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副猪嗜血杆菌血清7型菌株的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:3
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作者 王治方 朱文豪 +4 位作者 徐引弟 张青娴 焦文强 李海利 王克领 《养猪》 2022年第4期89-93,共5页
为了掌握河南某规模化猪场保育猪发病猪群的感染病原,研究从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得一株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列研究工作。结果表明,该株细菌为副猪嗜血杆... 为了掌握河南某规模化猪场保育猪发病猪群的感染病原,研究从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得一株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列研究工作。结果表明,该株细菌为副猪嗜血杆菌,血清型为7型,与副猪嗜血杆菌vHPS7株(GenBank登录号:CP049089)同源性为100%。该菌株同时携带有vta1、vta2、vta3、wza、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、dtC、espP等毒力基因,结合豚鼠致病性试验结果和临床发病情况,该菌株具有较强的致病性;对头孢噻呋、头孢他啶、强力霉素、土霉素、四环素、阿奇霉素6种药物敏感;对青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明、左氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、壮观霉素、卡那霉素、阿米卡星11种药物耐药。该研究为今后副猪嗜血杆菌血清7型致病机制研究奠定了基础,为副猪嗜血杆菌血清7型的临床防控提供了理论基础。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌血清7型 鉴定 毒力基因 药敏试验
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副猪嗜血杆菌血清7型菌株毒力及耐药性分析 被引量:6
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作者 王治方 徐引弟 +4 位作者 朱文豪 张青娴 焦文强 李海利 王克领 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期3245-3255,共11页
【目的】了解河南地区副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)血清7型流行菌株的毒力及耐药情况。【方法】以Hps血清7型参考菌株为对照,对6株Hps血清7型临床分离菌株进行16S rRNA基因扩增、序列分析、毒力基因检测、致病性试验和药敏... 【目的】了解河南地区副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)血清7型流行菌株的毒力及耐药情况。【方法】以Hps血清7型参考菌株为对照,对6株Hps血清7型临床分离菌株进行16S rRNA基因扩增、序列分析、毒力基因检测、致病性试验和药敏试验研究。【结果】16S rRNA基因测序及相似性比对结果显示,菌株1436与参考菌株0007相似性为100%,菌株1565、1624与参考菌株0007相似性均为98.6%。系统发育树分析表明,菌株1436与参考菌株0007亲缘关系最近;菌株1624与参考菌株0007亲缘关系最远。6株临床菌株与参考菌株表现为2种毒力基因型,菌株均携带有vta1、vta2、vta3、wza、nanH、cdtA、cdtB、cdtC和espP2毒力基因,其中5株临床菌株还携带ompP2毒力基因。豚鼠致病性试验结果显示,临床菌株毒力较参考菌株表现出不同程度的增强,参考菌株不能感染豚鼠发病,未表现任何临床症状;临床菌株可感染豚鼠发病,表现出一定的临床症状,发病率为20%~40%,死亡率为0。参考菌株和临床菌株均对头孢他啶和头孢噻呋敏感,对强力霉素、氟苯尼考中介,对新霉素、卡那霉素、阿米卡星、红霉素、替米考星等耐药,且均表现出多重耐药现象。【结论】Hps血清7型临床菌株有一定的致病性,但毒力较弱,对头孢类药物敏感,有明显的多重耐药现象,临床上应注意对该血清型的防控。本研究为Hps血清7型流行病学、致病机制研究奠定了基础,为Hps血清7型的临床防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 杆菌(Hps) 血清7 鉴定 毒力基因 致病性试验 药敏试验
