苷酶产酶菌株。在以乳糖为单一碳源的MRS固体培养基中加入显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal),以菌落生长颜色... 为了给益生性低聚半乳糖(GOS)的合成提供新的乳酸菌酶源,本研究从新疆传统奶酪中筛选具有高转糖苷活性的β-半乳糖苷酶产酶菌株。在以乳糖为单一碳源的MRS固体培养基中加入显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal),以菌落生长颜色进行初筛,以粗酶液酶活性以及转糖苷反应混合物的薄层色谱(TLC)进行复筛,结合其形态学、生理生化特征及16S rRNA序列同源性分析对产转糖苷活性的β-半乳糖苷酶菌株进行鉴定。单因素实验确定菌株的产酶条件和粗酶液的转糖苷反应条件,高效液相色谱分析转糖苷反应产物的组分及含量。筛选获得产转糖苷活性β-半乳糖苷酶的菌株6株,其中Pediococcus acidilactici Y1的产酶水平和转糖苷活性最高。单因素实验结果表明,P.acidilactici Y1在20 mg/mL乳糖,37℃培养18 h时,产酶水平最高可达(15.52±0.34)U/g。在初始乳糖浓度300 mg/mL,加酶量4.24 U/mL,50℃反应28 h时,GOS得率最高为38.4%±0.56%(w/w),乳糖残留量为30.9%±0.44%(w/w)。其中转移二糖、转移三糖以及转移四糖的质量分数分别为15.6%±0.21%(w/w)、18.3%±0.15%(w/w)和4.5%±0.01%(w/w)。以上结果表明,P.acidilactici Y1是一株产转糖苷活性β-半乳糖苷酶的新菌株,在益生性GOS的合成领域具有应用前景。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 转糖苷活性 低聚半乳糖 乳酸片球菌 奶酪

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Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 β-半乳糖苷酶的生物信息学分析、异源表达及其酶学性质

4

作者 符长春 杨瑞金 仝艳军 《食品科学》 北大核心 2025年第6期98-107,共10页

本研究旨在为低聚半乳糖(galactooligosaccharide,GOS)的合成提供新的双歧杆菌酶源,对Bifidobacterium bifidum ATCC 29521的β-半乳糖苷酶(β-gal^(^(ATCC29521)))进行生物信息学分析,并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现异源表达。... 本研究旨在为低聚半乳糖(galactooligosaccharide,GOS)的合成提供新的双歧杆菌酶源,对Bifidobacterium bifidum ATCC 29521的β-半乳糖苷酶(β-gal^(^(ATCC29521)))进行生物信息学分析,并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现异源表达。研究β-gal^(ATCC29521)的异源表达条件和发酵优化条件、酶学性质及其在乳清体系合成GOS的应用。生物信息学分析表明β-gal^(ATCC29521)属于糖苷水解酶家族2,不存在信号肽和跨膜区。发酵优化实验结果表明,E.coli BL21(DE3)-pET28a-β-gal^(ATCC29521)重组菌在含有10 g/L蔗糖、12 g/L胰蛋白胨、24 g/L酵母粉的培养基中,且0.05 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷在27℃诱导培养16 h后,酶活力可达318.03 U/mL。粗酶液经过镍柱亲和层析得到电泳纯蛋白,其最适pH值和最适温度分别为7.5和40℃。β-gal^(ATCC29521)纯化酶在温度10~30℃和pH 6.5~9.0范围内表现出良好的稳定性。Mn^(2+)和Mg^(2+)可显著提高酶活性,Cu^(2+)和Fe^(3+)则显著抑制酶活性。以乳清为底物合成GOS时,该酶的产率为29.83%。研究结果表明β-gal^(ATCC29521)在GOS的制备领域中具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 低聚半乳糖 Β-半乳糖苷酶 Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 发酵优化 酶学性质

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β-半乳糖苷酶的固定化及其合成低聚半乳糖研究

5

作者 李智慧 赖田甜 +4 位作者 张敏 郝瑞敏 姚梦珂 赵华 杨贞耐 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期102-112,共11页

