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新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的分离鉴定与耐药性分析
1
作者 蔡扩军 徐敏 +2 位作者 孙鹏亮 夏利宁 赵红琼 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第1期464-475,共12页
旨在了解新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行情况与耐药特性。本研究从新疆奶牛集约化养殖集中的9个地区采集15个规模奶牛养殖场奶牛2083份临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样,对样品中的肺炎克雷伯菌进行分离培养、革兰染色,并采用PCR及16S... 旨在了解新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行情况与耐药特性。本研究从新疆奶牛集约化养殖集中的9个地区采集15个规模奶牛养殖场奶牛2083份临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样,对样品中的肺炎克雷伯菌进行分离培养、革兰染色,并采用PCR及16S rRNA测序进行鉴定,对分离菌株采用微量肉汤稀释法检测耐药情况。结果表明,从奶样中分离出266株肺炎克雷伯菌,分离率为12.8%(266/2083),临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样肺炎克雷伯菌分离率无显著差异(P>0.05)。采用微量肉汤稀释法测定266个分离株对16种抗菌药物的敏感性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,结果显示分离株对四环素、头孢噻呋、头孢吡肟、头孢噻肟和头孢唑林的耐药率较高(23.7%~41.0%)。16.9%(45/266)的分离株为多重耐药菌,6.4%(17/266)的分离株产ESBLs。结果提示,新疆15家规模化奶牛场乳腺炎肺炎克雷伯菌平均分离率在全国处于相对较低水平。分离株对四环素和头孢类抗菌药物具有较强的耐药性,本研究为掌握奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行特征及指导临床用药提供了依据。 展开更多
关键词 奶牛乳腺炎 肺炎克雷伯菌 分离鉴定 耐药特性
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四川肉牛源疣状毛癣菌的分离鉴定、系统发育分析与药敏试验
2
作者 王娅 李志国 +3 位作者 罗荣艳 刘瑞国 左之才 马晓平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期459-468,共10页
【目的】探究四川肉牛真菌性皮肤病的病原,为该病的防治提供参考。【方法】采集四川各地疑似皮肤癣病的患畜皮屑,用三点接种法将采集的样本接种于皮肤癣菌鉴别培养基,将分离得到的菌株经内部转录间隔区(ITS)序列扩增后通过NCBI数据库BL... 【目的】探究四川肉牛真菌性皮肤病的病原,为该病的防治提供参考。【方法】采集四川各地疑似皮肤癣病的患畜皮屑,用三点接种法将采集的样本接种于皮肤癣菌鉴别培养基,将分离得到的菌株经内部转录间隔区(ITS)序列扩增后通过NCBI数据库BLAST分析基因相似性并构建系统发育树,以10^(7) CFU/mL分离菌孢子悬液感染免疫抑制小鼠,观察临床症状和病理学特征,微量二倍稀释法探究分离菌耐药表型。【结果】从24个样本中分离到10株真菌(rntv01~rntv10)。PCR扩增结果显示,分离株均得到大小为681 bp的扩增片段;BLAST比对结果显示,分离株与疣状毛癣菌相似性为97%~100%;动物试验结果显示,免疫抑制小鼠感染该菌后皮肤出现被毛脱落、结痂、皮屑增多等症状,HE染色后观察到表皮角质层角化不全、炎性细胞增生,PAS染色后观察到大量菌丝侵染;药敏试验结果显示,除rntv10外,其余菌株对两性霉素B中介;分离菌对伊曲康唑敏感性不同,rntv09、rntv10敏感,rntv01、rntv04~rntv08中介,rntv02、rntv03耐药;rntv10对酮康唑敏感、对5-氟胞嘧啶中介,其余菌株均为耐药株;所有菌株对环吡酮胺中介,对氟康唑和特比萘芬耐药。【结论】四川肉牛真菌性皮肤病主要病原是疣状毛癣菌,该菌可引起小鼠皮肤的侵袭性感染,患病牛可用两性霉素B、伊曲康唑或环吡酮胺进行治疗。 展开更多
关键词 肉牛 疣状毛癣菌 分离鉴定 ITS序列 系统发育分析 药敏试验
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云南地区血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及生物学特性分析
3
作者 李富祥 宋建领 李占鸿 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期499-508,共10页