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1株血清2型副猪嗜血杆菌的分离鉴定及致病性研究
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作者 李倩文 华涛 +3 位作者 常晨 颜星宇 李军星 唐波 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期901-911,共11页
[目的]明确浙江地区某猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染情况,明确分离株的血清型、生物学特性及致病性,为临床控制副猪嗜血杆菌提供理论参考。[方法]从发病猪的肺脏、心脏血液、关节液等病料中分离、纯化菌株,并对其进... [目的]明确浙江地区某猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染情况,明确分离株的血清型、生物学特性及致病性,为临床控制副猪嗜血杆菌提供理论参考。[方法]从发病猪的肺脏、心脏血液、关节液等病料中分离、纯化菌株,并对其进行革兰染色镜检、16S rRNA基因PCR扩增及测序,明确分离株的血清型,检测分离株携带毒力基因情况、对常见抗菌药物的敏感性及对小鼠的致病性,使用饱和硫酸铵法提取菌株分泌蛋白,并通过电泳分析蛋白主要富集区域。[结果]分离株在TSA培养基上生长出圆形、光滑湿润、颜色灰白、边缘整齐的针尖大小的菌落;接种至TSB培养基后,1~3 h生长缓慢,3~4 h进入对数生长期,4~12 h进入生长稳定期;革兰染色镜检呈红色短杆状、长杆状,长度不等,疑似副猪嗜血杆菌。16S rRNA基因PCR扩增结果显示,出现680 bp的特异性条带,与预期相符。血清型鉴定结果显示,检测到2型血清型副猪嗜血杆菌特异性条带。BLAST比对显示该分离株为血清2型副猪嗜血杆菌。毒力基因检测结果显示,分离株携带cdtA、cdtB、cdtC、vtaA1、rfaD、rfaE、gnd、cpaD、espP2、vacJ、rfaF、vtaA2、htrA和ompP2基因。该菌株以1.0×10^(9) CFU/mL剂量感染BALB/c小鼠,在5~10 h出现死亡,并引起小鼠肝脏细胞核浓缩、坏死,肺泡腔内有大量浆液性渗出物,混有红细胞和菌体,脾脏组织炎性细胞浸润。药敏试验结果显示,分离株对头孢哌酮、头孢呋辛钠、哌拉西林、青霉素等药物耐药,对氯霉素表现中介,对环丙沙星、左氧氟沙星、阿奇霉素等药物敏感。该菌株分泌蛋白大小主要集中在25~180 ku。[结论]本研究分离鉴定获得1株血清2型副猪嗜血杆菌,该分离株编码多种毒力基因,具有致病性,对多种常用抗菌药物有明显的耐药性,并分泌多种蛋白。试验结果提示该猪场可使用喹诺酮类、大环内酯类及氨基糖苷类药物进行防控。 展开更多
关键词 杆菌 血清 分离鉴定 致病性
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1株血清10型副猪嗜血杆菌的分离鉴定与生物学特性分析 被引量:2
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作者 戴璐 张千 +6 位作者 万佳佳 谢婷婷 贾一珍 张锐 张付贤 刘峰 雷连成 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1671-1685,共15页
【目的】阐明引起荆州某猪厂仔猪疑似副猪嗜血杆菌病的病原生理生化特性、毒力与药物敏感性,为今后对该病的防治提供科学依据。【方法】从患病仔猪中分离培养病原菌,通过形态学观察、生理生化鉴定、PCR鉴定、16S rRNA基因测序、血清型... 【目的】阐明引起荆州某猪厂仔猪疑似副猪嗜血杆菌病的病原生理生化特性、毒力与药物敏感性,为今后对该病的防治提供科学依据。【方法】从患病仔猪中分离培养病原菌,通过形态学观察、生理生化鉴定、PCR鉴定、16S rRNA基因测序、血清型鉴定、多序列位点分型(MLST)对分离菌株进行鉴定。通过毒力基因检测、小鼠致病性、药敏试验、中药治疗试验等对分离株进行致病性、耐药性分析。【结果】通过形态学观察、生理生化试验、16S rRNA序列比对、系统进化树分析确定分离菌株为副猪嗜血杆菌。通过血清型与MLST分析确定分离菌株为血清10型、ST型为299。毒力基因检测发现,分离菌株具有CapD、vta 1、vta 2等15种毒力基因。将分离菌株腹腔注射感染小鼠,可导致小鼠多个脏器发生明显病变,具有较强致病性。耐药基因检测试验发现,分离菌株具有β-内酰胺类耐药基因bla OXA和氟喹诺酮类耐药基因gyrA。药敏试验结果显示,分离菌株对头孢他啶、新霉素、米诺环素等10种抗菌药物敏感,同时对明雄黄、款冬花、全蝎3种中药敏感。中药治疗试验结果表明,明雄黄和全蝎对分离菌株感染小鼠有较明显的治疗作用。【结论】试验成功分离1株血清10型副猪嗜血杆菌,侵染小鼠可致多个器官出血坏死,该菌株对10种抗菌药物及3种中药敏感,且明雄黄和全蝎对分离菌株感染小鼠治疗效果明显。研究结果可为今后副猪嗜血杆菌的防治和临床诊疗提供参考依据。 展开更多
