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白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达纯化及性质研究
被引量：
4
1
作者
赵雪娜
董相陈
+3 位作者
侯登勇
孙丽霞
王晶翼
王庆民
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期153-156,共4页
CRM197是一种白喉毒素突变体,作为载体蛋白广泛用于疫苗开发。将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pET25b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,CRM197获得高效表达,达到菌体总蛋白的20%。目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后...
CRM197是一种白喉毒素突变体,作为载体蛋白广泛用于疫苗开发。将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pET25b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,CRM197获得高效表达,达到菌体总蛋白的20%。目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换、S-100分子筛纯化获得纯度高于95%的CRM197样品,用该蛋白样品免疫新西兰大白兔,免疫兔血清中检测到特异性抗体应答。急性毒性试验中,每只豚鼠皮下注射200μgCRM197纯化样品,未出现明显毒性反应症状,与之相比较,注射后48h内,20ng白喉毒素阳性对照组动物全部死亡。结果表明,利用本试验的表达策略,CRM197得到高效表达,并且具有良好的免疫原性和安全性,为其进一步生产及应用奠定基础。
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关键词
CRM197
白喉毒素
包涵体免疫原性
急性毒性
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职称材料
题名
白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达纯化及性质研究
被引量：
4
1
作者
赵雪娜
董相陈
侯登勇
孙丽霞
王晶翼
王庆民
机构
齐鲁制药有限公司药物研究院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期153-156,共4页
文摘
CRM197是一种白喉毒素突变体,作为载体蛋白广泛用于疫苗开发。将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pET25b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,CRM197获得高效表达,达到菌体总蛋白的20%。目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换、S-100分子筛纯化获得纯度高于95%的CRM197样品,用该蛋白样品免疫新西兰大白兔,免疫兔血清中检测到特异性抗体应答。急性毒性试验中,每只豚鼠皮下注射200μgCRM197纯化样品,未出现明显毒性反应症状,与之相比较,注射后48h内,20ng白喉毒素阳性对照组动物全部死亡。结果表明,利用本试验的表达策略,CRM197得到高效表达,并且具有良好的免疫原性和安全性,为其进一步生产及应用奠定基础。
关键词
CRM197
白喉毒素
包涵体免疫原性
急性毒性
Keywords
CRM197 Diphtheria toxin Inclusion body Immunogenicity Acute toxicity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达纯化及性质研究
赵雪娜
董相陈
侯登勇
孙丽霞
王晶翼
王庆民
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
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