【目的】研究云南地区猪源胸膜肺炎放线杆菌的生物学特性。【方法】从云南红河州某猪场患呼吸道疾病猪肺脏中分离细菌,采用生化试验、16S rDNA序列分析和PCR扩增鉴定分离菌,并分析分离菌的血清型、致病性、药物敏感性和耐药基因等生物... 【目的】研究云南地区猪源胸膜肺炎放线杆菌的生物学特性。【方法】从云南红河州某猪场患呼吸道疾病猪肺脏中分离细菌,采用生化试验、16S rDNA序列分析和PCR扩增鉴定分离菌,并分析分离菌的血清型、致病性、药物敏感性和耐药基因等生物学特性。【结果】从病猪肺脏样品中分离到1株革兰阴性小球杆菌,将其编号为YN240724。生化鉴定结果显示,分离菌分解葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖和甘露醇产酸,氧化酶、尿素酶及硝酸盐还原试验呈阳性,其生化特性与胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)参考株相同。16S rDNA基因序列分析结果显示,分离菌与胸膜肺炎放线杆菌模式菌株ATCC 27088T和其他胸膜肺炎放线杆菌参考株间的16S rDNA序列相似性分别为100%和99.6%~100%;分离菌株与全部胸膜肺炎放线杆菌参考株形成同一个进化分支;基于上述特征分离菌YN24074被鉴定为胸膜肺炎放线杆菌。血清型鉴定结果显示,该分离菌为胸膜肺炎放线杆菌血清7型。耐药基因检测结果显示,分离菌携带β-内酰胺内耐药基因blaCIT和blaTEM以及四环素类耐药基因tetM。药敏试验结果显示,分离菌对氨基糖苷类(庆大霉素和阿米卡星)、喹诺酮类(氧氟沙星)、酰胺醇类(氟苯尼考)、四环素类(四环素)、磺胺类(磺胺甲噁唑)以及头孢类(头孢噻肟和头孢呋辛)敏感,对青霉素类(青霉素、氨苄西林和哌拉西林)以及糖肽类(万古霉素)耐药。致病性试验结果显示,分离菌对小鼠的半数致死量(LD_(50))为7.5×10^(4)CFU,致病性较强。【结论】本研究从云南地区分离获得1株猪源血清7型胸膜肺炎放线杆菌,其携带耐药基因blaCIT、blaTEM及tetM,对多种抗菌药物表现耐药,致病性较强。试验结果可为云南地区猪场猪传染性胸膜肺炎的治疗和免疫防控提供重要参考。 展开更多
关键词 猪 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 血清型 致病性
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2株猪源产肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定及毒力因子和耐药性分析
4
作者 马欣 刘博 +6 位作者 魏津 张效斌 朱良全 李霆 王琦 王雨雨 姚文生 《中国兽药杂志》 2026年第2期42-53,共12页
从湖南某猪场断奶后腹泻仔猪粪便中分离到2株疑似大肠杆菌,命名为H株和J株。为鉴定其致病性大肠杆菌类型,本研究将H株和J株分别接种伊红美蓝琼脂平板鉴别培养基和大肠杆菌IMViC生化鉴定试剂,并采取分子鉴定技术对其进行微生物种属鉴定;... 从湖南某猪场断奶后腹泻仔猪粪便中分离到2株疑似大肠杆菌,命名为H株和J株。为鉴定其致病性大肠杆菌类型,本研究将H株和J株分别接种伊红美蓝琼脂平板鉴别培养基和大肠杆菌IMViC生化鉴定试剂,并采取分子鉴定技术对其进行微生物种属鉴定;同时采取PCR扩增技术分析其携带大肠杆菌的肠毒素、黏附素以及α-溶血素、志贺样毒素2型变异体(Stx2e)、耶尔森氏菌毒力岛(HPI)等毒力因子情况。为了解H株和J株的耐药性,本研究使用微量肉汤稀释法对其进行最低抑菌浓度(MIC)测定,并参照CLSI M100-S33抗微生物药物敏感性试验执行标准进行耐药性分析。结果显示,H株、J株的伊红美蓝琼脂平板培养特性、大肠杆菌IMViC生化鉴定试验结果、分子鉴定结果均符合大肠杆菌典型特征;毒力因子分析结果为:H株为LT^(+)+STa^(+)+STb^(+)+EAST-1^(+)+F18^(+)+Stx2e^(+)+α-溶血素+,J株为STa^(+)+STb^(+)+HPI^(+);耐药性分析结果为:H、J株均对氨苄西林、四环素、氟苯尼考、磺胺异噁唑、复方新诺明耐药和对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、头孢他啶、恩诺沙星、美罗培南敏感;不同的是H株对大观霉素、粘杆菌素耐药和头孢噻呋中介,而J株对大观霉素、头孢噻呋敏感和粘杆菌素中介。本研究上述结果表明H株、J株均为产肠毒素型大肠杆菌(ETEC),但携带的毒力因子各不相同,且均存在多重耐药,与浙江、河北、江西、福建和广西的猪源ETEC耐药情况的比较分析表明养殖环节大肠杆菌耐药性具有复杂性。本研究既为大肠杆菌毒力因子研究和猪场防控大肠杆菌感染引起的仔猪断奶后腹泻病(PWD)提供了参考,也为如何减少兽用抗菌药的使用提供了新思路:兽用抗菌药+疫苗+益生菌+噬菌体+益生元的综合防控手段。 展开更多
关键词 猪源 产肠毒素型大肠杆菌 分离鉴定 毒力因子 耐药性
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猫源细小病毒上海株的分离鉴定及VP2基因遗传进化分析
5
作者 唐聪圣 刘健 +9 位作者 常晓静 夏炉明 张忠海 白艺兰 范玉凤 朱亭仪 桂亚萍 夏琦琦 王建 赵洪进 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第4期2071-2081,共11页
【目的】了解上海地区猫源细小病毒VP2基因遗传进化情况,丰富猫源细小病毒的流行病学,为其新型疫苗研究提供技术支持。【方法】对采自上海地区的14份疑似细小病毒感染的猫粪便拭子样品进行病毒分离,采用PCR扩增、间接免疫荧光试验(IFA)... 【目的】了解上海地区猫源细小病毒VP2基因遗传进化情况,丰富猫源细小病毒的流行病学,为其新型疫苗研究提供技术支持。【方法】对采自上海地区的14份疑似细小病毒感染的猫粪便拭子样品进行病毒分离,采用PCR扩增、间接免疫荧光试验(IFA)、病毒粒子形态学观察等方法对分离株进行鉴定,并对分离株VP2基因进行测序和遗传进化分析,进一步对VP2蛋白进行生物信息学分析。【结果】从14份样品中分离到4株病毒,PCR扩增序列与犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)CH-AH-D5、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)cat-2、FPV HN1806和FPV BFPV-1株VP2基因部分序列相似性达100%,分别命名为CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a、FPV/SH/CHN/01/2022、FPV/SH/CHN/02/2022和FPV/SH/CHN/03/2022。