关键词 杆菌 血清10 ST-299 毒力基因 药物敏感性
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我国部分地区副猪嗜血杆菌分离株流行特征与耐药性
5
作者 张桂君 陈佳文 +8 位作者 柳妍玲 付来宇 李祥迪 王洁 吕金东 李彦 赵永达 杨胜男 郭莉莉 《中国动物检疫》 2025年第3期7-16,20,共11页
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是当前严重威胁养猪业发展的重要细菌性病原之一。为了解近年来HPS的流行特征及耐药情况,分析了2018—2023年从我国12个省份养殖场病死猪中分离的91株HPS的地域和血清型分布特征及其生物被膜形... 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是当前严重威胁养猪业发展的重要细菌性病原之一。为了解近年来HPS的流行特征及耐药情况,分析了2018—2023年从我国12个省份养殖场病死猪中分离的91株HPS的地域和血清型分布特征及其生物被膜形成能力和耐药性。结果显示:HPS分离株在12个省份均被检出,血清5型(21.98%)和4型(17.58%)为优势流行血清型,不可分型菌株占比较大(19.78%)。所有菌株对磺胺类药物表现出高度耐药,对多黏菌素B和头孢噻肟较敏感;菌株多重耐药率高达94.51%,不同血清型及地区HPS分离株的耐药性具有差异性。HPS分离株携带7种耐药基因tetB、bla_(TEM)、bla_(ROB)-1、sul1、sul2、ermB和mefA,其中tetB检出率最高。此外,80.22%的HPS菌株能够形成生物被膜。结果表明,HPS分离株在我国部分地区具有流行性,血清型丰富多样,耐药种类较广泛,具有较强的生物被膜形成能力。本研究揭示了我国部分地区HPS的流行特征和耐药性,为该病原感染的防控提供了依据和数据支持。 展开更多
关键词 杆菌 血清 生物被膜 药敏试验 耐药基因
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副猪嗜血杆菌4型灭活疫苗攻毒菌株的筛选 被引量:1
6
作者 刘元杰 王秀丽 +5 位作者 李建 辛凌翔 朱良全 张一帜 姚文生 刘燕 《中国兽药杂志》 2024年第1期6-12,共7页
为筛选副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)4型攻毒菌株,对8株HPS进行血清型鉴定,并绘制细菌生长曲线;用豚鼠攻毒实验对其中5个菌株进行毒力测定,同时记录发病豚鼠的临床症状和剖检病变。结果显示8个菌株均为HPS4型,确定了候选菌株... 为筛选副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)4型攻毒菌株,对8株HPS进行血清型鉴定,并绘制细菌生长曲线;用豚鼠攻毒实验对其中5个菌株进行毒力测定,同时记录发病豚鼠的临床症状和剖检病变。结果显示8个菌株均为HPS4型,确定了候选菌株的最佳扩大培养时间为8~10h,筛选出毒力最强的CVCC4355。本研究确定CVCC4355可作为HPS4型疫苗产品效力检验的攻毒菌株。 展开更多
关键词 杆菌4 筛选 毒力测定
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血清7型副猪嗜血杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:8
7
作者 陶伟杰 段笑笑 +4 位作者 赵辉 刘佳卉 赵远 单虎 张传美 《动物医学进展》 北大核心 2021年第12期14-19,共6页
为了对疑似副猪嗜血杆菌感染的仔猪病例进行诊治,对病死仔猪进行了细菌分离,用16S rRNA测序、套式PCR、血清型分型PCR、基因型分型PCR等方法对分离菌株进行鉴定,并对分离菌株进行药敏试验和小鼠致病性试验。结果显示,从发病仔猪的关节... 为了对疑似副猪嗜血杆菌感染的仔猪病例进行诊治,对病死仔猪进行了细菌分离,用16S rRNA测序、套式PCR、血清型分型PCR、基因型分型PCR等方法对分离菌株进行鉴定,并对分离菌株进行药敏试验和小鼠致病性试验。结果显示,从发病仔猪的关节液中分离得到1株革兰氏阴性菌;16S rRNA测序和特异性套式PCR结果表明,该分离菌株为副猪嗜血杆菌;血清型分型PCR结果表明,分离菌株为血清型7型;多点位序列分型ST-400;分离菌株对头孢曲松、阿莫西林/棒酸、庆大霉素、壮观霉素、多西环素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、左氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考、多黏菌素B敏感,对亚胺培南、林可霉素耐药;小鼠致病性试验结果表明,该菌株致病性和毒力较低。结果表明,在饲养条件不良或者有混合感染的条件下,血清7型副猪嗜血杆菌可能感染猪群并表现出相应的临床症状,可以根据药敏试验的结果选择头孢曲松、氟苯尼考等敏感药物对患病仔猪进行用药治疗。试验证实了血清7型副猪嗜血杆菌在临床中的感染情况,并为临床上对该病的治疗用药提供了一定参考依据。 展开更多
