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基于化学激活荧光素酶表达基因法和标准方法评估动物源性固态食品中17种二噁英类化合物毒性当量的相关性比较 被引量:1
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作者 王燕 张敏 +5 位作者 朱晓艳 江玲丽 王如坤 钟莺莺 谭曜 保琦蓓 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-8,共8页
为使化学激活荧光素酶表达基因法(CALUX)在动物源性固态食品中二噁英类化合物毒性当量筛查中具有更好的适用性,使其能够与标准方法高分辨气相色谱-高分辨质谱法(HRGC-HRGC)的评估结果相互转换,分别基于CALUX和HRGC-HRGC评估了肉类、海... 为使化学激活荧光素酶表达基因法(CALUX)在动物源性固态食品中二噁英类化合物毒性当量筛查中具有更好的适用性,使其能够与标准方法高分辨气相色谱-高分辨质谱法(HRGC-HRGC)的评估结果相互转换,分别基于CALUX和HRGC-HRGC评估了肉类、海鲜类和配方乳粉这3类典型动物源性固态食品中7种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并二噁英(PCDDs)和10种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并呋喃(PCDFs)的毒性当量,分析两种方法测定结果的相关性,并确定换算关系和适宜样品类型。结果表明:基于HRGC-HRMS得到的样品中17种目标物的毒性当量(TEQ)下限值为0.001~0.106 pg·g^(-1),TEQ上限值为0.004~0.242 pg·g^(-1),远低于欧盟法规EC 1881/2006规定的限量值(3.5 pg·g^(-1));基于CALUX得到的肉类样品中17种目标物的毒性当量(BEQ)值为0.74~1.30 pg·g^(-1),海鲜类样品中17种目标物的BEQ值为0.31~0.63 pg·g^(-1),配方乳粉样品中17种目标物的BEQ值为0.043~0.074 pg·g^(-1);肉类和配方乳粉样品的BEQ值与TEQ值的相关性较差,而海鲜类样品的BEQ值与TEQ上限值相关性较好。 展开更多
关键词 化学激活荧光表达基因(CALUX) 高分辨气相色谱-高分辨质谱(HRGC-HRGC) 动物源性固态食品 毒性当量 相关性
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CALUX法检测食品中的二噁英类化学污染物:产生,发展与展望 被引量:3
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作者 赵静 王月华 +1 位作者 徐方旭 冯叙桥 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期204-211,共8页
二噁英类化学物质是环境中广泛存在的一类化学污染物,这类化学物质具有毒性强、不易降解、易产生生物富集和生物放大等特性,传统的气相色谱质谱(GC/MS)检测方法存在昂贵、耗时、操作要求高等局限性。目前越来越多的科研和商业机构及政... 二噁英类化学物质是环境中广泛存在的一类化学污染物,这类化学物质具有毒性强、不易降解、易产生生物富集和生物放大等特性,传统的气相色谱质谱(GC/MS)检测方法存在昂贵、耗时、操作要求高等局限性。目前越来越多的科研和商业机构及政府部门开始用化学激活荧光素酶表达法(CALUX)来检测食品、饲料、环境样品和消费品中的二噁英类物质。CALUX检测法是用含荧光素酶报告基因的重组细胞来检测二噁英类物质的一种生物检测法。文中着重就CALUX法的产生背景、应用现状、分析原理和操作注意事项进行了介绍和展望。CALUX法与GC/MS法和其他一些生物检测法相比,具有快速、低廉、敏感、能同时检测大量样品等显著优势,是一个适用于对食品中的二噁英污染物进行常规监测,筛选和半定量分析的有效方法。 展开更多
关键词 二噁英类化学物质 荧光表达 报告基因 生物检测 气相色谱质谱
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基因标记、转化、表达与检测
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《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第4期32-38,共7页
关键词 启动子调控 基因标记 电激 自主复制序列 荧光 转染细胞 操纵子 包装细胞系 质粒表达载体 表达产物
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小清河(济南段)支流内分泌干扰物综合激素效应分布特征研究 被引量:1
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作者 许燕 孙韶华 +3 位作者 逯南南 孙莉 赵清华 贾瑞宝 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期178-186,共9页
