HBV信号肽区热点变异真核表达载体的构建及对HBeAg表达的影响 被引量：2

1

作者 林裕龙 侯金林 +3 位作者 王战会 孙剑 阎丽 骆抗先 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期480-482,共3页

采用分子生物学方法 ,设计引入KpnⅠ和HindⅢ酶切位点的引物扩增HBV的Pre C/C片段 (1814～ 2 45 2 ) ,经酶切后连于EBO真核表达载体 ,利用定点突变技术分别对连接载体进行T186 2 ,A1896 ,A1899,A1896 +A1899点的定点诱变。经错配PCR RFL... 采用分子生物学方法 ,设计引入KpnⅠ和HindⅢ酶切位点的引物扩增HBV的Pre C/C片段 (1814～ 2 45 2 ) ,经酶切后连于EBO真核表达载体 ,利用定点突变技术分别对连接载体进行T186 2 ,A1896 ,A1899,A1896 +A1899点的定点诱变。经错配PCR RFLP和测序分析 ,确定突变的克隆。将突变前后的质粒以脂质体转染法转染HepG2细胞 ,检测不同点突变后HBeAg表达的改变。突变前后的质粒转染HepG2细胞经稳定表达 ,结果未突变的EBO PreC/C重组质粒HBeAg表达为强阳性 ,A1899突变的重组质粒HBeAg表达比未突变的重组质粒稍弱 ,而转染EBO空载体和T186 2 ,A1896 ,A1896 +A1899重组质粒突变体的细胞培养上清HBeAg均为阴性。 展开更多

关键词 定点突变 真核表达载体 基因转染 乙型肝炎 HBV 前c信号肽区热点变异

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e抗原阴性重症乙型肝炎患者HBV前C区热点变异研究 被引量：18

2

作者 林裕龙 候金林 +3 位作者 王战会 孙剑 阎丽 骆抗先 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第11期852-854,共3页

目的　研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法　采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限 制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８... 目的　研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法　采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限 制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８ 例、慢性重肝２４例）及４４例慢性乙型肝炎患者的Ｔ１８６２、Ａ１８９６变异情况。结果　急性重肝的Ａ１８９６、Ｔ１８６２变异分别 为６６．７％（４／６）、０（０／６）；亚急性重肝４２．１％（１６／３８）、１５．８％（６／３８）；慢性重肝 ２５．０％（６／２４）、１６．７％（４／２４）；慢性肝炎 ４５．５％（２０／４４）、２．３％（１／４４）。重症乙型肝炎组与慢性肝炎组比较Ｔ１８６２变异率有显著差异（Ｐ＜０．０１），Ａ１８９６变异率无显 著差异（Ｐ>０．０５）。结论　提示Ｔ１８６２变异与乙型肝炎的重症化密切相关。而Ａ１８９６变异与乙型肝炎重症化进程是否有 关还不能确定。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 前c区热点变异 乙型肝炎病毒 HBV E抗原

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HBV前C/C基因启动子区变异与HBeAg阴性CHB患者肝组织病理变化的关系 被引量：7

3

作者 廖宝林 林思炜 +4 位作者 陈伟烈 刘惠媛 陈铿 刘丽儿 施海燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第14期2347-2350,共4页

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前C/C基因启动子区变异与HBe Ag阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织病理变化的关系。方法：将2012年4月至2013年12月在广州市第八人民医院住院诊治所有伴肝活检的HBeAg阴性CHB患者71例纳入本项研究,提取血... 目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前C/C基因启动子区变异与HBe Ag阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织病理变化的关系。方法：将2012年4月至2013年12月在广州市第八人民医院住院诊治所有伴肝活检的HBeAg阴性CHB患者71例纳入本项研究,提取血清DNA后通过巢式PCR扩增HBV的S基因区与前C/C基因启动子区并测序分析,Logistic回归分析与显著性肝脏组织学异常相关的病毒性因素指标。结果：基因型B患者组与基因型C患者组比较,显著性肝脏炎症发生率（15.8%vs.27.3%,χ^2=1.398,P=0.237）及显著性肝纤维化发生率（71.1%vs.84.4%,χ^2=1.926,P=0.165）均无显著差异。纳入年龄、性别、HBV基因型以及变异位点（T1753V、A1762T/G1764A、A1846T和G1896A）进行Logistic回归分析,HBV基因的A1762T/G1764A变异与显著性肝脏炎症相关（OR=4.296,P=0.037）,而年龄、性别、基因型和其他位点变异与显著性肝组织病理学改变无显著相关性（均P〉0.05）。结论：HBV前C/C基因区变异可能可作为评估肝组织病理变化的生化指标。 展开更多

