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大豆GmARA6a的克隆及响应盐胁迫的功能分析
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作者 张晴 杨昱 +6 位作者 郭茜 岳霈尧 殷丛丛 牛景萍 赵晋忠 杜维俊 岳爱琴 《作物学报》 北大核心 2026年第2期480-493,共14页
囊泡运输在植物响应盐胁迫过程中起关键作用,ARA6(RabF1)通过促进内体与质膜间囊泡介导的物质转运,在调节植物的耐盐能力上发挥积极影响。本研究对大豆GmARA6a基因进行克隆及生物信息学分析;通过BFA、WM处理以及与AtARA6共定位探究GmAR... 囊泡运输在植物响应盐胁迫过程中起关键作用,ARA6(RabF1)通过促进内体与质膜间囊泡介导的物质转运,在调节植物的耐盐能力上发挥积极影响。本研究对大豆GmARA6a基因进行克隆及生物信息学分析;通过BFA、WM处理以及与AtARA6共定位探究GmARA6a的亚细胞定位;探究该基因在不同组织及盐胁迫下的表达模式;利用拟南芥ara6突变株、GmARA6a回补株系和过表达株系研究GmARA6a基因在调控植株耐盐性方面的作用。结果表明,大豆中克隆的GmARA6a基因长603 bp,编码200个氨基酸,具有ARA6家族的4段共有序列、1段效应结合区以及N端独特的“MGCXSS”结构域。GmARA6a定位于细胞膜以及多囊泡体(MVB)上。在大豆根中GmARA6a被盐胁迫诱导上调表达。盐胁迫下,拟南芥ara6突变株出现盐敏感表型;而GmARA6a过表达株系生长良好,抗氧化能力增强,膜损伤、脂质过氧化程度降低,H_(2)O_(2)、O_(2)^(-)积累量下降;通过分析相关基因表达水平,表明GmARA6a可能通过SOS信号通路、囊泡运输途径调控植株耐盐性。本研究结果为进一步探究GmARA6a的功能提供参考。 展开更多
关键词 大豆 GmARA6a 亚细胞定位 盐胁迫 功能分析
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越南参PAL基因家族鉴定及PvPAL 2和PvPAL4功能分析
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作者 侯家娥 李健斌 +5 位作者 李雷林 艾明涛 唐最奕 崔秀明 刘源 杨千 《植物资源与环境学报》 北大核心 2026年第1期36-47,共12页
为探究PAL基因家族在越南参(Panax vietnamensis Ha et Grushv.)中的功能,通过同源比对和隐马尔可夫模型检索对PAL基因家族成员进行鉴定,对其相关的理化性质、系统发育关系、基因结构、启动子顺式作用元件、共线性特征、组织特异性表达... 为探究PAL基因家族在越南参(Panax vietnamensis Ha et Grushv.)中的功能,通过同源比对和隐马尔可夫模型检索对PAL基因家族成员进行鉴定,对其相关的理化性质、系统发育关系、基因结构、启动子顺式作用元件、共线性特征、组织特异性表达及其在水杨酸处理下的表达模式进行了系统解析,并在越南参愈伤组织中对PvPAL 2和PvPAL4进行了功能验证。结果显示:在越南参中共鉴定出4个PAL基因,依据其染色体位置分别将命名为PvPAL1、PvPAL2、PvPAL3、PvPAL4。4个PvPAL蛋白的氨基酸数为712~719,相对分子质量为77732.84~78236.50,理论等电点为pI 6.00至pI 6.24。越南参PvPAL2与PvPAL4聚在同一个分支,亲缘关系较近,且PvPAL2与PvPAL4具有相似的外显子和内含子结构。PvPAL启动子区含有大量顺式作用元件,其中,非生物和生物胁迫响应元件数量最多。总体上看,PvPAL在大多数组织间的表达水平差异显著(P<0.05)。水杨酸处理6 h后,PvPAL1、PvPAL2和PvPAL4表达受到显著诱导。此外,愈伤组织瞬时过表达显示PvPAL2与PvPAL4可促进木质素和类黄酮积累。综上所述,4个PvPAL基因整体保守性较高,且基因表达水平显著受水杨酸诱导,PvPAL2和PvPAL4显著促进了木质素和类黄酮的积累,在越南参生长发育中发挥重要作用。 展开更多
关键词 越南参 PAL基因家族 木质素 类黄酮 功能分析
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金银花MYB蛋白质家族成员鉴定与功能分析
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作者 张净洁 潘兵兵 +3 位作者 朱攀攀 潘琪 张冕 肖巧巧 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2026年第1期97-113,共17页