关键词 杆菌 分离鉴定 血清7 药敏试验
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2012年我国部分省市规模化猪场副猪嗜血杆菌分离鉴定及菌株血清分型 被引量:22
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作者 王建 邵卫星 +9 位作者 吕占军 王超 董雅琴 刘爽 王博扬 吴发兴 张志 刘自立 王佳 李晓成 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第3期48-52,共5页
为掌握2012年我国猪场副猪嗜血杆菌(Hps)感染的发病状况,在我国部分省市规模化猪场采集疑似副猪嗜血杆菌病猪的心包积液及发生纤维素性浆膜炎的肺脏等病料共168份,通过病原分离培养、形态及培养特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴... 为掌握2012年我国猪场副猪嗜血杆菌(Hps)感染的发病状况,在我国部分省市规模化猪场采集疑似副猪嗜血杆菌病猪的心包积液及发生纤维素性浆膜炎的肺脏等病料共168份,通过病原分离培养、形态及培养特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定,最终分离出51株副猪嗜血杆菌,分离率约为30.4%。对51株副猪嗜血杆菌用琼脂扩散法进行血清分型,得到4型的6株(11.8%),5型的9株(17.6%),13型9株(17.6%),12型、14型各2株,1型、6型、10型、11型各1株,未能确定血清型19株,4型、5型、13型占总比例的47.1%,占有毒力血清型(强毒和中等毒力血清型)比例80.0%,表明副猪嗜血杆菌4型、5型、13型菌株是我国的优势血清型。 展开更多
关键词 杆菌 分离 鉴定 聚合酶链反应 血清
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猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌的鉴别诊断及血清型鉴定 被引量:27
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作者 张培君 孙惠玲 +2 位作者 苗得园 龚玉梅 Pat Blackall 《中国兽药杂志》 2002年第10期18-20,28,共4页
利用PCR技术、琼脂扩散试验、糖发酵试验和间接血凝试验(IHA)对野外分离到的可疑猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌进行了诊断和血清型鉴定。PCR鉴定分离物HS1580为副猪嗜血杆菌,分离物HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌; 生化试验表明分离物H... 利用PCR技术、琼脂扩散试验、糖发酵试验和间接血凝试验(IHA)对野外分离到的可疑猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌进行了诊断和血清型鉴定。PCR鉴定分离物HS1580为副猪嗜血杆菌,分离物HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌; 生化试验表明分离物HS1581和HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌; 血清型鉴定分离物HS1580不属于被检的14个血清型之列,HS1581为App血清15型,HS1582为App血清7型。试验结果表明,综合使用PCR等技术可快速、准确地对这两种传染性细菌进行鉴别诊断和血清型鉴定。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 杆菌 鉴别诊断 血清鉴定
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副猪嗜血杆菌血清型和外膜蛋白P5基因型多样性的研究 被引量:3
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作者 陈小飞 张斌 +2 位作者 郭定乾 汤承 岳华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期143-146,共4页
