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miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞乳脂代谢的影响: 1; 作者李卫清王国栋 +4 位作者吕丹薇张丹丹刘权辉潘思尧黄奔《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1969-1978,共10页; 【目的】探讨miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞(CiMECs)乳脂代谢的影响,为研究微小RNA(miRNA)对山羊乳腺功能的调控机制提供理论依据。【方法】利用单一小分子化合物RepSox(TGFβR-1/ALK5抑制剂)诱导山羊成纤维细胞(GEFs),诱导8 ... 展开更多; 关键词奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞(cimecs) miR-455-3p 乳脂; 在线阅读下载PDF 职称材料

山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响被引量：8: 2; 作者王苗罗军 +4 位作者许会芬朱江江赫秋亚姚大为史怀平《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1806-1816,共11页; 本研究旨在通过构建西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG1)的重组腺病毒(Adenovirus,Ad)超表达载体,研究该基因超表达后对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响,从而为该基因在山羊乳腺脂质合成调控中的功能研究奠定基础。根据GenBank(登录号:... 展开更多; 关键词山羊乳腺上皮细胞胰岛素诱导基因1(INSIG1) 超表达脂质合成; 在线阅读下载PDF 职称材料

奶牛乳腺上皮细胞的原代培养被引量：6: 3; 作者吴娟王凤龙王申元《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第6期2497-2499,2513,共4页; [目的]探讨在生化培养箱中进行奶牛乳腺上皮细胞原代培养的可行性。[方法]采用组织块法,在体外进行乳腺上皮细胞的分离培养,探索其在生化培养箱中合适的培养条件。用倒置显微镜观察、细胞爬片吉姆萨染色和角蛋白免疫组织化学染色的方法... 展开更多; 关键词奶牛乳腺上皮细胞原代培养细胞爬片免疫组织化学; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化被引量：3: 4; 作者田甜李键王中乾《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第9期4604-4606,4613,共4页; [目的]优化脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞的条件。[方法]通过胶原酶消化法和组织块贴壁法,体外分离培养得到牦牛乳腺上皮细胞。采用免疫细胞化学技术检测细胞角蛋白在细胞内的表达。以绿色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体... 展开更多; 关键词牦牛乳腺上皮细胞免疫细胞化学转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

肌上皮细胞标志物p63、α-SMA和Calponin在乳腺良恶性疾病中的表达及意义被引量：5: 5; 作者梁建芳《山西医科大学学报》 CAS 2005年第5期555-558,共4页; 目的探讨乳腺肌上皮细胞标志物p63、-αSMA和Calponin在乳腺良恶性疾病中的表达及意义。方法收集乳腺癌标本67例及其癌旁组织。将其分为5组:癌旁正常乳腺组、乳腺增生组、乳腺导管不典型增生组、原位癌组和浸润癌组。应用免疫组织化学S-... 展开更多; 关键词乳腺肿瘤肌上皮细胞免疫组织化学 P63 Α-SMA CALPONIN; 在线阅读下载PDF 职称材料

山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化被引量：2: 6; 作者杜珊马保华 +3 位作者李亮亮刘军赵晓娥张涌《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期159-166,共8页; 为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了... 展开更多; 关键词山羊乳腺上皮细胞电穿孔转染效率人β-防御素3基因诱导表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

