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黄腐酚等8种中药单体对奶牛乳房炎临床分离株体外抗菌及抗溶血能力研究
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作者 王晓平 尹立子 王芷涵 《饲料工业》 北大核心 2025年第17期102-106,共5页
为研究黄腐酚等8种中药单体对奶牛乳房炎临床分离株的体外抗菌及抗溶血能力,采用试管二倍稀释法测定该8种中药单体的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),测定... 为研究黄腐酚等8种中药单体对奶牛乳房炎临床分离株的体外抗菌及抗溶血能力,采用试管二倍稀释法测定该8种中药单体的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),测定中药单体在亚抑菌浓度下的抗溶血能力。结果表明:黄腐酚对临床分离株的抗菌效果最好,MIC为1~4μg/mL;其他依次是冬凌草甲素、乔松素、广藿香酮、桑色素、百里香酚,MIC为8~512μg/mL;而升麻苷、石吊兰素最小抑菌浓度均大于1 024μg/mL,但其抗溶血能力较好,MIC为16~64μg/mL。其中黄腐酚、冬凌草甲素、百里香酚、广藿香酮等可作为抑菌药物或抗细菌毒素药物。 展开更多
关键词 中药单体 奶牛乳房炎 临床分离株 体外抑菌 亚抑菌浓度 溶血能力
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金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型研究
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作者 高菊 翁胜男 +4 位作者 冷贵云 李昕 姚杰 周强 唐伟 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1312-1319,共8页
目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型。方法采用三点接种法检测105株临床样本分离金黄色葡萄球菌的溶血表型;实时荧光定量聚合酶链式反应检测4种溶血素基因(hla、hlb、hlc和hld)mRNA表达量;VITEK 2 GP639药敏卡检测常用抗生素... 目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型。方法采用三点接种法检测105株临床样本分离金黄色葡萄球菌的溶血表型;实时荧光定量聚合酶链式反应检测4种溶血素基因(hla、hlb、hlc和hld)mRNA表达量;VITEK 2 GP639药敏卡检测常用抗生素耐药性;DNA凝胶电泳法检测mecA、sea、tst和pvl基因携带率;微孔板成膜结晶紫染色法检测生物膜形成能力;CCK-8法检测巨噬细胞毒性。结果金黄色葡萄球菌临床分离株中检出7种溶血表型。不同溶血表型金黄色葡萄球菌临床分离株在溶血素基因mRNA表达量、常用抗生素耐药性、毒力基因携带率、生物膜形成能力、小鼠巨噬细胞毒性作用等方面均有差异(P<0.05)。结论金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型多样,应当引起微生物检验、临床治疗和院感防控等多维度重点关注。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 临床分离株 溶血表型 溶血素 耐药性 毒力
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猪胸膜肺炎放线杆菌临床分离株特性分析及疫苗候选菌株筛选
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作者 陈虹宇 朋璐 +7 位作者 张娇 韩未尧 汤细彪 宋文博 黄超 金卉 周锐 黎璐 《四川农业大学学报》 北大核心 2025年第2期458-468,共11页
【目的】分析胸膜肺炎放线杆菌(APP)临床分离株的优势血清型,获得疫苗候选菌株。【方法】从国内疑似分离株中鉴定获得53株APP菌株,鉴定各菌株血清型及评价其生物学特性后,利用大蜡螟和小鼠模型筛选评估有价值的疫苗候选菌株。【结果】53... 【目的】分析胸膜肺炎放线杆菌(APP)临床分离株的优势血清型,获得疫苗候选菌株。【方法】从国内疑似分离株中鉴定获得53株APP菌株,鉴定各菌株血清型及评价其生物学特性后,利用大蜡螟和小鼠模型筛选评估有价值的疫苗候选菌株。【结果】53株APP中血清型占比由高到低依次为1、7、15、5型,各菌株在体外生长存活能力强,具有不同程度的溶血活性。MIC结果显示,分离菌株对氟苯尼考敏感度较低,而对头孢类药物高度敏感。用大蜡螟和小鼠模型从每个血清型菌株中各筛选到一株高毒力候选菌株。其中,1型菌株制备的灭活疫苗能够以小于商品化疫苗中1型菌株1/5的剂量,保护100%同血清型攻毒小鼠存活。同时,商品化疫苗中缺乏的15型菌株制备的灭活疫苗对同血清型攻毒小鼠保护率为66.7%,高于商品化疫苗的保护率。【结论】本研究筛选获得高毒力的优势血清型1、5、7、15型菌株各一株,根据免疫剂量和免疫保护率分析,其中的1型菌株和15型菌株有开发为新疫苗候选菌株的潜力。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 临床分离株 血清型 灭活疫苗 猪传染性胸膜肺炎
