超声分子影像组学评估前列腺癌前列腺特异膜抗原表达:实验研究 被引量：1

1

作者 李蓉 黄钊希 +2 位作者 黄方易 袁晗 高泳 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2024年第3期327-331,共5页

目的 观察超声分子影像组学评估前列腺癌(PCa)前列腺特异膜抗原(PSMA)表达的价值。方法 分别于裸鼠皮下接种22RV1细胞(PSMA阳性表达,n=9)或PC-3细胞(PSMA阴性表达,n=10),构建不同PSMA表达水平人前列腺癌细胞移植瘤裸鼠模型。制备靶向PSM... 目的 观察超声分子影像组学评估前列腺癌(PCa)前列腺特异膜抗原(PSMA)表达的价值。方法 分别于裸鼠皮下接种22RV1细胞(PSMA阳性表达,n=9)或PC-3细胞(PSMA阴性表达,n=10),构建不同PSMA表达水平人前列腺癌细胞移植瘤裸鼠模型。制备靶向PSMA的超声纳米泡(PSMA-NB),进行表征检测及体内、外超声分子成像。以7∶3比例将裸鼠随机分为训练集及测试集,提取训练集纹理特征,以组内相关系数、单因素分析、最小绝对收缩和选择算子等方法筛选特征,构建超声分子影像组学模型,并评估模型诊断PSMA阳性PCa的效能。结果 所制备PSMA-NB平均粒径为(392.2±31.56)nm, Zeta电位为(-29.3±0.95)mV,体外显像效果理想,稳定性好。共基于训练集数据提取1 561个纹理特征,最终筛选出3个特征,包括exponential_glszm_ZoneVariance、wavelet_HHH_gldm_SmallDependenceLowGrayLevelEmphasis及logarithm_gldm_DependenceVariance,以之构建的超声分子影像组学模型诊断训练集、测试集PSMA阳性表达PCa的曲线下面积分别为0.950、0.875。结论 基于靶向PSMA超声分子影像组学模型可用于评估PCa裸鼠PSMA表达。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 超声检查 动物实验 前列腺特异膜抗原

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新型前列腺特异膜抗原剪接变异体的发现及临床意义初步探讨 被引量：7

2

作者 曹开源 戴淑琴 +4 位作者 肖娜 徐霖 袁广卿 丘少鹏 黄小荣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期2185-2188,共4页

目的:探讨前列腺特异膜抗原(PSMA)及其与前列腺癌发生、发展的关系,寻求更为特异的前列腺癌诊断和治疗的靶点。方法:采用RT-PCR和DNA测序技术,克隆PSMA基因新的剪接变异体,并根据其序列信息,设计特异性引物,检测其在不同病变前列腺组织... 目的:探讨前列腺特异膜抗原(PSMA)及其与前列腺癌发生、发展的关系,寻求更为特异的前列腺癌诊断和治疗的靶点。方法:采用RT-PCR和DNA测序技术,克隆PSMA基因新的剪接变异体,并根据其序列信息,设计特异性引物,检测其在不同病变前列腺组织及不同组织来源肿瘤细胞中的表达。结果:发现了一种新的PS-MA剪接变异体,其在前列腺癌、前列腺增生及正常前列腺组织中的表达率分别为92.6%、78.8%及10.0%,且特异表达于前列腺癌LNCaP细胞株,而在前列腺癌PC3细胞株、膀胱癌、肾癌、肝癌细胞株中均不表达。结论:发现了一种新型PSMA剪接变异体(定名为PSMA5),并证实该变异体与前列腺癌及前列腺增生有明显相关性,为研究前列腺癌的发生机制和寻求前列腺癌特异性诊治靶点提供了新的线索。 展开更多

关键词 前列腺特异膜抗原 剪接变异体 前列腺肿瘤

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前列腺特异膜抗原在Pichia pastoris酵母中的表达及鉴定 被引量：2