选用壳聚糖、海藻酸钠、海藻酸钠/明胶、海藻酸钠/羧甲基纤维素为固定化载体材料,探究β-半乳糖苷酶的固定化方法,并将获得的适宜固定化酶应用于合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide,GOS)。结果表明,较优固定化载体为壳聚糖,β-半... 选用壳聚糖、海藻酸钠、海藻酸钠/明胶、海藻酸钠/羧甲基纤维素为固定化载体材料,探究β-半乳糖苷酶的固定化方法,并将获得的适宜固定化酶应用于合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide,GOS)。结果表明,较优固定化载体为壳聚糖,β-半乳糖苷酶的优化固定化条件为壳聚糖质量浓度0.03 g/mL,静置时间2 h,戊二醛体积分数2%,交联时间3 h,吸附时间12 h,固定化温度60℃,加酶量0.4 mg/g(以壳聚糖微球质量计)。与游离酶相比,固定化酶的耐酸、碱、热的稳定性显著提升。进一步利用壳聚糖固定化β-半乳糖苷酶合成GOS,确定了优化反应条件:加酶量为2 U/mL,pH值为6.0,反应温度为50℃,初始乳糖质量浓度为500 g/L,反应时间为14 h。此条件下GOS产率可达到52.61%,高于已报道的GOS产率(25.1%~46.0%),且产物中聚合度大于等于3的GOS含量为37.07%。固定化酶重复使用5次后,产GOS活性仍保留了97.21%,研究获得的壳聚糖固定化β-半乳糖苷酶在GOS合成领域具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖合成 固定化方法 壳聚糖 交联

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半乳糖上调内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平抑制巨噬细胞活性

6

作者 吴妮婷 摄渊婷 +2 位作者 刘红梅 李瑾 贾乙 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期1502-1511,共10页

目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该... 目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该聚糖配体末端糖苷键类型;分别用左旋葡萄糖、葡萄糖、N-乙酰基葡萄糖、甘露糖、N-乙酰基甘露糖、半乳糖、唾液酸、蔗糖处理内皮细胞48 h,采用流式细胞术检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体的表达;将内皮细胞分为对照组和半乳糖组(n=3),Western blot、流式细胞术、免疫荧光分析半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体表达的影响;α2-3,6,8唾液酸酶处理内皮细胞后,Western blot检测半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体恢复时间的影响;半乳糖处理内皮细胞后,Western blot检测分析细胞内唾液酸合成关键酶(GNE、NANS、NANP、CMAS、NPL以及ST3Gals)表达水平,并用RT-qPCR验证相关蛋白的mRNA表达;siRNA敲低NANP、CMAS及ST3Gal-Ⅲ,Western blot检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平变化;巨噬细胞与内皮细胞共培养实验分析Siglec-9聚糖配体的增加对巨噬细胞的凋亡与吞噬能力的影响。结果内皮细胞上表达有Siglec-9聚糖配体且该配体为末端结构为α2-3连接的唾液酸糖蛋白;与对照组比较,半乳糖组内皮细胞上该聚糖配体表达水平显著增加(P<0.01),但半乳糖的添加对该配体的自我恢复时间无影响;与对照组比较,半乳糖处理的内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ表达水平升高(P<0.05,P<0.01),且RT-qPCR验证结果与其一致;抑制内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ的表达后,内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平下降(P<0.01)。共培养实验中,与未处理组比较,半乳糖处理的内皮细胞促进巨噬细胞凋亡增加(P<0.01),并导致其吞噬能力减弱(P<0.05)。结论半乳糖通过NANP-CMAS-ST3Gal-Ⅲ通路上调内皮细胞上Siglec-9聚糖配体水平,从而抑制巨噬细胞活性。 展开更多

关键词 半乳糖 内皮细胞 唾液酸特异性Ig样凝集素-9聚糖配体 唾液酸合成关键酶 巨噬细胞

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米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖 被引量：9

7

作者 归莉琼 魏东芝 +1 位作者 崔玉敏 俞俊棠 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期422-426,共5页

研究了温度、ｐＨ、酶量和起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响，发现乳糖水解为单糖和合成低聚糖所需的最佳条件并不相同；利用有机溶剂作反应介质有利于低聚糖合成。在疏水性环己烷／水（９５／５，Ｖ／Ｖ）反应体系中得到的低聚糖浓... 研究了温度、ｐＨ、酶量和起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响，发现乳糖水解为单糖和合成低聚糖所需的最佳条件并不相同；利用有机溶剂作反应介质有利于低聚糖合成。在疏水性环己烷／水（９５／５，Ｖ／Ｖ）反应体系中得到的低聚糖浓度为５２．６ｇ／Ｌ，占总产物的３９．１９％；在亲水性乙酸乙酯／水（８０／２０，Ｖ／Ｖ）体系中得到低聚糖的浓度为４０．０４ｇ／Ｌ，占总产物的３９．６２％。另外，疏水性有机溶剂抑制低聚糖水解的能力强于亲水性溶剂。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 合成 米曲霉 半乳糖

