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染料在聚丙烯酰胺上层凝胶电泳免疫印迹中的应用
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作者 陈伟光 严辰杰 +5 位作者 许朝进 董依婷 毛智超 孙嘉玮 王万铁 袁琳波 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期1036-1040,共5页
目的:探讨染料Remazol BrOrange yellow(RBY)和赤藓红(erythrosine,ERY)分别用于十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺浓缩胶染色后对免疫印迹分析效果的影响。方法:将聚丙烯酰胺凝胶分为5组:对照组(按常规试剂盒步骤制备)、终浓度为0.08 g/L的RBY... 目的:探讨染料Remazol BrOrange yellow(RBY)和赤藓红(erythrosine,ERY)分别用于十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺浓缩胶染色后对免疫印迹分析效果的影响。方法:将聚丙烯酰胺凝胶分为5组:对照组(按常规试剂盒步骤制备)、终浓度为0.08 g/L的RBY染色组、终浓度为0.16 g/L的RBY染色组、终浓度为0.08 g/L的ERY染色组和终浓度为0.8 g/L的ERY染色组。依次制胶进行电泳,结束后用考马斯亮蓝对电泳胶进行染色,观察蛋白条带;随后转膜,并进行PVDF膜封闭、Ⅰ抗及Ⅱ抗孵育、洗涤,最后进行曝光拍照,观察目的蛋白黏着斑蛋白(vinculin)条带。结果:与未染色浓缩胶相比,RBY或ERY预染色浓缩胶的上样孔更加清晰可见,且经Marker显示和电泳后的凝胶考马斯亮蓝染色分析表明,RBY或ERY染色浓缩胶后,蛋白电泳能力与未染色浓缩胶无显著差异。蛋白免疫印迹对比分析也表明,转移到PVDF膜的蛋白样品检测不受影响。结论:RBY或ERY预染色浓缩胶可提高基于凝胶的电泳和免疫印迹分析的工作效率。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 Remazol BrOrange yellow 赤藓红 免疫印迹
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SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色新方法的研究 被引量:12
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作者 程冬梅 邓志勇 郭霭光 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第6期1214-1217,共4页
通过几种金属盐溶液对 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明 ,0 .2 5 mol/L的Ca Cl2 和 Mg Cl2 溶液能够对蛋白质进行有效的染色 ,经这 2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是 Ca Cl2 法灵敏度更高 ,而且蛋白质条带形成... 通过几种金属盐溶液对 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明 ,0 .2 5 mol/L的Ca Cl2 和 Mg Cl2 溶液能够对蛋白质进行有效的染色 ,经这 2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是 Ca Cl2 法灵敏度更高 ,而且蛋白质条带形成之后也十分稳定。 展开更多
关键词 sds聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色 氯化钙 制备 电泳纯化蛋白
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聚丙烯酰胺凝胶电泳及其在食品检测中的应用 被引量:8
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作者 唐亚丽 施用晖 +1 位作者 赵伟 乐国伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期111-116,共6页
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷数量来进行分离。文中就其原理及在食品检测方面的应用做一简要概述。
关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-PAGE) 食品检测
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两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响 被引量:2
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作者 周艳芬 赵晓瑜 +1 位作者 李亚东 乔环宇 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第1期59-61,共3页
以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收。它们的灵敏度分别为500ng和5ng;蛋白质回收率分别为37.9%和74.4%。
关键词 牛血清白蛋白 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色方法 蛋白质回收 马斯亮蓝 咪唑—Zn
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利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定玉米种子纯度的研究 被引量:2
5
作者 严莉 谢英维 +2 位作者 颜彤 刘炜 张亚平 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第2期125-126,共2页
