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中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒(EAV)感染马血清流行病学调查 被引量:6
1
作者 李红梅 侯玉杰 +4 位作者 时成龙 郭巍 胡兰 赵立平 相文华 《中国动物检疫》 CAS 2012年第11期54-56,共3页
马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一。本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒... 马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一。本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品。其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%。鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播。 展开更多
关键词 赛马 役用马 动脉炎病毒 流行病学调查
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马动脉炎病毒N蛋白基因GST融合表达载体的构建及表达 被引量:4
2
作者 杜建 王志亮 +2 位作者 宋厚辉 金宁一 张念祖 《动物医学进展》 CSCD 2005年第9期50-54,共5页
采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因ORF7,并将其克隆到pMD18-T载体,构建成重组质粒pMD18-N,在上海生物工程公司测序。结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAV NC-002532株的同源性为99%。表明ORF7是EAV基因组内的保守序... 采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因ORF7,并将其克隆到pMD18-T载体,构建成重组质粒pMD18-N,在上海生物工程公司测序。结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAV NC-002532株的同源性为99%。表明ORF7是EAV基因组内的保守序列,将ORF7亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组质粒pGEX-6P-N,用pGEX-6P-N转化表达菌株BL21(DE3),诱导表达后SDS-PAGE和Western blotting分析表明,克隆在谷胱苷肽硫转移酶(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子质量约为40 ku,为马动脉炎病毒病血清学诊断方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 核衣壳蛋白基因 克隆 原核表达
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马动脉炎病毒实时RT-PCR检测方法的建立 被引量:5
3
作者 杨松 梁成珠 +2 位作者 高宏伟 刘永华 陈溥言 《动物医学进展》 CSCD 2007年第5期32-35,共4页
选取马动脉炎病毒基因组中高度保守的开放阅读框7序列,设计了特异性引物和TaqMan探针,利用一步法的实时定量RT-PCR来定量检测马动脉炎病毒。分别使用马动脉炎病毒的总RNA和含有选定检测序列的克隆标准品做扩增曲线,两曲线斜率之差小于0... 选取马动脉炎病毒基因组中高度保守的开放阅读框7序列,设计了特异性引物和TaqMan探针,利用一步法的实时定量RT-PCR来定量检测马动脉炎病毒。分别使用马动脉炎病毒的总RNA和含有选定检测序列的克隆标准品做扩增曲线,两曲线斜率之差小于0.1,证明两者的扩增效率相同,可用选定检测序列的克隆标准品对马动脉炎病毒进行定量检测。该方法敏感,快速,准确,且无交叉污染,能满足海关及检疫部门对马动脉炎病毒快速、准确的检测要求。 展开更多
关键词 实时反转录-聚合酶链反应 定量检测 动脉炎病毒
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马动脉炎病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量:3
4
作者 杜建 王志亮 +2 位作者 陈继明 金宁一 张念祖 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第5期28-30,共3页