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米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的工艺研究 被引量：10

8

作者 许牡丹 杨伟东 +2 位作者 柯蕾 檀志芬 崔丽娜 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期183-185,189,共4页

研究了反应时间、乳糖浓度、温度、加酶量、pH对低聚半乳糖合成的影响,结果表明,加酶量、乳糖浓度、反应温度的影响较大。通过正交实验确定的米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最佳工艺条件为:pH6.0、温度55℃、乳糖浓度40%、加... 研究了反应时间、乳糖浓度、温度、加酶量、pH对低聚半乳糖合成的影响,结果表明,加酶量、乳糖浓度、反应温度的影响较大。通过正交实验确定的米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最佳工艺条件为:pH6.0、温度55℃、乳糖浓度40%、加酶量40U/g、反应时间32h。在最佳工艺条件下,低聚半乳糖的合成率为32.4%。 展开更多

关键词 米曲霉 低聚半乳糖 Β-半乳糖苷酶

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固定化β-半乳糖苷酶催化生成低聚半乳糖 被引量：15

9

作者 秦燕 宁正祥 胡新宇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期12-16,共5页

研究了聚丙烯酰胺包埋后的乳糖酶的基本酶学性质和 pH、温度、反应时间、起始乳糖质量分数和酶用量对固定化酶合成低聚糖的影响。得到填充床式连续反应优化反应条件为 4 0 %的乳糖质量分数 ,反应温度 5 5℃ ,pH 5 5 ,反应停留时间 4 5m... 研究了聚丙烯酰胺包埋后的乳糖酶的基本酶学性质和 pH、温度、反应时间、起始乳糖质量分数和酶用量对固定化酶合成低聚糖的影响。得到填充床式连续反应优化反应条件为 4 0 %的乳糖质量分数 ,反应温度 5 5℃ ,pH 5 5 ,反应停留时间 4 5min ,酶用量 30U/g乳糖。得率可达 4 0 % 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 固定化 合成 凝胶包埋

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转糖基β-半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖的低乳糖牛奶 被引量：7

10

作者 李正义 肖敏 +1 位作者 卢丽丽 李玉梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期241-244,共4页

研究利用具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。含低聚半乳糖的低乳糖牛奶既能解决乳糖不耐症问题,同时还在牛奶中增添了低聚半乳糖双歧因子。从Enterobacter sp．B5的无细胞抽提液中,利用硫酸铵沉淀制备具有转... 研究利用具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。含低聚半乳糖的低乳糖牛奶既能解决乳糖不耐症问题,同时还在牛奶中增添了低聚半乳糖双歧因子。从Enterobacter sp．B5的无细胞抽提液中,利用硫酸铵沉淀制备具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶,作用鲜牛奶生成含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。利用薄层层析、高压液相色谱技术和软件NIH ImageJ 1．36分析了反应产物中的糖组分(葡萄糖、半乳糖、乳糖和低聚糖(包括转移二糖和三糖))。结果显示酶作用后的鲜牛奶中大约70%的乳糖转化为葡萄糖和半乳糖,至少10%的乳糖通过转糖基反应生成低聚半乳糖。在酶浓度为3U/ml,50℃酶解4h的反应条件下,获得含低聚半乳糖的低乳糖牛奶的糖组成为0．59%低聚半乳糖(含0．37%转移二糖和0．22%三糖),1．33%乳糖,2．83%单糖。本研究利用软件NIH ImageJ 1．36定量分析样品糖组分的TLC结果,可以避免乳糖的同分异构体-转移二糖在高压液相色谱结果中因无法分离而造成的漏检。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 转糖基作用 低聚半乳糖 低乳糖牛奶

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鹰嘴豆α-低聚半乳糖的肠道益生功能 被引量：10

11

作者 贺晋艳 张芸 +2 位作者 李伟 孙怡 曾晓雄 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第15期94-98,共5页

