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染料在聚丙烯酰胺上层凝胶电泳免疫印迹中的应用
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作者 陈伟光 严辰杰 +5 位作者 许朝进 董依婷 毛智超 孙嘉玮 王万铁 袁琳波 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期1036-1040,共5页
目的:探讨染料Remazol BrOrange yellow(RBY)和赤藓红(erythrosine,ERY)分别用于十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺浓缩胶染色后对免疫印迹分析效果的影响。方法:将聚丙烯酰胺凝胶分为5组:对照组(按常规试剂盒步骤制备)、终浓度为0.08 g/L的RBY... 目的:探讨染料Remazol BrOrange yellow(RBY)和赤藓红(erythrosine,ERY)分别用于十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺浓缩胶染色后对免疫印迹分析效果的影响。方法:将聚丙烯酰胺凝胶分为5组:对照组(按常规试剂盒步骤制备)、终浓度为0.08 g/L的RBY染色组、终浓度为0.16 g/L的RBY染色组、终浓度为0.08 g/L的ERY染色组和终浓度为0.8 g/L的ERY染色组。依次制胶进行电泳,结束后用考马斯亮蓝对电泳胶进行染色,观察蛋白条带;随后转膜,并进行PVDF膜封闭、Ⅰ抗及Ⅱ抗孵育、洗涤,最后进行曝光拍照,观察目的蛋白黏着斑蛋白(vinculin)条带。结果:与未染色浓缩胶相比,RBY或ERY预染色浓缩胶的上样孔更加清晰可见,且经Marker显示和电泳后的凝胶考马斯亮蓝染色分析表明,RBY或ERY染色浓缩胶后,蛋白电泳能力与未染色浓缩胶无显著差异。蛋白免疫印迹对比分析也表明,转移到PVDF膜的蛋白样品检测不受影响。结论:RBY或ERY预染色浓缩胶可提高基于凝胶的电泳和免疫印迹分析的工作效率。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 Remazol BrOrange yellow 赤藓红 免疫印迹
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癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析非变性蛋白质分子量的适用性鉴定
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作者 臧家涛 徐竞 +2 位作者 李东红 刘建仓 刘良明 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2012年第4期55-58,61,共5页
目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相... 目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相关性。结果:5种标准分子量蛋白质的四级结构完整,log Mr与x线性相关性较低;但其中的α-牛乳白蛋白、鸡蛋清白蛋白、牛血清白蛋白的log Mr与x线性相关性较好,相关系数平方值(R2)>0.94。结论:SDecS-PAGE可用于测定有限种类的非变性蛋白质的分子量。 展开更多
关键词 癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 非变性蛋白质 分子量测定 SDecS-PAGE
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连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳制备人和兔中性粒细胞防御素各组分 被引量:11
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作者 王永杰 齐名 《医学研究生学报》 CAS 2001年第2期106-109,共4页
目的 :建立和应用连续酸 -尿素 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (CAU- PAGE)纯化人和兔中性粒细胞防御素组分(HNP- 1~ 3和 RNP- 1~ 5 )。 方法 :从人外周血或兔人工无菌性腹水中分离中性粒细胞 ,用 5 %冰醋酸直接提取 ,经 CAU- PA GE洗脱 ,获... 目的 :建立和应用连续酸 -尿素 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (CAU- PAGE)纯化人和兔中性粒细胞防御素组分(HNP- 1~ 3和 RNP- 1~ 5 )。 方法 :从人外周血或兔人工无菌性腹水中分离中性粒细胞 ,用 5 %冰醋酸直接提取 ,经 CAU- PA GE洗脱 ,获取纯化的 HNP- 1~ 3或 RNP- 1~ 5组分。以聚丙烯酰胺凝胶过滤作为参比方法。 结果 :1次洗脱电泳可从 5× 10 8个细胞中获得纯化的 HNP组分约 1.5 0 mg或 RNP组分 2 .5 0 mg,并保持天然的生物活性。 结论 :CAU- PAGE是一种较简便、快速。 展开更多
关键词 防御素 中性粒细胞 连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳 制备
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聚丙烯酰胺凝胶电泳及其在食品检测中的应用 被引量:8
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作者 唐亚丽 施用晖 +1 位作者 赵伟 乐国伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期111-116,共6页
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷数量来进行分离。文中就其原理及在食品检测方面的应用做一简要概述。
关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 食品检测
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两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响 被引量:2
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作者 周艳芬 赵晓瑜 +1 位作者 李亚东 乔环宇 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第1期59-61,共3页