关键词 HBV 前c/c基因区 变异 肝纤维化

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HBV前C区基因变异与血清肝纤维化标志物的相关性研究 被引量：10

4

作者 李瀚旻 张振鄂 +3 位作者 杨玲 晏雪生 肖琳 张金发 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2003年第1期29-30,共2页

探讨HBV前c区基因变异与肝纤维化的相关性。应用聚合酶链反应-单链构象多肽性分析(PCR-SS-CP)银染技术检测FIBV前C区基因变异和放射免疫法检测血清肝纤维化标志物(血清透明质酸,HA和血清Ⅲ型前胶原肽,PCⅢ)检测103例HBeAg阴性而HBV-DNA... 探讨HBV前c区基因变异与肝纤维化的相关性。应用聚合酶链反应-单链构象多肽性分析(PCR-SS-CP)银染技术检测FIBV前C区基因变异和放射免疫法检测血清肝纤维化标志物(血清透明质酸,HA和血清Ⅲ型前胶原肽,PCⅢ)检测103例HBeAg阴性而HBV-DNA阳性的慢性乙肝患者的血清,进行前C区基因变异与血清肝纤维化标志物水平的相关性分析。结果发现,70.87％发生了HBV前C区变异,其中包括变异株与野生株混合感染的病例,而这些病例中的血清肝纤维化标志物(HA、PCⅢ)水平显著高于单纯野生株感染者(P<0.01),HBV前C区基因变异检出率与血清肝纤维化标志物水平呈正相关,提示HBV前C区基因变异与肝纤维化密切相关。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 前c区 基因变异 肝纤维化 透明质酸 Ⅲ型前胶原肋 相关性 PcR-SScP技术 放射免疫法

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慢性乙型肝炎HBV前C区基因变异与e系统及肝功能的关系 被引量：3

5

作者 黄育华 盛国光 张建军 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2002年第3期141-141,共1页

关键词 慢性乙型肝炎 HBV前c区基因变异 E系统 肝功能 相关性

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干扰素与胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎前C区变异株感染的疗效观察 被引量：1

6

作者 江晓平 孙秋林 +2 位作者 叶珺 叶英 尹华发 《安徽医科大学学报》 CAS 2002年第6期454-456,共3页

目的　了解干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎前C区变异株感染的疗效。方法　 6 3例患者随机分为A、B两组。A组用干扰素α 2b 3 0× 10 6U ,肌注 ,每日 1次 ,14d后改隔日 1次至 6个月 ,胸腺肽 40～ 5 0mg ,静滴 ,每日 1次 ,1～ 2月... 目的　了解干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎前C区变异株感染的疗效。方法　 6 3例患者随机分为A、B两组。A组用干扰素α 2b 3 0× 10 6U ,肌注 ,每日 1次 ,14d后改隔日 1次至 6个月 ,胸腺肽 40～ 5 0mg ,静滴 ,每日 1次 ,1～ 2月后改肌注或口服至 3个月。B组单用干扰素α 2b ,方法同A组。比较两组血清HBVDNA、HBsAg阴转率和ALT复常率。结果　A、B两组治疗结束时HBVDNA阴转率分别为 45 16 %和 43 75 % (P >0 0 5 ) ,9个月后分别为77 42 %和 5 3 13 % (P <0 0 5 ) ,远期疗效联合治疗组优于单用干扰素组。两组治疗结束时均无HBsAg阴转者。ALT复常率A组为 48 39% ,B组为 5 0 % ,两组差异无显著性。结论　干扰素α 2b联合胸腺肽治疗乙型肝炎病毒前C区变异株感染远期疗效优于单用干扰素组 ,但疗效仍不够理想。 展开更多

关键词 干扰素 胸腺肽 联合治疗 乙型肝炎前c区变异株感染 疗效观察

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慢性无症状HBV感染者前C区变异与肝脏病理的关系 被引量：1

7

作者 潘峻岩 刘丽娜 石铭 《临床肝胆病杂志》 CAS 2008年第2期126-126,129,共2页

关键词 慢性乙型肝炎 HBV感染者 肝脏病理改变 前c区变异 无症状 HBVDNA阳性 病理组织学检查 HBV前c区

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重症乙型肝炎病人HBV前C区A_(83)位点的变异

8

作者 牛俊奇 鲍万国 +3 位作者 苏秀芬 许昶 刘永华 吕美德 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1998年第6期672-673,共2页