利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97%以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种... 利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97%以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种手段。 展开更多
关键词 玉米 种子贮存蛋白 种子蛋白 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 sds-PAGE 品种纯度 杂交种 自交系
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银屑病患者指甲和鳞屑的蛋白质SDS-电泳图谱和转谷氨酰胺酶活性探讨
6
作者 张玉红 李红文 吴景兰 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期700-702,共3页
目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PA... 目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。应用辣根过氧化物酶(HRP)-单丹酰尸胺结合物对鳞屑铺片标本检测TGase 1酶活性。结果:健康人指甲和鳞屑的SDS-PAGE图谱皆呈现4条主带:63 ku、54 ku、48 ku及38 ku,银屑病患者指甲及鳞屑的SDS-PAGE图谱也呈现此4条主带,但多数主带扫描数值的水平较高,P<0.01。健康人的鳞屑铺片标本TGase 1酶活性呈现为棕黄色细颗粒定位于角质深层角质形成细胞(KC)的周缘;相比之下银屑病患者的TGase 1酶活性缺乏。结论:指甲及鳞屑的SDS-PAGE主带相似,前者图谱更清晰可能与其蛋白较稳定有关。银屑病患者比健康人的SDS-PAGE图谱主带表达水平升高,提示其KC可能呈增生状态,表达产物较多;患者TGase 1酶活性的缺如提示其表皮屏障功能有缺陷,可能与其参与代偿性增生有关。 展开更多
关键词 银屑病 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 活性 转谷氨酰胺 指甲 鳞屑
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几种动物类中药材SDS-PAGE的电泳鉴别 被引量:11
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作者 史克莉 陈振江 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期411-413,共3页
目的 :建立几种动物类中药的电泳鉴别方法。方法 :利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)技术 ,对 3种蜂王浆、牛血清蛋白、金钱白花蛇[2 ] 、乌梢蛇、鹿蹄筋、炮制前后的蝎子[3 ] 进行鉴别分析。结果 :结果表明 3种蜂王浆... 目的 :建立几种动物类中药的电泳鉴别方法。方法 :利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)技术 ,对 3种蜂王浆、牛血清蛋白、金钱白花蛇[2 ] 、乌梢蛇、鹿蹄筋、炮制前后的蝎子[3 ] 进行鉴别分析。结果 :结果表明 3种蜂王浆间 ,炮制前后的蝎子间的电泳图谱存在显著差异 ;金钱白花蛇、乌梢蛇、鹿蹄筋也有各自的谱带。结论 :电泳鉴别可为动物类中药的鉴别提供一项可靠的 。 展开更多
关键词 动物中药 中药鉴别 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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七种水蛭组织细胞可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析 被引量:7
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作者 汪波 张彬 +2 位作者 龚元 于翔 吕军仪 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第16期3423-3425,共3页
采用垂直平板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对我国7种常见水蛭的组织细胞可溶性蛋白成分进行电泳图谱特性分析。结果表明,7种水蛭组织细胞中可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱中多数条带相同,但也存在差异。其中日本医蛭(Hirud... 采用垂直平板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对我国7种常见水蛭的组织细胞可溶性蛋白成分进行电泳图谱特性分析。结果表明,7种水蛭组织细胞中可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱中多数条带相同,但也存在差异。其中日本医蛭(Hirudo nipponia Whitman)蛋白条带最多,达28个,并且吸血蛭类的蛋白条数要明显大于非吸血蛭类,而3种不同地理分布的菲牛蛭(Hirudi-naria manillensis Lesson)间表达蛋白图谱无明显差异。该研究为在分子水平分析我国水蛭不同种类、同种不同地理分布及不同食性间的差异积累了新的生物学数据,对其分类和药材鉴别提供了参考依据。 展开更多
关键词 水蛭 可溶性蛋白 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-PAGE)
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二硫苏糖醇和β-巯基乙醇在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应 被引量:2
9
作者 杨平 李敏惠 +4 位作者 常山 何建荣 罗兴艳 刘阳 邹强 《医学研究生学报》 CAS 2009年第9期916-919,共4页
目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品... 目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品和未还原蛋白样品间隔上样进行电泳,通过观察未还原样品的电泳条带来判断是否受到邻近泳道还原剂的扩散影响。结果:还原剂DTT或2-ME可扩散到邻近泳道,使未还原蛋白样品发生部分还原,扩散效应的强弱与还原剂的含量成正相关。结论:SDS-PAGE电泳过程中DTT和2-ME均存在扩散效应,在同一块凝胶上同时分离还原蛋白和未还原蛋白时,至少应该在2个泳道间设置一空白泳道,以规避扩散效应。 展开更多