3

作者 叶传忠 赵旭东 +3 位作者 许明 李平作 张永康 陈常庆 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期352-355,共4页

前列腺特异膜抗原是一种具有高度前列腺特异性的糖蛋白 ,其表达的增高与肿瘤的术后复发、激素抵抗及较差的预后正相关 ,在前列腺癌的诊断和治疗中有广泛的应用前景 .从前列腺癌组织提取总RNA ,利用RT PCR技术获得PSMA基因的全长序列 ,... 前列腺特异膜抗原是一种具有高度前列腺特异性的糖蛋白 ,其表达的增高与肿瘤的术后复发、激素抵抗及较差的预后正相关 ,在前列腺癌的诊断和治疗中有广泛的应用前景 .从前列腺癌组织提取总RNA ,利用RT PCR技术获得PSMA基因的全长序列 ,构建了重组酵母表达载体pPIC3.5K PSMA .电击法转化Pichiapastoris酵母 ,通过表型筛选和PCR鉴定证实该基因已稳定整合入Pichiapastoris酵母基因组中 .SDS PAGE显示 ,获得的PSMA蛋白分子量约 10 0kD ,表达产物经West ern印迹证实可特异地与PSMA单克隆抗体 4G5结合 .结果表明 ,成功地获得PSMA编码的cDNA并在酵母细胞中获得表达 . 展开更多

关键词 前列腺特异膜抗原 毕赤酵母 基因表达 鉴定

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抗前列腺特异膜抗原单克隆抗体的标记及在荷瘤裸鼠体内的分布研究 被引量：2

4

作者 徐鸿绪 王晓波 +2 位作者 曾文涛 梅骅 刘长征 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期409-411,417,共4页

目的:研究125I标记的抗前列腺特异膜抗原(PSM A)单克隆抗体(125I-Ed-5)及正常小鼠IgG(125I-NM IgG)在荷人前列腺癌瘤裸鼠体内的分布,探讨应用125I-Ed-5进行放射免疫显像诊断和放射免疫治疗实验性人前列腺癌的可行性。方法:建立荷人前列... 目的:研究125I标记的抗前列腺特异膜抗原(PSM A)单克隆抗体(125I-Ed-5)及正常小鼠IgG(125I-NM IgG)在荷人前列腺癌瘤裸鼠体内的分布,探讨应用125I-Ed-5进行放射免疫显像诊断和放射免疫治疗实验性人前列腺癌的可行性。方法:建立荷人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,用125I标记抗PSM A单克隆抗体Ed-5和NM IgG,125I-Ed-5和125I-NM IgG经尾静脉注入荷瘤裸鼠体内,于注射后24、48、72、120小时分批处死,测定肿瘤和血液、肝、肺等重要脏器的单位重量放射性比值(T/NT)、各组织摄取百分比(%ID/g),研究其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布情况。结果:125I-Ed-5的标记率为72.3%,放射性比活度为55.2M Bq/m g,放射性化学纯度是90.2%,免疫活性分数为63%。在注射125I-Ed-5后24～120小时内,裸鼠体内肿瘤部位出现选择性放射性浓聚;各组织的T/NT比值在72h达到最高,其中肿瘤/肌肉高达6.36。而在注射125I-NM IgG的对照组中,裸鼠体内未见放射性浓聚,呈全身均匀性分布。结论:标记后的125I-Ed-5免疫活性没有改变,在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有靶向定位作用,为进一步应用125I-Ed-5进行前列腺癌放射免疫显像和放射免疫治疗的实验研究奠定基础。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 前列腺特异膜抗原 单克隆抗体 分布

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前列腺特异膜抗原的结构模型研究

5

作者 叶传忠 林传捷 +4 位作者 张芳林 张磬 叶敏 陈建华 黄云腾 《上海第二医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第6期481-484,共4页