MYB蛋白质家族是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与生长发育、逆境应答及次生代谢过程,但金银花MYB蛋白质家族成员尚未被鉴定。本研究采用生物信息学方法对其进行全基因组鉴定与分析,涵盖基本理化性质、系统进化树、基因结构、保... MYB蛋白质家族是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与生长发育、逆境应答及次生代谢过程,但金银花MYB蛋白质家族成员尚未被鉴定。本研究采用生物信息学方法对其进行全基因组鉴定与分析,涵盖基本理化性质、系统进化树、基因结构、保守基序、顺式作用元件等,并通过构建pCAMBIA1300-GFP融合载体、烟草叶片瞬时转染检测MYB6、MYB106d、MYB114蛋白质的亚细胞定位。结果显示,共鉴定到147个LjMYB基因,分属17个亚家族(S1~S17);其编码氨基酸长度52~1060 AA,等电点4.42~11.52 pI,外显子1~13个,分子量6086.3~119075.08 kD。MEME分析发现,不同MYB的基序数量及分布存在差异,同一亚家族结构特征相似;顺式作用元件分析表明,其启动子区域含光响应、激素应答及生物与非生物胁迫相关元件和结合位点。染色体分布显示,MYB基因存在显著基因组加倍(可能与染色体进化加倍相关);金银花与拟南芥MYB基因的共线性分析显示,121对同源基因分布于拟南芥所有染色体,体现进化保守性。表达谱分析表明,金银花MYB基因在生长发育中作用不同,且对不同光照强度敏感程度有差异;亚细胞定位显示,LjMYB6、LjMYB106d以及LjMYB114均定位于细胞核。综上,金银花MYB蛋白质家族具有多样生物学特性,可能参与生长发育、激素调控及生物/非生物胁迫响应过程。 展开更多
关键词 金银花 MYB蛋白质家族 鉴定 理化性质 功能分析
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澳洲坚果锌指蛋白基因MiZFP11响应干旱和高温胁迫的功能分析 被引量:2
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作者 杨祥燕 蔡元保 +5 位作者 曾黎明 杨为海 林玉虹 巫辅民 赵渊 胡玲 《热带作物学报》 北大核心 2025年第3期524-533,共10页
CCCH型锌指蛋白在植物生长发育及响应逆境胁迫中发挥重要的调控作用。本研究以澳洲坚果JW和桂热1号品种为试验材料,采用RT-PCR技术获得澳洲坚果锌指蛋白基因MiZFP11,分析其编码蛋白的结构特征和亚细胞定位,并利用实时荧光定量PCR技术分... CCCH型锌指蛋白在植物生长发育及响应逆境胁迫中发挥重要的调控作用。本研究以澳洲坚果JW和桂热1号品种为试验材料,采用RT-PCR技术获得澳洲坚果锌指蛋白基因MiZFP11,分析其编码蛋白的结构特征和亚细胞定位,并利用实时荧光定量PCR技术分析其在不同组织中以及干旱、高温胁迫下的表达水平。RT-PCR克隆结果表明,克隆获得的澳洲坚果锌指蛋白基因MiZFP11(GenBank注册号为MT332641),与CCCH型锌指蛋白基因较高同源。生物信息学分析表明,澳洲坚果MiZFP11蛋白相对保守的C端含有LCCL结构域,属于C3H13亚类锌指蛋白。蛋白基本性质分析表明,MiZFP11蛋白是不稳定的亲水蛋白和非分泌非跨膜蛋白,且以丝氨酸磷酸化修饰为主。蛋白高级结构分析表明,MiZFP11蛋白的二级和三级结构主要由无规则卷曲、α-螺旋和延伸链交错组成。烟草叶片的瞬时表达和共聚焦显微分析显示,MiZFP11蛋白定位于细胞核,与亚细胞定位预测结果一致。实时荧光定量PCR分析表明,澳洲坚果JW和桂热1号品种的MiZFP11基因在叶片中的表达量最高,在根、小花和小果中也有较高的表达量,在茎中的表达量则最低。干旱胁迫1~36h,叶片中的MiZFP11基因在JW品种中表现出“升-降-升-降”的表达模式,在桂热1号品种中表现出“升-降”的表达模式,2个品种整体上均受诱导上调表达。高温胁迫1~36h,叶片中的MiZFP11基因在JW和桂热1号品种中均表现出“升-降”的上调表达模式,且JW品种的表达量明显高于桂热1号品种。因此,MiZFP11基因在不同组织中均有显著差异表达,且受干旱和高温胁迫诱导后显著上调表达,推测MiZFP11基因在澳洲坚果组织生长发育,尤其在响应干旱和高温胁迫中起重要作用。 展开更多
关键词 澳洲坚果 CCCH型锌指蛋白 干旱胁迫 高温胁迫 功能分析
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抗大豆花叶病毒基因位点qTsmv-3候选基因克隆及功能分析
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作者 林静 史晓蕾 +6 位作者 徐俊杰 于翠红 曹志敏 唐晓东 杨春燕 张孟臣 闫龙 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期57-64,共8页
