lncRNA SNAI3-AS1调节miR-367-3p/SOX4轴对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响

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作者 王小虎 李亚灵 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第10期914-922,共9页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNAI3-AS1调节微RNA(miR)-367-3p/高迁移率族盒蛋白4(SOX4)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法实时PCR检测人PCa细胞系DU145、LNCap、PC-3、正常前列腺上皮细胞系RWPE-1以及PC组织、癌旁组织... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNAI3-AS1调节微RNA(miR)-367-3p/高迁移率族盒蛋白4(SOX4)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法实时PCR检测人PCa细胞系DU145、LNCap、PC-3、正常前列腺上皮细胞系RWPE-1以及PC组织、癌旁组织中SNAI3-AS1、miR-367-3p、SOX4 mRNA表达。选取对数生长期的LNCap,设置空白组、阴性对照(vector)组、SNAI3-AS1过表达(vector SNAI3-AS1)组、小干扰RNA(siRNA)阴性对照(si-NC)组、si-SNAI3-AS1组、si-SNAI3-AS1+抑制剂阴性对照(NC inhibitor)组和si-SNAI3-AS1+miR-367-3p inhibitor组。用克隆形成实验、Transwell实验、Hoechst33258染色分别检测细胞克隆形成能力、迁移、侵袭及凋亡;实时PCR检测LNCap中SNAI3-AS1、miR-367-3p、SOX4 mRNA表达;Western blotting检测LNCap中SOX4蛋白表达;报告基因实验验证miR-367-3p与SNAI3-AS1、SOX4的靶向关系。结果SNAI3-AS1、SOX4 mRNA表达在DU145、LNCap、PC-3及PC组织中显著增加,miR-367-3p表达显著降低(P<0.05)。与空白组、vector组相比,vector SNAI3-AS1组SNAI3-AS1、SOX4 mRNA及蛋白表达、克隆数、侵袭与迁移显著增加,miR-367-3p表达、凋亡显著降低(P<0.05);与空白组、si-NC组相比,si-SNAI3-AS1组SNAI3-AS1、SOX4 mRNA及蛋白表达、克隆数、侵袭与迁移显著降低,miR-367-3p表达、凋亡显著增加(P<0.05);与si-SNAI3-AS1+NC inhibitor组相比,si-SNAI3-AS1+miR-367-3p inhibitor组SOX4 mRNA及蛋白表达、克隆数、侵袭与迁移显著增加,miR-367-3p表达、凋亡显著降低(P<0.05),SNAI3-AS1表达无统计学差异(P>0.05)。miR-367-3p与SNAI3-AS1、SOX4存在靶向关系。结论lncRNA SNAI3-AS1通过上调miR-367-3p/SOX4轴抑制PC细胞恶性生物学行为的发展。 展开更多

关键词 lncRNA SNAI3-AS1 miR-367-3p/SOX4轴 前列腺癌细胞 恶性生物学行为

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槲皮素对前列腺癌细胞增殖及转录因子Sp1功能的抑制作用 被引量：21

2

作者 苑辉卿 杨玲玲 +3 位作者 姜安丽 孔峰 张建业 Charles YF YOUNG 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期673-678,共6页

雄激素受体(androgenreceptor,AR)作为核转录因子,其高表达、基因突变以及AR辅激活因子的过表达等造成AR的异常激活与前列腺癌细胞的增殖、恶化转移、多药耐药等密切相关.天然黄酮槲皮素(quercetin),是一很有潜力的预防和治疗前列腺肿... 雄激素受体(androgenreceptor,AR)作为核转录因子,其高表达、基因突变以及AR辅激活因子的过表达等造成AR的异常激活与前列腺癌细胞的增殖、恶化转移、多药耐药等密切相关.天然黄酮槲皮素(quercetin),是一很有潜力的预防和治疗前列腺肿瘤的化合物.槲皮素不仅抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖,并呈剂量依赖性,而且下调前列腺癌中AR的表达、抑制AR的转录激活功能.GCbox是AR核心启动子的主要正调控元件,是转录因子Sp1的结合位点.细胞转染结果表明,槲皮素能抑制Sp1蛋白对AR启动子的激活作用,可能是槲皮素下调AR表达的机理之一.进一步研究显示,槲皮素还能明显抑制Sp1蛋白对AR转录激活功能的增强作用.Western印迹结果显示,槲皮素对Sp1蛋白表达无明显影响,但能够诱导c-Jun的高表达,而高表达的c-Jun蛋白能逆转Sp1蛋白对AR的转录激活作用,由此推测,槲皮素可能通过介导c-Jun与Sp1的蛋白质相互作用,抑制Sp1的功能,进而起到抑制AR表达和功能的作用.免疫沉淀结果又进一步证实了Sp1与c-Jun二者的相互作用.因此,槲皮素可能通过抑制前列腺癌细胞中AR的表达和功能抑制了细胞的增殖,其分子机理可能与槲皮素诱导的c-Jun与Sp1蛋白相互作用、降低Sp1对AR的转录激活作用有关. 展开更多