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)的血清型及基因型具有复杂多样性。本研究用间接血凝试验对某一猪场分离的Hps进行血清分型鉴定,并对部分菌株的外膜蛋白P5基因进行克隆测序和进化发育分析。试验结果显示,在21头病死猪不同部位... 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)的血清型及基因型具有复杂多样性。本研究用间接血凝试验对某一猪场分离的Hps进行血清分型鉴定,并对部分菌株的外膜蛋白P5基因进行克隆测序和进化发育分析。试验结果显示,在21头病死猪不同部位共分离了42株Hps,其中Hps血清5型17株(40.7%)、血清14型12株(28.5%)、血清4型1株(2.3%)和未定型12株(28.5%)。本试验中有5头猪同时感染2种不同血清型的Hps。21株Hps临床分离株分属5个不同基因序列型(STA~STE),其中STA有12株(12/21)为优势基因型;相同血清型的Hps分离株具有不同的STs型,来自同一头猪的Hps血清型和STs型也不相同。以上结果表明,同一猪群感染的Hps血清型和基因型存在明显的多样性,同一头猪感染Hps的血清型和基因型也存在多样性。本研究为进一步揭示猪群感染Hps的复杂性,研究该病的感染与流行机制提供了有价值的参考。 展开更多
关键词 杆菌 血清 外膜蛋白P5 基因 多样性
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副猪嗜血杆菌河南分离株的优势血清型和毒力基因研究 被引量:8
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作者 张青娴 徐引弟 +3 位作者 王治方 朱文豪 焦文强 李海利 《养猪》 2020年第6期89-93,共5页
为了解河南省副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的血清型和毒力基因的流行与分布情况,对2017-2018年河南地区分离到的46株HPS,利用PCR反应鉴定血清型与毒力基因。结果显示,46株HPS共检测出7种血清型(2、4、5/12、6、7、11、13),... 为了解河南省副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的血清型和毒力基因的流行与分布情况,对2017-2018年河南地区分离到的46株HPS,利用PCR反应鉴定血清型与毒力基因。结果显示,46株HPS共检测出7种血清型(2、4、5/12、6、7、11、13),血清型5/12和4为优势血清型,最流行的血清型为5/12型(15/46,32.6%),其次是4型(12/46,26.1%)和7型(7/46,15.2%)。强毒株和中等毒力株含有大多数毒力基因,无毒力菌株一般只含有vta1、ompP2、nanH和espP2基因。可见,毒力基因与血清型有很强的相关性。 展开更多
关键词 杆菌 血清 毒力基因
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89株副猪嗜血杆菌临床分离株血清型、基因型鉴定与分析 被引量:12
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作者 王迪 陈章 +6 位作者 邢刚 何长生 刘晓露 魏建忠 孙裴 刘雪兰 李郁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2802-2811,共10页
旨在明确副猪嗜血杆菌(HPS)临床分离株分离部位的组织分布,进而探讨其血清型和基因型的流行分布特点及相关性,为猪格氏病(Glässer’s disease)的有效防控提供科学依据。针对临床分离鉴定的89株HPS,利用PCR技术鉴定血清型,统计各血... 旨在明确副猪嗜血杆菌(HPS)临床分离株分离部位的组织分布,进而探讨其血清型和基因型的流行分布特点及相关性,为猪格氏病(Glässer’s disease)的有效防控提供科学依据。针对临床分离鉴定的89株HPS,利用PCR技术鉴定血清型,统计各血清型HPS在不同分离部位的菌株分布数量;应用多位点序列分型(MLST)方法进行序列类型(ST)鉴定分析、位点多态性分析、BURST分群统计和UPGMA系统发育树聚类分析。89株HPS临床分离株共鉴定出9种血清型(1、2、4、5、7、11、12、13、14)以及未定型(NT),血清4、13、7和5型为优势血清型,分别占比28.09%、22.47%、13.48%和10.11%,有64株HPS分离于肺,占比71.91%;24种ST型,ST267、ST268、ST387和ST365为优势基因型,分别占比26.97%、21.35%、8.99%和5.62%,每个基因位点存在3~13个等位基因,多态性位点从3(g3pd)到71(6pgd)不等,BURST分析中划分为2个单个ST型和11个克隆群(CC),UPGMA系统发育树被分为4个分支,优势ST型处于2、3、4三个分支中,均对应具有毒力血清型的HPS分离株。HPS临床分离株流行血清型和基因型呈现多元化,具有明显的遗传异质性,同时,ST型与血清型存在一定的交叉性,且与HPS临床致病力相关。 展开更多