其中1株鉴定为CPV New CPV-2a亚型,另外3株鉴定为FPV。相似性比对显示,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株与FPV疫苗株CU-4、Purevax核苷酸序列相似性分别为98.2%和98.3%;相比标准株,分离株14个关键氨基酸位点均未发生变化,但是相比FPV疫苗株,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株VP2蛋白中有12个关键氨基酸位点发生突变。遗传进化分析显示,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株属于CPV分支,与CPV中国株06/09、CPV-G15同属一个亚分支;3株FPV分离株均属FPV分支,但是处于不同亚分支。相比FPV疫苗株,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株的抗原决定簇存在2个氨基酸位点突变,分别位于第93(K-N)和300位(A-G)氨基酸处;相比CPV疫苗株,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株抗原决定簇存在1个氨基酸位点差异,位于第300位氨基酸处(A-G);3株FPV分离株与FPV疫苗株抗原决定簇7个位点均保持一致。【结论】本研究从上海地区分离获得4株猫源细小病毒,其中1株为CPV New CPV-2a亚型,3株为FPV。研究结果为CPV New CPV-2a亚型感染猫提供了佐证,丰富了猫源细小病毒的流行病学,也为其新型疫苗研究提供了参考资料。 展开更多
关键词 细小病毒 分离鉴定 VP2基因 遗传进化
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甘肃源牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及全基因序列分析
6
作者 任晓婷 马晓霞 +4 位作者 安乐乐 王春林 刘泽煜 张丽娟 刘俊林 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第3期1500-1511,共12页
【目的】了解甘肃地区牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行株情况及其分子特征,为该地区BVDV防控提供参考。【方法】对前期检测为BVDV阳性的血清样本进行病毒分离,并利用靶向BVDV NS3蛋白的单克隆抗体对分... 【目的】了解甘肃地区牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行株情况及其分子特征,为该地区BVDV防控提供参考。【方法】对前期检测为BVDV阳性的血清样本进行病毒分离,并利用靶向BVDV NS3蛋白的单克隆抗体对分离毒株进行间接免疫荧光试验(IFA)鉴定。根据分离株全基因组测序结果,对其全基因组、5´-UTR、Npro及E2基因序列分别进行系统发育分析和相似性比对,对分离毒株关键蛋白Npro和E2进行生物信息学分析,并进一步了解分离毒株基因组同义密码子使用模式。【结果】BVDV阳性血清样本接种MDBK细胞盲传5代后未观察到典型的细胞病变情况,分离获得1株非细胞病变型(NCP)BVDV毒株,命名为BVDV 24GS-19,提交NCBI(登录号:PV806860.1)。IFA结果显示,分离株接种细胞后可观察到特异性红色荧光。相似性比对显示,分离毒株与BVDV CH0513株(登录号:MH901135.1)相似性达97.02%;遗传进化分析表明该毒株为BVDV-1b型。生物信息学分析显示,分离株Npro和E2蛋白不稳定指数分别为49.11和57.61,且存在氨基酸突变位点和磷酸化位点;E2蛋白存在N-糖基化和C-甘露糖基化位点;E2蛋白中预测到2个抗原表位(第250—269、687—706位氨基酸处)。同义密码子使用模式分析显示,该毒株对脯氨酸、精氨酸、丙氨酸和苏氨酸的同义密码子使用存在偏好性。【结论】本研究分离获得1株NCP型BVDV流行毒株,经基因组和遗传演化分析鉴定为BVDV-1b亚型,其与分离株BVDV CH0513相似性较高。本试验结果为甘肃地区牛病毒性腹泻的防控和疫苗研发提供了数据支撑。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分离鉴定 全基因序列 同义密码子
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产雌马酚菌株的筛选及分离鉴定
7
作者 刘铭洋 王晓丹 +4 位作者 路茹青 吕加平 逄晓阳 张书文 李柏良 《中国乳品工业》 北大核心 2026年第2期28-35,共8页
文章从健康人体肠道中分离出肠道菌群,利用大豆苷元作为底物,进行发酵试验,采用高效液相色谱对发酵液进行雌马酚含量测定,筛选出具有生产雌马酚能力的菌株并对其进行16S rRNA鉴定。结果表明,从人体中筛选出的127株肠道菌中能产生雌马酚... 文章从健康人体肠道中分离出肠道菌群,利用大豆苷元作为底物,进行发酵试验,采用高效液相色谱对发酵液进行雌马酚含量测定,筛选出具有生产雌马酚能力的菌株并对其进行16S rRNA鉴定。结果表明,从人体中筛选出的127株肠道菌中能产生雌马酚的菌株有5株,经鉴定分离得到的菌株为4株屎肠球菌和1株脆弱拟杆菌。分离得到的菌株在BHI液体培养基中,以pH 7.3、37℃厌氧培养48 h的条件下发酵。发酵液中脆弱拟杆菌的雌马酚产量最高,达到(26.21±0.94)μg/mL,4株屎肠球菌雌马酚产量分别为(22.74±0.76)、(11.35±0.89)、(16.48±0.99)μg/mL和(15.41±0.87)μg/mL。为了排除其他与雌马酚相似物质的干扰,在液相色谱检测的基础上利用液质法(Triple quadrupole mass spectrometry)对雌马酚进行验证,表明在发酵液中确实有雌马酚产生。 展开更多