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3个猪链球菌2型四川分离株4个毒力因子基因序列测定与分析 被引量:5
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作者 蔡振鸿 范伟兴 +5 位作者 赵冉 何海权 王幼明 姜平 李晓成 黄保续 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期901-905,共5页
目的设计了特异性引物对3个致病性猪链球菌2型(Ss2)四川分离株4个主要毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2分别进行了扩增,序列测定与分析结果表明3个Ss2四川分离株均存在4个毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2,其核苷酸序列与1998年江苏分离... 目的设计了特异性引物对3个致病性猪链球菌2型(Ss2)四川分离株4个主要毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2分别进行了扩增,序列测定与分析结果表明3个Ss2四川分离株均存在4个毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2,其核苷酸序列与1998年江苏分离株9801及国外参考菌株的同源性均大于99.5%,提示3个四川分离菌株与1998年江苏流行的高毒力菌株可能具有共同的来源。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 毒力因子 核苷酸序列测定 Ss2四川分离株 Ss2江苏分离株9801
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PubMLST数据库克罗诺杆菌中外分离株的分型比较 被引量:3
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作者 王小曼 赵炜 +1 位作者 李诗瑶 周帼萍 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第4期165-170,共6页
为了解中国与全球其他地区克罗诺杆菌(Cronobacter)分离株的差异,从PubMLST数据库下载具有完整序列型(ST)的菌株信息进行分离源、种、序列型及克隆复合体(CC)分析,并深入分析国内外食品及临床分离株。结果显示,具有完整ST型的中国克罗... 为了解中国与全球其他地区克罗诺杆菌(Cronobacter)分离株的差异,从PubMLST数据库下载具有完整序列型(ST)的菌株信息进行分离源、种、序列型及克隆复合体(CC)分析,并深入分析国内外食品及临床分离株。结果显示,具有完整ST型的中国克罗诺杆菌分离株(907株)最多,来源主要是婴儿配方奶粉、香料和即食食品。克罗诺杆菌中国分离株具有高度遗传多样性,我国的食品分离株(580株)中,CC4和CC7型菌株占比较高;但我国及其他东亚和南亚国家都没有临床株的信息。我国分离株明确致病型信息与欧美国家的差异较大,仅ST256(1株)、ST60(2株)、ST83(2株)与新生儿脑膜炎相关,欧美国家则主要包括ST4、ST1、ST12、ST7,说明我国的克罗诺杆菌与其他国家地域的菌株在系统进化和毒力可能具有差异,或与克罗诺杆菌的感染对象-人种的差异有关。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌 中国分离株 临床分离株 食品分离株 感染对象
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鹅副粘病毒分离株生物学特性的研究 被引量:44
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作者 丁壮 王承宇 +3 位作者 向华 潘玉民 于为民 邹啸环 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期390-391,共2页
