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原位杂交检测增生和癌变前列腺组织中前列腺分泌蛋白94mRNA的表达
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作者 刘立忠 刘丽 +2 位作者 谢宝树 冷爱军 曹颖 《解放军医学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期106-108,共3页
根据前列腺分泌蛋白 94(PSP94)和PSP5 7的基因结构特点 ,设计并合成了以地高辛标记的两条探针 ,利用组织原位杂交的方法 ,对增生和癌变前列腺组织中PSP94mRNA的表达量进行了比较。结果显示 ,2 0例增生前列腺组织 ,有 1 0例PSP94和PSP5 ... 根据前列腺分泌蛋白 94(PSP94)和PSP5 7的基因结构特点 ,设计并合成了以地高辛标记的两条探针 ,利用组织原位杂交的方法 ,对增生和癌变前列腺组织中PSP94mRNA的表达量进行了比较。结果显示 ,2 0例增生前列腺组织 ,有 1 0例PSP94和PSP5 7共同探针的杂交信号比PSP94特异探针杂交信号强 ,1 0例相反。它们的共同点是均以腺体增生为主。而 7例前列腺癌组织中除 1例外 ,其余 6例PSP94特异探针的杂交信号均比PSP94和PSP5 7共同探针的杂交信号强。增生和癌变前列腺组织杂交结果比较 ,癌变前列腺组织PSP94特异探针杂交信号均比增生前列腺组织强。 展开更多
关键词 原位杂交 前列腺分泌蛋白 前列腺肿瘤 mRNA
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人PSP94的分泌表达及其表达产物抗前列腺癌作用 被引量:2
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作者 刘丽 刘建香 +4 位作者 刘立忠 石缨 谢宝树 冷爱军 曹颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期542-545,共4页
将编码人 94个氨基酸的前列腺分泌蛋白 ( PSP94) c DNA与酵母整合载体 p PICZαA重组 ,构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞 GS1 1 5,获得了 PSP94在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞 .诱导后的培养物中 ,rh PSP94表达量约为 0 .9m... 将编码人 94个氨基酸的前列腺分泌蛋白 ( PSP94) c DNA与酵母整合载体 p PICZαA重组 ,构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞 GS1 1 5,获得了 PSP94在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞 .诱导后的培养物中 ,rh PSP94表达量约为 0 .9mg/L,分子量约 1 6.5k D.培养上清经离子交换层析纯化后 ,目的蛋白的纯度为 92 % .体外在人前列腺癌细胞上活性分析表明 ,rh PSP94以1 0 0μg/L ,对该细胞的抑制率 2 0 .4% ;单纯新型 TNF,以 1 0 3 U/ml,抑制率 2 9.8% ;rh PSP94和新型 TNF以上述同样剂量联合应用 ,抑制率为 86.3% .提示 PSP94在体外对抗前列腺癌细胞有杀伤作用 ,但不明显 ;PSP94与新型 TNF联合应用 ,可使抑制率明显提高 ,可能 PSP94与新型 TNF有协同抗前列腺癌的作用 . 展开更多
关键词 前列腺分泌蛋白 TNF衍生物 前列腺 抗肿瘤
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前列腺精子结合蛋白的二维凝胶电泳及质谱分析 被引量:1
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作者 骆建民 谢江新 王俐 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期601-606,621,共7页
【目的】应用精子膜蛋白亲和层析柱分离金黄地鼠前列腺精子结合蛋白,并用二维电泳和质谱对金黄地鼠前列腺精子膜结合蛋白进行初步分析。【方法】应用附睾精子膜亲和层析柱纯化前列腺精子结合蛋白,采用二维凝胶电泳对纯化的前列腺精子膜... 【目的】应用精子膜蛋白亲和层析柱分离金黄地鼠前列腺精子结合蛋白,并用二维电泳和质谱对金黄地鼠前列腺精子膜结合蛋白进行初步分析。【方法】应用附睾精子膜亲和层析柱纯化前列腺精子结合蛋白,采用二维凝胶电泳对纯化的前列腺精子膜结合蛋白进行蛋白分离和图像分析,并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点;RT-PCR检测已鉴定蛋白在前列腺及未受精卵子中的mRNA的表达。【结果】附睾精子膜蛋白亲和层析柱可纯化出前列腺结合蛋白,前列腺附睾精子膜蛋白结合蛋白的二维凝胶电泳蛋白图谱。分离的蛋白质斑点为30个,质谱鉴定出2个蛋白点,一为热休克蛋白105,另一羰基还原酶(NADPH)-3。前列腺和未受精卵中均表达热休克蛋白105和羰基还原酶-3的mRNA。【结论】自前列腺分泌物中分离出精子膜结合蛋白,金黄地鼠前列腺中精子结合蛋白经双向电泳及飞行质谱分析鉴定出蛋白热休克蛋白和羰基还原酶。 展开更多