鉴定抗大豆花叶病毒(SMV)相关基因功能,为培育抗SMV品种提供基因资源。以前期构建抗SMV位点qTsmv-3的近等基因系和转基因拟南芥为材料,对6个MATE候选基因在抗SMV侵染过程中的功能进行分析和鉴定。在大豆基因组中预测到128个MATE家族基因... 鉴定抗大豆花叶病毒(SMV)相关基因功能,为培育抗SMV品种提供基因资源。以前期构建抗SMV位点qTsmv-3的近等基因系和转基因拟南芥为材料,对6个MATE候选基因在抗SMV侵染过程中的功能进行分析和鉴定。在大豆基因组中预测到128个MATE家族基因,可分成5个亚家族。qTsmv-3位点的6个MATE候选基因均位于第Ⅰ亚家族,根据公共数据显示它们的表达量或表达部位存在显著差异,Glyma.03G005600在地上部叶和茎中整体表达量最高,Glyma.03G005800在地下部根和根瘤中整体表达量最高。qTsmv-3近等基因系接种SMV后,与#NIL-SMC家系相比,GmICS1和GmPR1在#NIL-NC中的表达量分别上调2.40,15.16倍,SMV浓度降低70%,表明qTsmv-3位点的抗性与水杨酸(SA)介导的抗病通路相关。此外,6个MATE候选基因仅有Glyma.03G005300和Glyma.03G005600的表达量在近等基因系间出现显著差异,分别下调表达61.0%,82.1%。综合考虑6个MATE基因的表达模式和对SMV侵染后的响应,Glyma.03G005600可能为qTsmv-3位点的关键候选基因。进一步研究发现,携带Glyma.03G005600的转基因拟南芥(OE_MATE)受UV-B胁迫后,AtICS1和AtPR1的表达量比野生型(WT)分别显著上调4.22,9.12倍,说明Glyma.03G005600能够显著促进或影响SA信号通路上基因的表达。研究结果初步证实Glyma.03G005600是抗SMV位点qTsmv-3的关键调控基因,为克隆抗SMV关键调控基因奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆花叶病毒 抗病候选基因 MATE qTsmv-3 功能分析
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复杂机电系统的软件与物理统一的形式化功能分析 被引量:2
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作者 曹悦 刘玉生 +1 位作者 秦绪佳 汤颖 《中国机械工程》 北大核心 2025年第2期245-254,共10页
复杂机电系统的功能分析长期以来主要关注物理子系统实现的连续物理变换,忽略了软件子系统控制的物理过程之间的复杂执行顺序。针对这一挑战,提出了一种软件与物理统一的形式化功能表征与分析方法。对基于流的功能表示方法进行扩展,形... 复杂机电系统的功能分析长期以来主要关注物理子系统实现的连续物理变换,忽略了软件子系统控制的物理过程之间的复杂执行顺序。针对这一挑战,提出了一种软件与物理统一的形式化功能表征与分析方法。对基于流的功能表示方法进行扩展,形成软件与物理统一的形式化功能表征。在此基础上,提出一种基于规则的功能分解方法,支持软件与物理混合功能的自动分解。以移动机器人系统为例,展示了软件与物理统一的功能分析过程。 展开更多
关键词 基于模型的系统工程 概念设计 机电一体化 功能分析
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木薯MeLHY基因克隆和功能分析
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作者 陈甘露 付莉莉 +3 位作者 颜彦 邱先进 丁泽红 胡伟 《福建农业学报》 北大核心 2025年第9期907-916,共10页
【目的】MYB转录因子在植物生长发育、非生物胁迫响应和淀粉代谢等方面起重要调控作用。克隆木薯(Manihot esculenta)MeLHY基因(属于MYB家族成员)并系统开展生物信息学分析、亚细胞定位、基因表达分析及酵母单杂交实验,可为后续深入解... 【目的】MYB转录因子在植物生长发育、非生物胁迫响应和淀粉代谢等方面起重要调控作用。克隆木薯(Manihot esculenta)MeLHY基因(属于MYB家族成员)并系统开展生物信息学分析、亚细胞定位、基因表达分析及酵母单杂交实验,可为后续深入解析该基因的生物学功能奠定基础。【方法】以木薯品种‘SC205’为材料,克隆MeLHY基因编码区序列,并通过生物信息学方法研究该基因的结构特征。分别构建pNC-Green-SubC与pNC-Green-CherryC亚细胞定位重组载体,通过农杆菌瞬时转化法侵染本氏烟草表皮细胞,利用激光共聚焦显微镜捕获荧光信号,明确MeLHY蛋白的亚细胞定位。基于qRT-PCR技术分析MeLHY基因在木薯不同组织及块根发育不同阶段的表达模式。通过酵母单杂交技术研究MeLHY与淀粉代谢基因启动子的结合特性,阐明MeLHY对淀粉代谢的潜在调控机制。【结果】MeLHY基因编码区全长2271 bp,编码756个氨基酸。MeLHY蛋白的分子量为83717.14 Da,理论等电点为5.92,属于不稳定亲水性蛋白。MeLHY蛋白包含MYB家族典型的DNA结合结构域。MeLHY与橡胶树(Hevea brasiliensis)MYB蛋白同源性最高,相似性为83.73%。MeLHY基因的启动子区包含光响应元件、生长素和茉莉酸响应元件以及非生物胁迫响应元件。MeLHY蛋白亚细胞定位于细胞核中。MeLHY基因在块根、叶片和中脉的表达量较高,且在块根发育早期的表达量要显著高于块根发育晚期。MeLHY与淀粉代谢基因MeAPL1和MeDPE1共表达,且MeLHY蛋白可以直接结合到他们的启动子上。【结论】MeLHY基因属于MYB基因家族成员,其表达呈现组织特异性及块根发育阶段性的特征,MeLHY蛋白定位于细胞核,可以与淀粉代谢基因MeAPL1和MeDPE1的启动子互作,可能调控木薯块根发育和淀粉代谢。 展开更多