鹅副粘病毒病是一种新发现的由副粘病毒引起的能引起不同年龄鹅发病、以消化系统损害为主的传染病。本研究对一野毒株 (NA_1)应用鸡胚传代、电镜形态学观察、红细胞凝集_红细胞凝集抑制试验、鹅体回归试验、实验免疫保护试验等进行了研... 鹅副粘病毒病是一种新发现的由副粘病毒引起的能引起不同年龄鹅发病、以消化系统损害为主的传染病。本研究对一野毒株 (NA_1)应用鸡胚传代、电镜形态学观察、红细胞凝集_红细胞凝集抑制试验、鹅体回归试验、实验免疫保护试验等进行了研究 ,并进行了三项毒力指标的测定。依据国际上判定新城疫病毒毒力的标准 ,NA_1毒株均具有与新城疫病毒速发型相似的毒力 ,属于强毒力的毒株。应用NA_1毒株制备的油乳剂灭活苗实验免疫雏鹅 。 展开更多
关键词 副粘病毒 分离株 生物学特性
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I群禽腺病毒江苏分离株(FAVI-JS)的分离鉴定 被引量:31
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作者 何秀苗 张科 +3 位作者 秦爱建 金文杰 刘岳龙 陈溥言 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期42-45,共4页
通过形态学、致细胞病变和序列比较等对一株疑为I群禽腺病毒江苏分离株FAVI_JS进行了鉴定 ,试验结果表明 :该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称 ,直径为 70nm~ 80nm ;不具有凝集鸡、鸭、鹅红细胞的能力但可以凝集大鼠红细胞。在鸡胚肾... 通过形态学、致细胞病变和序列比较等对一株疑为I群禽腺病毒江苏分离株FAVI_JS进行了鉴定 ,试验结果表明 :该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称 ,直径为 70nm~ 80nm ;不具有凝集鸡、鸭、鹅红细胞的能力但可以凝集大鼠红细胞。在鸡胚肾细胞 (CEK)上可致细胞变圆 ,折光性增强等病变 ;通过PCR方法扩增出的FAVI_JSL、R、ITR三个片段 ,经过测序分析并与GenBank上发表的属于血清I型的CELO病毒、FAV_1、FAV_A和血清 8型的禽腺病毒 (FAV_8)全基因组的相应序列比较 ,FAVI_JS与I群禽腺病毒各毒株在三个片段上同源性都很高 ,其中与血清I型的同源性高达 96 %以上 ,在根据对遗传上具有重要意义的ITR序列绘制的遗传进行树分析 ,FAVI_JS与Ⅲ群禽腺病毒EDS、Y81G4株明显属于不同的分支 ,而与群禽腺病毒 ,特别是与血清I型的禽腺病毒更接近 ,这些结果证明 。 展开更多
关键词 Ⅰ群禽腺病毒 江苏分离株 FAVI-JS 分离 鉴定 形态学 序列分析
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猪链球菌1998分离株病原特性鉴定 被引量:193
8
作者 姚火春 陈国强 陆承平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期67-70,共4页
对1998年江苏分离的3株猪源链球菌进行了鉴定,其形态、染色均符合链球菌的特点,具α或β溶血,生化试验结果不稳定。用国际通用的链球菌乳胶分型诊断液检测上述分离株,均不在其检测范围,即不属于链球菌兰氏分群的A~G群。但... 对1998年江苏分离的3株猪源链球菌进行了鉴定,其形态、染色均符合链球菌的特点,具α或β溶血,生化试验结果不稳定。用国际通用的链球菌乳胶分型诊断液检测上述分离株,均不在其检测范围,即不属于链球菌兰氏分群的A~G群。但它们凝集猪链球菌2型抗血清,人工接种兔有致病性。表明此次流行的猪败血症的病原不同于以往的C群链球菌,不是马腺疫链球菌兽疫亚种,而是属于R群的猪链球菌2型。 展开更多
关键词 链球菌 分离株 病原鉴定
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我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株生物学特性的研究 被引量:28
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作者 贺秀媛 刘胜旺 +3 位作者 王玮 刘丽玲 孔宪刚 王建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期349-353,共5页
从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒 ,在 9~ 11日龄SPF鸡胚上连续传代 9次 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变... 从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒 ,在 9~ 11日龄SPF鸡胚上连续传代 9次 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变化、病毒在CEF中的增殖特性、凝集鸡红细胞的特性以及动物回归试验等来研究我国鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的生物学特性。结果表明 ,该毒株的第一代尿囊液对鸡胚无肉眼可见的致病作用 ,当继代到第 5代后 ,胚体严重病变 ;电镜观察该病毒为典型的冠状病毒 ;病毒在鸡胚中随着接种病毒时间的延长 ,其效价增高 ,96小时可达到 48小时的 1倍 ,该毒株可在CEF上生长 ,但不能形成明显的蚀斑 ;并且经 1%胰酶处理后可凝集鸡红细胞 ;鸡胚的第 4代尿囊液病毒回归动物体 ,可致鸡病变病死鸡肾脏病变尤为明显 ,呈典型的花斑肾 ,腺胃则未见肉眼可见的病变 ,接种鸡、同居鸡和对照鸡之间NDV疫苗免疫后其HI抗体水平无明显差异 ,但从发病症状来看 。 展开更多