根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段,与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病... 根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段,与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病毒科的猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)作为对照的扩增结果均为阴性。敏感性试验表明,该方法可以检测出10-4个TCID50的病毒含量,说明具有较好的敏感性。 展开更多
关键词 PCR检测方法 动脉炎病毒 RT 呼吸道综合征 Vero细胞 TCID50 核苷酸序列 病毒基因组 PCR扩增 敏感性试验 病毒感染 病毒含量 设计值 猪繁殖
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抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备 被引量:1
5
作者 赵世华 戚亭 +9 位作者 郭巍 李红梅 王贵宾 刘翠云 仇铮 田志革 王征 卢刚 潘佳亮 相文华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期827-829,共3页
为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Wes... 为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这两株杂交瘤细胞分泌的MAb均能够识别EAV。EAV N蛋白MAb的制备,为EAV血清学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 核衣壳蛋白 单克隆抗体
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动脉炎病毒属病毒的传染性cDNA克隆及其作为疫苗载体的研究进展 被引量:2
6
作者 赵恩茂 宋卫兰 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第10期I0001-I0005,共5页
作者根据病毒反向遗传学的基本原理、动脉炎病毒的基因结构和亚基因mRNA的合成,就动脉炎病毒传染性cD-NA克隆的构建及基因工程操作的研究进展作一综述。以期利用传染性cDNA克隆作为工具,构建出安全、有效的新型疫苗。
关键词 传染性克隆 动脉炎病毒 反向遗传学 疫苗载体 动脉炎病毒 猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒
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马动脉炎病毒主要结构蛋白基因酵母工程菌的构建及鉴定
7
作者 杜建 王志亮 +2 位作者 宋厚辉 金宁一 张念祖 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第11期3-5,共3页
目的:构建马动脉炎病毒读码框ORF5、ORF6、ORF7主要结构蛋白基因全长片段的克隆载体及汉逊酵母穿梭载体,并获得重组工程菌,为下一步酵母表达重组目的蛋白奠定基础。方法:应用RT-PCR方法从病毒核酸中扩增ORF5、ORF6和ORF7读码框的全长基... 目的:构建马动脉炎病毒读码框ORF5、ORF6、ORF7主要结构蛋白基因全长片段的克隆载体及汉逊酵母穿梭载体,并获得重组工程菌,为下一步酵母表达重组目的蛋白奠定基础。方法:应用RT-PCR方法从病毒核酸中扩增ORF5、ORF6和ORF7读码框的全长基因,产物回收后分别与PUC18和PMD18-T载体连接并转化DH5αE.coli,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体PUC18-GL、PUC18-M和PMD18T-ORF7;以构建的克隆载体为模板,用重新设计的引物构建了汉逊酵母分泌性穿梭载体,然后电转化至汉逊酵母基因组中。结果:所有重组质粒经PCR和酶切鉴定均出现目的片段,测序结果证实正确,目的基因ORF5、ORF6与酵母重组成功。结论:构建了含有目的基因ORF5、ORF6的重组酵母工程菌,为实现分泌表达目的蛋白,进而研制病毒亚单位疫苗及诊断试剂提供了物质基础。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 结构蛋白基因 克隆 汉逊酵母菌
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马动脉炎病毒大囊膜糖蛋白真核表达载体的构建与瞬时表达
8
作者 杜建 王志亮 +1 位作者 金宁一 张念祖 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期133-135,共3页
将马动脉炎病毒大囊膜糖蛋白基因GL插入真核表达载体pVAX1中构建真核表达载体pVAX1-GL,酶切和测序结果表明构建是正确的,用脂质体转染试剂将其转染BHK-21细胞并通过间接免疫荧光试验检测其在体外的表达情况,结果在转染的细胞表面观察到... 将马动脉炎病毒大囊膜糖蛋白基因GL插入真核表达载体pVAX1中构建真核表达载体pVAX1-GL,酶切和测序结果表明构建是正确的,用脂质体转染试剂将其转染BHK-21细胞并通过间接免疫荧光试验检测其在体外的表达情况,结果在转染的细胞表面观察到绿色荧光,证明基因得到了表达,而对照则无绿色荧光,本研究为马动脉炎基因疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 大囊膜糖蛋白 真核表达载体