关键词 槲皮素 细胞增殖 SP1 前列腺癌细胞 抑制作用

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蝎毒多肽提取物对非激素依赖性前列腺癌细胞增殖抑制作用的实验研究 被引量：19

3

作者 王兆朋 张维东 +5 位作者 张捷 贾青 宋守琴 王朝霞 黄山英 张月英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期938-942,共5页

目的观察蝎毒多肽提取物(PESV)对非激素依赖性前列腺癌细胞DU145和PC3的生长与增殖、细胞周期及cyclinE和p27蛋白表达的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测PESV对前列腺癌细胞PC3和DU145生长与增殖的影响,流式细胞术观察药物对细胞周期的... 目的观察蝎毒多肽提取物(PESV)对非激素依赖性前列腺癌细胞DU145和PC3的生长与增殖、细胞周期及cyclinE和p27蛋白表达的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测PESV对前列腺癌细胞PC3和DU145生长与增殖的影响,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响,免疫组织化学法检测药物干预后,cyclinE和p27蛋白水平表达的变化。结果MTT结果显示,PBSV40～200mg·L-1时对前列腺癌细胞具有毒性作用,40mg·L-1时,DU145和PC3细胞抑制率(IR)分别为30.5%和33.1%,与阴性组比较细胞增殖抑制作用明显(P<0.05),随剂量加大作用增大,至200mg·L-1时,几乎100%抑制,呈明显剂量效应关系;流式细胞术显示,PESV干预后处于S期的细胞减少(DU145细胞和PC3细胞S期的比例分别为34.1%和17.1%,与阴性对照组相比,P<0.01),处于G0/G1和G2/M期的细胞增多;免疫组织化学检测显示,PBMV干预后,DU145和PC3细胞cyclinE蛋白阳性表达细胞数量减少,灰度值明显下调(P<0.01),p27蛋白阳性表达数量增加,灰度值明显上调(P<0.05)。结论PESV可阻止前列腺癌细胞由G0/G1和G2期进入S期,对前列腺癌细胞增殖具有明显抑制作用,在前列腺癌治疗中具有重要价值。 展开更多

关键词 蝎毒抗癌因子 前列腺癌细胞 增殖

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低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导pEGFP-N1基因转染体外前列腺癌细胞 被引量：7

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作者 吴作辉 白文坤 +1 位作者 张吉臻 胡兵 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2012年第8期1460-1464,共5页

目的探讨低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-N1)转染前列腺癌细胞的可行性,并对超声微泡浓度参数进行优化。方法将前列腺癌PC-3细胞悬液分为空白对照组、超声组、微泡组、微泡+超声组、脂质体组、脂质... 目的探讨低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-N1)转染前列腺癌细胞的可行性,并对超声微泡浓度参数进行优化。方法将前列腺癌PC-3细胞悬液分为空白对照组、超声组、微泡组、微泡+超声组、脂质体组、脂质体+微泡组、脂质体+超声组、脂质体+微泡+超声组,其中脂质体+微泡+超声组根据微泡体积浓度不同分为(0、10%、20%、30%、40%和50%)6个亚组。经超声辐照,24h后用荧光显微镜观察细胞中基因表达情况,并用流式细胞仪检测转染率。结果脂质体+微泡+超声组基因转染效率最高,与其他组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);在脂质体+微泡+超声亚组中,微泡浓度为20%亚组基因转染率最高。结论低频超声联合微泡能有效增强脂质体介导pEGFP-N1基因在体外前列腺癌细胞中的转染率,20%是体外基因转染前列腺癌细胞的最佳微泡浓度。 展开更多

关键词 超声学 微泡 脂质体 前列腺癌细胞 基因转移技术

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鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对前列腺癌细胞生长的抑制作用 被引量：5

5

作者 张岩 刘贤锡 +2 位作者 张冰 胡海燕 龚磊 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期128-133,共6页