以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收。它们的灵敏度分别为500ng和5ng;蛋白质回收率分别为37.9%和74.4%。
关键词 牛血清白蛋白 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色方法 蛋白质回收 马斯亮蓝 咪唑—Zn
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利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定玉米种子纯度的研究 被引量:2
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作者 严莉 谢英维 +2 位作者 颜彤 刘炜 张亚平 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第2期125-126,共2页
利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97%以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种... 利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97%以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种手段。 展开更多
关键词 玉米 种子贮存蛋白 种子蛋白 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE 品种纯度 杂交种 自交系
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利用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定壳斗科植物种质资源
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作者 刘慧娟 冯志国 +2 位作者 李先文 彭峰 袁红雨 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第7期115-117,共3页
通过对5个壳斗科植物盐溶蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析,为壳斗科植物的种质资源鉴定提供科学依据。以栗属(板栗、锥栗、茅栗)和栎属(麻栎)5个壳斗科植物为试验材料,分别提取种子内盐溶蛋白,并进行PAGE电泳检测。结果表明,茅栗(Ca... 通过对5个壳斗科植物盐溶蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析,为壳斗科植物的种质资源鉴定提供科学依据。以栗属(板栗、锥栗、茅栗)和栎属(麻栎)5个壳斗科植物为试验材料,分别提取种子内盐溶蛋白,并进行PAGE电泳检测。结果表明,茅栗(Castanea seguinii Dode)的盐溶蛋白种类最丰富,有19条,而麻栎(Quercus acutissima Carr)最少,有11条。对每条谱带进行相似性比较,发现茅栗与板栗(Castanea mollissima Bl)的相似程度最高,其次是锥栗[Castanea henr-yi(Skan)Rehd.et.Wils]和麻栎,再次是茅栗与锥栗,而板栗与麻栎的差异性最大。从而推断出它们之间进化关系:麻栎→锥栗→茅栗→板栗。表明利用SDS-PAGE技术可用于鉴定壳斗科植物之间的进化关系和亲缘关系。 展开更多
关键词 盐溶蛋白 十二烷基硫酸-聚丙烯酰胺凝胶电泳 壳斗科 进化
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银屑病患者指甲和鳞屑的蛋白质SDS-电泳图谱和转谷氨酰胺酶活性探讨
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作者 张玉红 李红文 吴景兰 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期700-702,共3页
目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PA... 目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。应用辣根过氧化物酶(HRP)-单丹酰尸胺结合物对鳞屑铺片标本检测TGase 1酶活性。结果:健康人指甲和鳞屑的SDS-PAGE图谱皆呈现4条主带:63 ku、54 ku、48 ku及38 ku,银屑病患者指甲及鳞屑的SDS-PAGE图谱也呈现此4条主带,但多数主带扫描数值的水平较高,P<0.01。健康人的鳞屑铺片标本TGase 1酶活性呈现为棕黄色细颗粒定位于角质深层角质形成细胞(KC)的周缘;相比之下银屑病患者的TGase 1酶活性缺乏。结论:指甲及鳞屑的SDS-PAGE主带相似,前者图谱更清晰可能与其蛋白较稳定有关。银屑病患者比健康人的SDS-PAGE图谱主带表达水平升高,提示其KC可能呈增生状态,表达产物较多;患者TGase 1酶活性的缺如提示其表皮屏障功能有缺陷,可能与其参与代偿性增生有关。 展开更多
关键词 银屑病 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 活性 转谷氨酰胺 指甲 鳞屑
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双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质
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作者 江培洲 甘明 +3 位作者 沈新明 黄华 李欣 姚开泰 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期24-28,62,共6页
[目的]寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。[方法]用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向... [目的]寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。[方法]用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。[结果]软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质,质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白P1前体、微管蛋白beta-5链;TPA处理后明显表达下调的蛋白质有galectin-1、N-myc下游调节基因1蛋白。[结论]TPA刺激NIH3T3细胞后可以下调生长抑制基因的表达,同时上调与细胞增生相关基因的表达。因此,促癌剂TPA可能对NIH3T3细胞有促进增生的作用。 展开更多