关键词 肠道菌群 雌马酚 分离鉴定 益生菌 液质法
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高山锥叶的成分分离鉴定及其胰脂肪酶抑制活性研究
8
作者 袁红静 庞闹 +4 位作者 王亚凤 何瑞杰 刘章彬 李桂勤 黄永林 《广西植物》 北大核心 2026年第3期455-464,共10页
为系统探究高山锥叶中的化学成分,并明确其化合物对胰脂肪酶的抑制活性,该研究采用Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P、Diaion HP20SS、Toyopearl HW-40F等多种色谱柱交叉层析法,对高山锥叶80%甲醇提取物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱... 为系统探究高山锥叶中的化学成分,并明确其化合物对胰脂肪酶的抑制活性,该研究采用Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P、Diaion HP20SS、Toyopearl HW-40F等多种色谱柱交叉层析法,对高山锥叶80%甲醇提取物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱技术并结合文献对比鉴定化合物结构;基于4-甲基伞形酮油酸酯(4-MUO)荧光测定法构建体外胰脂肪酶抑制活性筛选模型,以奥利司他为阳性对照(IC_(50)=0.001 4 mmol·L^(-1)),评价单体化合物的胰脂肪酶抑制活性。结果表明:(1)从高山锥叶80%甲醇提取物中共分离得到19个化合物,分别鉴定为没食子酸(1)、丁香酸(2)、顺式对羟基肉桂酸(3)、反式对羟基肉桂酸(4)、dehydrodigallic acid(5)、3-O-β-D-(6′-O-galloyl)-glucopyranoside(6)、龙胆酸5-O-β-D-(6′-O-没食子酰基)-吡喃葡萄糖苷(7)、macarangioside E(8)、chesnatin(9)、茶倍素(10)、3-O-对香豆酰基奎宁酸(11)、5-O-咖啡酰基奎宁酸(12)、5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(13)、槲皮素(14)、杨梅素-3-O-葡萄糖苷(15)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(16)、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷(17)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸-6″-甲酯(18)、quercetin 3-O-(6″-O-galloyl)-β-D-galactopyranoside(hyperin 6″-gallate)(19)。(2)共筛选出12个对胰脂肪酶具有不同程度抑制活性的化合物,化合物6、7、12、17表现出较好的抑制活性。所有化合物均为首次从高山锥中分离得到,该研究为高山锥降脂作用的深入研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 高山锥 化学成分 分离鉴定 胰脂肪酶 抑制活性
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黑龙江省猪流行性腹泻病毒流行毒株分离鉴定与遗传进化分析
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作者 张欣欣 张岳 +6 位作者 崔安 李金儒 张芸菁 何丽霞 杨桂君 任玉东 李广兴 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期378-389,共12页
【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研... 【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研发提供参考依据。【方法】采集养猪场疑似猪流行性腹泻病料,利用Vero-E6细胞进行适应性培养获得病毒,并通过RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)对毒株进行分离鉴定。通过PCR分别扩增PEDV分离毒株的S1、S2和ORF3基因,构建重组质粒并测序鉴定,获得PEDV分离株的S、ORF3基因序列。将分离株与26株参考毒株的S和ORF3基因序列进行核苷酸序列相似性比对和遗传进化分析,确定分离毒株的所属亚群。【结果】在Vero-E6细胞上培养分离的PEDV毒株,感染细胞出现变形圆缩、折光性降低,细胞发生融合,后期细胞脱落出现空斑等典型细胞病变;RT-PCR和IFA检测显示,扩增均出现片段大小约600 bp的特异性条带,分离株感染细胞后均可与PEDV N蛋白单克隆抗体发生特异性反应,表明分离的3株病毒株均为PEDV,分别命名为HLJ、HLJ2020和HLJ2021株。成功构建PEDV各分离株的S1、S2和ORF3基因重组质粒并测序获得相应基因序列。核苷酸序列相似性比对与遗传进化树分析结果显示,PEDV HLJ与HLJ2020株为GⅠb亚群毒株,PEDV HLJ2021株归入GⅡc亚群。【结论】本研究从黑龙江地区腹泻猪小肠组织中成功分离获得3株PEDV流行毒株,其中分离毒株PEDV HLJ与PEDV HLJ2020属于GⅠb亚群,PEDV HLJ2021株属于GⅡc亚群。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 分离鉴定 S基因 ORF3基因 遗传进化分析