为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染... 为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染滴度 ,再采用Western印迹和流式细胞术检测rAd ODC Ex3as对细胞中ODC表达的抑制作用、对细胞周期和凋亡的影响以及与CDK抑制物p2 1的关系 .实验显示 ,rAd ODC Ex3as分别以 5 0MOI、2 5MOI感染PC 3和LNCap细胞可明显抑制其生长增殖 ,而不引起细胞毒性作用 ;其对两种细胞中ODC表达的抑制作用分别为4 5 %和 5 9% .流式细胞DNA含量分析证实 ,rAd ODC Ex3as可引起PC 3和LNCap细胞周期G1期阻滞 ,但并未引起凋亡 .通过Western印迹发现 ,细胞中ODC表达的降低可诱导p2 1蛋白的过表达 .结果表明 ,rAd ODC Ex3as在体外能有效地干扰ODC基因的表达 ,并通过诱导p2 1的过表达使其细胞周期停于G1期 ,从而抑制前列腺癌细胞PC 3和LNCap的增殖 ,为其进一步基因治疗的研究打下基础 . 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒 基因治疗 反义RNA 前列腺癌细胞

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人同源盒基因NKX3·1对前列腺癌细胞的诱导凋亡作用 被引量：6

6

作者 刘闻闻 于春晓 +5 位作者 崔福爱 张鹏举 陈蔚文 胡晓燕 姜安丽 张建业 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期996-1002,共7页

构建人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达及对细胞的促凋亡作用.以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3·1基因全长编码片段,将NKX3·1cDNA重组到真核表达载... 构建人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达及对细胞的促凋亡作用.以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3·1基因全长编码片段,将NKX3·1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3·1(+)中;将pcDNA3·1-NKX3·1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP细胞,用RT-PCR和Western印迹检测NKX3·1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达;绘制细胞生长曲线,观察NKX3·1对前列腺癌细胞增殖的抑制作用;用DNA/ladder和流式细胞术检测NKX3·1对前列腺癌细胞凋亡的影响,进一步用RT-PCR检测凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9、Apaf1、survivin和Bcl2表达的变化.人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1经酶切及测序鉴定正确.pcDNA3·1-NKX3·1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和Western印迹证明能有效表达NKX3·1.生长曲线显示,前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA后细胞增殖受到抑制;前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA48h后,DNA电泳呈现具有凋亡特征的DNAladder;流式细胞术检测出现明显凋亡峰;RT-PCR检测凋亡相关基因.结果显示,caspase3、caspase8、caspase9基因表达明显增加,Bcl2基因表达明显减少.本研究成功构建了真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1,转染PC-3和LNCaP细胞后能有效表达,并对细胞具有诱导凋亡作用. 展开更多

关键词 同源盒基因NKX3.1 真核表达载体 前列腺癌细胞 细胞凋亡

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用RNAi沉默survivin基因表达对前列腺癌细胞系PC3的影响 被引量：4

7

作者 沈建军 刘家云 +3 位作者 苏明权 缪应业 张青 郝晓柯 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第1期37-41,共5页

目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断前列腺癌细胞系PC3中survivin基因的表达,并研究 survivin基因沉默后对PC3细胞产生的影响。方法:用真核转录载体pSilencerTM3．1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体pSilenc... 目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断前列腺癌细胞系PC3中survivin基因的表达,并研究 survivin基因沉默后对PC3细胞产生的影响。方法:用真核转录载体pSilencerTM3．1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体pSilencer 3．1-SVV1、pSilencer 3．1-SVV2和pSilencer 3．1-SVV3,并用脂质体法转染前列腺癌细胞系PC3,通过RT- PCR、蛋白印迹实验检测sunrivin的表达变化,并用流式细胞术、MTT法检测转染后PC3细胞的凋亡、细胞周期、细胞生长速度、对顺铂的敏感性等芳面的变化。结果:重组载体pSilencer 3．1-SVV2和pSilencer 3．1-SVV3有效地阻断了PC3细胞中sur- vivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P<0．01)。重组载体转染PC3细胞后,与对照组相比,细胞的凋亡增加了10％- 15％;细胞生长速度明显变慢,其细胞数在84 h时与对照组相比减少约30％;G1期细胞增加了10％,G2期和S期细胞减少了 5％以上。加入顺铂后,pSilencer 3．1-SVV2、pSilencer 3．1-SVV3重组质粒转染的PC3细胞的存活数下降了35％-45％,细胞凋亡则增加了10％-14％。结论:初步证明了survivin基因在前列腺癌细胞分化增殖、抗凋亡等方面所扮演的重要角色,为进一步阐明survivin基因与前列腺癌的关系以及以survivin基因为靶点的前列腺癌基因治疗研究奠定了基础。 展开更多