关键词 TPA 聚丙烯酰胺双向凝胶电泳 细胞增生 促癌剂 双向凝胶电泳-飞行时间质谱法
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几种动物类中药材SDS-PAGE的电泳鉴别 被引量:11
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作者 史克莉 陈振江 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期411-413,共3页
目的 :建立几种动物类中药的电泳鉴别方法。方法 :利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)技术 ,对 3种蜂王浆、牛血清蛋白、金钱白花蛇[2 ] 、乌梢蛇、鹿蹄筋、炮制前后的蝎子[3 ] 进行鉴别分析。结果 :结果表明 3种蜂王浆... 目的 :建立几种动物类中药的电泳鉴别方法。方法 :利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)技术 ,对 3种蜂王浆、牛血清蛋白、金钱白花蛇[2 ] 、乌梢蛇、鹿蹄筋、炮制前后的蝎子[3 ] 进行鉴别分析。结果 :结果表明 3种蜂王浆间 ,炮制前后的蝎子间的电泳图谱存在显著差异 ;金钱白花蛇、乌梢蛇、鹿蹄筋也有各自的谱带。结论 :电泳鉴别可为动物类中药的鉴别提供一项可靠的 。 展开更多
关键词 动物中药 中药鉴别 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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七种水蛭组织细胞可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析 被引量:7
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作者 汪波 张彬 +2 位作者 龚元 于翔 吕军仪 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第16期3423-3425,共3页
采用垂直平板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对我国7种常见水蛭的组织细胞可溶性蛋白成分进行电泳图谱特性分析。结果表明,7种水蛭组织细胞中可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱中多数条带相同,但也存在差异。其中日本医蛭(Hirud... 采用垂直平板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对我国7种常见水蛭的组织细胞可溶性蛋白成分进行电泳图谱特性分析。结果表明,7种水蛭组织细胞中可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱中多数条带相同,但也存在差异。其中日本医蛭(Hirudo nipponia Whitman)蛋白条带最多,达28个,并且吸血蛭类的蛋白条数要明显大于非吸血蛭类,而3种不同地理分布的菲牛蛭(Hirudi-naria manillensis Lesson)间表达蛋白图谱无明显差异。该研究为在分子水平分析我国水蛭不同种类、同种不同地理分布及不同食性间的差异积累了新的生物学数据,对其分类和药材鉴别提供了参考依据。 展开更多
关键词 水蛭 可溶性蛋白 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
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二硫苏糖醇和β-巯基乙醇在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应 被引量:2
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作者 杨平 李敏惠 +4 位作者 常山 何建荣 罗兴艳 刘阳 邹强 《医学研究生学报》 CAS 2009年第9期916-919,共4页
目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品... 目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品和未还原蛋白样品间隔上样进行电泳,通过观察未还原样品的电泳条带来判断是否受到邻近泳道还原剂的扩散影响。结果:还原剂DTT或2-ME可扩散到邻近泳道,使未还原蛋白样品发生部分还原,扩散效应的强弱与还原剂的含量成正相关。结论:SDS-PAGE电泳过程中DTT和2-ME均存在扩散效应,在同一块凝胶上同时分离还原蛋白和未还原蛋白时,至少应该在2个泳道间设置一空白泳道,以规避扩散效应。 展开更多
关键词 还原剂 扩散效应 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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聚乙二醇化学修饰的重组L-门冬酰胺酶对小鼠白血病细胞P_(388)的抑制作用
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作者 曹荣月 钱之玉 +2 位作者 竞永华 申克宇 刘景晶 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第6期628-632,共5页
目的 :考察聚乙二醇 (polyethyleneglycol,PEG)化学修饰的重组L 门冬酰胺酶 (recombinantL asparaginase ,rL ASP)的抗肿瘤活性。方法 :PEG化学修饰rL ASP ,获得的化学修饰酶 (polyethylenegly colmodifiedrecombinantL asparaginase ,r... 目的 :考察聚乙二醇 (polyethyleneglycol,PEG)化学修饰的重组L 门冬酰胺酶 (recombinantL asparaginase ,rL ASP)的抗肿瘤活性。方法 :PEG化学修饰rL ASP ,获得的化学修饰酶 (polyethylenegly colmodifiedrecombinantL asparaginase ,rL ASP PEG)利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (sodi umdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis ,SDS PAGE)观察其分子大小变化 ,四甲基偶氮唑盐(3 (4 ,4 dimcthylthioazol 2 yl) 2 ,5 diphenyl tetrazoliumbromide ,MTT)法和流式细胞仪 (flowcytometer,FCM )检测rL ASP PEG对体外培养的小鼠白血病细胞P3 3 8增殖作用的抑制作用 ,腹腔给药考察rL ASP PEG对小鼠移植性实体瘤P3 3 8抑瘤效果 ,透射电镜(transmissionelectronmicroscopy ,TEM )观察rL ASP PEG引起的肿瘤组织超微病理变化。结果 :SDS PAGE显示 ,rL ASP PEG的分子量大于rL ASP ;MTT实验表明 ,rL ASP PEG能抑制体外培养的小鼠P3 88白血病细胞的增殖 ,半数有效浓度 (inhibitoryconcen tration 5 0 % ,IC50 )为 2 .0 5 6IU·ml-1。FCM结果表明 ,rL ASP PEG主要将肿瘤细胞P3 88抑制在G0 +G1期 ,S期细胞减少。DBA 2荷瘤小鼠的抑瘤实验表明rL ASP PEG对移植性实体瘤P3 3 8有显著抑制作用 。 展开更多