目的对前列腺特异膜抗原(PSMA)进行结构模建并尝试其小分子抑制物的设计。 方法通过网络资源和分子设计软件SYBYL进行PSMA的三维模建和小分子抑制物的设计。 结果以气单胞菌氨肽酶(AMP)的晶体结构为模板使用Composer模块,获得PSMA胞外... 目的对前列腺特异膜抗原(PSMA)进行结构模建并尝试其小分子抑制物的设计。 方法通过网络资源和分子设计软件SYBYL进行PSMA的三维模建和小分子抑制物的设计。 结果以气单胞菌氨肽酶(AMP)的晶体结构为模板使用Composer模块,获得PSMA胞外区三维结构模型。采用分子对接方法,以AMP和p-碘基-D-苯丙酸-氧肟酸(AIDPH)的复合物晶体结构IIGB为参照,将AIDPH对接到PSMA的结构上,相对应形成疏水作用一端的残基为Y279、Y294、Y298及Y301,与IIGB的晶体结构中的蛋白-抑制剂间的疏水作用非常相似,相对应于另一端形成氢键的4个残基中有3个相同,说明两个复合物氢键形成的方式大体一致。 结论成功获得PSMA三维结构的理论模型。AIDPH有望作为设计PSMA靶向性药物的前导基团。 展开更多

关键词 前列腺特异膜抗原 结构模型 串线法 药物设计 前列腺癌

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前列腺特异膜抗原基因的克隆和真核表达

6

作者 戴淑琴 王军业 +2 位作者 曹开源 徐霖 袁广卿 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期38-40,共3页

【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定... 【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定 PSMA 蛋白的表达。【结果】序列测定结果表明,两条引物之间的片段长度为2279bp,与预期长度一致。将克隆的编码区序列与 GenBank 的 PSMA 序列进行 Blast 对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100ku。【结论】成功扩增了 PSMA 编码区序列,构建了 PSMA 真核表达载体,建立了 PSMA 稳定表达的细胞株。经免疫分析,证实了真核细胞内表达的 PSMA 为分子质量正确的膜蛋白,且具有良好的抗原性。所获得的 PSMA 真核表达系统为进一步研究 PSMA 基因修饰的 DCs 疫苗对前列腺癌的治疗提供了物质基础。 展开更多

关键词 前列腺特异膜抗原 克隆 分子 真核表达

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前列腺特异性膜抗原PET/CT对减少前列腺癌过度穿刺活检的应用价值 被引量：1

7

作者 张继燊 谢玉洁 +2 位作者 杨婷 焦举 何朝辉 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2025年第2期311-317,共7页

【目的】评估前列腺特异性膜抗原(PSMA)PET/CT在前列腺穿刺活检筛查中的应用效果,提出基于PSMA PET/CT检查的前列腺癌穿刺活检策略。【方法】回顾性分析2020年1月至2023年12月期间155例可疑前列腺癌患者穿刺活检前的PSMA PET/CT图像和... 【目的】评估前列腺特异性膜抗原(PSMA)PET/CT在前列腺穿刺活检筛查中的应用效果,提出基于PSMA PET/CT检查的前列腺癌穿刺活检策略。【方法】回顾性分析2020年1月至2023年12月期间155例可疑前列腺癌患者穿刺活检前的PSMA PET/CT图像和临床病理资料。采用PRIMARY评分作为PSMA PET/CT诊断前列腺癌的标准化评估方法,比较不同PRIMARY评分筛选前列腺穿刺患者的活检阳性率、漏诊患者比例及避免活检患者比例。使用ROC曲线分析PSA及其衍生指标,选出最适合与PRIMARY评分联合应用的补充筛查指标,评估两者联用对降低漏诊患者比例的效果。【结果】PRIMARY评分1~5分的病例中前列腺的患者比例分别为15.8%(3/19),17.1%(7/41),50%(12/24),95.2%(20/21),98%(49/50)。以PRIMARY评分3~5分作为筛选策略的活检阳性率为85.3%,避免活检患者比例为38.7%,漏诊率为11%。以PSA密度>0.15 ng/(mL·cm³)作为辅助筛选标准,能有效检出PRIMARY评分1~2分病例中的前列腺癌患者,与PRIMARY评分3~5分筛选策略联合应用,可使活检漏诊率降低至2.2%。【结论】本研究提出一种新的PSMA PET/CT应用于可疑前列腺癌患者穿刺活检的筛选策略,即对PRIMARY评分3~5分或PRIMARY评分1~2分但PSA密度>0.15 ng/(mL·cm³)的患者进行活检。该综合策略能够有效避免不必要的活检,同时显著降低漏诊率。 展开更多