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珲春敬信湿地1株候鸟海雕源绿色气球菌的分离鉴定及致病性和药物敏感性分析
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作者 马振 王隆胜 +5 位作者 唐泽宇 闵鹏飞 赵健豪 王振宇 薛书江 贾立军 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第3期1434-1444,共11页
【目的】了解珲春敬信湿地候鸟海雕携带病原菌情况,建立病原数据库以识别潜在威胁,为候鸟海雕疫病防控提供科学依据。【方法】在珲春敬信湿地采集30份候鸟海雕新鲜粪便样本进行病原菌分离和纯化;对其革兰染色镜检、生化鉴定及16S rRNA基... 【目的】了解珲春敬信湿地候鸟海雕携带病原菌情况,建立病原数据库以识别潜在威胁,为候鸟海雕疫病防控提供科学依据。【方法】在珲春敬信湿地采集30份候鸟海雕新鲜粪便样本进行病原菌分离和纯化;对其革兰染色镜检、生化鉴定及16S rRNA基因PCR扩增与测序;对其进行BLAST对比、DNAStar相似性分析及Mega 11.0进化树构建;对其进行小鼠致病性试验;利用纸片扩散法检测分离菌株的药物敏感性。【结果】分离菌株为革兰阳性菌,呈四联球状。生化鉴定结果显示,该分离株赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、棉子糖、枸橼酸盐试验为阳性;硫化氢、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐等试验为阴性。16S rRNA基因PCR扩增出大小为1400 bp的单一目的条带,相似性比对结果显示,分离菌株(登录号:PP658446)与绿色气球菌K52(登录号:KU922455.1)和绿色气球菌K53(登录号:KU922464.1)的相似性分别为99.1%和99.0%,说明分离的菌株为绿色气球菌。小鼠致病性试验结果显示,与阴性对照组小鼠相比,接种0.5 mL 1×10^(8)和1×10^(9) CFU/mL浓度菌液的小鼠在12 h内死亡,接种0.5 mL 1×10^(6)和1×10^(7) CFU/mL浓度菌液的小鼠在7 d内死亡,并在各试验组小鼠的心脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑组织中扩增出1400 bp条带,各脏器组织也均出现多处细胞浸润和出血。药物敏感试验结果显示,分离菌株对头孢氨苄和万古霉素表现敏感;对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、米诺环素等8种药物表现敏感;对苯唑西林、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素等9种药物表现耐药,其中对链霉素药物耐药性最强。【结论】本研究从珲春敬信湿地海雕粪便中成功分离出1株具有耐药性的绿色气球菌,为珲春敬信湿地海雕肠道菌群的种类及用药研究提供了参考。 展开更多
关键词 珲春 海雕 绿色气球菌 分离鉴定 耐药性
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8株野生动物园爬行动物冬眠后初粪源乳酸菌的分离鉴定及益生特性评估
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作者 丁香 孙浩然 +3 位作者 伍国宏 王海燕 叶思明 刘文博 《动物营养学报》 北大核心 2026年第2期1569-1580,共12页
为筛选具有应用价值的乳酸菌,本研究从多种爬行动物冬眠后初粪中分离菌株,并进行鉴定及益生特性评价,以期获得微生态制剂候选株。采用平板划线法从25份爬行动物粪便样本中分离菌株,经溶血试验排除潜在致病菌后,结合生化鉴定与16S rRNA... 为筛选具有应用价值的乳酸菌,本研究从多种爬行动物冬眠后初粪中分离菌株,并进行鉴定及益生特性评价,以期获得微生态制剂候选株。采用平板划线法从25份爬行动物粪便样本中分离菌株,经溶血试验排除潜在致病菌后,结合生化鉴定与16S rRNA基因序列分析进行菌株鉴定。对筛选菌株分析其益生特性,包括生长和产酸能力、耐酸和耐胆盐能力、药敏性、抑菌活性及自凝性和疏水性,并通过动物安全性试验评估候选菌株安全性。结果表明,成功分离鉴定出8株乳酸菌,分别为4株粪肠球菌(Enterococcus faecalis),1株乳酸明串珠菌(Leuconostoc lactis),1株发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),1株河流漫游球菌(Vagococcus fluvialis),1株屎肠球菌(Enterococcus faecium)。8株乳酸菌在培养24 h后菌液pH均在4.5以下,产酸能力良好。8株乳酸菌均对氯霉素和氨苄西林敏感。菌株L25产酸能力、耐酸和耐胆盐能力以及对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的抑制能力均优于其他菌株。动物安全性试验表明,菌株L25和L30安全性良好。综上所述,本研究从多种爬行动物粪便中分离出8株乳酸菌,其中菌株L25具有良好的益生特性,可作为制备微生态制剂的候选菌株。 展开更多
关键词 爬行动物 粪便 乳酸菌 分离鉴定 益生特性
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乳源鼠李糖乳酪杆菌的分离鉴定及其体外益生 特性评价
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作者 吕舒婷 谭琳 +7 位作者 李俊玫 文兆海 闫书平 谭慧明 刘增援 巨向红 殷宏 李有全 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第3期1226-1236,共11页