关键词 木薯 MYB转录因子 MeLHY 基因克隆 功能分析
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花生中镰刀菌抗性相关WRKY转录因子的挖掘及功能分析
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作者 朱立飞 王冕 +5 位作者 唐月异 张初署 陈静 周海翔 曹世宁 张建成 《花生学报》 北大核心 2025年第2期117-124,133,共9页
由镰刀菌感染引起的根腐病、果腐病等花生病害严重制约花生产业的发展,镰刀菌相关抗性基因的挖掘以及抗病新品种的培育成为亟待解决的问题。本研究以接种镰刀菌的花育20幼苗为材料,利用转录组测序挖掘花生中的差异表达基因。通过转录因... 由镰刀菌感染引起的根腐病、果腐病等花生病害严重制约花生产业的发展,镰刀菌相关抗性基因的挖掘以及抗病新品种的培育成为亟待解决的问题。本研究以接种镰刀菌的花育20幼苗为材料,利用转录组测序挖掘花生中的差异表达基因。通过转录因子预测、功能注释等方法筛选获得31个受镰刀菌诱导表达的WRKY转录因子;利用多序列比对、保守基序分析、GO分类和KEGG富集分类分析以及蛋白互作网络分析等方法对31个转录因子进行分类及功能鉴定。结果显示:镰刀菌侵染后,31个WRKY转录因子均为上调表达;31个转录因子根据结构域特点分为3类,Ⅰ类4个,Ⅱ类18个、Ⅲ类9个;在植物-病原体互作通路中有4个WRKY转录因子均与VQ蛋白互作,且共同富集在植物MAPK级联途径中。本研究为镰刀菌抗性相关基因的挖掘及功能分析提供了新方向,也为后续开展花生中抗病调控网络机制的解析工作奠定了基础。 展开更多
关键词 花生 WRKY转录因子 镰刀菌 抗性基因挖掘 功能分析
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多花黄精PcWRKY1基因的克隆及响应高温胁迫功能分析
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作者 贾慧 赵玉龙 +4 位作者 郭晓阳 杨铁钢 郭红霞 苏秀红 腊贵晓 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第4期200-208,共9页
探究WRKY转录因子家族在多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)适应高温胁迫中的作用,基于前期转录组分析鉴定到受高温影响显著下调的基因PcWRKY1,克隆了PcWRKY1基因,并利用生物信息学、RT-qPCR和玉米原生质体瞬时转化体系等技术对其编... 探究WRKY转录因子家族在多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)适应高温胁迫中的作用,基于前期转录组分析鉴定到受高温影响显著下调的基因PcWRKY1,克隆了PcWRKY1基因,并利用生物信息学、RT-qPCR和玉米原生质体瞬时转化体系等技术对其编码蛋白的基本特性、组织表达特异性、高温胁迫下表达模式及功能进行了分析。结果显示:PcWRKY1基因CDS序列全长共1560 bp,编码519个氨基酸;PcWRKY1蛋白没有跨膜结构,分子量为56.93 ku,等电点为7.2,具有2个WRKY保守结构域,属于GroupⅠa类群;RT-qPCR分析结果显示,PcWRKY1基因在多花黄精不同组织中均有表达,且在种子中表达量最高,其转录水平受高温胁迫的抑制;玉米原生质体中PcWRKY1定位于细胞核中,且高温处理不影响其位点;在玉米原生质体中瞬时过表达PcWRKY1,与无高温胁迫相比,抑制了过氧化氢酶(CAT)活性的增加,提高了高温胁迫诱导的丙二醛(MDA)含量的增加,说明过表达PcWRKY1降低了原生质体在高温胁迫下的耐性。综上所述,PcWRKY1可能在多花黄精响应高温胁迫中起负调控作用。 展开更多
关键词 多花黄精 WRKY转录因子 高温胁迫 生物信息学分析 功能分析
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油莎豆MYB转录因子基因CeMYB154克隆及耐盐功能分析
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作者 程珊 王会伟 +6 位作者 陈晨 朱雅婧 李春鑫 别海 王树峰 陈献功 张向歌 《生物技术通报》 北大核心 2025年第6期218-228,共11页