关键词 重组L-门冬酰胺 聚乙二醇 肿瘤抑制 化学修饰 半数有效浓度 白血病 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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不同产地乌梅的SDS-PAGE的电泳鉴别 被引量:2
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作者 史克莉 黄凤桥 《中医药学刊》 2005年第11期2079-2080,共2页
目的对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别。方法利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析。结果不同... 目的对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别。方法利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析。结果不同产地乌梅的电泳图谱存在差异,各品种图谱基本相似。结论电泳鉴别可为中药不同产地药材蛋白质成分鉴别提供一项可靠的简便的检测方法。 展开更多
关键词 乌梅 不同产地成分鉴别 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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枣树叶片蛋白质提取及SDS-PAGE单向电泳条件优化 被引量:6
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作者 杜绍华 卜志国 《安徽农业科学》 CAS 2012年第13期7631-7632,7655,共3页
[目的]对枣树叶片蛋白质提取方法及其SDS-PAGE单向电泳条件进行优化。[方法]对枣树5种蛋白质提取方法和影响SDS-PAGE单向电泳的因素进行比较研究。[结果]改良丙酮沉降法提取出的蛋白质杂质较少,条带数量多且清晰,同时通过研究确定了一... [目的]对枣树叶片蛋白质提取方法及其SDS-PAGE单向电泳条件进行优化。[方法]对枣树5种蛋白质提取方法和影响SDS-PAGE单向电泳的因素进行比较研究。[结果]改良丙酮沉降法提取出的蛋白质杂质较少,条带数量多且清晰,同时通过研究确定了一套适用于枣树蛋白检测的SDS-PAGE凝胶制备及电泳方法。[结论]该研究为进一步从分子生物学的角度研究枣树与枣疯病植原体的互作机制提供了技术的基础。 展开更多
关键词 枣树 蛋白提取 十二烷基酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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大豆特征蛋白的SDS-PAGE研究 被引量:4
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作者 管方方 卢伟京 +4 位作者 许旭 董宏伟 李冰瑶 陈保华 钟佳琪 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期438-442,共5页
大豆蛋白作为乳品中的主要掺假蛋白,对其进行鉴别并建立相应的检测和分析方法,对于健全乳制品安全监管体制,确保消费者的合法权益具有重要的意义。该文利用SDS-PAGE方法对12种不同来源大豆均质浆液中的可溶性蛋白进行分析,并与两种商品... 大豆蛋白作为乳品中的主要掺假蛋白,对其进行鉴别并建立相应的检测和分析方法,对于健全乳制品安全监管体制,确保消费者的合法权益具有重要的意义。该文利用SDS-PAGE方法对12种不同来源大豆均质浆液中的可溶性蛋白进行分析,并与两种商品大豆蛋白进行比较。经SDS-PAGE电泳分析,这14种大豆蛋白主要包含相对分子质量(简称分子量)为1.90×10^4~8.50×10^4的9组蛋白。每组蛋白的分子量差异较小,相对差值不大于3.3%,而且蛋白条带的相对含量基本相同。发现大豆中蛋白分子量为4.97×10^4、4.17×10^4、3.57×10^4以及1.98×10^4的可溶性蛋白组分,可作为SDS-PAGE鉴别牛乳中掺杂大豆蛋白的特征识别标记,其中4.96×10^4和3.57×10^4的最低检出限可达0.2 g/L。使用光密度仪测定,在大豆浆液蛋白含量0.1~10 g/L范围,定量工作曲线的线性关系较好,R=0.998 1,应用于0.60~8.0 g/L范围测量,相对误差为0.63%~13.3%。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 大豆蛋白 乳品 乳品掺假 食品与饲料用化学品
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采用高效液相色谱-质谱考察家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质的多样性 被引量:3
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作者 胡朝暾 肖震 +3 位作者 周熙 陈佳 陈波 刘中华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期628-633,共6页