目的：探讨HBV前C区A(83)位点的变异和重症肝炎发病机理的关系。方法：应用多聚酶链反应，结合限制性内切酶多态性分析法及末端终止法对3例重症乙型肝炎病毒前C区变异状况进行了分析，并选择5例其他型乙肝病人作对照。结果：发现3例重... 目的：探讨HBV前C区A(83)位点的变异和重症肝炎发病机理的关系。方法：应用多聚酶链反应，结合限制性内切酶多态性分析法及末端终止法对3例重症乙型肝炎病毒前C区变异状况进行了分析，并选择5例其他型乙肝病人作对照。结果：发现3例重症乙型肝炎病人中有2例HBV前C区A(83)位点突变；其它5例未发现变异。结论：HBV前C区A(83)位点突变和重症肝炎的发生有密切的关系。 展开更多

关键词 重症 乙型肝炎 基因变异 HBV前c区

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南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点 被引量：2

9

作者 曾文权 赵巍 《中国全科医学》 CAS CSCD 2005年第20期1671-1672,共2页

目的探讨南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点.方法随机选择2004年3月～2005年3月南京地区HBV-DNA阳性(荧光PCR)的HBV感染者220例.采用多对型特异性引物PCR法检测HBV基因型,采用特异性引物PCR法检测HBV前C区1896变异株和野生... 目的探讨南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点.方法随机选择2004年3月～2005年3月南京地区HBV-DNA阳性(荧光PCR)的HBV感染者220例.采用多对型特异性引物PCR法检测HBV基因型,采用特异性引物PCR法检测HBV前C区1896变异株和野生株.结果 HBV感染者中基因型B 71例,基因型C 146例,基因型D 1例,B/C混合型1例,A/B混合型1例,未发现基因型A、E、F存在.有163例HBV感染者发生了前C区1896变异,变异株检出率(单纯变异株/混合变异株)为74.1%.基因型B 78.9%发生了前C区1896变异,基因型C有66.4%发生了C区1896变异,两组比较,差别有显著性意义 (χ2=4.56,P＜0.05).结论南京地区存在HBV基因B、C、D及B+C和 A+B混合型,以B、C型为优势基因型,未发现A、F、E基因型;HBV基因型B前C区1896的变异率较HBV基因型C高. 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 基因型 前c区变异

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乙型肝炎病毒前C区基因变异研究进展 被引量：5

10

作者 邱望龙 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1997年第1期9-11,共3页

自1989年报道乙型肝炎病毒(HBV)前C区终止密码变异株后,有关前C区核苷酸1896位突变和其它位点变异的研究增多。这些变异可直接影响病毒的复制水平,或通过阻止HBeAg的合成与分泌来调节宿主免疫应答,因而具有较重要的临床意义,本文就HBV前... 自1989年报道乙型肝炎病毒(HBV)前C区终止密码变异株后,有关前C区核苷酸1896位突变和其它位点变异的研究增多。这些变异可直接影响病毒的复制水平,或通过阻止HBeAg的合成与分泌来调节宿主免疫应答,因而具有较重要的临床意义,本文就HBV前C区基因变异的检测、变异热点的特点及临床意义等方面做一综述。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 前c区 基因变异

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慢性乙型肝炎患者血清TNF_α及IL-6水平与HBV前C区基因变异关系的研究 被引量：4

11

作者 张琳 李颖 +1 位作者 曹丽 乔光彦 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期371-373,共3页

目的：探讨细胞因子（ＴＮＦα及ＩＬ－６）水平与ＨＢＶ前Ｃ区变异之间的关系。方法：应用ＥＬＩＳＡ法及３′－碱基特异性聚合酶链反应法对４３例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者进行血清ＴＮＦα、ＩＬ－６含量及ＨＢＶ前Ｃ区１８... 目的：探讨细胞因子（ＴＮＦα及ＩＬ－６）水平与ＨＢＶ前Ｃ区变异之间的关系。方法：应用ＥＬＩＳＡ法及３′－碱基特异性聚合酶链反应法对４３例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者进行血清ＴＮＦα、ＩＬ－６含量及ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点突变的检测。结果：ＨＢＶ前Ｃ区突变株，检出率为４８．８％（２１／４３），突变株感染组ＴＮＦα、ＩＬ－６水平明显高于野生株感染组。结论：慢性乙型肝炎患者血清ＴＮＦα及ＩＬ－６水平与ＨＢＶ前Ｃ区基因变异有密切关系。 展开更多

