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加味宫外孕Ⅱ号方对人绒毛膜滋养层细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 郑文兰 范敏 文晓敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期573-577,共5页
目的探讨加味宫外孕Ⅱ号方含药血清诱导人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo)凋亡的机制。方法36只大鼠随机分为阴性对照组,中药低、中、高剂量组,西药(甲氨蝶呤)组,中西药结合组,每组6只,各组给予相应的药物处理,于第8天给药1 h后心脏采血... 目的探讨加味宫外孕Ⅱ号方含药血清诱导人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo)凋亡的机制。方法36只大鼠随机分为阴性对照组,中药低、中、高剂量组,西药(甲氨蝶呤)组,中西药结合组,每组6只,各组给予相应的药物处理,于第8天给药1 h后心脏采血,制备空白血清及含药血清。各组血清与HTR-8/SVneo细胞共培养24 h,同时设置仅添加培养基处理的HTR-8/SVneo细胞作为空白对照组,流式细胞术检测细胞早、晚期凋亡率及胞浆内游离Ca^(2+)水平,Western blot和RT-qPCR法检测细胞钙蛋白酶1(calpain-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)蛋白及mRNA相对表达量。结果与阴性对照组比较,各给药组细胞凋亡率、胞浆内Ca^(2+)水平、calpain-1、caspase-12蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05),且中药各剂量组作用呈剂量依赖性(P<0.05),其中中药高剂量组作用优于西药组和中西药结合组(P<0.05)。结论加味宫外孕Ⅱ号方能够诱导人绒毛膜滋养层细胞凋亡,并呈剂量依赖性,其机制可能与激活内质网应激caspase-12信号通路,增加细胞胞浆内游离Ca^(2+)水平,上调calpain-1和caspase-12表达有关。 展开更多
关键词 加味宫外孕ⅱ号方 HTR-8/SVneo细胞 内质网应激 细胞凋亡 calpain-1 CASPASE-12 CA^(2+)
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加味宫外孕Ⅱ号方对人滋养叶细胞Caspase-12通路影响的研究 被引量:3
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作者 范敏 郑文兰 文晓敏 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期29-34,共6页
目的观察加味宫外孕Ⅱ号方对人滋养叶细胞内质网应激Caspase-12信号通路凋亡相关蛋白Caspase-7、Caspase-9、Caspase-3水平的影响及细胞超微结构变化,探讨其治疗异位妊娠的作用机制。方法将SD大鼠分为阴性对照组(B组)、低、中、高剂量... 目的观察加味宫外孕Ⅱ号方对人滋养叶细胞内质网应激Caspase-12信号通路凋亡相关蛋白Caspase-7、Caspase-9、Caspase-3水平的影响及细胞超微结构变化,探讨其治疗异位妊娠的作用机制。方法将SD大鼠分为阴性对照组(B组)、低、中、高剂量中药组(C组、D组、E组)、甲氨蝶呤组(F组)、中西药结合组(G组),予相应药物处理后取血制备含药血清,将各组含药血清分别作用于HTR-8/SVneo细胞24 h,并设置未用含药血清处理的细胞作为空白对照组(A组)。采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)与实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测HTR-8/SVneo细胞中凋亡基因Caspase-7、Caspase-9、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平;采用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果(1)Caspase-7、Caspase-9、Caspase-3蛋白水平及mRNA相对表达量:A组与B组比较无差异(P>0.05);与B组比较,C组Caspase-7 mRNA、Caspase-9蛋白及Caspase-3蛋白与mRNA表达均上调明显(P<0.05),而Caspase-7蛋白、Caspase-9 mRNA表达无差异(P>0.05);D、E、F、G组Caspase-7、Caspase-9、Caspase-3蛋白及mRNA表达量均较B组明显上调(P<0.05);E组较D组上调明显(P<0.05);E组与F组比较,Caspase-7、Caspase-9蛋白与mRNA及Caspase-3蛋白表达上调明显(P<0.05);E组与G组比较,Caspase-9蛋白与mRNA及Caspase-3蛋白表达上调明显(P<0.05);F组与G组比较无差异(P>0.05)。(2)透射电镜结果显示:A组与B组细胞染色质均匀散布于核膜内,细胞内质网、线粒体、高尔基体清晰可见;与B组比较,C、D、E、F、G组细胞微绒毛减少,染色质固缩,异染色质边缘化,部分线粒体肿胀、脊紊乱或断裂、甚至消失,线粒体空泡化等典型的凋亡特征改变。结论加味宫外孕Ⅱ号方可能通过激活内质网应激Caspase-12信号通路,破坏滋养叶细胞的形态学结构,上调Caspase-7、Caspase-9、Caspase-3凋亡相关基因的表达,促进滋养叶细胞凋亡。 展开更多
关键词 加味宫外孕ⅱ号方 内质网应激 HTR-8/SVneo细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-7 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
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