【目的】为获得可用于动物益生菌制剂的潜在菌种资源,本研究从青海牧民传统酸奶中分离乳酸菌,重点鉴定其中的鼠李糖乳酪杆菌,并对其安全性、黏附性及抗菌性等关键益生特性进行评估。【方法】采用MRS琼脂培养基,在厌氧条件下对青海牧民... 【目的】为获得可用于动物益生菌制剂的潜在菌种资源,本研究从青海牧民传统酸奶中分离乳酸菌,重点鉴定其中的鼠李糖乳酪杆菌,并对其安全性、黏附性及抗菌性等关键益生特性进行评估。【方法】采用MRS琼脂培养基,在厌氧条件下对青海牧民传统酸奶中的乳酸菌进行分离纯化;通过菌落形态学观察结合16S rRNA基因测序比对进行菌种鉴定;采用绵羊血琼脂平板法测定酸奶样品中鼠李糖乳酪杆菌的溶血活性;通过蛋白酶与淀粉酶分泌试验分析代谢功能;采用自凝集试验、黏附试验及微生物黏附碳氢化合物法表征菌体表面的黏附潜力。采用纸片扩散法检测分离菌株对10种抗菌药物的敏感性,并运用琼脂扩散法评估其对多种致病菌的抑制能力。【结果】从酸奶样品中成功分离得到3株鼠李糖乳酪杆菌:LGG3、TF1、BAMN3,所有菌株均无溶血活性,且均能分泌蛋白酶与淀粉酶。菌体表面特性分析显示,LGG3菌株自凝集率显著高于BAMN3菌株(P<0.05),疏水率和黏附率均显著优于TF1和BAMN3菌株(P<0.05)。抗菌药物敏感性分析表明,3株菌均对头孢噻肟、卡那霉素、庆大霉素表现耐药,而对四环素敏感,对氨苄西林、氯霉素和克林霉素敏感或中敏。在抑菌活性方面,LGG3菌株对革兰阴性和革兰阳性致病菌均表现出广谱抑制效果。【结论】鼠李糖乳酪杆菌LGG3具备良好的体外益生特性,包括有效的表面黏附能力及显著的抗菌活性等,可作为开发动物益生菌剂的潜在候选菌株。 展开更多
关键词 鼠李糖乳酪杆菌 分离鉴定 益生特性 体外评价
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甘肃张掖、金昌地区犊牛腹泻致病菌的分离鉴定、致病性及耐药性分析
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作者 顾强文 陈茜 +5 位作者 吴延荣 高强 徐进鹏 文洋 王胜义 郝宝成 《中国草食动物科学》 北大核心 2026年第2期67-74,共8页
本研究旨在了解甘肃省张掖和金昌地区犊牛腹泻的主要致病菌种类及其致病性和耐药流行情况,为当地防治犊牛腹泻提供用药参考。本研究在张掖和金昌的6个犊牛养殖场采集了41份样品(27份粪便样,4份乳样,10份土壤样),通过细菌分离培养、革兰... 本研究旨在了解甘肃省张掖和金昌地区犊牛腹泻的主要致病菌种类及其致病性和耐药流行情况,为当地防治犊牛腹泻提供用药参考。本研究在张掖和金昌的6个犊牛养殖场采集了41份样品(27份粪便样,4份乳样,10份土壤样),通过细菌分离培养、革兰氏染色、生长特性鉴别和16S rRNA基因测序进行致病菌分离鉴定;采用致病性试验和K-B纸片法药敏试验检测致病菌的致病性和耐药性。结果表明,41份样本中共分离出4株致病菌,其中JC01株、JC02株、JC03株为大肠杆菌(Escherichia coli),JC04株为肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)。同源性分析结果表明,JC01株与大肠杆菌U 5/41菌株亲缘关系最近,JC04株与肺炎克雷伯菌臭鼻亚种(Klebsiella pneumoniae subsp.ozaenae)标准菌株亲源关系最近。致病性研究表明,JC01株和JC04株均具有很强的致病性,可造成脾和空肠组织严重病理损伤。药敏试验结果表明,3株大肠杆菌对β-内酰胺类(88.89%)、大环内酯类(100%)、四环素类(100%)、林可酰胺类(100%)和磺胺类(100%)抗菌药物的耐药性较高;1株肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、林可酰胺类和磺胺类抗菌药物完全耐药,仅对头孢西丁、氧氟沙星和诺氟沙星敏感。综上,甘肃张掖、金昌地区犊牛腹泻致病菌主要为大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,二者均具有很强的致病性,且均存在耐药谱广、耐药率高的特征。 展开更多
关键词 犊牛腹泻 大肠杆菌 肺炎克雷伯菌 分离鉴定 耐药性
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凡纳滨对虾源副溶血性弧菌的分离鉴定及药敏试验
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作者 李威 张远昊 +4 位作者 孙一享 季鑫垚 张永安 袁勇超 黎洁 《大连海洋大学学报》 北大核心 2026年第1期58-66,共9页
为研究海水凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)源副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)对淡水克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的致病性及防控依据,从福建漳州凡纳滨对虾养殖区域暴发性死亡事件的患病个体肝胰腺中分离得到一株优势致病... 为研究海水凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)源副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)对淡水克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的致病性及防控依据,从福建漳州凡纳滨对虾养殖区域暴发性死亡事件的患病个体肝胰腺中分离得到一株优势致病菌(LJVP-21),经鉴定为副溶血性弧菌,随后进行了人工回归感染试验。结果表明:该菌株对淡水养殖克氏原螯虾具有致病性,其半数致死量(LD 50)为3.16×10^(6)CFU/mL;被感染个体表现出肝胰腺肿大、颜色变灰(部分组织呈弥散状态)、鳃丝肿大发红、肠道萎缩无内容物等症状,且可从感染个体的肝胰腺中重新分离到该菌;药敏试验结果显示,LJVP-21菌株对氟苯尼考等8种药物敏感,对环丙沙星、妥布霉素中度敏感,对恩诺沙星等6种药物耐药。研究表明,海水源副溶血性弧菌可能对淡水养殖产业构成威胁,本研究结果可为相关病害的防控提供科学参考。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 克氏原螯虾 副溶血性弧菌 分离鉴定 药物敏感性