关键词 杆菌 分离株 血清 基因
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副猪嗜血杆菌血清4型和13型的分子血清分型研究 被引量:5
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作者 李忍 郭芳芳 +3 位作者 郭杰 崔一芳 曹晓亚 徐福洲 《动物医学进展》 北大核心 2021年第2期6-11,共6页
为在临床诊断中快速鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)血清4型和13型等优势流行血清型,分子血清分型方法较常规的基于特异性抗血清的血清分型方法更加准确和高效。根据HPS血清4型脂多糖合成蛋白基因wcip 4和血清13型糖脂转移蛋白基因gltP序列设计... 为在临床诊断中快速鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)血清4型和13型等优势流行血清型,分子血清分型方法较常规的基于特异性抗血清的血清分型方法更加准确和高效。根据HPS血清4型脂多糖合成蛋白基因wcip 4和血清13型糖脂转移蛋白基因gltP序列设计特异性引物,分别建立了简便快速鉴定HPS血清4型和13型的环介导等温扩增方法(LAMP)。特异性检测结果显示,HPS血清4型或13型参考菌株检测为阳性,而其他HPS血清型参考菌株及19种其他细菌检测均为阴性;敏感性检测结果显示,在25μL反应体系中,HPS血清4型和13型基因组DNA检测限分别为1 pg和2.5 pg。对已知血清型的22株HPS临床分离株检测结果显示,13株血清4型和5株血清13型分别检测均为阳性,而其他血清型分离株检测均为阴性。结果表明,建立的LAMP方法可用于HPS血清4型和13型的快速鉴定,有助于HPS优势流行血清型的快速调查及疫苗防控。 展开更多
关键词 杆菌 分子血清 环介导等温扩增 特异性 敏感性
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1株副猪嗜血杆菌血清4型的分离鉴定及耐药性分析 被引量:9
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作者 王同兆 张付贤 雷连成 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第3期1096-1105,共10页
【目的】阐明引起河南漯河某规模化猪场仔猪呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性。【方法】无菌采集发病仔猪的口鼻拭子及病死猪的胸腔积液及肺脏、肝脏、脾脏等组织器官,进行病原的PCR检测,并通过细菌分离培养、形态学观察、... 【目的】阐明引起河南漯河某规模化猪场仔猪呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性。【方法】无菌采集发病仔猪的口鼻拭子及病死猪的胸腔积液及肺脏、肝脏、脾脏等组织器官,进行病原的PCR检测,并通过细菌分离培养、形态学观察、卫星试验、16S rDNA基因PCR扩增、系统进化树构建、多重PCR鉴定分离菌的血清型、致病性试验和药敏试验等对分离菌株进行生物学特性分析。【结果】在含有V因子的BHI固体平板上生长出圆形、表面光滑湿润、无色透明的微小菌落,在不含V因子的培养基上不生长;分离菌株经革兰染色,镜下可见革兰阴性菌,多呈单个存在的球杆、长杆状;在金黄色葡萄球菌的培养物周围形成典型的“卫星菌落”;16S rDNA基因序列分析表明,分离菌株与副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)处于同一分支,相似性>97%,亚型鉴定结果判定分离菌为Hps血清4型;将分离的Hps腹腔注射感染小鼠,可导致感染小鼠多个器官不同程度出血,以肺脏最为明显;高剂量感染可导致小鼠死亡。药敏试验发现,该菌株对四环素、环丙沙星、复方新诺明具有较强抗性,合理用药后,取得了良好的治疗效果。【结论】试验成功分离出1株血清4型Hps,可致感染小鼠多个器官不同程度出血,对四环素、环丙沙星、复方新诺明耐药,研究结果为副猪嗜血杆菌病的临床诊断和治疗提供了理论依据。 展开更多
关键词 杆菌(Hps) 血清4 分离鉴定 耐药性
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江西省部分猪场副猪嗜血杆菌病血清学调查 被引量:8