乳房: 7; 《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 2002年第5期108-108,共1页; 0217842 乳房诊断用计算机辅助诊断(CAD)[日]/难波清//新医疗.-2001,(9).-66～69 冀医情0217843 MMP-9在肿瘤坏死因子诱导的乳腺上皮细胞的增生和分支形态的发生中的功能性意义/Lee P P∥Endocrinology.-2000,141(10).-3764～3773; 关键词计算机辅助诊断肿瘤坏死因子乳腺上皮细胞乳房分支形态功能性医科上皮细胞增生医疗诱导; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞乳脂代谢的影响: 1; 作者李卫清王国栋吕丹薇张丹丹刘权辉潘思尧黄奔; 机构广西大学广西大学动物科学技术学院广西医学科学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1969-1978,共10页; 基金国家自然科学基金(31960160、32160171)。; 文摘【目的】探讨miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞(CiMECs)乳脂代谢的影响,为研究微小RNA(miRNA)对山羊乳腺功能的调控机制提供理论依据。【方法】利用单一小分子化合物RepSox(TGFβR-1/ALK5抑制剂)诱导山羊成纤维细胞(GEFs),诱导8 d后观察细胞形态变化,采用特异性标记物免疫荧光染色和油红O染色鉴定CiMECs是否诱导成功。使用脂质体将miR-455-3p的过表达载体(miR-455-3p mimics、miR-455-3p mimics-NC)和干扰载体(miR-455-3p inhibitors、miR-455-3p inhibitors-NC)转染至CiMECs,通过细胞增殖及毒性检测(CCK-8)试剂盒、甘油三酯检测试剂盒、实时荧光定量PCR检测miR-455-3p对于CiMECs的增殖率、甘油三酯分泌情况及乳脂代谢基因表达量。【结果】GEFs诱导8 d后形成类似于山羊乳腺上皮细胞的岛状、多核和鹅卵石状细胞形状。免疫荧光结果显示,CiMECs可表达上皮特异性标志物抗原,包括细胞角蛋白14(CK14)和CK18;油红O染色结果显示,诱导后的细胞具有分泌脂滴的功能。CiMECs转染结果显示,miR-455-3p mimics极显著促进了miR-455-3p的表达(P<0.01),miR-455-3p inhibitors显著抑制了miR-455-3p的表达(P<0.05)。CCK-8及甘油三酯检测结果表明,与对照组相比,miR-455-3p mimics组细胞增殖率、甘油三酯分泌量均极显著降低(P<0.01),miR-455-3p inhibitors组细胞增殖率、甘油三酯分泌量均显著增加(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,诱导后CiMECs中HADHB基因表达量极显著降低(P<0.01);miR-455-3p mimics组HADHB基因表达量极显著升高(P<0.01),miR-455-3p inhibitors组HADHB基因表达量显著降低(P<0.05)。【结论】通过抑制miR-455-3p可促进奶山羊CiMECs增殖,降低脂肪代谢基因HADHB的表达,从而提高山羊奶中脂肪酸含量。研究结果可为后续利用miRNA改善山羊乳品质提供参考。; 关键词奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞(cimecs) miR-455-3p 乳脂; Keywords dairy goats chemically induced mammary epithelial cells(cimecs) miR-455-3p milk fat; 分类号 S814.8 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响被引量：8: 2; 作者王苗罗军许会芬朱江江赫秋亚姚大为史怀平; 机构西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1806-1816,共11页; 基金国家自然科学基金项目(31372281) 国家转基因新品种培育重大专项(2014ZX08009-051B); 文摘本研究旨在通过构建西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG1)的重组腺病毒(Adenovirus,Ad)超表达载体,研究该基因超表达后对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响,从而为该基因在山羊乳腺脂质合成调控中的功能研究奠定基础。根据GenBank(登录号:JQ665439)中山羊INSIG1基因序列设计引物,PCR扩增得到其CDS区序列。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV后获得pAdTrack-CMV-INSIG1质粒,将该质粒PmeⅠ线性化后转入大肠杆菌BJ5183感受态细胞进行同源重组,获得pAdEasy-INSIG1重组腺病毒超表达载体。该重组质粒经PacⅠ线性化后转染293A细胞进行病毒的包装及扩繁,利用LaSRT法测定其滴度。