关键词 RNA干扰 SURVIVIN 凋亡 前列腺癌细胞

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组织特异性启动子介导的反义FGF8b RNA对前列腺癌细胞生长增殖能力的影响 被引量：5

8

作者 吕英谦 毛泽斌 +3 位作者 周艳艳 韩宽怀 张志文 薛兆英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期755-761,共7页

利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆... 利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆转录病毒载体pSIR中构建成重组体PB 反义FGF8b pSIR .经转染包装细胞PT 6 7后将产生的复制缺陷型逆转录病毒体外感染前列腺癌细胞系PC 3M ,体外检测其生长增殖和侵袭转移能力的变化 .结果表明 ,与对照组相比 ,前列腺癌细胞感染产生反义FGF8bRNA的逆转录病毒后生长速度减慢 ,集落形成能力下降 ,体外侵袭转移能力降低 (P <0 0 1) .体外试验表明 ,前列腺组织特异性启动子介导的反义FGF8bRNA可有效降低前列腺癌细胞的体外生长增殖和转移能力 ,这为体内靶向前列腺癌基因治疗奠定了可靠的基础 . 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子8b 靶向基因治疗 组织特异性启动子 介导 反义FGF8bRNA 前列腺癌细胞 生长增殖能力

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淫羊藿苷对前列腺癌细胞株活力、迁移与侵袭的作用 被引量：21

9

作者 张温花 张文超 于远东 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1017-1020,共4页

目的:探讨淫羊藿苷对前列腺癌细胞株Du145与PC3的存活、迁移与侵袭能力的影响,并初步研究其机制。方法:CCK-8法检测不同浓度淫羊藿苷(0、5、10、20、40和80μmol/L)对Du145细胞与PC3细胞活力的影响;Transwell小室实验检测细胞的迁移和... 目的:探讨淫羊藿苷对前列腺癌细胞株Du145与PC3的存活、迁移与侵袭能力的影响,并初步研究其机制。方法:CCK-8法检测不同浓度淫羊藿苷(0、5、10、20、40和80μmol/L)对Du145细胞与PC3细胞活力的影响;Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1蛋白水平。结果:MTT法检测结果显示淫羊藿苷呈浓度依赖性抑制Du145与PC3细胞的活力,当浓度到达40μmol/L时,抑制作用达到最大;经淫羊藿苷干预后,Du145和PC3细胞迁移和侵袭能力显著下降,Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1蛋白表达水平显著下降。结论:淫羊藿苷具有抑制前列腺癌细胞株Du145与PC3生长、迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与淫羊藿苷抑制Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 前列腺癌细胞 细胞活力 细胞迁移 细胞侵袭

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shRNA介导GSTP1基因沉默对激素非依赖性前列腺癌细胞株DU145的影响 被引量：3

10

作者 金鹏 谢晋良 +3 位作者 朱向荣 周成 丁翔 杨罗艳 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期807-816,共10页