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新疆石河子地区牛乳源产酸克雷伯菌的分离鉴定及生物学特性分析
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作者 魏增科 许淑芸 +6 位作者 魏京京 俞杰 罗志洁 王子杰 张辉 周霞 樊泰山 《动物医学进展》 北大核心 2026年第3期47-54,共8页
为了解新疆石河子地区牛乳源产酸克雷伯菌生物学特性,采集石河子地区9个规模化奶牛养殖场大罐奶样本,分离鉴定并用16S rRNA PCR检测分离菌;PCR方法检测分离株毒力与耐药基因携带情况,用微量肉汤稀释法测定分离株耐药表型,用96孔微量板... 为了解新疆石河子地区牛乳源产酸克雷伯菌生物学特性,采集石河子地区9个规模化奶牛养殖场大罐奶样本,分离鉴定并用16S rRNA PCR检测分离菌;PCR方法检测分离株毒力与耐药基因携带情况,用微量肉汤稀释法测定分离株耐药表型,用96孔微量板法检测生物被膜(BF)的形成能力,感染小鼠分析其致病性。结果共分离出14株产酸克雷伯菌,blaOXA基因检出率为50%、sul1为42.8%及blaTEM为35.7%,未检测到QnrA1、ermA基因;14株分离菌对阿莫西林、四环素、氨苄青霉素、头孢西丁、阿米卡星的耐药率较高,分别为100%、92.86%、78.57%、71.43%、57.14%,对氧氟沙星、磺胺甲噁唑均敏感;分离株均表现为多重耐药,其中1株菌对8种抗生素耐药,4株菌同时对7种抗生素耐药;毒力基因kfuBC、ureA携带率分别为71.4%、57.1%,fimH、ompA、wabG、ybtA基因的携带率均为7.1%,未检测到rmpA基因;其中3株具有较强的生物被膜形成能力、10株菌形成能力中等,1株形成能力弱;仅有1株菌能引起小鼠死亡。说明分离的乳源产酸克雷伯菌具有广泛耐药性,携带相关耐药基因,有一定的致病性。 展开更多
关键词 产酸克雷伯菌 分离鉴定 生物学特性 耐药基因 最小抑菌浓度 生物被膜 致病性
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禽源产气荚膜梭菌的分离鉴定及耐药性分析
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作者 黄志远 符兴如 +4 位作者 崔阳 孙小慧 宋泽和 贺喜 刘自逵 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期140-148,共9页
研究旨在调查规模化养鸡场中产气荚膜梭菌(Cp)的流行情况、耐药性和生物被膜形成能力。试验从湖南省常德市3个蛋鸡场和4个肉鸡场共采集200份样品,包括产蛋后期蛋鸡盲肠食糜和腹泻肉鸡肛拭子样本,进行Cp分离培养以及16S rDNA基因鉴定、... 研究旨在调查规模化养鸡场中产气荚膜梭菌(Cp)的流行情况、耐药性和生物被膜形成能力。试验从湖南省常德市3个蛋鸡场和4个肉鸡场共采集200份样品,包括产蛋后期蛋鸡盲肠食糜和腹泻肉鸡肛拭子样本,进行Cp分离培养以及16S rDNA基因鉴定、生化试验、毒力基因分析、药敏试验以及生物膜形成试验。结果显示:Cp总分离率为32%(64/200),蛋鸡和肉鸡的分离率分别为49%(23/47)和27%(41/153),且所有分离株均属于A型;超过50%的Cp分离株对包括万古霉素、四环素和氯霉素在内的7种抗生素具有耐药性,但对环丙沙星表现出较低的耐药性,耐药率为20%。所有Cp分离株都具有生物被膜形成能力,其中6株具有强生物被膜形成能力,33株具有中等生物被膜形成能力,25株具有弱生物被膜形成能力。研究表明,从规模化养鸡场分离的64株A型Cp均具备生物被膜形成能力,其中半数以上对多种抗生素表现出耐药性,结果对临床抗菌药物指导具有重要意义。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 分离鉴定 抗微生物敏感性 生物被膜形成 毒素分型
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犊牛奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性分析
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作者 张潇涵 杨怀星 +4 位作者 马利青 李秀萍 简莹娜 王光华 胡勇 《青海畜牧兽医杂志》 2026年第1期13-17,23,共6页
本研究从青海东部地区某奶牛场采集的16份犊牛腹泻粪样中分离获得一株可疑菌,分离菌株为革兰氏阴性菌,具有迁徙生长特性,通过16S rRNA基因扩增、测序对分离菌株进行鉴定。经NCBI数据库比对,分离株16S rRNA基因与奇异变形杆菌同源性为99.... 本研究从青海东部地区某奶牛场采集的16份犊牛腹泻粪样中分离获得一株可疑菌,分离菌株为革兰氏阴性菌,具有迁徙生长特性,通过16S rRNA基因扩增、测序对分离菌株进行鉴定。经NCBI数据库比对,分离株16S rRNA基因与奇异变形杆菌同源性为99.93%,为奇异变形杆菌。经药敏试验、耐药基因检测及动物试验结果表明,该菌株广谱耐药,携带11种耐药基因,对小鼠具有致病性。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 分离鉴定 犊牛 16S rRNA基因 耐药基因检测