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马动脉炎病毒GP5蛋白主要抗原域的表达及鉴定
9
作者 侯玉杰 时成龙 +4 位作者 相文华 郭巍 李红梅 赵立平 胡兰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期18-21,共4页
在分析EAV-GP5蛋白抗原性的基础上,设计一对引物扩增GP5蛋白的主要抗原域编码EAV-GP5 79~330 bp。将扩增基因插入pET-30aBamHⅠ和HindⅢ间构建原核表达载体pET-GP5。将pET-GP5质粒转入BL21(DE3)宿主菌并优化诱导表达条件,实现马动脉... 在分析EAV-GP5蛋白抗原性的基础上,设计一对引物扩增GP5蛋白的主要抗原域编码EAV-GP5 79~330 bp。将扩增基因插入pET-30aBamHⅠ和HindⅢ间构建原核表达载体pET-GP5。将pET-GP5质粒转入BL21(DE3)宿主菌并优化诱导表达条件,实现马动脉炎病毒EAV-GP5蛋白主要抗原域的高效表达。重组pGP5经纯化制备兔抗pGP5免疫血清,经免疫印迹及间接免疫荧光试验鉴定,证实所得表达产物具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 GP5蛋白 免疫原性
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定量检测马动脉炎病毒方法的建立
10
作者 杨松 梁成珠 +1 位作者 高宏伟 陈溥言 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期115-118,共4页
为建立快速、敏感、准确的马动脉炎病毒检测方法,笔者选取病毒基因组中高度保守的ORF7序列设计引物和Taq-Man探针,分别使用马动脉炎病毒的总RNA和含有选定检测序列的克隆标准品进行一步法实时定量RT-PCR,绘制扩增曲线,两曲线斜率之差小... 为建立快速、敏感、准确的马动脉炎病毒检测方法,笔者选取病毒基因组中高度保守的ORF7序列设计引物和Taq-Man探针,分别使用马动脉炎病毒的总RNA和含有选定检测序列的克隆标准品进行一步法实时定量RT-PCR,绘制扩增曲线,两曲线斜率之差小于0.1,证明两者的扩增效率相同,可用选定检测序列的克隆标准品对马动脉炎病毒进行定量检测。 展开更多
关键词 定量检测 REAL-TIME TAQMAN RT-PCR 动脉炎病毒
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新疆乌鲁木齐地区马疱疹病毒1型、马动脉炎病毒、马流感病毒感染的血清学调查 被引量:9
11
作者 王雪竹 加尔肯 +8 位作者 刘建华 胡月 孙佳琪 王旭蕾 车传忠 郑学功 贾钦瑞 祖力亚江·阿不都热合曼 冉多良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期998-1002,共5页
为了解新疆乌鲁木齐地区马疱疹病毒1型(EHV-1)、马动脉炎病毒(EAV)、马流感病毒(EIV)的感染现状和特点,本研究采集该地区676份马血清样品,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和血凝抑制试验(HI)进行上述病毒的血清抗体的检测,采用统计学... 为了解新疆乌鲁木齐地区马疱疹病毒1型(EHV-1)、马动脉炎病毒(EAV)、马流感病毒(EIV)的感染现状和特点,本研究采集该地区676份马血清样品,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和血凝抑制试验(HI)进行上述病毒的血清抗体的检测,采用统计学方法分析不同地区、年龄、性别及品种马的EHV-1、EAV、EIV的抗体阳性率。结果显示,新疆乌鲁木齐地区马群EHV-1、EAV、EIV及EHV-1+EIV抗体阳性率分别为39.35%(266/676)、0(0/676)、40.53%(274/676)、24.85%(168/676)。其中,南山景区、乌鲁木齐县、达坂城区马群感染EHV-1的抗体阳性率分别为44.44%(72/162)、57.89%(88/152)、66.67%(52/78),显著高于新市区16.00%(32/200)和米东区26.19%(22/84)(p<0.05);米东区、南山景区、乌鲁木齐县、达坂城区马群感染EIV的抗体阳性率分别为58.00%(58/84)、57.00%(57/162)、47.37%(95/152)、41.03%(32/78),显著高于新市区16.00%(32/200)(p<0.05);1岁以内马驹EHV-1、EIV及EHV-1+EIV抗体阳性率最高,分别为50.00%(20/40)、77.50%(31/40)、32.50%(13/40),显著高于其它年龄的马(p<0.05)。