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荧光染料EMA在实时荧光PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用
被引量:
7
1
作者
祝儒刚
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第20期206-210,共5页
将荧光染料——叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时荧光-聚合酶链式反应(real-time poly-merase chain reaction,RT-PCR)技术相结合,对其在RT-PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用进行研究。纯培养条件下...
将荧光染料——叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时荧光-聚合酶链式反应(real-time poly-merase chain reaction,RT-PCR)技术相结合,对其在RT-PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用进行研究。纯培养条件下,在2.2×102~2.2×107CFU范围内细胞数的常用对数值与Ct值之间呈严格的负相关性,并且不添加EMA时的检测灵敏度(22CFU)略大于添加EMA(2.2×102CFU)时的检测灵敏度;人工污染牡蛎样品,利用RT-PCR和EMA RT-PCR以及平板计数法分别进行副溶血弧菌定量检测,结果表明EMA RT-PCR更接近于平板计数的结果,单纯RT-PCR定量的结果偏大;在采集的45份海产品样品中,不经富集培养,利用EMA RT-PCR方法仅有一份牡蛎样品呈阳性,牡蛎样品污染程度为114CFU/g。该方法能够快速、灵敏、准确地进行海产品中致病性副溶血弧菌活细胞的定量检测,具有很好的应用价值。
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关键词
叠氮溴乙锭(EMA)
实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)
海产品
活细胞
副溶血弧菌检测
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职称材料
题名
荧光染料EMA在实时荧光PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用
被引量:
7
1
作者
祝儒刚
机构
辽宁大学轻型产业学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第20期206-210,共5页
基金
辽宁大学青年科学基金项目(2009LDQN21)
文摘
将荧光染料——叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时荧光-聚合酶链式反应(real-time poly-merase chain reaction,RT-PCR)技术相结合,对其在RT-PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用进行研究。纯培养条件下,在2.2×102~2.2×107CFU范围内细胞数的常用对数值与Ct值之间呈严格的负相关性,并且不添加EMA时的检测灵敏度(22CFU)略大于添加EMA(2.2×102CFU)时的检测灵敏度;人工污染牡蛎样品,利用RT-PCR和EMA RT-PCR以及平板计数法分别进行副溶血弧菌定量检测,结果表明EMA RT-PCR更接近于平板计数的结果,单纯RT-PCR定量的结果偏大;在采集的45份海产品样品中,不经富集培养,利用EMA RT-PCR方法仅有一份牡蛎样品呈阳性,牡蛎样品污染程度为114CFU/g。该方法能够快速、灵敏、准确地进行海产品中致病性副溶血弧菌活细胞的定量检测,具有很好的应用价值。
关键词
叠氮溴乙锭(EMA)
实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)
海产品
活细胞
副溶血弧菌检测
Keywords
ethidium bromide monoazide(EMA)
real-time polymerase chain reaction(RT-PCR)
seafood
viable cells
Vibrio parahaemolyticus detection
分类号
TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
荧光染料EMA在实时荧光PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用
祝儒刚
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
7
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