目的:探讨谷胱甘肽巯基转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)基因沉默对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株DU145增殖活性和对化学治疗药物敏感性的影响。方法:根据选取靶序列形成短发卡状RNA(short hairpinRNA,shRNA)的DNA模板设计... 目的:探讨谷胱甘肽巯基转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)基因沉默对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株DU145增殖活性和对化学治疗药物敏感性的影响。方法:根据选取靶序列形成短发卡状RNA(short hairpinRNA,shRNA)的DNA模板设计3条表达载体(shRNA255,shRNA554,shRNA593),并克隆到质粒pGPU6/GFP/Neo。经酶切和测序鉴定,筛选转染率最高基因沉默效果最好的shRNA作RNA干扰。DU145细胞株分为空白质粒转染组和shRNA转染组。转染前后按化学治疗药物分为氟尿嘧啶(fluorouracil,FU)组及紫杉醇(paclitaxel,PA)组,并按作用浓度(FU:30,60,120,240μg/mL;PA:0.2,2,10,20μg/mL)分别分成4个亚组,并分别设有一个空白对照组。四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]比色法检测转染后细胞增殖活性的变化,MTT及末端脱氧核苷酸转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(terminal de-oxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测转染前后不同浓度FU和PA对DU145细胞抑制增殖及诱导凋亡的效果。结果:3条表达载体(pGPU6/GFP/Neo-shRNA255,pGPU6/GFP/Neo-shRNA554,pGPU6/GFP/Neo-shRNA593)的转染率分别为(63.3±1.04)%,(76.2±0.68)%,(72.7±0.33)%,shRNA554转染率最高,三者之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。转染后mRNA含量分别为128.31±2.50,43.24±4.30和85.62±6.30,GSTP1蛋白含量分别为163.92±12.40,65.38±9.30和114.25±16.70,shRNA554转染后GSTP1基因mRNA和蛋白含量均最低,三者比较差异有统计学意义(P<0.01)。MTT检测转染前FU不同浓度(30,60,120,240μg/mL)四个亚组作用后细胞存活率分别为(95.60±2.11)%,(90.20±0.86)%,(83.10±3.12)%和(74.60±1.32)%;转染后存活率为(91.30±1.43)%,(84.6±2.13)%,(73.2±1.52)%和(65.5±0.94)%。TUNEL检测转染前FU不同浓度(30,60,120,240μg/mL)四个亚组作用后细胞凋亡率分别为(5.50±0.88)%,(10.20±1.64)%,(15.20±2.39)%和(25.10±2.59)%;转染后凋亡率(10.80±0.62)%,(15.70±1.32)%,(20.40±1.89)%和(34.90±2.54)%。转染后相同FU浓度下细胞存活率降低,凋亡率增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。MTT检测转染前PA不同浓度(0.2,2,10,20μg/mL)四个亚组作用后细胞存活率为(98.50±2.34)%,(95.20±1.32)%,(89.40±0.68)%和(82.70±1.73)%;转染后存活率为(94.2±0.78)%,(86.5±2.13)%,(78.7±1.34)%和(70.1±0.76)%。TUNEL检测转染前PA不同浓度(0.2,2,10,20μg/mL)四个亚组作用后细胞凋亡率分别为(2.4±1.07)%,(5.2±1.33)%,(10.5±2.41)%和(20.7±1.92)%;转染后凋亡率(5.46±2.13)%,(13.8±1.24)%,(21.2±2.39)%和(29.2±2.21)%。转染后相同PA浓度下细胞存活率降低,凋亡率增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:shRNA介导的GSTP1基因沉默可抑制雄激素非依赖型前列腺癌DUl45细胞增殖活性,诱导凋亡,并且其作用呈现时间依赖性,可提高其对于化学治疗的药物敏感性。 展开更多

关键词 前列腺癌细胞株DU145 短发卡状RNA 谷胱甘肽S-转移酶P1 化学治疗敏感性

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多西他赛对雄激素依赖型及非依赖亚型前列腺癌细胞中C-jun与雄激素受体相互作用的影响 被引量：2

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作者 陈玢屾 徐亚文 +4 位作者 徐啊白 刘春晓 郑少波 李虎林 许凯 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1461-1464,共4页

目的研究C-jun和雄激素受体(AR)在多西他赛处理的前列腺癌LNCaP细胞及其非雄激素依赖亚型LNCaP-bic细胞中的相互作用。方法采用多西紫杉醇处理雄激素依赖型LNCaP前列腺癌细胞及其亚型雄激素非依赖型LNCaP-bic细胞,采用荧光素酶分析检测A... 目的研究C-jun和雄激素受体(AR)在多西他赛处理的前列腺癌LNCaP细胞及其非雄激素依赖亚型LNCaP-bic细胞中的相互作用。方法采用多西紫杉醇处理雄激素依赖型LNCaP前列腺癌细胞及其亚型雄激素非依赖型LNCaP-bic细胞,采用荧光素酶分析检测AR及AP-1基因的表达,利用Western blotting,免疫沉淀方法分析C-jun以及AR的蛋白表达和相互作用。结果经多西他赛处理后,LNCaP-bic以及其父代LNCaP细胞AR和C-jun在基因表达水平均得到增强。Western blotting提示LNCaP-bic细胞中C-jun的磷酸化水平高于LNCaP细胞,同时其PSA蛋白表达也更强。免疫沉淀结果提示多西他赛使LNCaP-bic细胞株中的AR和C-jun有更高的相关作用。结论多西他赛可以激活AR非配体依赖的转录功能,AR和C-jun之间的相互作用可能影响多西他赛对前列腺癌的化疗结果。 展开更多

关键词 多西他赛 前列腺癌细胞 雄激素受体 C-JUN

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紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对前列腺癌细胞的抑制作用 被引量：3

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作者 刘征 杨为民 叶章群 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期352-354,共3页