关键词 传染性 支气管炎 病毒 地方分离株 生物学特性
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禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)全基因克隆及序列分析 被引量:32
10
作者 张建林 于康震 +2 位作者 陈化兰 唐秀英 田国斌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期232-235,共4页
本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定... 本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定。序列分析结果表明 ,所扩增到的 8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架。GD1/96株与 1997年香港禽流感事件中的 4株香港流感病毒分离株 (分别来自人、鸡、鸭和鹅 )的HA基因的高度同源性说明它们可能起源于同一种系 ,但NS基因的差异说明它们分属于不同的基因群系。GD1/96株与香港流感病毒分离株的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性较低 ( 6 3.9%~ 98.1%) ,而香港流感病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸序列的同源性很高 ( 96 .5 %~ 10 0 %) ,且香港各流感病毒分离株的NA均缺失 5 7个核苷酸 ( 19个氨基酸 )残基。因此 ,内地H5N1分离株GD1/96与 展开更多
关键词 禽流感病毒 分离株 全基因克隆 序列分析
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H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究 被引量:20
11
作者 陈君彦 李海燕 +3 位作者 申之义 陈化兰 于康震 毕英佐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-17,共5页
对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型... 对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型SIV的HAI蛋白在 10、11、2 3、87、2 87位都存在高度保守的糖基化位点 ,此外 ,在 2 76位多了一个“_NTT_”糖基化位点 ,与参考毒株SW /IW / 93/ 0 1一致 ,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征。本研究进一步发现 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G ,具有非高致病力毒株分子特征 ;而其受体结合位点在HA蛋白上第 2 2 6位是Q ,第 2 2 8位是G ,可能具有感染禽的潜力。经同源性比较 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/ 4 75 4 / 94的同源性相对最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到 95 7%~ 96 1%和96 5 %~ 97 2 %。由同源性比较结果和进化树分析可见 。 展开更多
关键词 H1N1亚型 猪流感病毒 中国分离株 血凝素基因 分子演化 序列分析
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禽呼肠孤病毒广西分离株σ_3基因的克隆和表达 被引量:18
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作者 谢芝勋 邓显文 +3 位作者 刘加波 庞耀珊 唐小飞 廖敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期167-170,共4页