10岁以上马EHV-1、EIV及EHV-1+EIV抗体阳性率最低,分别为26.05%(31/119)、33.61%(40/119)、14.29%(17/119);母马感染EHV-1、EIV的抗体阳性率分别为54.21%(58/107)、67.29%(72/107),显著高于公马36.56%(208/569)、35.50%(202/569)(p<0.05);本地品种哈萨克马EHV-1、EIV及EHV-1+EIV抗体阳性率最高,分别为54.95%(200/364)、54.67%(199/364)、35.71%(130/364),显著高于其他品种的马(p<0.05)。除混血马外,其它品种的马均存在不同程度的EIV感染;伊犁马EIV和EHV-1+EIV抗体阳性率最低,均为9.09%(2/22),显著低于其它品种的马(p<0.05);不同地区、年龄、性别及品种的马EHV-1、EIV感染率差异显著(p<0.05)。本研究为该地区这3种马传染病的研究和防控提供数据参考。 展开更多
关键词 马疱疹病毒 马流感病毒 动脉炎病毒 酶联免疫吸附试验
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马动脉炎病毒Eva Green荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:3
12
作者 胡月 戚亭 +2 位作者 胡哲 关平原 王晓钧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期943-947,共5页
为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本研究设计了一对针对EAV Bucyrus株ORF7基因序列的特异性引物,建立了检测EAV的Eva Green荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)方法。结果表明,该方法在102拷贝/μL^107拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;... 为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本研究设计了一对针对EAV Bucyrus株ORF7基因序列的特异性引物,建立了检测EAV的Eva Green荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)方法。结果表明,该方法在102拷贝/μL^107拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;最低检出量为101.5TCID50/m L病毒,敏感性为常规RT-PCR的100倍,与其他马常见病毒无交叉反应;组内及组间重复性试验的变异系数均小于2%,具有较好的重复性。此外,采用该方法测定了EAV Bucyrus株及其拯救病毒ic EAV感染RK-13细胞后的复制动态,并与TCID50方法进行了比较。结果显示ic EAV与其亲本病毒接种RK-13细胞后,0 h测定病毒TCID50及拷贝数分别为103.33TCID50/m L(104.65拷贝/2μL)和103.50TCID50/m L(104.70拷贝/2μL);60 h时,细胞病变达到100%,ic EAV及其亲本病毒的TCID50及拷贝数分别为105.67TCID50/m L(107.0拷贝/2μL)和105.57TCID50/m L(106.98拷贝/2μL),两株病毒在RK-13细胞内的复制效率相似。本研究建立的Eva Green q RT-PCR方法可以为细胞培养物中EAV的检测提供有效的技术手段。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 QRT-PCR EVA Green 病毒含量
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动脉炎病毒PRRSV和EAV的Nsp4蛋白对mTANK蛋白的降解
13
作者 吴磊 袁旭 +3 位作者 洪锦璇 陈叶 李训良 宋中宝 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2022年第5期675-681,共7页
为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和马动脉炎病毒(EAV)等动脉炎病毒的Nsp4蛋白在病毒免疫逃逸中的作用,通过免疫沉淀和质谱技术筛选到与Nsp4互作的宿主蛋白mTANK.将pCAGGS-PRRSV-Nsp4-Flag、pCAGGS-EAV-Nsp4-Flag质粒分别与pCAGGS-m... 为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和马动脉炎病毒(EAV)等动脉炎病毒的Nsp4蛋白在病毒免疫逃逸中的作用,通过免疫沉淀和质谱技术筛选到与Nsp4互作的宿主蛋白mTANK.将pCAGGS-PRRSV-Nsp4-Flag、pCAGGS-EAV-Nsp4-Flag质粒分别与pCAGGS-mTANK-HA质粒共转染HEK293T细胞,发现Nsp4可特异性降解mTANK.为了进一步揭示其中的机制,利用蛋白酶体抑制剂MG-132、凋亡途径抑制剂Z-VAD-FMK、溶酶体抑制剂NHCl和自噬抑制剂3-MA分别处理共转染的细胞,发现这些抑制剂处理并不影响Nsp4对mTANK的降解作用,随后构建了PRRSV Nsp4(E39、E64、E118)和EAV Nsp4(E39、E65、E120)的酶活性突变体质粒.将突变体质粒分别与pCAGGS-mTANK-HA质粒共转染后发现,Nsp4蛋白酶活性缺失后无法降解mTANK.进一步研究发现,mTANK降解产生的片段分别位于30和25~30 ku附近.综上,PRRSV和EAV的Nsp4蛋白可通过其3C样蛋白酶活性特异性切割宿主蛋白mTANK. 展开更多