关键词 乙型肝炎 肿瘤坏死因子 IL-6 前c区变异 HBV

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小儿慢性乙型肝炎病毒前C区变异与临床关系探讨

12

作者 张薇莉 赵隽 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期452-453,共2页

关键词 慢性乙型肝炎病毒 前c区变异 关系探讨 临床 乙肝病毒(HBV) 慢性乙型病毒性肝炎 HBV前c区 小儿 DNA聚合酶 复制过程 高变异性 病毒变异 酶活性

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HBV C/D重组体的临床意义和C基因启动子/前C区病毒变异

13

作者 李华 王战会 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期2586-2586,共1页

HBV C/D重组体主要流行于中国西部的藏族地区,虽然有关C/D重组体的地域和民族分布已比较明确,但其临床意义和病毒在C基因启动子/前C区(BCP/PC)的变异特点仍不清楚。青海省传染病专科医院Li等进行了一项研究,共纳入174例藏族和汉族慢性HB... HBV C/D重组体主要流行于中国西部的藏族地区,虽然有关C/D重组体的地域和民族分布已比较明确,但其临床意义和病毒在C基因启动子/前C区(BCP/PC)的变异特点仍不清楚。青海省传染病专科医院Li等进行了一项研究,共纳入174例藏族和汉族慢性HBV感染者,包括慢性乙型肝炎患者115例,肝硬化患者45例,肝癌患者14例,通过高通量测序对HBV的S和BCP/PC区准种组成和位点变异情况进行了分析。结果显示,174例患者中基因型B、C2、D和C/D重组体的比例分别为1.1%(2/174)、19.5%(34/174)、0.6%(1/174)和78.7%(137/174)。对C2和C/D两组感染者的临床资料和病毒变异频率比较显示,C2和C/D在不同疾病进展阶段患者中的比例无显著差异,两种基因型感染者的肝功能指标也无明显差异。 展开更多

关键词 慢性HBV感染者 c基因启动子 病毒变异 临床意义 重组体 前c区 慢性乙型肝炎患者 传染病专科医院

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氧化苦参碱治疗前C区变异的慢性乙型肝炎40例 被引量：2

14

作者 曹明 杨虹 +1 位作者 王天东 巩向诺 《医药导报》 CAS 2005年第4期292-292,共1页

　目的　观察和评价氧化苦参碱对前C区变异的慢性乙型肝炎的抗病毒疗效。方法　选择慢性乙型肝炎 80例,治疗组 40例为前C区变异患者,对照组 40例为野生株患者,两组分别给予氧化苦参碱 150mg,静脉滴注 1个月后改为 400mg,肌内注射 2个月... 　目的　观察和评价氧化苦参碱对前C区变异的慢性乙型肝炎的抗病毒疗效。方法　选择慢性乙型肝炎 80例,治疗组 40例为前C区变异患者,对照组 40例为野生株患者,两组分别给予氧化苦参碱 150mg,静脉滴注 1个月后改为 400mg,肌内注射 2个月,观察HBVDNA、HBeAg的阴转情况。结果　治疗结束后,治疗组HBVDNA有效率,阴转率分别为 87. 5%, 42 .5%,HBeAg阴转率为 44 .4%,对照组HBVDNA有效率,阴转率分别为 85 .0%, 47. 5%,HBeAg阴转率为 40 0%。两组比较差异无显著性(P>0 .05)。结论　氧化苦参碱对前C区变异的慢性乙型肝炎抗病毒疗效与野生株比较无耐药性。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 肝炎 乙型 慢性 前c区变异

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应用PCR产物直接测序技术测定乙型肝炎病毒前C区基因序列 被引量：1

15

作者 李智伟 窦晓光 刘沛 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期247-248,251,共3页

目的 :测定乙型重型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,探讨乙型肝炎病毒前C区基因变异的意义。方法 :采用PCR产物直接测序技术 ,测定 13例乙型重型肝炎和 10例慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ... 目的 :测定乙型重型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,探讨乙型肝炎病毒前C区基因变异的意义。方法 :采用PCR产物直接测序技术 ,测定 13例乙型重型肝炎和 10例慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,并与基因库中来自世界各地的不同基因型的毒株进行比较。结果 :患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,除发现乙型肝炎病毒前C区基因 1896位存在点变异外 ,还可见 184 6位点变异 ,且乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 (P <0 .0 5 ) ,而 186 2位未检出变异。 1838位核苷酸全部为腺嘌呤核苷酸 (A) ,184 6位核苷酸大多为胸腺嘧啶核苷酸 (T) ,仅 4例发生了G→A点突变。经与不同基因型的毒株进行比较 ,提示沈阳地区流行的乙型肝炎病毒毒株接近美国株。结论 :乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 ; 展开更多