关键词 还原剂 扩散效应 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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不同产地乌梅的SDS-PAGE的电泳鉴别 被引量:2
10
作者 史克莉 黄凤桥 《中医药学刊》 2005年第11期2079-2080,共2页
目的对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别。方法利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析。结果不同... 目的对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别。方法利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析。结果不同产地乌梅的电泳图谱存在差异,各品种图谱基本相似。结论电泳鉴别可为中药不同产地药材蛋白质成分鉴别提供一项可靠的简便的检测方法。 展开更多
关键词 乌梅 不同产地成分鉴别 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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用SDS—PAGE研究NaHCO_3处理后西伯利亚蓼不同部位蛋白表达的变化 被引量:8
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作者 刘关君 王大海 +3 位作者 郭晓瑞 杨传平 冯昕 张波 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期361-365,共5页
利用酚抽提法分别提取对照、3%NaHCO3处理 5d和 1 0d的西伯利亚蓼地茎、茎和叶部蛋白 ,用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS—PAGE)和分析软件 (Labwork 3.0 )对提取蛋白进行分离和定量分析。结果表明 ,地茎蛋白图谱在 34.1和 2 ... 利用酚抽提法分别提取对照、3%NaHCO3处理 5d和 1 0d的西伯利亚蓼地茎、茎和叶部蛋白 ,用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS—PAGE)和分析软件 (Labwork 3.0 )对提取蛋白进行分离和定量分析。结果表明 ,地茎蛋白图谱在 34.1和 2 5 .0× 1 0 3D位置处出现了两条明显受正向调控的蛋白条带 ,茎部蛋白图谱在 5 8.1× 1 0 3D、47.8× 1 0 3D和 9.6× 1 0 3D位置处出现三条正向调控的条带 ,叶组织蛋白图谱在 2 5 .0× 1 0 3D处出现一受正调控的条带。除地茎和叶组织在 2 5 .0× 1 0 3D处同时出现受正向调控的蛋白条带外 ,盐处理后其它组织间表达受正向调控的蛋白条带间存在差异 。 展开更多
关键词 西伯利亚蓼 盐胁迫 酚抽提法 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白表达
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大豆特征蛋白的SDS-PAGE研究 被引量:4
12
作者 管方方 卢伟京 +4 位作者 许旭 董宏伟 李冰瑶 陈保华 钟佳琪 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期438-442,共5页
大豆蛋白作为乳品中的主要掺假蛋白,对其进行鉴别并建立相应的检测和分析方法,对于健全乳制品安全监管体制,确保消费者的合法权益具有重要的意义。该文利用SDS-PAGE方法对12种不同来源大豆均质浆液中的可溶性蛋白进行分析,并与两种商品... 大豆蛋白作为乳品中的主要掺假蛋白,对其进行鉴别并建立相应的检测和分析方法,对于健全乳制品安全监管体制,确保消费者的合法权益具有重要的意义。该文利用SDS-PAGE方法对12种不同来源大豆均质浆液中的可溶性蛋白进行分析,并与两种商品大豆蛋白进行比较。经SDS-PAGE电泳分析,这14种大豆蛋白主要包含相对分子质量(简称分子量)为1.90×10^4~8.50×10^4的9组蛋白。每组蛋白的分子量差异较小,相对差值不大于3.3%,而且蛋白条带的相对含量基本相同。发现大豆中蛋白分子量为4.97×10^4、4.17×10^4、3.57×10^4以及1.98×10^4的可溶性蛋白组分,可作为SDS-PAGE鉴别牛乳中掺杂大豆蛋白的特征识别标记,其中4.96×10^4和3.57×10^4的最低检出限可达0.2 g/L。使用光密度仪测定,在大豆浆液蛋白含量0.1~10 g/L范围,定量工作曲线的线性关系较好,R=0.998 1,应用于0.60~8.0 g/L范围测量,相对误差为0.63%~13.3%。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 大豆蛋白 乳品 乳品掺假 食品与饲料用化学品
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豆状带绦虫抗原的SDS-PAGE及Western-blot分析 被引量:2
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作者 张倩 李作磊 +5 位作者 尚清炎 范希萍 苟惠天 韩进欢 韩乐乐 孙晓林 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期11-14,20,共5页