关键词 前列腺分泌蛋白 附睾精子膜蛋白 二维凝胶电泳 质谱
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重组分泌型人PSP94对前列腺癌细胞株PC-3抑制作用的研究
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作者 郭丛慧 田长生 +5 位作者 赵丹 高瑞娟 谭岩 姜艳芳 狄茜 赵雪俭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第2期94-97,共4页
目的:探讨重组分泌型人PSP94(rsHPSP94)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3生长的作用和作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测rsHPSP94对PC-3的抑制率。流式细胞仪检测细胞周期分布的变化。结果:rsHPSP94以剂量和时间依赖性抑制PC-3... 目的:探讨重组分泌型人PSP94(rsHPSP94)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3生长的作用和作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测rsHPSP94对PC-3的抑制率。流式细胞仪检测细胞周期分布的变化。结果:rsHPSP94以剂量和时间依赖性抑制PC-3的增殖,流式细胞仪分析表明细胞增殖阻滞在G_1期,并出现凋亡。结论:本实验结果表明rsHPSP94通过使细胞阻滞在G_1期抑制PC-3细胞的增殖。 展开更多
关键词 重组分泌型人PSP94 前列腺 PC-3 抑制作用 抗肿瘤 前列腺分泌蛋白
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正常人前列腺组织PSP mRNA的表达
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作者 刘丽 刘建香 +7 位作者 刘庆鑫 刘立忠 王颖 孟岩 谢宝树 冷爱军 苏旭 刘树铮 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期265-267,共3页
用RT-PCR和cDNA序列测定法分析5名正常中国人前列腺组织中前列腺分泌蛋白(PSP)mRNA的表达。结果表明,在这5名正常前列腺组织中均同时存在PSP94和PSP57cDNA,且基因序列与文献报道的从前列腺癌和增... 用RT-PCR和cDNA序列测定法分析5名正常中国人前列腺组织中前列腺分泌蛋白(PSP)mRNA的表达。结果表明,在这5名正常前列腺组织中均同时存在PSP94和PSP57cDNA,且基因序列与文献报道的从前列腺癌和增生前列腺组织中获得的完全一致。这可能对PSP进一步的基础研究和应用有一定的意义。 展开更多
关键词 前列腺分泌蛋白 MRNA 前列腺组织
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PSP94-TNFαD11a融合基因在NIH3T3细胞中的表达及其产物活性分析 被引量:2
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作者 刘庆鑫 刘丽 +4 位作者 石缨 刘立忠 王烨 杨彦 曹颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期194-197,共4页
为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片... 为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片段 ;以 PSP94c DNA为探针 ,对 RT-PCR产物进行 Southern印迹分析 .结果表明 :转染 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的 NIH3T3细胞 ,其 RT- PCR产物杂交信号为阳性 .细胞培养上清用 TNF抗体行 Western印迹和 ELISA分析 ,检测结果为阳性 .生物学活性分析表明 ,细胞培养上清不仅具有 PSP94抑制人前列腺癌细胞 PC- 3生长的活性 ,而且显示出 TNFα对 L92 9细胞的细胞毒作用 .以上结果表明 ,pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a质粒能够正确表达目的基因 PSP94- TNFα D1 1 a,且表达的 PSP94- TNFαD1 1 a融合蛋白具有预期的双重生物学活性 . 展开更多
关键词 前列腺分泌蛋白 TNFα衍生物 融合基因表达 活性 前列腺
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