关键词 前列腺穿刺 前列腺癌 PET/CT 前列腺特异膜抗原 前列腺特异抗原密度

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^(18)F-PSMA-1007 PET/CT与mp-MRI对前列腺癌的检测效能及与病理分级的相关性研究 被引量：3

8

作者 周云舒 陈晓华 +6 位作者 陈志强 张若弟 刘世莉 王卓 张少茹 李鹏 李艳梅 《磁共振成像》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期71-76,96,共7页

目的探讨18氟标记前列腺特异性膜抗原-1007正电子发射计算机体层摄影(fluorine-18 prostate specific membrane antigen 1007-positron emission tomography/computed tomography,^(18)F-PSMA-1007 PET/CT)与多参数磁共振成像(multi-par... 目的探讨18氟标记前列腺特异性膜抗原-1007正电子发射计算机体层摄影(fluorine-18 prostate specific membrane antigen 1007-positron emission tomography/computed tomography,^(18)F-PSMA-1007 PET/CT)与多参数磁共振成像(multi-parameter magnetic resonance imaging,mp-MRI)单独及联合对前列腺癌(prostate cancer,PCa)的检测效能,并比较最大标准化摄取值(maximum standardized uptake value,SUV_(max))、表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)、SUV_(max)/ADC、T1、T2、质子密度(proton density,PD)值与PCa病理分级的相关性。材料与方法回顾性分析我院2020年4月至2022年9月疑似PCa并拟行穿刺活检或手术的患者病例,最终50例患者被纳入研究,其中42例确诊PCa。按照国际泌尿病理协会(International Society of Urological Pathology,ISUP)分级共分为5组,包括中高级别组(分级≥4)25例和低级别组(分级1~3)17例,比较不同分组的SUV_(max)、ADC及SUV_(max)/ADC的差异。采用Spearman相关分析SUV_(max)、ADC、SUV_(max)/ADC、T1、T2、PD值之间的相关性及分别与ISUP分级的相关性。以病理为金标准,分析^(18)F-PSMA-1007 PET/CT与mp-MRI单独及联合对前列腺良恶性的检测效能。绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)并计算曲线下面积(area under the curve,AUC)、敏感度和特异度,评价SUV_(max)、ADC、SUV_(max)/ADC及联合参数诊断效能,通过DeLong检验比较AUC间的差异。结果PCa高级别组与低级别组的ADC值、SUV_(max)、SUV_(max)/ADC差异均有统计学意义(P均<0.001)。50例患者的ADC值与SUV_(max)呈负相关性(r=-0.516,P<0.05),42例确诊PCa患者的ADC值与ISUP分级呈负相关(r=-0.616,P<0.05),SUV_(max)、SUV_(max)/ADC与ISUP分级呈正相关(r=0.549、0.639,P均<0.05)。20例完成定量磁共振图像编译(magnetic resonance image compilation,MAGiC)序列患者T1、T2、PD值与ISUP分级无相关性(r=0.045、0.202、0.028,P均>0.05);T1、T2值与ADC值呈正相关(r=0.616,r=0.756,P均<0.05),PD值与ADC值呈负相关(r=-0.506,P<0.05)。SUV_(max)与T1、T2、PD值没有明显相关性(r=-0.132,r=-0.422,r=0.230,P均>0.05)。ROC曲线分析显示,SUV_(max)的AUC为0.940,差异有统计学意义(P<0.001),以7.80为临界值,诊断PCa的敏感度为83.33%,特异度为100.00%;ADC值的AUC为0.970,差异有统计学意义(P<0.001),以1.20×10^(-3)mm^(2)/s为临界值,诊断PCa的敏感度为95.24%,特异度为87.50%;SUV_(max)/ADC的AUC为0.970,差异有统计学意义(P<0.001),以6.43×10^(3)为临界值,诊断PCa的敏感度为90.48%,特异度为100%;SUV_(max)和ADC联合的AUC为0.976,差异有统计学意义(P<0.001),以0.85为临界值,诊断PCa的敏感度为90.48%,特异度为100.00%。结论联合^(18)F-PSMA-1007 PET/CT与mp-MRI可以提高对PCa的诊断效能;ADC值、SUV_(max)及SUV_(max)/ADC能够区分低危与中高危PCa。 展开更多