以鹰嘴豆为材料,通过提取与活性炭-硅藻土柱层析分离纯化,制备鹰嘴豆粗提物和不同纯化程度的鹰嘴豆α-低聚半乳糖(α-GOS)样品。采用体外厌氧粪样混合培养与荧光原位杂交技术,评价鹰嘴豆α-GOS的益生功能。结果表明:鹰嘴豆α-GOS对肠道... 以鹰嘴豆为材料,通过提取与活性炭-硅藻土柱层析分离纯化,制备鹰嘴豆粗提物和不同纯化程度的鹰嘴豆α-低聚半乳糖(α-GOS)样品。采用体外厌氧粪样混合培养与荧光原位杂交技术,评价鹰嘴豆α-GOS的益生功能。结果表明:鹰嘴豆α-GOS对肠道有益菌(双歧杆菌、乳酸菌)有较好的增殖作用,而对有害菌(拟杆菌、梭状菌)的生长有一定的抑制作用;鹰嘴豆α-GOS只是改变了肠道内菌体的组成,而对总体菌群的数量基本没有影响;α-GOS含量高于90%的鹰嘴豆α-GOS样品的益生指数(PI)最高(2.00),α-GOS含量为70%～80%、80%～90%的鹰嘴豆α-GOS样品及鹰嘴豆粗提物的PI值依次为1.39、1.73和0.89,而对照组(不加任何碳源的处理)为负值(-0.29)。总之,鹰嘴豆α-GOS具有很好的肠道益生功能。 展开更多

关键词 鹰嘴豆 α-低聚半乳糖 益生功能 荧光原位杂交技术 体外发酵

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β-半乳糖苷酶催化乳糖合成低聚半乳糖 被引量：10

12

作者 李美玲 江波 张涛 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期234-239,共6页

通过对环状芽孢杆菌B.circulans SK28.003的发酵获得β-半乳糖苷酶酶液,经过浓缩、盐析沉淀和低温冷冻干燥,制备酶粉。利用β-半乳糖苷酶的转糖苷功能催化乳糖合成低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),采用单因素和正交试验优化,... 通过对环状芽孢杆菌B.circulans SK28.003的发酵获得β-半乳糖苷酶酶液,经过浓缩、盐析沉淀和低温冷冻干燥,制备酶粉。利用β-半乳糖苷酶的转糖苷功能催化乳糖合成低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),采用单因素和正交试验优化,通过高效液相色谱法检测,以GOS产率为评价指标,确定最佳合成条件为:乳糖起始质量浓度为50 g/d L,加酶量为6 U/g,反应温度为60℃,p H 7.5。在此条件下反应12 h,GOS产率可达45.5%。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 转糖苷功能 条件优化 正交试验

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半乳糖-聚乙二醇-聚-L-赖氨酸共聚物的制备与分析 被引量：3

13

作者 胡海梅 潘仕荣 +2 位作者 张璇 温玉婷 郭振寰 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期38-43,共6页

将相对分子质量为4000的聚乙二醇中活性较弱的羟基转化为氨基,利用乳糖分子中含有半缩醛结构,可与双端氨基聚乙二醇(AT-PEG)分子中的伯氨基形成Schiff碱,然后在氰基硼氢化钠作用下选择性还原为稳定的C-N单键,使半乳糖连接在PEG的一个氨... 将相对分子质量为4000的聚乙二醇中活性较弱的羟基转化为氨基,利用乳糖分子中含有半缩醛结构,可与双端氨基聚乙二醇(AT-PEG)分子中的伯氨基形成Schiff碱,然后在氰基硼氢化钠作用下选择性还原为稳定的C-N单键,使半乳糖连接在PEG的一个氨基上,合成半乳糖-单端氨基聚乙二醇(Gal-PEG-NH2),以Gal-PEG-NH2为大分子引发剂,引发Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸-N-羧酸酐[Lys(Z)-NCA]开环聚合制备一系列半乳糖-聚乙二醇-聚-L-赖氨酸(PLL-PEG-Gal)嵌段共聚物,通过调节Lys(Z)-NCA和Gal-PEG-NH2的摩尔比例([A]/[I])可控制聚合物的相对分子质量。利用IR、13C-NMR、UV等方法进行共聚物结构分析,并对其接糖率进行了分析。结果表明,乳糖与双端氨基聚乙二醇反应生成的带有一侧氨基的聚乙二醇能引发Lys(Z)-NCA聚合生成Gal-PEG-PLL,其中半乳糖的接入率为8.3%。随着[A]/[I]的增加,共聚物的相对分子质量变大。 展开更多

关键词 半乳糖 半乳糖-聚乙二醇-聚-L-赖氨酸共聚物 开环聚合 生物降解聚合物

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K.fragilis β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的组成分析 被引量：6