关键词 PcR产物直接测序技术 乙型肝炎病毒 前c区变异 DNA序列分析

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慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因突变与临床的关系 被引量：4

16

作者 张琳 冯国和 +1 位作者 马力 乔光彦 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期585-587,共3页

目的：探讨慢性乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区基因变异与临床的关系。方法：应用３′－碱基特异性ＰＣＲ法（３′－ＢＳ－ＰＣＲ）。结果：５５例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者中检出突变株２５例。突变株的检出主要集中在抗－ＨＢｅ阳... 目的：探讨慢性乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区基因变异与临床的关系。方法：应用３′－碱基特异性ＰＣＲ法（３′－ＢＳ－ＰＣＲ）。结果：５５例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者中检出突变株２５例。突变株的检出主要集中在抗－ＨＢｅ阳性患者中，并随肝损害加重而增加，重型肝炎患者突变株检出率最高。ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染者高于ＨＢＶ单纯感染者。结论：突变株感染者病情较重，预后差；抗－ＨＢｅ的出现并不完全意味着病情的缓解；ＨＣＶ的重叠感染可能是导致ＨＢＶ前Ｃ区基因突变的原因之一。 展开更多

关键词 乙型肝炎 乙型肝炎病毒 前c区变异 基因突变

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中药维肝力栓治疗e-抗体阳性慢性乙型病毒性肝炎观察 被引量：4

17

作者 梁超 郑万品 《中医药学刊》 CAS 2002年第5期619-620,共2页

目的 :观察益气补阳的中药维肝力 (HY99)栓对e抗体阳性慢性乙型肝炎 (CCHB)的治疗效果。方法 :所有病例HBVDNA均为阳性 (采用PCR -ELISA检测方法 ) ,采用病例自身前后对照及停药后追踪 4～ 6月的方法 ;先后两批共 2 5例(取 8例做HBV基... 目的 :观察益气补阳的中药维肝力 (HY99)栓对e抗体阳性慢性乙型肝炎 (CCHB)的治疗效果。方法 :所有病例HBVDNA均为阳性 (采用PCR -ELISA检测方法 ) ,采用病例自身前后对照及停药后追踪 4～ 6月的方法 ;先后两批共 2 5例(取 8例做HBV基因测序 ,结果均证实为前C区变异 )。每日早晚用HY99栓 1粒塞肛 ,疗程 6个月。结果 :2 5例中 ,疗程结束时 2 1例HBVDNA阴转 ,随访结束时为 2 3例。 12例ALT升高者 ,随访时有 8例下降 ,其中 6例降至正常。结论 :该药对前C区变异CHB有显著疗效 ,表现在对病毒复制有明显抑制作用 ,同时能改善肝功能。 展开更多

关键词 中药 维肝力栓 治疗 e-抗体阳性慢性乙型病毒性肝炎 HY99栓 cHB 前c区变异 诊断

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暴发性乙型肝炎的分子病毒学机制

18

作者 骆小杨 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1997年第1期14-15,共2页

乙型肝炎病毒(HBV)变异与暴发性乙型肝炎(FHB) 一贯认为FHB的发病机理是由于宿主免疫系统对乙型肝炎病毒(HBV)感染的过度应答,但导致免疫异常的原因不明。分子流行病学调查发现有些FHB是由变异毒株所引起。HBV-DNA前C/C区变异在FHB常见... 乙型肝炎病毒(HBV)变异与暴发性乙型肝炎(FHB) 一贯认为FHB的发病机理是由于宿主免疫系统对乙型肝炎病毒(HBV)感染的过度应答,但导致免疫异常的原因不明。分子流行病学调查发现有些FHB是由变异毒株所引起。HBV-DNA前C/C区变异在FHB常见,在急性肝炎较少出现,提示病毒的变异与疾病的发展的结局密切相关。另外,有报道急性肝炎潜伏期的丈夫把HBV变异毒株传给妻子,妻子得了FHB。相同的病毒株引起不同的结果,提示其发生机理也与个体免疫应答有关。 展开更多

关键词 乙型肝炎 分子病毒学 前c区变异

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