目的探讨紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞的抑制作用。方法MTT法测定紫杉醇、TRAIL及紫杉醇联合TRAIL作用于LNCAP、Du145、PC3细胞后的细胞生存率,同时,用流式细胞技术测定3种细胞的凋亡率。结果2ng/ml TR... 目的探讨紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞的抑制作用。方法MTT法测定紫杉醇、TRAIL及紫杉醇联合TRAIL作用于LNCAP、Du145、PC3细胞后的细胞生存率,同时,用流式细胞技术测定3种细胞的凋亡率。结果2ng/ml TRAIL对LNCAP、PC3细胞有明显的抑制作用,但对Du145细胞抑制作用不明显;当TRAIL与紫杉醇联用则对3种癌细胞均显示出明显的抑制作用,且发生在给药24h后,72h时抑制作用最强。TRAIL对3种癌细胞有诱导凋亡作用,5ng/ml较2ng/ml作用强;紫杉醇与TRAIL联用明显增强诱导凋亡作用。结论紫杉醇与TRAIL联合应用能明显增强对LNCAP、Du145、PC3细胞的抑瘤效果和诱导凋亡作用。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 紫杉醇 前列腺癌细胞 细胞凋亡

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人前列腺癌细胞系PC-3中PTI-1 cDNA的克隆及序列分析 被引量：1

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作者 付振虹 王禾 +4 位作者 许彦鸣 武国军 袁建林 王成济 杨安钢 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期323-326,共4页

为获取人前列腺癌诱导基因家族新成员 ,以人前列腺癌细胞系PC 3的总RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增人前列腺癌诱导基因 1(PTI 1) ,将其亚克隆至克隆载体pUC19,进行测序 .将克隆得到的PTI 1基因片段与国外报道的人PTI 1基因编码区cDNA同源... 为获取人前列腺癌诱导基因家族新成员 ,以人前列腺癌细胞系PC 3的总RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增人前列腺癌诱导基因 1(PTI 1) ,将其亚克隆至克隆载体pUC19,进行测序 .将克隆得到的PTI 1基因片段与国外报道的人PTI 1基因编码区cDNA同源性为 99.3% ,但第 72 6、74 6、116 7、12 70、132 6、144 9、16 94和 16 95位碱基分别由A、A、C、C、A、A、T和C替代了文献中的C、C、G、G、G、C、C和T .其中 6个碱基的不同 ,导致了第 36、183、2 17、2 36、2 77和 35 9位密码子代表的氨基酸分别由Lys替代Gln ,Arg替代Gly ,Ala替代Gly ,Ser替代Gly ,Thr替代Pro和Arg替代Cys .将所获得的基因在GenBank登录 ,登录号为AF3974 0 3.结果提示 ,获得了PTI 1家族新成员 ,并且与EF 1α分子的同源性较已报道的PTI 1高 . 展开更多

关键词 人前列腺癌细胞系 PC-3 PTI-1 CDNA 克隆 序列分析

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低氧通过诱导自噬增强小鼠前列腺癌细胞的化疗抵抗作用 被引量：1

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作者 唐礼功 谢森 +3 位作者 潘铁军 李志雄 陈欢欢 井莹 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期651-655,共5页

目的探讨低氧对小鼠前列腺癌细胞化疗抵抗的影响及其可能的机制。方法将小鼠前列腺癌细胞RM-1分别在常氧(20%O2)和低氧(1%O2)条件下与化疗药物Cisplatin、Docetaxel共同培养,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Real-time PC... 目的探讨低氧对小鼠前列腺癌细胞化疗抵抗的影响及其可能的机制。方法将小鼠前列腺癌细胞RM-1分别在常氧(20%O2)和低氧(1%O2)条件下与化疗药物Cisplatin、Docetaxel共同培养,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Real-time PCR检测凋亡相关因子的表达;将自噬标志性分子LC3的质粒(GFP-LC3)转染至RM-1细胞,荧光显微镜下观察细胞自噬的情况。结果低氧条件可显著诱导RM-1细胞化疗抗性增加,与常氧条件相比,低氧条件下以化疗药物处理的细胞,其增殖显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),促凋亡基因Bax表达降低,而凋亡抑制基因Bcl-2表达升高;RM-1细胞转染GFP-LC3后发现,低氧可显著诱导RM-1细胞发生自噬;在低氧条件下,以化疗药物处理RM-1细胞时加入自噬抑制剂,可显著增加细胞对化疗的敏感性。结论低氧可显著增强前列腺癌细胞的化疗抗性,其机制可能是通过诱导前列腺癌细胞发生自噬所介导。 展开更多

关键词 前列腺癌细胞 低氧 自噬 化疗抵抗

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环六缩酚肽抑制人前列腺癌细胞增殖活性及作用机制研究 被引量：1

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作者 倪晓辰 张爱莉 +1 位作者 赵志红 史清文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1527-1530,共4页