采用RT_PCR技术扩增禽呼肠孤病毒广西分离株R1σ3基因,将σ3基因克隆至PGEX_4T_1载体上,测序结果表明插入的片段为σ3目的基因。切下目的基因σ3,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白质粒表达载体PGEX_4T_1,获得重组质粒经PCR酶切以及序... 采用RT_PCR技术扩增禽呼肠孤病毒广西分离株R1σ3基因,将σ3基因克隆至PGEX_4T_1载体上,测序结果表明插入的片段为σ3目的基因。切下目的基因σ3,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白质粒表达载体PGEX_4T_1,获得重组质粒经PCR酶切以及序列分析鉴定,表达σ3基因插入的位置,大小和阅码框架均正确,表明成功构建了融合表达载体PGEX_R1_σ3。构建好的重组质粒,经1mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌DH5α中得到了表达。融合蛋白GST_R1_σ3的分子量为60ku,以包涵体形式存在。Westernblot分析表明,融合蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 σ3基因 基因克隆 基因表达 PGEX-4T-1 广西分离株 RT-PCR
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鹅副粘病毒NA-1分离株HN蛋白基因的克隆与序列分析 被引量:14
13
作者 王学理 丁壮 +4 位作者 左玉柱 向华 常爽 黄海楠 宣华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期18-21,共4页
鹅副粘病毒分离株NA_1经 11日龄鸡胚增殖后纯化。提取病毒的基因组RNA ,采用RT_PCR扩增出与预期设计的 1 7kb大小相符合的特异条带。将扩增产物提纯后克隆入pMD 18_T载体 ,经纯化、筛选及酶切鉴定后 ,初步获得了含鹅副粘病毒HN基因的阳... 鹅副粘病毒分离株NA_1经 11日龄鸡胚增殖后纯化。提取病毒的基因组RNA ,采用RT_PCR扩增出与预期设计的 1 7kb大小相符合的特异条带。将扩增产物提纯后克隆入pMD 18_T载体 ,经纯化、筛选及酶切鉴定后 ,初步获得了含鹅副粘病毒HN基因的阳性克隆 ,并对阳性克隆进行测序。测序后拼接得出HN基因的全序列长度为 174 0bp ,该基因的ORF总长为 1716bp ,编码 5 71个氨基酸。与GenBank下载的 15株参考毒株比较HN基因编码区全核苷酸序列 ,发现所测NA_1毒株与参考毒株YG97核苷酸序列同源性为 97 3% ,与F48E9同源性为 84 5 % ,与LaSota为 82 2 %。 展开更多
关键词 鹅副粘病毒 NA-1分离株 HN蛋白 基因克隆 序列分析 同源性
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急、慢性猪瘟病毒分离株和疫苗株E2基因的序列分析 被引量:10
14
作者 刘伯华 刘湘涛 +3 位作者 韩雪清 赵启祖 李明晖 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期568-575,共8页
利用反转录 (RT)及套式PCR(N -PCR)扩增并测定了 6株具有不同表症近期甘肃省猪瘟流行野毒及C -株细胞疫苗毒的主要免疫原E2基因的核苷酸序列。序列分析比较结果表明 ,6株流行野毒与C -株疫苗毒的核苷酸同源性为 82 %~ 84 % ,流行野毒... 利用反转录 (RT)及套式PCR(N -PCR)扩增并测定了 6株具有不同表症近期甘肃省猪瘟流行野毒及C -株细胞疫苗毒的主要免疫原E2基因的核苷酸序列。序列分析比较结果表明 ,6株流行野毒与C -株疫苗毒的核苷酸同源性为 82 %~ 84 % ,流行野毒之间的核苷酸同源性在 89%~99%之间 ,并且明显可分为二个组群 ,病毒株所属组群与其临床症状有一定的相关性。流行野毒与C -株毒在中和抗原决定簇上有部分氨基酸存在性质差异 ,可能影响C -株毒对流行野毒的中和滴度。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2基因 序列分析 分离株 疫苗
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多位点序列分型在新疆人间布鲁氏菌病临床分离株遗传进化研究中的应用 被引量:9
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作者 李博 岳锡宏 +3 位作者 崔步云 黎唯 刘志国 尚修建 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期411-415,439,共6页