家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基... 家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对粗毒多肽和蛋白质的多样性进行了分析。结果表明:家福捕鸟蛛粗毒经色谱分离后得到40多个色谱峰,经质谱鉴定得到238个多肽,且多肽的相对分子质量呈现出双峰分布,其中62.5%的多肽的相对分子质量分布在3 000-4 500之间,33.2%的多肽的相对分子质量分布在1 000-3 000之间。这种相对分子质量的分布模式不同于其他已经报道的蜘蛛粗毒中多肽的分布模式。电泳分析结果表明:除了相对分子质量在10 000以下的多肽分子,粗毒在50、72和90 kD附近有3条明显的条带,粗毒电泳条带经液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定,主要是一些血蓝蛋白、钾离子通道蛋白、钙蛋白酶等。说明家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质种类丰富。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 多肽 蛋白质 蜘蛛粗毒 家福捕鸟蛛
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我国秋播麦区小麦Glu-1和Glu-3位点等位变异分析 被引量:5
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作者 刘丽 于亚雄 +1 位作者 胡银星 程耿 《西南农业学报》 CSCD 2004年第B05期30-34,共5页
用SDS-PAGE分析了251份我国秋播麦区主栽品种和高代品系的高分子量麦谷蛋白亚基和低分子量麦谷蛋白亚基构成。结果表明,Glu-A1位点有2、1和N3种等位变异,Glu-B1位点有9种等位变异,即17+18、14+15、7+8、7+8、7+9、13+16、6+8、20和7,Glu... 用SDS-PAGE分析了251份我国秋播麦区主栽品种和高代品系的高分子量麦谷蛋白亚基和低分子量麦谷蛋白亚基构成。结果表明,Glu-A1位点有2、1和N3种等位变异,Glu-B1位点有9种等位变异,即17+18、14+15、7+8、7+8、7+9、13+16、6+8、20和7,Glu-D1位点有4种等位变异,即5+10、2+12、3+12和4+12,Glu-A3位点有5种等位变异,即GluA3d、GluA3b、GluA3c、GluA3a和CluA3e,Glu-B3位点有8种等位变异,即GluB3d、GluB3b、GluB3b’、GluB3a、GluB3h、GluB3f、GluB3g和GluB3j。品质较差的HMW-GSN、7+9、2+12和LMW-GS GIuA3a与GluB3j(1BL/1RS)在我国秋播麦区分布较广,频率分别为39.4%、45.0%、59.8%、37.1%和44.6%;优质HMW-GS 14+15和5+10,以及优质LMW-GS GluB3d和GluB3g的频率较低,分别为1.6%、24.7%、20.7%和0.8%。劣质HMW-GS和LMW-GS的频率较高是我国小麦面筋品质差的主要原因。 展开更多
关键词 小麦 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 高分子量麦谷蛋白亚基 低分子量麦谷蛋白亚基 等位变异
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大豆7S蛋白-糖体系晚期糖基化终产物形成因素 被引量:2
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作者 刘贵梅 章鼎敏 +3 位作者 李普 卢永翎 郑铁松 吕丽爽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第15期20-25,共6页
目的:在大豆蛋白糖基化改性过程中会引发非酶糖基化反应,形成有害的晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs),为提高食品安全性,模拟糖基化加工条件,构建大豆7S蛋白-糖体系模型,考察影响该体系AGEs形成的因素并进行有... 目的:在大豆蛋白糖基化改性过程中会引发非酶糖基化反应,形成有害的晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs),为提高食品安全性,模拟糖基化加工条件,构建大豆7S蛋白-糖体系模型,考察影响该体系AGEs形成的因素并进行有效调控。方法:采用荧光光谱法(λ_(ex)/λ_(em)=340 nm/465 nm)检测糖种类、还原糖质量浓度、pH值、反应温度、抑制剂种类及其浓度对AGEs形成的影响,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征有害产物的形成及抑制效果。结果:糖种类为果糖、蛋白质与葡萄糖质量浓度配比1∶4、pH 9.2、反应温度121℃条件下产生荧光性AGEs的作用效果最强,4种黄酮类化合物槲皮素、染料木素、芦丁和木犀草素对荧光性AGEs的形成均可达到较好的抑制效果,且呈现良好的剂量-效应关系。结论:糖的种类与抑制剂种类对AGEs的形成有一定影响;降低还原糖质量浓度、降低pH值和降低反应温度,添加0.1 mmol/L大豆源染料木素可有效抑制大豆加工过程中有害产物AGEs的形成。 展开更多
关键词 大豆7S蛋白-糖体系 糖基化 荧光性晚期糖基化终产物 荧光光谱 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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豆状带绦虫抗原的SDS-PAGE及Western-blot分析 被引量:2
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作者 张倩 李作磊 +5 位作者 尚清炎 范希萍 苟惠天 韩进欢 韩乐乐 孙晓林 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期11-14,20,共5页
为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶... 为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114 ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63 ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的 IgG免疫球蛋白对 7种虫体抗原进行的 Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63 ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63 ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫 7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础. 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹 豆状带绦虫 抗原
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