目的研究从微生物次生代谢产物中纯化的3种环六缩酚肽对人前列腺癌细胞(PC-3)增殖的抑制作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法 MTT比色法检测细胞增殖抑制率;TUNEL技术检测PC-3细胞凋亡;Western印迹技术检测Bax和caspase-3蛋白的表... 目的研究从微生物次生代谢产物中纯化的3种环六缩酚肽对人前列腺癌细胞(PC-3)增殖的抑制作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法 MTT比色法检测细胞增殖抑制率;TUNEL技术检测PC-3细胞凋亡;Western印迹技术检测Bax和caspase-3蛋白的表达变化。结果 MTT法实验结果显示10μmol·L-1浓度的Pullularin C对PC-3细胞增殖有明显抑制作用,与对照组相比差异有显著性(P<0.01);TUNEL检测结果显示1μmol·L-1浓度的PullularinC处理组的细胞凋亡率明显高于阴性对照组(P<0.01);Western blot分析结果显示由Pullularin C处理的PC-3细胞中的Bax和caspase-3的表达与对照组相比有明显的增加(P<0.05)。结论 Pullularin C具有极强的抑制人前列腺癌细胞增殖作用,并可诱导其凋亡。Pullularin C诱导PC-3细胞凋亡可能通过Bax和caspase-3介导。 展开更多

关键词 环六缩酚肽 前列腺癌细胞 抑制活性 细胞凋亡Bax CASPASE-3

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异黄酮增加前列腺癌细胞放射敏感性 被引量：2

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作者 严森祥 郑树森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第3期239-244,共6页

目的 :研究异黄酮 ( genistein)与辐射联合应用对 DU14 5前列腺癌细胞放射敏感性的影响。方法 :雄激素非依赖型 DU14 5前列腺癌细胞在克隆形成试验中 ,接受不同浓度的 genistein和 /或合用辐射 ,比较 DU14 5细胞的存活率 ;用 DNA Ladde... 目的 :研究异黄酮 ( genistein)与辐射联合应用对 DU14 5前列腺癌细胞放射敏感性的影响。方法 :雄激素非依赖型 DU14 5前列腺癌细胞在克隆形成试验中 ,接受不同浓度的 genistein和 /或合用辐射 ,比较 DU14 5细胞的存活率 ;用 DNA Ladder检测细胞凋亡 ,并辅以 TUNEL法观察凋亡形态 ;流式细胞仪和免疫印迹法分别观察细胞周期改变和相关蛋白表达。结果 :克隆形成试验显示 ,genistein在较低或中等浓度 ( 5～ 15μmol/ L )时 ,即可提高DU14 5细胞的放射敏感性 ;单独辐射和 /或合用 genistein 2 4 h后 ,细胞凋亡主要见于高浓度 genistein( >30μmol/L )处理组 ,72 h后凋亡亦见于较低浓度 genistein组 ;当 genistein与辐射合用时 ,可产生 G2 / M细胞周期阻滞 ,72 h后得到大部维持并伴有凋亡和超二倍体细胞群的出现 ;细胞周期相关蛋白分析提示 ,随着 genistein浓度的提高 ,周期素 B1呈明显双相改变 ,cdc- 2亦呈类似改变 ,但较轻微 ,而 p2 1cip1则稳步上升。结论 :genistein可提高 DU14 5前列腺癌细胞的放射敏感性 ,其机理可能与凋亡细胞的增加 。 展开更多

关键词 DU145 前列腺癌细胞 异黄酮 辐射效应 凋亡 细胞周期

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同源异型盒基因EN2在前列腺癌细胞中的表达及意义 被引量：1

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作者 赖彩永 苏泽轩 +4 位作者 叶东明 刘玉峰 梁蔚波 陈洁 黄维佳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期1721-1724,共4页

目的:探讨同源异型盒基因EN2 mRNA及蛋白在前列腺癌细胞及人前列腺上皮细胞中的表达差异及意义。方法:体外培养激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞、激素非依赖性前列腺癌DU145及PC-3细胞,以人前列腺上皮RWPE-1细胞为对照,采用RT-qPCR法及West... 目的:探讨同源异型盒基因EN2 mRNA及蛋白在前列腺癌细胞及人前列腺上皮细胞中的表达差异及意义。方法:体外培养激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞、激素非依赖性前列腺癌DU145及PC-3细胞,以人前列腺上皮RWPE-1细胞为对照,采用RT-qPCR法及Western blot法检测上述细胞中的同源异型盒基因EN2 mRNA及蛋白水平。结果:RT-qPCR分析显示,与RWPE-1细胞相比,EN2 mRNA在LNCaP细胞中的表达上调35倍,在DU145及PC-3细胞中的表达上调4.6及4.9倍。Western blot分析显示,RWPE-1细胞中未见EN2蛋白表达,LNCaP细胞、DU145细胞及PC-3细胞中EN2蛋白高表达。结论:同源异型盒基因EN2 mRNA及蛋白在前列腺癌细胞中表达增高,提示其与前列腺癌发生发展相关。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 EN2 前列腺癌细胞 人前列腺上皮细胞