【目的】油莎豆MYB转录因子基因CeMYB154参与盐胁迫响应过程,克隆及表征油莎豆CeMYB154并分析其耐盐功能,为油莎豆耐盐育种提供分子基础和基因资源。【方法】基于油莎豆参考基因组信息,克隆CeMYB154的全长CDS序列,利用生物信息学软件对... 【目的】油莎豆MYB转录因子基因CeMYB154参与盐胁迫响应过程,克隆及表征油莎豆CeMYB154并分析其耐盐功能,为油莎豆耐盐育种提供分子基础和基因资源。【方法】基于油莎豆参考基因组信息,克隆CeMYB154的全长CDS序列,利用生物信息学软件对其氨基酸序列特征及其启动子上顺式作用元件进行分析,利用分子生物学技术对其进行亚细胞定位和转录激活验证。构建CeMYB154过表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥,并对过表达株系的耐盐表型和生理指标进行分析。【结果】成功克隆了长度为780 bp的CeMYB154 CDS序列,其编码蛋白序列中2个典型的MYB结构域,属于R2R3型MYB转录因子。蛋白序列比对分析显示,CeMYB154蛋白在多个物种间序列高度保守。启动子区域含有多种激素(如ABA)响应以及MYB响应相关顺式作用元件。此外,亚细胞定位和转录激活分析显示,CeMYB154是一个具有转录激活活性的核转录因子。成功创制了过表达CeMYB154转基因拟南芥,获得了纯合T3转基因阳性株系。在盐胁迫下,与野生型拟南芥相比,转基因植株幼苗生长状态(叶片大小、颜色以及根长)较好;并且,转基因植株中MDA和H2O2含量均显著降低,而CAT、POD和SOD抗氧化酶活性则显著增强,表明过表达CeMYB154基因提高了拟南芥的耐盐性。【结论】油莎豆CeMYB154具有正向调控盐胁迫响应的功能,过表达CeMYB154基因可以增强抗氧化酶活性而提高转基因植株的耐盐性。 展开更多
关键词 油莎豆 盐胁迫 MYB转录因子 转录激活 功能分析 过表达 亚细胞定位 抗氧化酶
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中华拟同形溞卵黄蛋白原基因的表达和功能分析
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作者 李国庆 赵雅洁 +3 位作者 朱豪 尹熠辉 张坤 邓道贵 《水生生物学报》 北大核心 2025年第4期80-87,共8页
为了阐明卵黄蛋白原基因对溞属枝角类生殖和胚胎发育的影响机制,研究了RNA干扰下中华拟同形溞(Daphnia sinensis)的卵黄蛋白原基因表达及产幼溞数变化。结果表明,RNA干扰后,与EGFP(Enhanced green fluorescent protein)组相比,2%大肠杆... 为了阐明卵黄蛋白原基因对溞属枝角类生殖和胚胎发育的影响机制,研究了RNA干扰下中华拟同形溞(Daphnia sinensis)的卵黄蛋白原基因表达及产幼溞数变化。结果表明,RNA干扰后,与EGFP(Enhanced green fluorescent protein)组相比,2%大肠杆菌浓度下中华拟同形溞在Vtg组的首次产幼溞数和Vtg基因相对表达量没有显著差异;5%大肠杆菌浓度下中华拟同形溞前四个成龄在Vtg组的产幼溞数均显著小于EGFP组,且中华拟同形溞的第一成龄、第四成龄时在Vtg组的Vtg基因相对表达量均显著小于EGFP组,分别下降了5.25%和78.03%。此外,RNA干扰后Vtg组的中华拟同形溞还出现了胚胎消解和后代发育不全的现象。结果表明,高强度、长时间的RNA干扰能够显著降低中华拟同形溞Vtg基因的相对表达水平,也能够显著抑制其生殖量和胚胎发育。因此,Vtg基因对中华拟同形溞的生殖和胚胎发育起重要作用。 展开更多
关键词 Vtg基因 生殖 功能分析 中华拟同形溞
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烟草NtSPS5基因的克隆、表达及功能分析
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作者 李冰雨 刘俊宏 +2 位作者 王中 杨军 徐馨 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第19期45-52,共8页
基于烟草基因组与转录组数据,利用PCR克隆烟草NtSPS5基因,运用生物信息学方法分析基因结构、启动子顺式作用元件以及蛋白结构,同时利用qRT-PCR分析在不同糖源和激素处理条件下NtSPS5的表达模式,进行遗传转化研究NtSPS5调控烟草糖含量的... 基于烟草基因组与转录组数据,利用PCR克隆烟草NtSPS5基因,运用生物信息学方法分析基因结构、启动子顺式作用元件以及蛋白结构,同时利用qRT-PCR分析在不同糖源和激素处理条件下NtSPS5的表达模式,进行遗传转化研究NtSPS5调控烟草糖含量的功能。结果表明,NtSPS5基因编码区全长3 141 bp,其编码的蛋白有1 046个氨基酸,NtSPS5是亲水蛋白,无信号肽。NtSPS5基因的启动子区域包含多个参与激素响应的顺式作用元件。进一步表达分析结果表明,NtSPS5在脱落酸、茉莉酸甲酯、果糖和海藻糖处理下表达量显著上调,而生长素和麦芽糖会抑制NtSPS5基因的表达。此外,过表达NtSPS5基因显著提高了烟草叶片中的蔗糖、果糖、葡萄糖和可溶性糖含量。研究结果表明NtSPS5调控烟草蔗糖合成,并且受到糖和激素信号诱导,可为进一步探索植物蔗糖合成与代谢提供一定基础。 展开更多
关键词 蔗糖磷酸合成酶 烟草 NtSPS5基因表达分析 激素 功能分析
