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KSHV包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A和gL的克隆及真核表达
被引量：
1
1
作者
徐华国
卢春
+4 位作者
程林
曾怡
秦娣
吕志刚
陈秀英
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期502-506,共5页
目的:克隆并在293T细胞中表达卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A与gL。方法:以BCBL-1细胞总DNA为模板,用PCR方法扩增出K8.1和gL基因;以BCBL-1细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出K8.1A基因。将PCR产物...
目的:克隆并在293T细胞中表达卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A与gL。方法:以BCBL-1细胞总DNA为模板,用PCR方法扩增出K8.1和gL基因;以BCBL-1细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出K8.1A基因。将PCR产物克隆进真核载体pcDNA3.1(+)内,分别构建含K8.1、K8.1A和gL基因的重组真核表达质粒。重组质粒转染293T细胞,用Westernblot的方法检测K8.1和K8.1A在293T细胞中的表达;RT-PCR方法检测gL基因在293T细胞中的转录。结果:核酸序列分析的结果表明,克隆的K8.1、K8.1A和gL基因与GenBank中已登记的KSHVK8.1、K8.1A和gL基因序列100%同源。Westernblot结果显示,在约35ku位置有目的条带,与预期的重组K8.1和K8.1A蛋白大小一致。RT-PCR结果显示约在500bp位置检测到特异性条带。结论:KSHVK8.1、K8.1A和gL编码基因在293T细胞中获得正确表达。
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关键词
卡波济肉瘤相关疱疹病毒
包膜糖蛋白编码基因
真核表达
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职称材料
题名
KSHV包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A和gL的克隆及真核表达
被引量：
1
1
作者
徐华国
卢春
程林
曾怡
秦娣
吕志刚
陈秀英
机构
南京医科大学第一附属医院河西分院检验科
南京医科大学微生物学与免疫学系
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期502-506,共5页
基金
国家自然科学基金(30670096)
霍英东青年教师基金(101038)资助项目
文摘
目的:克隆并在293T细胞中表达卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A与gL。方法:以BCBL-1细胞总DNA为模板,用PCR方法扩增出K8.1和gL基因;以BCBL-1细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出K8.1A基因。将PCR产物克隆进真核载体pcDNA3.1(+)内,分别构建含K8.1、K8.1A和gL基因的重组真核表达质粒。重组质粒转染293T细胞,用Westernblot的方法检测K8.1和K8.1A在293T细胞中的表达;RT-PCR方法检测gL基因在293T细胞中的转录。结果:核酸序列分析的结果表明,克隆的K8.1、K8.1A和gL基因与GenBank中已登记的KSHVK8.1、K8.1A和gL基因序列100%同源。Westernblot结果显示,在约35ku位置有目的条带,与预期的重组K8.1和K8.1A蛋白大小一致。RT-PCR结果显示约在500bp位置检测到特异性条带。结论:KSHVK8.1、K8.1A和gL编码基因在293T细胞中获得正确表达。
关键词
卡波济肉瘤相关疱疹病毒
包膜糖蛋白编码基因
真核表达
Keywords
Kaposi＇s iated herpesvirus
gene encoded by envelope glycoprotein
eukaryotic expression
分类号
R336 [医药卫生—人体生理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
KSHV包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A和gL的克隆及真核表达
徐华国
卢春
程林
曾怡
秦娣
吕志刚
陈秀英
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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