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CD151基因对前列腺癌细胞增殖、转移的促进作用及其机制

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作者 林敬阳 刘正湘 +4 位作者 左后娟 刘毓 程忠良 张洁 汪道文 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期188-191,共4页

目的研究人前列腺癌细胞株PC3细胞转染CD151基因后其增殖和迁移能力的变化及机制。方法用FuGENE HD分别将质粒pAAV-CD151(CD151组)、pAAV-GFP(GFP组)转染入PC3细胞,并设加入等体积PBS的对照组。48 h后采用Western blot检测CD151蛋白... 目的研究人前列腺癌细胞株PC3细胞转染CD151基因后其增殖和迁移能力的变化及机制。方法用FuGENE HD分别将质粒pAAV-CD151(CD151组)、pAAV-GFP(GFP组)转染入PC3细胞,并设加入等体积PBS的对照组。48 h后采用Western blot检测CD151蛋白、磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)和总ERK的表达。采用MTT法检测CD151基因对PC3细胞增殖的影响,采用Boyden趋化小室研究CD151基因对PC3细胞迁移的影响。结果与对照组和GFP组相比,CD151组的CD151蛋白表达水平明显增加(均P<0.05);磷酸化ERK的表达量亦明显高于其它两组;细胞增殖能力比对照组和GFP组明显增高[相对吸光度值分别为:(0.245 7±0.006 4)vs(0.175 2±0.007 4)、(0.179 0±0.008 4)];细胞迁移数(107.8±9.6)亦显著高于对照组和GFP组[(53.0±7.6)和(57.0±5.2),P<0.05]。结论 CD151在前列腺癌细胞的增殖、转移中起着重要作用,是肿瘤转移的重要分子基础,其分子机制可能是CD151对ERK信号通路的激活。 展开更多

关键词 CD151基因 前列腺癌细胞 细胞迁移 细胞外信号调节激酶

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人高转移性和低转移性前列腺癌细胞株荧光差异凝胶电泳图像分析

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作者 李群 李一雷 +5 位作者 常明 杨新宇 王志新 梅红 夏阳 李玉林 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期343-346,共4页

目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法:应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分... 目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法:应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析并识别细胞间的差异表达蛋白质。结果:应用DIGE进行分离后,成功地获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)成功鉴定出11种蛋白质,其中9个蛋白质点仅在PC-3中有表达,2个蛋白质点仅在PC-3M中有表达。结论:人高、低转移前列腺癌细胞株的蛋白质组表达存在明显差异,这些差异蛋白质有可能为进一步发现前列腺癌转移相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据。 展开更多

关键词 蛋白质组 差异凝胶电泳 人前列腺癌细胞株 差异表达

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植物性功能食品原料在前列腺癌细胞22RV1中的雄激素效应及其机制研究

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作者 陆玲 胡春艳 +1 位作者 李忠 汪之顼 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期897-901,共5页

目的 :研究植物性功能食品原料(当归、甘草、布渣叶)是否具有类雄激素效应,并初步探讨其机制。方法 :采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt(MTS)法检测植物性功... 目的 :研究植物性功能食品原料(当归、甘草、布渣叶)是否具有类雄激素效应,并初步探讨其机制。方法 :采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt(MTS)法检测植物性功能食品原料提取物对雄激素受体阳性前列腺癌细胞22RV1增殖的影响;采用real-time PCR法检测提取物对雄激素受体转录活性的影响。结果:布渣叶提取物与对照组相比,能够促进22RV1细胞的增殖,并且能够诱导雄激素受体靶基因PSA的表达,当加入雄激素受体抑制剂后,细胞活性和PSA水平均明显下降,当归和甘草提取物与对照相比并没有明显改变;ERK1/2的抑制剂U0126也可抑制布渣叶提取物介导的细胞增殖和PSA的表达。结论:在当归、甘草、布渣叶3种植物提取物中,布渣叶具有雄激素效应,并且这种效应依赖雄激素受体途径;ERK1/2信号通路参与了布渣叶提取物介导的雄激素效应。 展开更多

关键词 植物性功能食品 雄激素受体 雄激素效应 ERK1 2 雄激素依赖性前列腺癌细胞22RV1

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