关键词 前列腺癌 前列腺特异度膜抗原 弥散加权成像 最大标准化摄取值 表观弥散系数 磁共振成像 肿瘤分级

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^(188)Re-7E11C5.3抑制前列腺癌细胞增殖 被引量：3

9

作者 陈维真 张勇 +3 位作者 卢汉平 梁昌盛 谢瑶 刘长征 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2051-2053,共3页

目的:探讨铼-188(188Re)标记前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3(188Re-7E11C5.3)对前列腺癌细胞系LNCaP的体外抑制作用。方法:采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物,纸层析法测定标记率和放化纯度,直线回归外推法测定免... 目的:探讨铼-188(188Re)标记前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3(188Re-7E11C5.3)对前列腺癌细胞系LNCaP的体外抑制作用。方法:采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物,纸层析法测定标记率和放化纯度,直线回归外推法测定免疫活性分数。四唑盐(MTT)法测定其体外细胞毒作用。结果:188Re-7E11C5.3的标记率为(93.16±2.18)%,放化纯度为(95.62±0.48)%,免疫活性分数为(74.86±1.86)%。188Re-7E11C5.3对LNCaP细胞的生长抑制作用明显强于188Re标记的正常鼠IgG(mIgG)和游离188ReO4-,其半数有效抑制浓度(IC50)分别为(23.38±3.73)×107Bq/L,(59.21±8.02)×107Bq/L和(68.89±10.91)×107Bq/L。结论:188Re-7E11C5.3能有效抑制体外培养LNCaP细胞的增殖,可用于前列腺癌的放射免疫治疗。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 放射免疫疗法 抗体 单克隆 前列腺特异膜抗原 铼-188

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铼-188和平阳霉素联合导向治疗前列腺癌的体外作用

10

作者 张勇 陈维真 +3 位作者 温星桥 梁昌盛 刘长征 高新 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期159-162,共4页

【目的】探讨前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3介导铼-188和平阳霉素(PYM)导向治疗前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用。【方法】以葡聚糖为中介体制备7E11C5.3-PYM偶联物,间接ELISA法测定免疫活性,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定抑... 【目的】探讨前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3介导铼-188和平阳霉素(PYM)导向治疗前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用。【方法】以葡聚糖为中介体制备7E11C5.3-PYM偶联物,间接ELISA法测定免疫活性,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定抑菌活性。采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物,纸层析法测定标记率和放化纯度,直线回归外推法测定免疫活性分数。四唑盐(MTT)法测定体外细胞毒作用。【结果】7E11C5.3-PYM偶联物中7E11C5.3和PYM的克分子比为1∶54,偶联后单抗的免疫活性降低了10%～20%,偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的25%。188Re-7E11C5.3的标记率为93.16%±2.18%,放化纯度为95.62%±0.48%,免疫活性分数为74.86%±1.86%。7E11C5.3-PYM和188Re-7E11C5.3对LNCaP细胞的抑制作用分别强于游离PYM和188ReO4-;两者单独用药时,其半数抑制浓度(IC50)分别为(10.17±2.06)μg/mL和(23.38±3.73)×104Bq/mL;两者联合用药时,其IC50值分别为(1.83±0.20)μg/mL和(6.82±0.73)×104Bq/mL。【结论】7E11C5.3-PYM和188Re-7E11C5.3联合用药对前列腺癌细胞的抑制作用显著强于单独用药。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 前列腺特异膜抗原 铼-188 平阳霉素

