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题名北美栅锈菌和松杨栅锈菌可视化检测体系建立
被引量：1
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作者
蓝燕
农花萍
彭子嘉
陆颖
李坤蓬
徐勇
余仲东
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机构
西北农林科技大学林学院
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出处
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2023年第5期140-148,共9页
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基金
国家自然科学基金(31670650)
大学生创新创业训练计划项目(X202110712224)。
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文摘
[目的]为实现北美栅锈菌和松杨栅锈菌快速有效的鉴别及鉴定。[方法]本研究根据两种锈菌的28SrDNA基因序列设计若干组LAMP引物。经筛选得到的引物以北美栅锈菌、松杨栅锈菌、图拉斯叉钩丝壳菌、芍药白粉菌、梨胶锈菌、羊肚菌、金针菇的基因组DNA为模板进行LAMP反应并完成特异性检测;首先建立初始LAMP反应体系,再进一步优化LAMP反应体系的组分和反应条件,加入羟基萘酚蓝实现可视化检测;最后确定检测体系灵敏度。[结果]表明,筛选出的引物具有特异性;25μL北美栅锈菌LAMP检测体系最佳Mg^(2+)浓度为6 mmol·L^(−1),最佳内外引物比例为8:1,最佳dNTPs浓度为1.2 mmol·L^(−1);同样地,25μL松杨栅锈菌LAMP检测体系最佳Mg^(2+)浓度为4 mmol·L^(−1),最佳内外引物比例为6:1,最佳dNTPs浓度为1 mmol·L^(−1)。加入160μM羟基萘酚蓝(HNB)可清晰地指示反应结果,两种检测体系在61℃条件下,分别反应30 min和40 min可实现目视判断结果,且灵敏度分别可达34 fg·μL^(−1)和60 fg·μL^(−1)。[结论]通过建立两种锈菌的可视化LAMP-HNB检测体系可实现对北美栅锈菌和松杨栅锈菌进行区分及鉴定,为快速鉴定和区分重要杨树锈病提供了技术支撑和实践参考。
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关键词
杨树
北美栅锈菌
松杨栅锈菌
环介导等温扩增技术
羟基萘酚蓝
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Keywords
Poplar
M.medusae
M.larici-populina
LAMP
Hydroxynaphthol blue dying
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分类号
S763.15
[农业科学—森林保护学]
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题名全红杨与2025杨抗锈性差异比较
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作者
李春丽
彭子嘉
骆泽煜
余仲东
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机构
西北农林科技大学林学院
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出处
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2024年第5期178-185,共8页
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基金
国家自然科学基金(No.31670650)。
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文摘
[目的]为明确红叶杨品种全红杨与其亲本2025杨对叶锈病的抗性差异及其作用机制。[方法]通过在红叶杨品种全红杨和其亲本2025杨上人工接种北美栅锈菌,对两种杨树的发病状况、锈菌基因表达量、活性氧和抗氧化酶活性的动态变化进行了测定。[结果]表明两种杨树对北美栅锈菌均表现为感病,其中全红杨为中度感病,2025杨为高度感病。相比全红杨,锈菌在2025杨叶片内发育更快、潜育期更短、夏孢子堆更大更密。全红杨的3种抗氧化酶活性(POD、CAT、SOD)均高于2025杨,而2025杨中的活性氧水平高于全红杨。[结论]说明全红杨应对锈菌入侵较2025杨能更快的启动免疫应答反应,平衡活性氧水平,从而表现出较强的抗病性。
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关键词
红叶杨
北美栅锈菌
抗锈性
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Keywords
red-leaved poplar
Melampsora medusae
rust resistance
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分类号
S763.15
[农业科学—森林保护学]
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