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澳洲坚果锌指蛋白基因MiZFP9的克隆与功能分析 被引量:3
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作者 杨祥燕 蔡元保 +3 位作者 黄思婕 李季东 潘如军 黄运鹏 《南方农业学报》 北大核心 2025年第2期544-552,共9页
【目的】克隆澳洲坚果CCCH型锌指蛋白基因MiZFP9,并分析其在不同组织及低温、干旱胁迫下的表达情况,为深入探究澳洲坚果锌指蛋白基因的抗寒和耐旱分子机理提供理论依据。【方法】从澳洲坚果叶片克隆MiZFP9基因,并对其进行生物信息学分... 【目的】克隆澳洲坚果CCCH型锌指蛋白基因MiZFP9,并分析其在不同组织及低温、干旱胁迫下的表达情况,为深入探究澳洲坚果锌指蛋白基因的抗寒和耐旱分子机理提供理论依据。【方法】从澳洲坚果叶片克隆MiZFP9基因,并对其进行生物信息学分析。通过实时荧光定量PCR检测MiZFP9基因在不同组织中的表达特性及低温和干旱胁迫下的表达模式。【结果】从澳洲坚果叶片中克隆获得MiZFP9基因,属于CCCH型锌指蛋白基因C3H64亚类,其编码蛋白含有活性位点、Zn2+结合位点及CCCH型锌指蛋白的典型结构域ZF_C3H,为稳定的亲水性蛋白,以丝氨酸磷酸化为主,可能定位于细胞质,属于非分泌型蛋白。MiZFP9蛋白的高级结构主要由无规则卷曲、α-螺旋和延伸链交错组成。MiZFP9基因在Own Choice品种的不同组织中均显著差异表达(P<0.05,下同),其中在刚开放和未开放小花中的相对表达量最高,其次是根和叶,而在茎的相对表达量则最低。在低温胁迫和干旱胁迫下,MiZFP9基因在Own Choice和HAES695品种的相对表达量较对照(处理0 h)均显著上调,其中MiZFP9基因在Own Choice品种中呈先升高后降低的表达模式,在HAES695品种的相对表达量呈波动式变化模式,出现2个峰值,说明其在不同品种中的响应模式存在差异。【结论】MiZFP9基因具有组织表达特异性,并在低温和干旱处理后表达水平明显升高,推测MiZFP9在澳洲坚果组织生长发育及响应低温和干旱胁迫中发挥重要的正向调控作用。 展开更多
关键词 澳洲坚果 CCCH型锌指蛋白 基因克隆 功能分析
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核桃开花基因JrAP1、JrFT的克隆与功能分析
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作者 杨莉荟 王旭红 +2 位作者 张馨然 王潇 彭少兵 《西北林学院学报》 北大核心 2025年第3期55-64,共10页
开花过程是核桃生长发育的重要阶段,探究开花关键基因FLOWERING LOCUS T(FT)、APETALA 1(AP1)在成花转变中的表达模式与调控网络,为缩短核桃童期,加快核桃分子育种提供理论依据。本试验以早实核桃‘香玲’为材料,克隆JrAP1、JrFT基因,... 开花过程是核桃生长发育的重要阶段,探究开花关键基因FLOWERING LOCUS T(FT)、APETALA 1(AP1)在成花转变中的表达模式与调控网络,为缩短核桃童期,加快核桃分子育种提供理论依据。本试验以早实核桃‘香玲’为材料,克隆JrAP1、JrFT基因,并通过生物信息学分析与拟南芥遗传转化对JrAP1和JrFT基因进行功能分析。JrAP1的CDS长为740 bp,编码125个氨基酸,含有保守的MADS结构域和K结构域,与山核桃和白桦的亲缘关系最近;qRT-PCR显示,转基因拟南芥中JrAP1的表达量比野生型高约40倍;JrAP1基因的过表达使拟南芥花期提前10 d,莲座叶和分支数目均有显著差异。JrFT的CDS长为524 bp,编码174个氨基酸,具有高度保守的PEBP蛋白结构域,与山核桃和八仙花的亲缘关系最近;qRT-PCR显示,转基因拟南芥中JrFT的表达量比野生型高约30倍;JrFT基因的过表达使拟南芥花期提前12 d,分支和莲座叶数目、叶片长度以及果荚长度均有显著差异。由此推测,JrAP1和JrFT基因在植物开花过程中发挥着重要的调控作用。 展开更多
关键词 核桃 开花 JrAP1基因 JrFT基因 功能分析
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紫花苜蓿MsWRKY47基因的克隆及耐盐功能分析
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作者 严帅凤 赵梦冉 +2 位作者 徐倩 卢蕊 胡龙兴 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期38-47,共10页