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作者 赵萍 贺英 +2 位作者 储岳峰 高鹏程 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第12期107-109,共3页
为调查江西省副猪嗜血杆菌病的流行情况,采集未进行疫苗免疫接种的11个猪场150份血清,应用间接血凝试验检测其抗体滴度,结果表明本地区副猪嗜血杆菌抗体总阳性率为44%,其中母猪阳性率偏高,说明该省猪场存在一定程度的副猪嗜血杆菌的感染。
关键词 杆菌 血清学调查
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猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的诊断及病原分析 被引量:18
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作者 邓同炜 薛亚南 +8 位作者 卢建洲 夏艳勋 陈露露 郭懿文 彭丽明 蒋增海 乔宏兴 徐耀辉 张晓战 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第10期3401-3409,共9页
为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征(PRDC)的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流感病... 为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征(PRDC)的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流感病毒(SIV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪肺炎支原体(Mhp)等病原,并对核酸阳性病毒性病原的抗原结构基因进行测序和遗传演化分析。结果表明,通过细菌分离培养、形态观察、卫星现象观察和16S rRNA基因鉴定,从病死保育猪体内分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌(Hps),药敏实验表明该菌株对对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻呋和四环素几种药物敏感。核酸检测PRRSV和PCV2核酸阳性,分别命名为PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;进一步对PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的结构基因分析发现,PRRSV/HN-2019与与NADC30分支的毒株亲缘关系较近,属于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019与PCV-2d分支的毒株亲缘关系较近,属于PCV-2d分支。综上所述,本研究确定该猪场存在PRRSV、PCV2和Hps的混合感染,为该猪场下一步的PRDC有效防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 呼吸系统疾病综合征(PRDC) 杆菌(Hps) 繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 圆环病毒2(PCV2) 混合感染 病原分析
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副猪嗜血杆菌14型的分离鉴定和药敏试验 被引量:4
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作者 徐引弟 王治方 +5 位作者 焦文强 朱文豪 李海利 张青娴 郞利敏 王克领 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期7-11,共5页
为了明确河南省某规模化猪场断奶保育猪副猪嗜血杆菌感染情况,从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得1株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列试验,证实该株细菌为副猪嗜血杆菌14型... 为了明确河南省某规模化猪场断奶保育猪副猪嗜血杆菌感染情况,从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得1株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列试验,证实该株细菌为副猪嗜血杆菌14型,该菌株携带有capd、vta1、vta2、vta3、wza、hhdA、hhdB、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP等13种主要毒力基因;该菌株对保育仔猪表现出较强的致病性,对头孢他啶、氟苯尼考、头孢噻呋、氨苄西林、强力霉素、土霉素、氧氟沙星敏感,对青霉素、阿米卡星、诺氟沙星、复方新诺明耐药。研究结果可为副猪嗜血杆菌血清14型流行病学研究提供参考。 展开更多