为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶... 为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114 ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63 ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的 IgG免疫球蛋白对 7种虫体抗原进行的 Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63 ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63 ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫 7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础. 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹 豆状带绦虫 抗原
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脱脂松仁粕中球蛋白的提取工艺及其SDS–PAGE分析 被引量:1
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作者 包怡红 赵楠 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期654-657,共4页
以脱脂松仁粕为原料,采用Osborne法提取松仁粕中的球蛋白,设NaCl质量分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)、料(质量,g)液(体积,m L)比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35)、提取时间(30、60、90、120、150、180 min)和提... 以脱脂松仁粕为原料,采用Osborne法提取松仁粕中的球蛋白,设NaCl质量分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)、料(质量,g)液(体积,m L)比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35)、提取时间(30、60、90、120、150、180 min)和提取温度(40、45、50、55、60、65℃)4个单因素试验,再用响应面法优化松仁粕中球蛋白的提取工艺,并对其分子量进行分析。结果表明:当NaCl质量分数为2.5%,料液比为1∶15,提取时间为150 min,提取温度为56℃时,松仁粕中球蛋白的提取率较高,为15.32%;SDS–PAGE分析结果表明,脱脂松仁粕球蛋白的分子量为41 320、27 520、21 690、16 310、15 180。 展开更多
关键词 脱脂松仁粕 球蛋白 提取工艺 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds–PAGE)
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植物乳杆菌在不同盐质量浓度下生长至对数期中期全蛋白SDS-PAGE分析 被引量:1
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作者 乌日娜 徐鑫 +4 位作者 王茜茜 宋雪飞 薛雅婷 唐筱扬 武俊瑞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期155-161,共7页
以耐盐植物乳杆菌FS5-5为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术构建了菌株在Na Cl质量浓度分别为0、3、6、9 g/100 m L的培养基中生长至对数期中期的全蛋白表达图谱。通过比较分析,选取了6个差异蛋白质条带,并采用液相色... 以耐盐植物乳杆菌FS5-5为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术构建了菌株在Na Cl质量浓度分别为0、3、6、9 g/100 m L的培养基中生长至对数期中期的全蛋白表达图谱。通过比较分析,选取了6个差异蛋白质条带,并采用液相色谱-质谱/质谱联用对差异蛋白质条带进行质谱分析。结果表明:1号样品条带鉴定得到6种蛋白;2号样品条带鉴定得到11种蛋白;3号样品条带鉴定得到9种蛋白;4号样品条带鉴定得到4种蛋白;5号样品条带鉴定得到15种蛋白;6号样品条带鉴定得到15种蛋白。去除相同的蛋白,共有45种蛋白得到鉴定。这些蛋白大致可以分为4类:与蛋白质合成有关的蛋白25种;与代谢相关的蛋白10种;与核苷酸合成有关的蛋白8种;未知功能蛋白2种。可能由于这些蛋白的表达发生变化,才导致菌体中蛋白质合成、能量代谢、DNA复制能够正常进行,最终使植物乳杆菌FS5-5能够更好地在盐环境下生存下去。 展开更多
关键词 植物乳杆菌FS5-5 盐胁迫 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 差异蛋白
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SDS-PAGE预测小麦烘烤品质及在小麦育种中的应用
16
作者 王显萍 任有成 《青海农林科技》 2003年第4期30-31,共2页
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)在小麦育种中除主要用来确定小麦的烘烤品质外,还具有其它的用途,目前在小麦育种中已被广泛应用。本文系统地介绍了SDS PAGE预测小麦面包烘烤品质的科学依据及在小麦育种中的应用,为我省有... 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)在小麦育种中除主要用来确定小麦的烘烤品质外,还具有其它的用途,目前在小麦育种中已被广泛应用。本文系统地介绍了SDS PAGE预测小麦面包烘烤品质的科学依据及在小麦育种中的应用,为我省有效地利用SDS PAGE法选育优质、丰产小麦新品种提供理论依据。 展开更多
关键词 sds-PAGE预测 小麦 烘烤品质 育种 应用 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳
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银杏种子糖蛋白的SDS-PAGE分离及N-糖链的质谱分析 被引量:3
17
作者 李成 王承健 +5 位作者 晋万军 韩健利 杨梅芳 郜茜 黄琳娟 王仲孚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期69-75,共7页
