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加味柴胡疏肝汤调控miR-204影响癫痫小鼠海马神经元调亡与ATG7、LC3Ⅱ的表达 被引量:9
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作者 汪顺贵 玉倩 +7 位作者 李华霞 李欢 卢玲 廖现秋 周艳英 宋曦 秦红玲 刁丽梅 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第7期2154-2159,共6页
目的观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马神经元自噬和凋亡的拮抗作用,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组(20 mL·kg-1·d-1灌胃两周)、模型组(180mg·kg-1腹腔注射)、加味柴胡疏肝汤组(7 ... 目的观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马神经元自噬和凋亡的拮抗作用,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组(20 mL·kg-1·d-1灌胃两周)、模型组(180mg·kg-1腹腔注射)、加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1灌胃两周)、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组(2μL颅内注射)、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 inhibitor组(2μL颅内注射)、卡马西平组(混悬液30 mg·kg-1·d-1灌胃两周);采用匹罗卡品使小鼠致痫,抑制及过表达miRNA-204后,分别予加味柴胡疏肝汤灌胃,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测小鼠海马miRNA-204,以及自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达情况,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测小鼠海马C1区神经元凋亡情况。结果与生理盐水组相比,模型组小鼠海马miR-204表达明显降低(P<0.01),自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达,神经元凋亡指数明显升高(P<0.01);与模型组相比,使用加味柴胡疏肝汤后,小鼠海马组织miR-204表达明显升高,自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达,神经元凋亡指数明显降低(P<0.05);使miR-204过表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度增大(P<0.01);抑制miR-204表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度减少(P<0.05)。结论加味柴胡疏肝汤具有抗癫痫作用,可能是通过升高miRNA-204的表达,拮抗小鼠海马神经元过度自噬和凋亡。 展开更多
关键词 加味柴胡疏肝汤 癫痫 miR-204 自噬 凋亡
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加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠海马miR-187/Wnt/β-catenin信号通路表达的影响 被引量:4
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作者 吕婷婷 李瑞暖 +7 位作者 李洁玉 黄其柳 黄小妹 黄柳瑛 周艳英 罗玉珍 梁霜 刁丽梅 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第9期89-93,I0027,I0028,共7页
目的探讨加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠miR-187/Wnt/β-catenin信号通路表达的影响。方法制备匹罗卡品急性癫痫小鼠模型后,将小鼠随机分为模型组、加味柴胡疏肝汤组、卡马西平组、加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组、加味柴胡疏肝汤+miR-... 目的探讨加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠miR-187/Wnt/β-catenin信号通路表达的影响。方法制备匹罗卡品急性癫痫小鼠模型后,将小鼠随机分为模型组、加味柴胡疏肝汤组、卡马西平组、加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组、加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组,每组10只,除模型组之外,其余组别分别给予相应药物灌胃进行干预,2次/d,连续14 d。脑电图检测小鼠痫性波,苏木素-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法进行正常组与模型组病理组织学观察,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测小鼠海马组β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3 mRNA表达水平,免疫蛋白印迹法(western blot,WB)检测小鼠海马组织β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3蛋白表达水平,免疫荧光检测小鼠海马组织β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3的表达水平。结果脑电图结果显示,与正常组相比,模型组小鼠脑电图观察到连续性痫性放电,表现为棘波、尖波、棘-慢综合波;与模型组比较,加味柴胡疏肝汤组与卡马西平组均能减少癫痫小鼠脑电图痫性波次数;与加味柴胡疏肝汤组比较,加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组小鼠脑电图中痫性放电次数明显减少,加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组小鼠脑电图中痫性放电次数明显增加。RT-PCR结果显示,与正常组相比,模型组β-catenin、cyclin D1、c-myc和wnt3基因表达显著升高;与模型组相比,加味柴胡疏肝汤组和加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组小鼠海马组织中β-catenin、cyclin D1、c-myc和wnt3基因表达均明显减低,且较单纯使用加味柴胡疏肝汤组明显减低;加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组cyclin D1较模型组明显降低;卡马西平组β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3基因表达水平均明显降低。WB结果显示,与正常组相比,模型组β-catenin、cyclin D1、c-myc和wnt3蛋白表达显著升高;与模型组相比,加味柴胡疏肝汤组和卡马西平组小鼠海马组织中β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3蛋白表达量均减低;加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3蛋白表达量较模型组和加味柴胡疏肝汤组均明显减低;加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组c-myc、wnt3蛋白表达量较模型组比均明显降低;免疫荧光结果基本同WB。结论加味柴胡疏肝汤上调miR-187的表达,抑制β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3的表达,抑制癫痫的发生和发展。 展开更多
关键词 加味柴胡疏肝汤 癫痫 海马 miR-187 WNT/Β-CATENIN信号通路
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