关键词 杆菌血清14 鉴定分 毒力基因 毒力试验 药敏试验
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副猪嗜血杆菌SC096株荚膜多糖及其抗血清的制备 被引量:4
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作者 周琪 贺现辉 +2 位作者 杜雅萍 樊惠英 廖明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期81-84,共4页
为获得副猪嗜血杆菌荚膜多糖及其抗血清,本试验采用热酚法提取副猪嗜血杆菌SC096株荚膜多糖,并进行SDS-PAGE及银染检测,然后用荚膜多糖制备的油乳疫苗免疫家兔制备抗血清,并进行琼脂扩散试验及间接血凝试验检测。试验结果显示,热酚法可... 为获得副猪嗜血杆菌荚膜多糖及其抗血清,本试验采用热酚法提取副猪嗜血杆菌SC096株荚膜多糖,并进行SDS-PAGE及银染检测,然后用荚膜多糖制备的油乳疫苗免疫家兔制备抗血清,并进行琼脂扩散试验及间接血凝试验检测。试验结果显示,热酚法可制备高浓度的荚膜多糖;SDS-PAGE电泳及银染结果显示条带呈弥散性分布,荚膜多糖分子质量55ku左右;琼脂扩散试验结果呈阳性;间接血凝试验中红细胞发生高达10孔滴度的凝集现象。副猪嗜血杆菌SC096株荚膜多糖的提取及其抗血清的制备,为其他含荚膜的细菌抗血清的制备提供了方法和理论依据,也为细菌荚膜多糖抗原性及其疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 杆菌 荚膜多糖 热酚法 血清
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猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染的诊治 被引量:2
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作者 贾松涛 崔保安 +3 位作者 吴志明 闫若潜 赵明军 赵雪丽 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第8期99-100,共2页
通过分析一起猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染病例,阐明了这两种疾病混合感染时的发病情况、临床症状、病理变化,探索了这两种病混合感染时应采取的诊断方法和综合防制措施等,为养猪业可能发生的猪圆环病毒与副猪嗜血杆菌混合感染... 通过分析一起猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染病例,阐明了这两种疾病混合感染时的发病情况、临床症状、病理变化,探索了这两种病混合感染时应采取的诊断方法和综合防制措施等,为养猪业可能发生的猪圆环病毒与副猪嗜血杆菌混合感染提供了有效的防治方法和借鉴经验。 展开更多
关键词 圆环病毒2 杆菌 混合感染
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副猪嗜血杆菌单因子血清的制备 被引量:1
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作者 路明华 王雪敏 +4 位作者 李淑芳 路迎迎 张培君 龚玉梅 王宏俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第7期21-24,共4页
利用副猪嗜血杆菌(Hps)的15个血清型的参考菌株分别制备相应的兔抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到15个血清型的单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜... 利用副猪嗜血杆菌(Hps)的15个血清型的参考菌株分别制备相应的兔抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到15个血清型的单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜血杆菌进行血清型的鉴定,结果表明,其中6株为5型,2株为4型,1株为7型。 展开更多
关键词 杆菌 单因子血清 制备
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