为明确紫花苜蓿(Medicago sativa)MsWRKY47基因在调节植物耐盐性中的作用,本研究以紫花苜蓿‘WL363 HQ’的cDNA为模板,克隆了MsWRKY47基因,并对其蛋白序列特征以及MsWRKY47转基因拟南芥的耐盐性进行了分析。结果表明:MsWRKY47编码区全长... 为明确紫花苜蓿(Medicago sativa)MsWRKY47基因在调节植物耐盐性中的作用,本研究以紫花苜蓿‘WL363 HQ’的cDNA为模板,克隆了MsWRKY47基因,并对其蛋白序列特征以及MsWRKY47转基因拟南芥的耐盐性进行了分析。结果表明:MsWRKY47编码区全长1287 bp,编码428个氨基酸,含有一个WRKYGQK结构域,属于WRKY家族,与蒺藜苜蓿中同源蛋白MtWRKY47的亲缘关系最近;该基因在紫花苜蓿根中的表达量最高,且盐胁迫可诱导其表达;MsWRKY47蛋白定位于细胞核,不具备转录激活活性。盐胁迫后MsWRKY47转基因植株黄叶率高于野生型的黄叶率,氧化损伤程度更严重,表明MsWRKY47基因过表达降低了拟南芥的耐盐性,MsWRKY蛋白可能在植物对盐胁迫的响应过程中发挥负调控作用。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 WRKY转录因子 盐胁迫 功能分析
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白背飞虱刺猬基因(SfHh)的功能分析
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作者 陈柠楠 雷庆 +3 位作者 王召 龙贵云 金道超 杨洪 《山地农业生物学报》 2025年第2期11-18,共8页
白背飞虱是水稻上重要的迁飞性害虫,翅是其能够迁飞、扩大危害的重要器官。因此,解析昆虫翅发育基因可为害虫综合治理提供新的靶标。刺猬基因(Hedgehog,Hh)是能够参与调控昆虫翅发育的重要基因,但其在白背飞虱体内的转录特征和生物学功... 白背飞虱是水稻上重要的迁飞性害虫,翅是其能够迁飞、扩大危害的重要器官。因此,解析昆虫翅发育基因可为害虫综合治理提供新的靶标。刺猬基因(Hedgehog,Hh)是能够参与调控昆虫翅发育的重要基因,但其在白背飞虱体内的转录特征和生物学功能尚不清楚。本研究通过克隆获得白背飞虱刺猬基因SfHh,解析其时空表达模式,并借助RNA干扰技术验证其生物学功能。结果表明:(1)白背飞虱SfHh基因在5龄若虫表达量最高,在不同组织中表达量差异较大,其中在肠道与翅中表达量最高;(2)RNA干扰沉默SfHh基因24 h后,SfHh的mRNA相对转录水平降低了62%,且羽化成虫大多数个体的翅褶皱、末端卷曲或弯折等不能正常展开,而对照组成虫的翅均无任何畸形。表明SfHh基因是白背飞虱翅发育不可或缺的基因,其表达缺失可导致白背飞虱的翅不能正常伸展。本研究结果不仅能够为白背飞虱及其他迁飞性害虫的防治研究提供新的作用靶标,还可丰富半翅目昆虫翅发育的分子知识。 展开更多
关键词 白背飞虱 翅发育 刺猬基因 RNA干扰 功能分析
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胶孢炭疽菌Pth11-like型CFEM蛋白CgCFEM17的功能分析
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作者 何二秀 罗红丽 《热带生物学报(中英文)》 2025年第5期682-691,共10页
胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)是引起橡胶树炭疽病的主要病原。CFEM(common in fungal extracellular membrane)结构域是真菌特有的基序,含有CFEM和跨膜结构域的蛋白属于Pth11-like型CFEM蛋白,在调控病原真菌生长发育和... 胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)是引起橡胶树炭疽病的主要病原。CFEM(common in fungal extracellular membrane)结构域是真菌特有的基序,含有CFEM和跨膜结构域的蛋白属于Pth11-like型CFEM蛋白,在调控病原真菌生长发育和致病力中发挥重要作用。为了研究橡胶树胶孢炭疽菌的致病机制,从胶孢炭疽菌转录组中筛选出1个编码Pth11-like型CFEM蛋白的基因,将其命名为CgCFEM17。该基因的编码区全长1341 bp,编码446个氨基酸。生物信息学分析显示,CgCFEM17蛋白N端具有长度为26个氨基酸的信号肽和1个保守的CFEM结构域,C端包含6个跨膜结构域。为了分析CgCFEM17基因的功能,构建了该基因的敲除突变体(ΔCgCFEM17)及回补突变体(ΔCgCFEM17-C),并对其生长发育和致病性表型进行了分析。结果表明,与野生型和回补突变体相比,ΔCgCFEM17的分生孢子萌发和入侵结构的形成延迟,致病力减弱,但菌落生长速率、产孢能力及附着胞的形成率与形态发生没有变化。CgCFEM17可能通过调控分生孢子萌发进程,延缓侵染结构形成,影响胶孢炭疽菌对橡胶树的致病力,这为探究胶孢炭疽菌的致病机制及建立新的橡胶树炭疽病防治策略奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌 CgCFEM17 功能分析
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圆齿野鸦椿CLE多肽的系统鉴定及功能分析