关键词 动脉炎病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 动脉炎病毒 NSP4 mTANK 降解
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非结构蛋白1(nsp1)及其介导的1型干扰素分子在动脉炎病毒中的生物合成
14
作者 Han M 吴艳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期152-152,共1页
Ⅰ型干扰素(IFN-α/β)在宿主抗病毒中起重要作用,且研究发现猪动脉炎病毒属的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能下调感染过程中IFNs的产生。PRRSV的非结构蛋白1(nsp1)被认为是病毒的一个IFN颉颃剂,且nsp1α亚单位能降解CREB结合蛋白(CBP... Ⅰ型干扰素(IFN-α/β)在宿主抗病毒中起重要作用,且研究发现猪动脉炎病毒属的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能下调感染过程中IFNs的产生。PRRSV的非结构蛋白1(nsp1)被认为是病毒的一个IFN颉颃剂,且nsp1α亚单位能降解CREB结合蛋白(CBP)及抑制增强体的形成,从而导致IFN合成过程受到抑制。本试验对动脉炎病毒科其他病毒成员:马动脉炎病毒(EAV)、乳酸脱氢酶增高病毒(LDV)和猴出血热病毒(SHFV)进行研究。PRRSV-nsp1和LDV-nsp1可自动切割成nsp1α、nsp1β2个亚单位,而EAV-nsp1未发生切割。SHFV-nsp1最初被预测为可切割成nsp1α、nsp1β、nsp1γ3个亚单位,但实际上只有SHFVnsp1αβ和SHFV-nsp1γ2个亚单位形成。木瓜蛋白酶半胱氨酸蛋白酶(PLP)1α修饰在SHFV-nsp1α仍无效,且只有nsp1β的PLP1β修饰对生成SHFV-nsp1γ亚单位有效。nsp1的所有亚单位定位在细胞核和细胞浆中,但PRRSV-nsp1β、LDV-nsp1β、EAV-nsp1、SHFV-nsp1γ主要存在于细胞核中。nsp1的所有亚单位含有IFN抑制活性,抑制干扰素调控因子3(IRF3)和NF-κB介导的IFN启动子活性。与PRRSV-nsp1α相似,在表达LDV-nsp1α、SHFV-nsp1γ的细胞中CBP降解明显,但EAV-nsp1中降解不明显。即使CBP的降解,nsp1的所有亚单位仍能抑制IFN敏感反应元件(ISRE)启动子活性。本试验结果表明,nsp1介导的IFN调控对所有动脉炎病毒是一个共同策略,但不同病毒间的作用机制可能不同。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 CPB降解 动脉炎病毒(EAV) IFN颉颃 乳酸脱氢酶增高病毒(LDV) 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 猴出血热病毒(SHFV) 非结构蛋白1(nspl)
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山东、河南、河北驴群马动脉炎病毒和马疱疹病毒8型的检测与分析 被引量:2
15
作者 王彤彤 黄泽统 +7 位作者 陈丽 郭瑞宏 董宇婷 刘文强 刘桂芹 王长法 任慧英 李亮亮 《动物医学进展》 北大核心 2022年第5期30-35,共6页
为了解我国山东省、河南省、河北省驴群中马动脉炎病毒(EAV)和马疱疹病毒8型(EHV-8)的感染现状,于2020年从3个省份的屠宰场和驴场收集驴血样品共计860份。通过RT-PCR和PCR方法分别对血样进行EAV和EHV-8检测,统计其阳性率和混合感染率,... 为了解我国山东省、河南省、河北省驴群中马动脉炎病毒(EAV)和马疱疹病毒8型(EHV-8)的感染现状,于2020年从3个省份的屠宰场和驴场收集驴血样品共计860份。通过RT-PCR和PCR方法分别对血样进行EAV和EHV-8检测,统计其阳性率和混合感染率,并分析其流行情况;同时,对3个省份EAV和EHV-8阳性样品的ORF7基因和ORF70部分基因序列进行克隆、测序及遗传进化分析。结果显示,EAV的阳性率为5.7%(49/860),EHV-8的阳性19.7%(169/860),混合感染率为1.9%(16/860)。分析显示,3个省份扩增的EAV ORF7基因测序结果均与经典毒株EAV Bucyrus同源性最高,亲缘关系最近;河北EHV-8 ORF70基因与EHV-8 IR/2010/16亲缘关系最近,河南EHV-8 ORF70基因与EHV-8 IR/2010/47亲缘关系最近,山东EHV-8 ORF70基因与EHV-8 wh亲缘关系最近。论文首次报道EAV和EHV-8在驴群感染情况,为下一步防控EAV和EHV-8奠定了基础。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 马疱疹病毒8型 遗传分析