目的探讨多位点序列分型(MLST)技术在新疆人间布鲁氏菌病分离株遗传进化研究中的应用价值,了解分离株的种群结构和遗传进化关系。方法采用MLST对2015、2016年分离自新疆7个地州的24株人间布鲁氏菌病分离株和3株布鲁氏菌标准参考菌株进... 目的探讨多位点序列分型(MLST)技术在新疆人间布鲁氏菌病分离株遗传进化研究中的应用价值,了解分离株的种群结构和遗传进化关系。方法采用MLST对2015、2016年分离自新疆7个地州的24株人间布鲁氏菌病分离株和3株布鲁氏菌标准参考菌株进行分析,统计各菌株序列型(STs),运用BioNumerics软件构建菌株最小进化树,分析菌株间遗传关系;收集过往研究的186株全国不同地区布鲁氏菌分离株MLST结果,分析各ST型分布特点。结果 24株人间布鲁氏菌分离株全部为ST8型,3株标准参考菌株(羊种16M、牛种544A、猪种1330S)分别为ST7型、ST1型、ST14型;24株人间布鲁氏菌分离株的9个MLST位点变异完全相同,分离株种群结构单一。ST8型菌是我国主要流行的布鲁氏菌,且以北方流行为主;MLST能较好的区分布鲁氏菌种别,但不能有效区分生物型别。结论 ST8型菌(羊种3型)是新疆人间布鲁氏菌病的主要流行菌株,MLST技术可作为人间布鲁氏菌种群结构和遗传进化关系研究的补充手段。 展开更多
关键词 新疆 布鲁氏菌病 临床分离株 遗传进化
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禽I型副粘病毒广西分离株F基因序列及毒力的研究 被引量:11
16
作者 韦平 刘禄 +3 位作者 韦天超 左天荣 李康然 甘甲忠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期104-106,131,共4页
对源于鸡、鹅、鸽的 9株APMV_1广西分离株及我国常用的中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )的F基因N_端前段进行了RT_PCR扩增 ,产物进行核苷酸序列测定 ,用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行比较。结果发现 ,广西... 对源于鸡、鹅、鸽的 9株APMV_1广西分离株及我国常用的中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )的F基因N_端前段进行了RT_PCR扩增 ,产物进行核苷酸序列测定 ,用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行比较。结果发现 ,广西分离株在裂解位点的氨基酸组成和排列均符合强毒株的特征 ;根据F基因绘制的系谱树来看 ,广西鸡和鹅分离株都归属于基因型VII,证实近年来广西流行的基因型与国内其他地区的相同 ;并发现中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )也属于基因型VII。研究还对分离株进行了常规的毒力和致病性测定试验 ,并与根据F基因序列特征判定的结果相比较 ,结果发现其中一株鸽源和两株鹅源分离株根据常规方法判定的结果与毒株在临床上的致病性不相符 。 展开更多
关键词 禽Ⅰ型副粘病毒 广西分离株 F基因序列 毒力 研究
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内蒙古布鲁氏菌临床分离株多位点序列分型研究 被引量:9
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作者 刘志国 王妙 +4 位作者 刘日宏 赵鸿雁 朴东日 崔步云 夏咸柱 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期991-996,共6页
目的探讨临床分离布鲁氏菌的种群结构和遗传进化特征。方法布鲁氏菌标准参考菌株羊种16M,牛种544A和猪种1 330S作为对照菌株,采用多位点序列分型(Multiple locus sequence typing,MLST)方法对内蒙古地区分离的116株羊种布鲁氏菌进行分析... 目的探讨临床分离布鲁氏菌的种群结构和遗传进化特征。方法布鲁氏菌标准参考菌株羊种16M,牛种544A和猪种1 330S作为对照菌株,采用多位点序列分型(Multiple locus sequence typing,MLST)方法对内蒙古地区分离的116株羊种布鲁氏菌进行分析,确定待测菌株的序列型(STs),用软件BioNumerics(Version 5.0)构建菌株的最小生成树。结果116株羊种布鲁氏菌全部为ST8型,9个MLST位点的变异完全相同,分离株种群结构单一;羊种菌的生物型与ST型无明显关联,ST8型菌系该地区的主要流行菌种,并与内蒙古地区先前分离羊种布鲁氏菌进化程度相同,且有密切的亲缘关系。结论羊种布鲁氏菌的序列分型(ST)与常规生物分型存在差异,ST8型菌可能具有较强的环境适应性和致病性。MLST是一种较好的羊布鲁氏菌种群和进化关系研究方法,但更适合于具有较大时间跨度和地理分布菌株间的流行病学调查。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 临床分离株 MLST