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作者 潘钰茹 吴金琳 +2 位作者 高宇欣 唐韦伟 邹小兴 《南方农业》 2025年第1期1-7,F0003,共8页
采用生物信息学的方法,鉴定和分析了圆齿野鸦椿(Euscaphis konishii Hayata)CLE基因家族组成及其表达调控作用机制。结果:从圆齿野鸦椿中共鉴定出15个CLE基因,分布在圆齿野鸦椿的6条染色体上,其编码的前体肽大小介于94~920 aa,蛋白质相... 采用生物信息学的方法,鉴定和分析了圆齿野鸦椿(Euscaphis konishii Hayata)CLE基因家族组成及其表达调控作用机制。结果:从圆齿野鸦椿中共鉴定出15个CLE基因,分布在圆齿野鸦椿的6条染色体上,其编码的前体肽大小介于94~920 aa,蛋白质相对分子质量介于10705.66~101725.48 KD,理论等电点介于5.84~12.01。多序列比对和偏好性分析表明,圆齿野鸦椿CLE与拟南芥[Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.]CLE的同源多肽较为一致,但是部分圆齿野鸦椿CLE在第9位氨基酸上表现出了对丝氨酸的偏好性。系统进化分析表明,圆齿野鸦椿CLE基因成员分为6大亚家族,分别为Group1(0个)、Group2(0个)、Group3(CLE1、CLE2)、Group4(CLE8、CLE9、CLE10、CLE13、CLE14、CLE15)、Group5(CLE11、CLE12)、Group6(CLE3、CLE4、CLE5、CLE6、CLE7)亚组。功能分析发现,CLE3、CLE4在根部维管束组织中表达,影响根的初生木质部发育,CLE9、CLE10、CLE8、CLE13、CLE14、CLE15在根部韧皮部中表达,可以通过间接或直接相互作用,引导根的初生韧皮部细胞从分裂向分化转化。 展开更多
关键词 圆齿野鸦椿(Euscaphis konishii Hayata) CLE多肽 系统进化 功能分析
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尖孢镰刀菌黏团专化型转录因子SNT2基因敲除及其功能分析
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作者 徐新瑞 宋泽龙 李二峰 《华北农学报》 北大核心 2025年第2期173-180,共8页
甘蓝枯萎病是由尖孢镰刀菌黏团专化型(FOC)引起的土传真菌病害,严重影响甘蓝产量和品质。为了明确该病原菌中转录因子SNT2的生物学功能,利用同源重组和原生质体转化技术,成功获得了尖孢镰刀菌中SNT2基因敲除突变体ΔSNT2,并对其表型和... 甘蓝枯萎病是由尖孢镰刀菌黏团专化型(FOC)引起的土传真菌病害,严重影响甘蓝产量和品质。为了明确该病原菌中转录因子SNT2的生物学功能,利用同源重组和原生质体转化技术,成功获得了尖孢镰刀菌中SNT2基因敲除突变体ΔSNT2,并对其表型和致病力进行了分析。结果表明:尖孢镰刀菌中SNT2编码1529个氨基酸,具有与DNA结合的SANT结构域,蛋白归属亲水性蛋白质。与野生型菌株相比,ΔSNT2突变体菌丝生长速率降低且分隔明显增加,分生孢子产孢量显著下降。基于外源胁迫结果显示,ΔSNT2在1 mol/L山梨醇的渗透压胁迫中表现不敏感,但对0.1%H_(2)O_(2)、2 mol/L NaCl和0.05%刚果红(CR)的氧胁迫、盐胁迫和细胞壁胁迫的耐受性降低,同时致病力测定结果表明,接种ΔSNT2突变体的病情指数显著低于接种野生型,SNT2的缺失导致尖孢镰刀菌致病力显著下降。综上,转录因子SNT2在病原菌与寄主互作过程中对于维持细胞壁的完整性具有重要作用,同时参与调控尖孢镰刀菌的生长发育和致病力。 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌 SNT2 表型 致病力 功能分析 基因敲除
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融媒体背景下饲料企业文化的功能分析及传播路径
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作者 杨艾明 《中国饲料》 北大核心 2025年第10期157-160,共4页
在融媒体背景下,信息传播方式呈现多元化、互动化的发展趋势,为企业文化的建设和传播提供了新的途径。对饲料企业而言,企业文化是长期发展过程中形成的价值体系,并且能对企业凝聚力、品牌形象、科技创新等产生深远影响。本文结合融媒体... 在融媒体背景下,信息传播方式呈现多元化、互动化的发展趋势,为企业文化的建设和传播提供了新的途径。对饲料企业而言,企业文化是长期发展过程中形成的价值体系,并且能对企业凝聚力、品牌形象、科技创新等产生深远影响。本文结合融媒体背景,详细分析了企业文化的功能,提出了企业文化的传播路径,旨在提高文化传播的精准度和影响力,以优秀企业文化增强饲料企业的“软实力”。 展开更多
关键词 融媒体 饲料企业 企业文化 功能分析 传播路径
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