将获得的重组腺病毒AdINSIG1感染山羊原代乳腺上皮细胞,利用实时荧光定量PCR检测INSIG1及脂质合成相关基因的mRNA表达情况,利用GPO-Trinder酶学反应检测细胞中甘油三酯的含量。结果表明,成功构建了奶山羊INSIG1基因重组腺病毒超表达载体,获得了具有较高滴度(2×108 U·mL-1)的超表达腺病毒Ad-INSIG1;Ad-INSIG1感染山羊原代乳腺上皮细胞48h后,与Ad-GFP组相比,INSIG1基因的mRNA表达量上调约500倍,固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和SREBP裂解活化蛋白(SCAP)的mRNA表达量无明显变化,参与脂肪酸从头合成(ACCα、FASN)及去饱和(SCD1)基因的mRNA表达量均显著下降(P<0.05);参与甘油三酯合成的3个关键基因中,GPAM及DGAT2的mRNA表达量显著下降(P<0.05),AGPAT6的表达无显著变化;同时,催化甘油三酯分解(ATGL)的基因mRNA表达量也显著下降(P<0.05);细胞内甘油三酯含量无显著变化。综上所述,在山羊原代乳腺上皮细胞中,INSIG1能够抑制脂质合成相关基因的表达,对山羊乳腺脂质合成具有调控作用。; 关键词山羊乳腺上皮细胞胰岛素诱导基因1(INSIG1) 超表达脂质合成; Keywords GMEC INSIG1 overexpression lipid synthesis; 分类号 S827 [农业科学—畜牧学] S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名奶牛乳腺上皮细胞的原代培养被引量：6: 3; 作者吴娟王凤龙王申元; 机构内蒙古农业大学动物科学与医学学院病理研究室; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第6期2497-2499,2513,共4页; 基金内蒙古自然科学基金资助项目(200711020407) 中国农业大学与内蒙古农业大学合作项目; 文摘 [目的]探讨在生化培养箱中进行奶牛乳腺上皮细胞原代培养的可行性。[方法]采用组织块法,在体外进行乳腺上皮细胞的分离培养,探索其在生化培养箱中合适的培养条件。用倒置显微镜观察、细胞爬片吉姆萨染色和角蛋白免疫组织化学染色的方法对培养细胞进行形态学观察和鉴定。[结果]通过倒置显微镜观察发现,上皮细胞呈多角形,长满后呈上皮细胞特有铺路石样。细胞染色可见上皮细胞胞体较大,胞核深蓝色,圆形或椭圆形,核仁清晰可见,一般为2-4个。免疫组化鉴定结果显示,培养的细胞表达上皮细胞特异的角蛋白14和18。[结论]原代奶牛乳腺上皮细胞可以在生化培养箱中成功培养。; 关键词奶牛乳腺上皮细胞原代培养细胞爬片免疫组织化学; Keywords Bovine mammary epithelial cells Primary culture Cells growing on cover slip Immunohistocbemistry; 分类号 S823.91 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化被引量：3: 4; 作者田甜李键王中乾; 机构西南民族大学生命科学与技术学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第9期4604-4606,4613,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30771550); 文摘 [目的]优化脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞的条件。[方法]通过胶原酶消化法和组织块贴壁法,体外分离培养得到牦牛乳腺上皮细胞。采用免疫细胞化学技术检测细胞角蛋白在细胞内的表达。以绿色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体介导外源基因转染牦牛乳腺上皮细胞,统计在不同细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间下的转染效率,寻求最佳转染条件。[结果]牦牛乳腺上皮细胞在细胞融合度为81%～90%,脂质体的量为1.8μl,脂质体与质粒比例为2∶1,转染时间为4h时,转染效率最高。[结论]该研究可为乳腺生物反应器构建提供试验依据。; 关键词牦牛乳腺上皮细胞免疫细胞化学转染; Keywords Yak mammary epithelial cell Immunocytochemistry Transfection; 分类号 S823.85 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肌上皮细胞标志物p63、α-SMA和Calponin在乳腺良恶性疾病中的表达及意义被引量：5: 5; 作者梁建芳; 机构华中科技大学同济医学院病理学教研室; 出处《山西医科大学学报》 CAS 2005年第5期555-558,共4页; 基金山西医科大学第一医院科研基金资助项目(948); 文摘目的探讨乳腺肌上皮细胞标志物p63、-αSMA和Calponin在乳腺良恶性疾病中的表达及意义。方法收集乳腺癌标本67例及其癌旁组织。将其分为5组:癌旁正常乳腺组、乳腺增生组、乳腺导管不典型增生组、原位癌组和浸润癌组。