应用化学诱导荧光素酶表达基因法(chemical activated luciferase gene expression,CALUX)调研了小清河(济南段)主要支流的多种内分泌干扰物综合激素效应,明确了4类内分泌干扰物的含量水平及分布特征。结果表明,调研河流的二噁英类、雌... 应用化学诱导荧光素酶表达基因法(chemical activated luciferase gene expression,CALUX)调研了小清河(济南段)主要支流的多种内分泌干扰物综合激素效应,明确了4类内分泌干扰物的含量水平及分布特征。结果表明,调研河流的二噁英类、雌激素类和肾上腺皮质激素类的年平均毒性当量浓度范围为0.020~0.040 ng 2,3,7,8-TCDD TEQ·L^(-1)、0.007~0.050 ng E2-eq·L^(-1)和1.8~9.6 ng Dex-eq·L^(-1)。二噁英类和雌激素类的含量水平相对较低,雄激素类内分泌干扰物的污染风险较低,肾上腺皮质激素类是其内分泌干扰物污染的最大贡献者。二噁英类检出水平无明显的季节性和区域性差别,雌激素类季节性变化明显,春、冬两季检出率高,肾上腺皮质激素类分布的季节性分布不明显,但区域性分布规律明显,农业区支流的检出频次和含量水平明显低于居民区和商业区支流。 展开更多
关键词 化学诱导荧光素酶表达基因法 小清河(济南段)支流 综合激效应 分布特征 CALUX
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Tec真核表达载体构建及其对细胞信号的影响
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作者 李菲菲 刘雷 +5 位作者 郑红 周颖 余科科 程洁 王本忠 汪思应 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第3期206-210,共5页
目的构建人Tec酪氨酸蛋白激酶真核表达载体;研究Tec参与肝细胞再生的可能信号途径。方法经PCR扩增、酶切、连接等基因重组技术将人Tec插入pCDNA3.1(hismycTec)真核表达载体中,并经酶切、PCR、测序鉴定;用脂质体法将构建的真核表达载体... 目的构建人Tec酪氨酸蛋白激酶真核表达载体;研究Tec参与肝细胞再生的可能信号途径。方法经PCR扩增、酶切、连接等基因重组技术将人Tec插入pCDNA3.1(hismycTec)真核表达载体中,并经酶切、PCR、测序鉴定;用脂质体法将构建的真核表达载体瞬时转染Hela细胞,用Western方法检测Tec蛋白是否表达。用荧光素酶报告基因系统,检测Tec是否参与HGF刺激信号途径的活化。结果构建的Tec真核表达载体使Hela细胞高表达Tec蛋白;并发现Tec在HGF介导下,对Elk信号分子活化的报告质粒中荧光素酶的表达有明显增强作用。结论构建了Tec真核表达载体,并能使HGF介导的MAPK途径活化,提示Tec可能参与HGF介导肝细胞增殖的信号调控。 展开更多
关键词 真核表达载体构建 TEC 细胞信号 Hela细胞 酪氨酸蛋白激 Western pcDNA3 基因重组技术 MAPK途径 信号途径 荧光 肝细胞再生 PCR扩增 肝细胞增殖 HGF 瞬时转染 脂质体 基因系统 增强作用 信号分子 信号调控 c蛋白
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光诱导RNAi系统的构建及优化
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作者 王建华 王雪 +2 位作者 杜增民 赵玉政 杨弋 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期28-33,共6页
利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载体和不同核心启动子的shRNAmir表达载体,分析它们对报告基因的... 利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载体和不同核心启动子的shRNAmir表达载体,分析它们对报告基因的干扰效果的影响。结果表明,GAVPO的表达量对报告基因沉默效果和shRNAmir的背景表达水平至关重要。低表达量的GAVPO能够实现对报告基因的微调控,报告基因的表达量下降到约60%;而高表达量的GAVPO能够高效抑制报告基因表达,报告基因的表达量下降到34%。 展开更多
关键词 RNAI 诱导基因表达系统 shRNAmir 萤火虫荧光
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水环境中农药类污染物的内分泌干扰效应研究 被引量:3
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作者 逯南南 孙韶华 +4 位作者 王明泉 许燕 赵清华 宋艳 贾瑞宝 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期245-253,共9页
水环境中农药类内分泌干扰物与人类健康密切相关。以水源水中筛查鉴定出的15种农药类污染物为对象,采用化学激活荧光素酶基因表达法(CALUX),进行了雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)、肾上腺皮质激素受体(GR)激动和拮抗效应筛查。研究结... 水环境中农药类内分泌干扰物与人类健康密切相关。以水源水中筛查鉴定出的15种农药类污染物为对象,采用化学激活荧光素酶基因表达法(CALUX),进行了雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)、肾上腺皮质激素受体(GR)激动和拮抗效应筛查。研究结果显示所有测试物均未显示激素受体激动效应,环莠隆具有ER拮抗效应,多效唑、戊唑醇和三环唑表现出AR拮抗效应,阿特拉津、扑草净、三环唑和甲霜灵表现出GR拮抗作用。研究结果为水环境中农药类污染物的风险评估提供支撑。 展开更多
关键词 农药 化学诱导荧光素酶表达基因法 内分泌干扰物 综合激效应
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