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终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸
1
作者
龙高波
杨宪峰
+3 位作者
刘红博
蒲军
杨晓兰
廖飞
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第12期1431-1435,共5页
目的：考察终点平衡尿酸酶法和动力学尿酸酶法联用测定尿酸的可行性和线性范围。方法：在25℃下1.2 ml硼酸钠缓冲液（0.20 mol/L,pH 9.2）中用293 nm吸收跟踪尿酸酶反应;测定加入5μl尿酸酶液前反应体系吸收,加入5μl苛求芽孢杆菌尿酸...
目的：考察终点平衡尿酸酶法和动力学尿酸酶法联用测定尿酸的可行性和线性范围。方法：在25℃下1.2 ml硼酸钠缓冲液（0.20 mol/L,pH 9.2）中用293 nm吸收跟踪尿酸酶反应;测定加入5μl尿酸酶液前反应体系吸收,加入5μl苛求芽孢杆菌尿酸酶液后记录5.0 min内吸收变化。终点平衡法以尿酸酶反应前吸收为起点而尿酸完全氧化后吸收为本底,二者之差为尿酸净吸收且同尿酸浓度成正比;动力学法分析尿酸酶反应过程预测本底。分析模拟尿酸酶反应曲线,探索从终点平衡法转换为动力学法的尿酸浓度界限值;实验测定联用法的可行性和线性范围。结果：分析40 U/L苛求芽孢杆菌尿酸酶模拟反应曲线,发现两种方法转换的尿酸浓度界限值可为5.0μmol/L;分析实验反应曲线证实此界限值可行。在40 U/L尿酸酶时终点平衡法测量范围1.0~6.0μmol/L;联用法测量范围1.5~60μmol/L且对30μmol/L黄嘌呤有抗性;在5.0μmol/L以下变异系数小于10%而5.0μmol/L以上可小于5%。结论：这种联用法测定尿酸成本更低、线性范围更宽且效率高。
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关键词
尿酸
动力学尿酸酶法
终点平衡
尿酸酶
法
线性范围
联用
法
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职称材料
苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用
被引量：
5
2
作者
赵运胜
赵利娜
+3 位作者
杨根庆
陶佳
卜友泉
廖飞
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期239-242,共4页
目的考察苛求芽孢杆菌（ATCC 26904）分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后，用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力...
目的考察苛求芽孢杆菌（ATCC 26904）分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后，用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸。结果苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶只含1种肽链，分子量为34．7kD（1kD=0．9921ku），其米氏常数为（0．22±0．01）mmol／L（n=11），黄嘌呤抑制常数为（36±3）μmol／L（n=4）。用此尿酸酶，只要被分析反应曲线终点的底物浓度低于起点的30％，应用积分法就能可靠预测本底；直接测定反应前吸收，可使直接动力学尿酸酶法不受常见血清成分、酶活性变化和15μmol／L黄嘌呤等干扰。监测0．025U／ml尿酸酶反应5min的数据，其线性响应范围为1～50μmol／L；所得临床标本血清尿酸含量（Ct）与过氧化物酶偶联间接终点平衡法（Ce）正相关（Ck=-0．008＋1．046Ce，r=0．996，n=206），但Bland—Altman法分析表明两种方法不一致。结论苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶可用于直接动力学尿酸酶法测定尿酸，并可保障其优势。
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关键词
直接
动力学尿酸酶法
血清
尿酸
测定
苛求芽孢杆菌分泌型
尿酸酶
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职称材料
题名
终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸
1
作者
龙高波
杨宪峰
刘红博
蒲军
杨晓兰
廖飞
机构
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室
重庆医科大学附属第一医院泌尿外科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第12期1431-1435,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30672009)
重庆市科委重点资助项目(编号:CSTC2011BA5039)
文摘
目的：考察终点平衡尿酸酶法和动力学尿酸酶法联用测定尿酸的可行性和线性范围。方法：在25℃下1.2 ml硼酸钠缓冲液（0.20 mol/L,pH 9.2）中用293 nm吸收跟踪尿酸酶反应;测定加入5μl尿酸酶液前反应体系吸收,加入5μl苛求芽孢杆菌尿酸酶液后记录5.0 min内吸收变化。终点平衡法以尿酸酶反应前吸收为起点而尿酸完全氧化后吸收为本底,二者之差为尿酸净吸收且同尿酸浓度成正比;动力学法分析尿酸酶反应过程预测本底。分析模拟尿酸酶反应曲线,探索从终点平衡法转换为动力学法的尿酸浓度界限值;实验测定联用法的可行性和线性范围。结果：分析40 U/L苛求芽孢杆菌尿酸酶模拟反应曲线,发现两种方法转换的尿酸浓度界限值可为5.0μmol/L;分析实验反应曲线证实此界限值可行。在40 U/L尿酸酶时终点平衡法测量范围1.0~6.0μmol/L;联用法测量范围1.5~60μmol/L且对30μmol/L黄嘌呤有抗性;在5.0μmol/L以下变异系数小于10%而5.0μmol/L以上可小于5%。结论：这种联用法测定尿酸成本更低、线性范围更宽且效率高。
关键词
尿酸
动力学尿酸酶法
终点平衡
尿酸酶
法
线性范围
联用
法
Keywords
uric acid
the kinetic uricase method
the equilibrium uricase method
linear range
the integration method
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用
被引量：
5
2
作者
赵运胜
赵利娜
杨根庆
陶佳
卜友泉
廖飞
机构
重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室生物信息学与分子工程研究室
重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期239-242,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30672009
No.30200266)
文摘
目的考察苛求芽孢杆菌（ATCC 26904）分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后，用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸。结果苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶只含1种肽链，分子量为34．7kD（1kD=0．9921ku），其米氏常数为（0．22±0．01）mmol／L（n=11），黄嘌呤抑制常数为（36±3）μmol／L（n=4）。用此尿酸酶，只要被分析反应曲线终点的底物浓度低于起点的30％，应用积分法就能可靠预测本底；直接测定反应前吸收，可使直接动力学尿酸酶法不受常见血清成分、酶活性变化和15μmol／L黄嘌呤等干扰。监测0．025U／ml尿酸酶反应5min的数据，其线性响应范围为1～50μmol／L；所得临床标本血清尿酸含量（Ct）与过氧化物酶偶联间接终点平衡法（Ce）正相关（Ck=-0．008＋1．046Ce，r=0．996，n=206），但Bland—Altman法分析表明两种方法不一致。结论苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶可用于直接动力学尿酸酶法测定尿酸，并可保障其优势。
关键词
直接
动力学尿酸酶法
血清
尿酸
测定
苛求芽孢杆菌分泌型
尿酸酶
Keywords
direct kinetic uricase method
serum uric acid assay
Bacillus fastidious extracellular uricase
分类号
Q555.8 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸
龙高波
杨宪峰
刘红博
蒲军
杨晓兰
廖飞
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
2
苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用
赵运胜
赵利娜
杨根庆
陶佳
卜友泉
廖飞
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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