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牛冠状病毒分离鉴定及S基因遗传进化分析
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作者 石晓娇 谢梦圆 +2 位作者 丁宁 陈柯佳 徐晓静 《动物医学进展》 北大核心 2026年第4期37-43,共7页
牛冠状病毒(BCoV)在全球范围内流行且存在地域差异,其高突变率等均影响BCoV的进化,因此,BCoV的分离鉴定及遗传进化分析对不同地区疫病防控至关重要。本研究将临床检测为BCoV阳性的犊牛脾脏样品接种HRT-18细胞,盲传至出现典型细胞病变(C... 牛冠状病毒(BCoV)在全球范围内流行且存在地域差异,其高突变率等均影响BCoV的进化,因此,BCoV的分离鉴定及遗传进化分析对不同地区疫病防控至关重要。本研究将临床检测为BCoV阳性的犊牛脾脏样品接种HRT-18细胞,盲传至出现典型细胞病变(CPE)收集上清,进行全基因组测序并分析其突变和遗传进化关系。结果表明,传至第7代出现细胞隆起,聚集成团并脱落等典型CPE,测序鉴定为BCoV,命名为NMGX-SPL-23,测定TCID_(50)为10^(-5.75),与国外BCoV同源性为97.9%~99.4%,与国内BCoV同源性为98.2%~99.5%,进化上呈现典型的地域分布特点,与国内BCoV亲缘关系较近,位于进化树同一分支且为相对独立的一个分支,与美国原始BCoV分离株U00735.2亲缘关系较远。分离株NMGX-SPL-23的S蛋白与受体关键结合位点162Y、182E、184W和185H均未发生突变,但部分关键表位如:中和表位517~621 aa的Q580F及T细胞表位460~468 aa的V467A等存在突变。本研究为进一步开发BCoV疫苗及其分子遗传进化特性提供理论依据。 展开更多
关键词 牛冠状病毒 分离鉴定 基因序列分析 S基因
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两株鸡源鸭疫里默氏菌的分离鉴定及OmpA基因序列分析
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作者 吴蕾 常海霞 +6 位作者 李玉峰 韩青海 刘杰 韩帅琪 王东萍 刘哲 崔雪志 《家畜生态学报》 北大核心 2026年第1期73-78,共6页
为了鉴定从肉种鸡输卵管干酪样物和其孵化种蛋的卵黄中分离到的2株相似病原菌,对这2株分离菌进行革兰氏染色、血清型鉴定、药敏试验和OmpA基因分析,并将分离菌进行SPF鸡致病性试验。结果表明:从输卵管和卵黄中分离的菌株均为1型鸭疫里... 为了鉴定从肉种鸡输卵管干酪样物和其孵化种蛋的卵黄中分离到的2株相似病原菌,对这2株分离菌进行革兰氏染色、血清型鉴定、药敏试验和OmpA基因分析,并将分离菌进行SPF鸡致病性试验。结果表明:从输卵管和卵黄中分离的菌株均为1型鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA);2株分离菌对头孢噻肟、氟苯尼考、多西环素均敏感;OmpA基因进化分析显示,2株分离株的同源性100%,与鸡源、鸭源鸭疫里默氏菌参考株同源性分别为93.9%~94.0%,95.8%~99.9%;SPF鸡注射细菌后可导致鸡关节出现胶冻样物;病理学变化显示,肾小管上皮细胞水肿或变性,神经元水肿或皱缩。试验证明肉种鸡可以感染鸭疫里默氏菌,感染鸭疫里默氏菌后可能对鸡的生殖系统或腿部关节造成损伤。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏菌 鸡 分离鉴定 OmpA基因
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内蒙古翁牛特地区传统乳制品中乳酸菌分离鉴定
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作者 白路 杨成聪 +3 位作者 王丹丹 高源 朱世民 陈永福 《中国乳品工业》 北大核心 2026年第3期31-37,共7页
文章采用纯培养与全基因组重测序技术和系统发育进化关系,对翁牛特地区传统发酵乳制品中的乳酸菌进行分离纯化和种属鉴定,从95份样品中分离得到1628株乳酸菌,包括15个属,29个种。其中乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)占总分离株的18.67%... 文章采用纯培养与全基因组重测序技术和系统发育进化关系,对翁牛特地区传统发酵乳制品中的乳酸菌进行分离纯化和种属鉴定,从95份样品中分离得到1628株乳酸菌,包括15个属,29个种。其中乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)占总分离株的18.67%,是内蒙古翁牛特地区传统乳制品中的优势菌种。其次为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides),占总分离株的14.07%。优势菌群分析发现不同分离源的菌群结构差异较大,乳清来源菌株优势菌种为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides),嚼克来源菌株优势菌种为副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei),鲜奶来源菌株优势菌种为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),酸奶来源菌株优势菌种为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)。文章探究了不同发酵乳制品中乳酸菌的菌群结构,为乳制品加工提供优势菌种资源提供参考。 展开更多
关键词 乳酸菌 分离鉴定 多样性 传统发酵乳 系统发育树
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