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马动脉炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立
16
作者 胡月 戚亭 +2 位作者 赵世华 关平原 王晓钧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期651-654,共4页
为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本实验以EAV N蛋白单克隆抗体(MAb)2B9为捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的EAV N蛋白MAb 2B3(HRP-2B3)为检测抗体,建立EAV双抗体夹心ELISA检测方法。结果显示,该方法的最佳工作条件为:MAb 2B9... 为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本实验以EAV N蛋白单克隆抗体(MAb)2B9为捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的EAV N蛋白MAb 2B3(HRP-2B3)为检测抗体,建立EAV双抗体夹心ELISA检测方法。结果显示,该方法的最佳工作条件为:MAb 2B9的包被浓度为2μg/mL,HRP-2B3的工作浓度为2μg/mL,以OD450nm≥0.124为阳性判定标准。该方法对马传染性贫血病毒、马疱疹病毒I型和IV型、马流感病毒等均无交叉反应,特异性好;最低检出限为病毒标准品200倍稀释(103.2TCID50),敏感性高。3次重复试验建立的标准曲线的相关系数(R2)均大于0.997。本实验建立的EAV双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、敏感性高等优点,适于EAV的快速检测。 展开更多
关键词 动脉炎病毒 双抗体夹心ELISA 单克隆抗体 检测
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马动脉炎病毒血凝抑制试验与微量中和试验的对比研究 被引量:1
17
作者 朱来华 梁成珠 +4 位作者 李保家 魏乃林 吴华 王宁宁 原珍 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第2期15-17,共3页
关键词 负链RNA病毒 动脉炎病毒 血凝抑制试验 微量中和试验
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用套式PCR技术检测精液中马动脉炎病毒
18
作者 李凯年 《畜牧兽医科技信息》 1998年第20期5-5,共1页
最近,加拿大和美国研究人员合作研制了一种套式PCR测定技术,用以检测精液中的马动脉炎病毒(EAV)。这种方法用在不同EAV分离物中都高度保留的ORF/b基因的顺序作为引物,扩增直接从精清中提取的RNA。用这种方法可以检出每毫升自然感染精清... 最近,加拿大和美国研究人员合作研制了一种套式PCR测定技术,用以检测精液中的马动脉炎病毒(EAV)。这种方法用在不同EAV分离物中都高度保留的ORF/b基因的顺序作为引物,扩增直接从精清中提取的RNA。用这种方法可以检出每毫升自然感染精清中不到2. 展开更多
关键词 套式PCR 动脉炎病毒 技术检测 精液 病毒分离 测定技术 自然感染 研究人员 生物材料 合作研制
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用免疫细胞化学方法检测马动脉炎病毒
19
作者 李凯年 《畜牧兽医科技信息》 1996年第9期5-5,共1页
作者研制了一种可以从自然感染病例获得样品中快速鉴定传染性马动脉炎病毒(EAV)的免疫细胞化学方法。本法是用EAV的鼠单克隆抗体作为原始抗体的一种亲合素—生物素、葡萄糖—氧化酶复合物(ABC)染色法。将样品接种于兔肾细胞(RK—13)
关键词 免疫细胞 化学方法 动脉炎病毒 单克隆抗体 兔肾细胞 快速鉴定 组织培养液 生物素 感染病例 染色法
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用RT-PCR诊断马动脉炎病毒感染
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作者 史同瑞 《畜牧兽医科技信息》 2000年第7期12-12,共1页
德国学者Starick应用4对不同引物,成功的扩增了马动脉类病毒(EAV)基因的编码先导序列片段,并以此建立了反转录PCR(RT-PCR)。
关键词 RT-PCR 动脉炎病毒 斑点杂交试验 病毒感染 组织样 反转录PCR 病毒分离 检测方法 敏感性和特异性 病毒
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