14

作者 刘建福 陈庆森 王璋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期109-111,共3页

采用SephadexG-15与DTF-02树脂对K.fragilisβ-半乳糖苷酶催化生产低聚半乳糖的反应液中的糖类物质进行了分离纯化。分别应用高效液相色谱测定了分离的低聚半乳糖的纯度，气相色谱分析了该糖的化学组成。酶反应液经过SephadexG-15色谱... 采用SephadexG-15与DTF-02树脂对K.fragilisβ-半乳糖苷酶催化生产低聚半乳糖的反应液中的糖类物质进行了分离纯化。分别应用高效液相色谱测定了分离的低聚半乳糖的纯度，气相色谱分析了该糖的化学组成。酶反应液经过SephadexG-15色谱柱分成低聚半乳糖、乳糖和单糖(葡萄糖、半乳糖)3个组分。由SephadexG-15色谱柱收集的低聚半乳糖组分上DTF树脂柱出现2个洗脱峰，分别为低聚半乳糖和乳糖。经过上述2步纯化的低聚半乳糖组分在高效液相色谱(HPLC)上为一个单峰，其保留时间为10.481min。该低聚半乳糖是由1分子葡萄糖和2分子半乳糖组成的三糖。 展开更多

关键词 低聚半乳糖 纯化 组成分析 催化合成 K.fragilis Β-半乳糖苷酶

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β-半乳糖苷酶交联酶聚体的制备及酶学性质研究 被引量：3

15

作者 邢肖肖 王梦凡 +2 位作者 齐崴 苏荣欣 何志敏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期158-162,167,共6页

研究了乳酸克鲁维酵母所产β-半乳糖苷酶交联酶聚体(CLEAs)的制备条件和酶学性质,并应用于乳糖为底物催化制备低聚半乳糖(GOS)的反应体系中。结果表明:将β-半乳糖苷酶酶液稀释20倍,按体积比1∶1加入异丙醇,4℃下沉淀30min,加入体积分数... 研究了乳酸克鲁维酵母所产β-半乳糖苷酶交联酶聚体(CLEAs)的制备条件和酶学性质,并应用于乳糖为底物催化制备低聚半乳糖(GOS)的反应体系中。结果表明:将β-半乳糖苷酶酶液稀释20倍,按体积比1∶1加入异丙醇,4℃下沉淀30min,加入体积分数为0.125%交联剂戊二醛,4℃下交联30min,离心洗涤,所得CLEAs的酶活保留达45.77%;与游离酶相比,β-半乳糖苷酶CLEAs的最适p H由7提高至8,最适温度由30℃提高至37℃,p H和温度的适用范围有所拓宽,且37℃下热稳定性提高1倍,具有更高的转糖苷活性选择性,适于制备功能性低聚半乳糖。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 Β-半乳糖苷酶 交联酶聚体 低聚半乳糖

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银条α-低聚半乳糖的免疫调节作用研究 被引量：4

16

作者 马丽苹 秦翠丽 +2 位作者 邱智军 尤晓颜 曾晓雄 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期356-358,363,共4页

以银条为原料,通过乙醇浸提与D101大孔吸附树脂初步纯化,制备得α-低聚半乳糖(α-GOS),并采用免疫抑制小鼠模型评价其免疫调节活性。结果表明:银条α-GOS含量为76.39%,主要由蔗糖、棉籽糖和水苏糖组成,其中水苏糖约占总α-GOS的86.03%... 以银条为原料,通过乙醇浸提与D101大孔吸附树脂初步纯化,制备得α-低聚半乳糖(α-GOS),并采用免疫抑制小鼠模型评价其免疫调节活性。结果表明:银条α-GOS含量为76.39%,主要由蔗糖、棉籽糖和水苏糖组成,其中水苏糖约占总α-GOS的86.03%。银条α-GOS能显著地提高环磷酰胺诱导的免疫功能低下小鼠脾脏指数、迟发型超敏反应的耳肿胀度和血清中溶菌酶的活性,且这种变化与银条α-GOS呈现剂量依赖关系。因此,银条α-GOS具有良好的免疫调节活性。 展开更多

关键词 银条 α-低聚半乳糖 免疫调节 水苏糖 迟发型超敏反应

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鹰嘴豆α-低聚半乳糖的稳定性和美拉德反应特性 被引量：6

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作者 罗存回 贺晋艳 曾晓雄 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第23期91-95,共5页