应用免疫组织化学S-P法检测p63、-αSMA和Calponin在乳腺癌中的表达。结果在乳腺正常组、增生组、不典型增生组中,几乎所有的肌上皮细胞表达p63、-αSMA和Calponin,而所有的腺上皮细胞3种抗体均为阴性;在原位癌组中3种抗体均表现为:癌巢外围可见p63、-αSMA或Calponin阳性的肌上皮细胞完整或部分包绕;在浸润癌组所有的癌巢外缘均未见p63、α-SMA或Calponin阳性的肌上皮细胞。结论与-αSMA、Calponin相比,p63显示乳腺肌上皮细胞具有相对较高的敏感性和特异性,可作为肌上皮细胞的又一有效的标志物。; 关键词乳腺肿瘤肌上皮细胞免疫组织化学 P63 Α-SMA CALPONIN; Keywords breast neoplasms myoepithelial cells immunohistochemistry p63 a-SMA Calponin; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化被引量：2: 6; 作者杜珊马保华李亮亮刘军赵晓娥张涌; 机构西北农林科技大学动物医学院农业部动物生物技术重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期159-166,共8页; 基金国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-010B); 文摘为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了在不同电压(120、140、160、180、200V)、不同电击时长(5、10、15、20ms)以及2株细胞(GMEC1、GMEC2)的不同代数(第1代、第3代、第5代、第9代)条件下的转染效率,并利用优化条件对山羊乳腺上皮细胞进行人β-防御素3基因转染,经过G418筛选,最终获得单克隆细胞,同时对获得的单克隆阳性细胞进行体外诱导表达,并对诱导产物进行Western blotting鉴定。结果表明,不同遗传背景的细胞对转染效率的影响较小,而第1代培养的细胞转染效率要显著高于传代细胞,乳腺上皮细胞在电压180V、电击时长15ms、电击1次的条件下转染效率最高,优化条件下转染、筛选和扩增后获得稳定表达人β-防御素3蛋白的单克隆乳腺上皮细胞。研究工作为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺特异性表达载体的检测提供参考资料。; 关键词山羊乳腺上皮细胞电穿孔转染效率人β-防御素3基因诱导表达; Keywords goat mammary epithelial cells electroporation transfection efficiency human betadefensin 3 gene induced expression; 分类号 S827 [农业科学—畜牧学] S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳房: 7; 出处《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 2002年第5期108-108,共1页; 文摘 0217842 乳房诊断用计算机辅助诊断(CAD)[日]/难波清//新医疗.-2001,(9).-66～69 冀医情0217843 MMP-9在肿瘤坏死因子诱导的乳腺上皮细胞的增生和分支形态的发生中的功能性意义/Lee P P∥Endocrinology.-2000,141(10).-3764～3773; 关键词计算机辅助诊断肿瘤坏死因子乳腺上皮细胞乳房分支形态功能性医科上皮细胞增生医疗诱导; 分类号 R655.8 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞乳脂代谢的影响	李卫清王国栋吕丹薇张丹丹刘权辉潘思尧黄奔	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响	王苗罗军许会芬朱江江赫秋亚姚大为史怀平	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	8	在线阅读下载PDF 职称材料
3	奶牛乳腺上皮细胞的原代培养	吴娟王凤龙王申元	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2009	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化	田甜李键王中乾	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	肌上皮细胞标志物p63、α-SMA和Calponin在乳腺良恶性疾病中的表达及意义	梁建芳	《山西医科大学学报》 CAS	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化	杜珊马保华李亮亮刘军赵晓娥张涌	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	乳房		《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料