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RNAi沉默PSMA基因对前列腺癌LNCaP细胞生物学行为的影响 被引量：5

11

作者 曹开源 张甜 +4 位作者 徐霖 袁广卿 田小东 黄小荣 丘少鹏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1877-1881,共5页

目的:构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体,探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用。方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链,退火形成双链,连接入含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的pSilencer2.1-U6-neo真核表... 目的:构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体,探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用。方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链,退火形成双链,连接入含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的pSilencer2.1-U6-neo真核表达载体,双酶切及测序鉴定。使用脂质体转染的方法将重组质粒导入LNCaP细胞,G418筛选后RT-PCR、Western blotting检测其对PSMA基因干扰作用,并观察对LNCaP细胞生物学行为的影响。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建shRNA真核表达载体p-shRNA1,2,3转染LNCaP后,对细胞PSMA mRNA表达抑制率分别为33.15%、9.26%、41.97%,Western blotting结果显示对PSMA蛋白表达的抑制率分别为26.26%、6.47%、40.69%。选择抑制效率较高的p-shRNA3进行体外生长及侵袭力实验,发现干扰后对LNCaP细胞侵袭力增强,但是对细胞生长影响不大。结论:成功构建了人PSMA基因的RNAi的真核表达载体,并在LNCaP细胞中有效地发挥了对PSMA基因表达的干扰作用,初步发现PSMA在前列腺癌的侵袭中起负向调节作用,为进一步研究PSMA的生物学功能,探索前列腺癌的发病机制奠定一定的实验基础。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 前列腺癌特异膜抗原 RNA干扰

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STEAP1基因的体外转录

12

作者 潘玉琢 李扬 +3 位作者 赵丹 毛建华 孙连坤 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1454-1456,共3页

目的:建立STEAP1基因的体外转录模型,为进一步研究其功能奠定基础。方法:应用RT-PCR的方法从前列腺癌组织中钓取STEAP1全长cDNA,TA克隆后测序,亚克隆入pSP64载体,构建体外转录用载体STEAP1-pSP64。同时,通过PCR构建具有SP6RNA聚合酶结... 目的:建立STEAP1基因的体外转录模型,为进一步研究其功能奠定基础。方法:应用RT-PCR的方法从前列腺癌组织中钓取STEAP1全长cDNA,TA克隆后测序,亚克隆入pSP64载体,构建体外转录用载体STEAP1-pSP64。同时,通过PCR构建具有SP6RNA聚合酶结合位点的STEAP1体外转录盒。应用体外转录试剂盒,对比STEAP1-pSP64与STEAP1体外转录盒转录效率。结果:(1)成功从人前列腺癌组织中钓取了STEAP1全长cDNA,测序发现无一碱基错配。(2)成功构建了STEAP1-pSP64载体和STEAP1体外转录盒,两者转录效率的比较表明STEAP1-pSP64载体转录RNA的量明显高于STEAP1体外转录盒。结论:成功构建了两种STEAP1体外转录模型,并证明STEAP1-pSP64载体的转录效率高于STEAP1体外转录盒。本研究为进一步研究STEAP1的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 基因 STEAP1 前列腺肿瘤 pSP64载体 前列腺特异6次跨膜上皮抗原

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