以鹰嘴豆为原料,通过提取与活性炭-硅藻土柱层析分离纯化,制备得到低聚半乳糖含量为85%的α-低聚半乳糖样品(α-GOS),然后对其热稳定性、酸稳定性及美拉德反应特性进行研究。结果表明:鹰嘴豆α-GOS对热处理具有较好的稳定性,当加热温度... 以鹰嘴豆为原料,通过提取与活性炭-硅藻土柱层析分离纯化,制备得到低聚半乳糖含量为85%的α-低聚半乳糖样品(α-GOS),然后对其热稳定性、酸稳定性及美拉德反应特性进行研究。结果表明:鹰嘴豆α-GOS对热处理具有较好的稳定性,当加热温度为100℃时,鹰嘴豆α-GOS的残留率为94.27%,而同样条件下蔗糖的残留率就比较低。在酸处理的情况下,鹰嘴豆α-GOS的稳定性也较好,当pH值为3.0时,鹰嘴豆α-GOS的残留率为94.95%。鹰嘴豆α-GOS比葡萄糖的美拉德反应程度要差,当反应时间为3h时,相同条件下鹰嘴豆α-GOS的褐变程度相对于葡萄糖的70.65%。 展开更多

关键词 鹰嘴豆 α-低聚半乳糖 高效液相色谱法 稳定性 美拉德反应

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重组α-半乳糖苷酶酶解大豆低聚糖研究 被引量：3

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作者 王璇琳 李素波 +3 位作者 高红伟 田曙光 宫锋 章扬培 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期222-226,共5页

本研究应用本实验室基因重组咖啡豆α-半乳糖苷酶对棉籽糖和水苏糖进行了酶解,应用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法检测了酶解前后大豆低聚糖的变化情况,结合大豆制品传统加工工艺,提出了酶的添加方式和工艺。

关键词 大豆低聚糖 肠胃胀气 基因重组α-半乳糖苷酶

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β-半乳糖苷酶全细胞催化制备低聚半乳糖工艺优化

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作者 段绪果 孙晓军 吴敬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期61-65,共5页

β-半乳糖苷酶能以乳糖为底物生产低聚半乳糖。利用前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,进行摇瓶发酵并诱导培养。酵母菌体经过离心、洗涤后作为全细胞催化剂用于转化乳糖制备低聚半乳糖。为了提高转化率,首先通过单因... β-半乳糖苷酶能以乳糖为底物生产低聚半乳糖。利用前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,进行摇瓶发酵并诱导培养。酵母菌体经过离心、洗涤后作为全细胞催化剂用于转化乳糖制备低聚半乳糖。为了提高转化率,首先通过单因素实验,优化了反应的初始p H、温度、乳糖浓度、加酶量和反应时间等因素。在此基础上,采用正交实验进一步优化了反应条件,优化后的最佳条件为:反应初始p H 6.0,反应温度为80℃,乳糖浓度为80%(w/v),加酶量为5 U/m L。在最佳转化条件下,反应24 h,低聚半乳糖的最高转化率为59.9%。与游离酶转化方法相比,该反应体系中的杂蛋白和美拉德反应较少,更有利于低聚半乳糖产品的后续分离。该研究建立的全细胞酶转化方法,具有转化率高、简单易行以及容易操作等优点。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 毕赤酵母 全细胞催化剂 条件优化 低聚半乳糖

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响应面法优化β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖工艺 被引量：8

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作者 孙聪聪 庞道睿 +4 位作者 黎尔纳 李倩 邹宇晓 廖森泰 刘凡 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第22期246-255,共10页

本文以乳糖为起始原料,在单因素实验的基础上,结合响应面分析法考察加酶量、反应温度、反应时间、反应pH等因素对低聚半乳糖总产率和低聚半乳四糖产率的影响,优化β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖工艺。结果表明,β-半乳糖苷酶法制备低聚... 本文以乳糖为起始原料,在单因素实验的基础上,结合响应面分析法考察加酶量、反应温度、反应时间、反应pH等因素对低聚半乳糖总产率和低聚半乳四糖产率的影响,优化β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖工艺。结果表明,β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖的最佳工艺参数为起始乳糖浓度300 g/L、加酶量8.25 U/g乳糖、反应温度49℃、反应时间16 h、反应pH5.6。在此条件下,低聚半乳糖总产率为14.61%,低聚半乳四糖产率为3.31%。该方法针对性提高高聚合度低聚半乳糖的产率,可为低聚半乳糖的功能性应用及特医食品的研发提供参考。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 制备 优化 响应面法

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