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乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究 被引量:9
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作者 汤德元 王凤 +5 位作者 马萍 罗险峰 李春燕 曾智勇 徐健 刘建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1330-1336,共7页
收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计... 收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,得到了约59ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体。结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 贵州分离株 E基因 原核表达 免疫原性
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球孢白僵菌不同分离株生物学特性及对茶丽纹象甲成虫的杀虫活性研究 被引量:14
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作者 王定锋 曾明森 +2 位作者 王庆森 刘丰静 吴光远 《福建农业学报》 CAS 2012年第7期750-754,共5页
测定了从球孢白僵菌侵染的茶丽纹象甲虫尸上分离的8个分离株的生长速率、产孢量和孢子萌发率等生物学性状,以及对茶丽纹象甲成虫的杀虫活性,旨在筛选出感染该虫的高致病力菌株。结果表明:在萨氏培养基(SDAY)上,8个分离株从菌落形态上可... 测定了从球孢白僵菌侵染的茶丽纹象甲虫尸上分离的8个分离株的生长速率、产孢量和孢子萌发率等生物学性状,以及对茶丽纹象甲成虫的杀虫活性,旨在筛选出感染该虫的高致病力菌株。结果表明:在萨氏培养基(SDAY)上,8个分离株从菌落形态上可分为菌丝型和孢子型两类。其中,菌丝型菌株XJBb3001和XJBb3007生长速率最快,但菌丝徒长,未见明显产孢现象;菌株XJBb3005产孢量最大,为2.47×107个.mL-1,且都与其他菌株产孢量存在极显著差异;各菌株在孢子萌发率上不存在显著差异。采用浸虫法用1.0×107个.mL-1的孢子溶液处理茶丽纹象甲成虫后,菌株XJBb3005表现出最强的杀虫活性,第7d校正死亡率为100%,LT50仅为3.46d,LT90为5.45d,僵虫率达93.75%。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 茶丽纹象甲 分离株 生物学 杀虫活性
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猪链球菌2型福建分离株的主要毒力基因分析 被引量:14
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作者 方勤美 黄绍谦 +2 位作者 俞伏松 朱继昌 林天龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期65-68,共4页
目的为了解福建地区猪链球菌2型菌株毒力因子分布情况。方法选取谷氨酸脱氢酶(gdh)、荚膜多糖(cps)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)、溶血素(sly)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fbps)及毒力相关序列orf2等7个猪链球菌2型主要毒力... 目的为了解福建地区猪链球菌2型菌株毒力因子分布情况。方法选取谷氨酸脱氢酶(gdh)、荚膜多糖(cps)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)、溶血素(sly)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fbps)及毒力相关序列orf2等7个猪链球菌2型主要毒力基因,分别设计了7对引物,采用PCR方法,对本室分离保存的猪链球菌2型福建分离株的毒力基因进行分析。结果从屠宰生猪体内分离的4个猪链球菌2型菌株和SS2PFJ07株基因型为gdh+/cps2J+/mrp+/ef-/sly-/fb-ps+/orf2+,另1株从生猪体内分离的分离菌株基因型为gdh+/cps2J+/mrp+/ef+/sly+/fbps+/orf2+。结论福建地区生猪中猪链球菌2型至少有两种毒力基因型。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 福建分离株 毒力基因
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