利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离了银杏种子中的糖蛋白组分,进一步用氨水催化释放N-糖链,并采用电喷雾离子质谱(ESI-MS)及在线液相色谱-质谱联用(LC-UV-MS/MS^2)等技术对胶条上释放的N-糖链进行了定性定量分析.结... 利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离了银杏种子中的糖蛋白组分,进一步用氨水催化释放N-糖链,并采用电喷雾离子质谱(ESI-MS)及在线液相色谱-质谱联用(LC-UV-MS/MS^2)等技术对胶条上释放的N-糖链进行了定性定量分析.结果表明,从银杏种子中分离得到11种糖蛋白,共检测到11条N-糖链,包括高甘露糖型(4. 88%)和复杂型(95. 12%) 2种类型,其中分子量为21000,36000和50000的糖蛋白所释放的核心α-1,3-岩藻糖和β-1,2-木糖修饰的N-糖链所占比率较高,分别为68. 23%,64. 37%和75. 09%.本研究对进一步研究银杏糖蛋白功能具有重要意义. 展开更多
关键词 银杏糖蛋白 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 N-糖苷酶F 氨水催化 电喷雾离子质谱
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牛羊乳酪蛋白制备及电泳分析比较 被引量:10
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作者 宋宏新 张歌 +1 位作者 李红心 薛海燕 《中国酿造》 CAS 2012年第10期65-67,共3页
采采用新鲜和复原的牛羊乳为原料,等电点沉淀,通过洗涤、干燥等步骤分别制得牛乳和羊乳酪蛋白,用凯氏定氮法对其进行定量检测,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析比较牛羊乳酪蛋白组分差异。结果表明:牛乳酪蛋白得率为... 采采用新鲜和复原的牛羊乳为原料,等电点沉淀,通过洗涤、干燥等步骤分别制得牛乳和羊乳酪蛋白,用凯氏定氮法对其进行定量检测,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析比较牛羊乳酪蛋白组分差异。结果表明:牛乳酪蛋白得率为86.75%,羊乳酪蛋白得率为90.55%,高含量的酪蛋白主要集中在电泳图谱的中分子量组,可分为αs1-CN、αs2-CN、β-CN和κ-CN,牛羊乳αs2-CN分子量羊乳大于牛乳,牛乳α-CN含量比较多,羊乳β-CN含量比较多,鲜乳与复原乳全蛋白主要组分在电泳图谱中除酪蛋白差别外,上端的高分子量组清蛋白区羊乳IgG重链的分子量比牛乳小。应用蛋白质电泳分析技术可以区分羊乳和牛乳的蛋白质组分,等电点沉淀法制备酪蛋白的方法简单,易于操作。 展开更多
关键词 牛乳 羊乳 酪蛋白制备 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds PAGE)
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牛乳中蛋白质的电泳分析技术研究 被引量:11
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作者 宋宏新 刘立新 +1 位作者 柏红梅 蒋振威 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2010年第6期51-53,共3页
运用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-AGE)法分析牛乳蛋白质,以脱脂牛乳为对照,分析牛乳中掺入不同比例大豆蛋白粉和乳清蛋白粉的样品,经凝胶图像分析系统分析得这2种蛋白粉掺入牛乳的最低检出限分别为:0.79%和4.4%(m/m),应用该法... 运用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-AGE)法分析牛乳蛋白质,以脱脂牛乳为对照,分析牛乳中掺入不同比例大豆蛋白粉和乳清蛋白粉的样品,经凝胶图像分析系统分析得这2种蛋白粉掺入牛乳的最低检出限分别为:0.79%和4.4%(m/m),应用该法对5种市售婴幼儿奶粉进行鉴定,表明该法能较快速准确地表征乳蛋白组成,为乳及乳品质量的监控提供了一种直观有效的手段。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 牛乳蛋白质 乳粉掺假 大豆蛋白粉 乳清蛋白粉
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用蛋白电泳和高效凝胶排阻色谱法分析还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程的集聚体 被引量:5
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作者 梁长利 边六交 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第6期641-645,共5页
本文利用蛋白电泳和高效凝胶排阻层析法分析了还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程中的集聚体。当用复性液稀释复性还原脲变性蛋白溶菌酶时,会迅速产生可观量的沉淀。沉淀和上清液的不连续十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和... 本文利用蛋白电泳和高效凝胶排阻层析法分析了还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程中的集聚体。当用复性液稀释复性还原脲变性蛋白溶菌酶时,会迅速产生可观量的沉淀。沉淀和上清液的不连续十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻层析分析结果表明,还原脲变性蛋白溶菌酶在稀释复性过程中除了能够复性成天然态蛋白溶菌酶分子外,还会形成可溶的蛋白溶菌酶分子二聚体和三聚体,二聚体和三聚体主要是靠分子间二硫键的错配连接而成的;可溶的蛋白溶菌酶分子二聚体之间通过非共价键相互作用而形成集聚体沉淀,而可溶的三聚体溶菌酶分子则仍处于复性液上清液中。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 高效凝胶排阻层析 还原变性溶菌酶 集聚体 稀释复性 二硫键
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