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分泌表达苹果酸乳酸酶的大肠杆菌系统的构建
被引量：
1
1
作者
王宁宁
刘瑞
+1 位作者
陈福生
张秀艳
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期498-503,共6页
苹果酸乳酸酶(简称苹乳酶)是果酒生产过程中苹果酸乳酸发酵(简称苹乳发酵)的关键酶。为了构建分泌表达苹乳酶的大肠杆菌表达系统,作者通过融合PCR将信号肽基因(487bp)和苹乳酶基因(1 623bp)的编码序列连接在一起,将融合片段(2110 bp)克...
苹果酸乳酸酶(简称苹乳酶)是果酒生产过程中苹果酸乳酸发酵(简称苹乳发酵)的关键酶。为了构建分泌表达苹乳酶的大肠杆菌表达系统,作者通过融合PCR将信号肽基因(487bp)和苹乳酶基因(1 623bp)的编码序列连接在一起,将融合片段(2110 bp)克隆到表达质粒pET28a(+)上并转化大肠杆菌,得到阳性克隆子。IPTG诱导阳性克隆子后可得到相对分子质量约为60 000左右的蛋白质,利用HPLC可在其发酵上清液中检测到240.7 mg/L的L-乳酸。这说明成功构建了分泌表达苹乳酶的大肠杆菌系统,该菌株的获得将为苹乳酶的研究和应用提供了技术平台。
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关键词
苹果酸乳酸酶
苹乳发酵
分泌表达系统
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职称材料
枯草芽胞杆菌蛋白质表达分泌系统发展及展望
被引量：
7
2
作者
张大伟
康倩
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2019年第1期1-10,共10页
枯草芽胞杆菌作为革兰阳性模式菌株是基础研究和工业应用的常用宿主细胞。介绍了枯草芽胞杆菌中蛋白合成和分泌过程中的重要步骤及重要调控位点。在枯草芽胞杆菌蛋白表达及分泌系统中,可以针对目标基因在体内的转录、翻译、折叠、转运...
枯草芽胞杆菌作为革兰阳性模式菌株是基础研究和工业应用的常用宿主细胞。介绍了枯草芽胞杆菌中蛋白合成和分泌过程中的重要步骤及重要调控位点。在枯草芽胞杆菌蛋白表达及分泌系统中,可以针对目标基因在体内的转录、翻译、折叠、转运和菌株改造等方面对表达分泌系统进行优化改良,针对不同的目标蛋白,可进行不同优化模块的组装和拼搭,以达到针对目标蛋白产物定制化地提高产量和分泌量的目的。在未来,随着基因编辑和合成生物技术的发展,菌株改良策略的不断优化,枯草芽胞杆菌将会在工业生产蛋白质制品领域发挥更大的应用价值。
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关键词
枯草芽胞杆菌
蛋白质
表达
和
分泌
微生物应用
表达
分泌
系统
调控
菌株改造策略
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职称材料
耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及发酵条件优化
被引量：
2
3
作者
周煌凯
龚月生
+2 位作者
杨明明
张云雁
宋秀平
《饲料工业》
北大核心
2010年第14期25-29,共5页
研究耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草芽孢杆菌中异源表达。从耐碱性木聚糖酶高产短小芽孢杆菌BYG5—20中克隆得到带有自身启动子的木聚糖酶基因xynA，将其构建在大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pGJ148中得到重组质粒pGJ148-xynA。采用...
研究耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草芽孢杆菌中异源表达。从耐碱性木聚糖酶高产短小芽孢杆菌BYG5—20中克隆得到带有自身启动子的木聚糖酶基因xynA，将其构建在大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pGJ148中得到重组质粒pGJ148-xynA。采用电转化法将重组质粒pGJ148-xynA转入枯草芽孢杆菌1A747中，得到重组菌电．GJ148-xynA，然后进行诱导表达以及培养基的优化。重组菌GJ148～xynA发酵上清液中木聚糖酶酶活可达93．32IU／ml。耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶基因xynA可以在枯草芽孢杆菌中实现异源表达，为枯草芽孢杆菌木聚糖酶分泌表达系统的进一步优化奠定了基础。
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关键词
木聚糖酶
枯草芽孢杆菌
分泌表达系统
发酵条件
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职称材料
题名
分泌表达苹果酸乳酸酶的大肠杆菌系统的构建
被引量：
1
1
作者
王宁宁
刘瑞
陈福生
张秀艳
机构
华中农业大学食品科技学院
华中农业大学环境食品学教育部重点实验室
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期498-503,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31071588)
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2662015PY068)
文摘
苹果酸乳酸酶(简称苹乳酶)是果酒生产过程中苹果酸乳酸发酵(简称苹乳发酵)的关键酶。为了构建分泌表达苹乳酶的大肠杆菌表达系统,作者通过融合PCR将信号肽基因(487bp)和苹乳酶基因(1 623bp)的编码序列连接在一起,将融合片段(2110 bp)克隆到表达质粒pET28a(+)上并转化大肠杆菌,得到阳性克隆子。IPTG诱导阳性克隆子后可得到相对分子质量约为60 000左右的蛋白质,利用HPLC可在其发酵上清液中检测到240.7 mg/L的L-乳酸。这说明成功构建了分泌表达苹乳酶的大肠杆菌系统,该菌株的获得将为苹乳酶的研究和应用提供了技术平台。
关键词
苹果酸乳酸酶
苹乳发酵
分泌表达系统
Keywords
malolactic enzyme
malactic fermentation
secretory expression system
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
枯草芽胞杆菌蛋白质表达分泌系统发展及展望
被引量：
7
2
作者
张大伟
康倩
机构
中国科学院天津工业生物技术研究所中国科学院系统微生物工程重点实验室
中国科学院大学
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2019年第1期1-10,共10页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0901001)
天津市杰出青年科学基金项目(17JCJQJC45300)
天津市自然科学基金项目(16JCYBJC23500)
文摘
枯草芽胞杆菌作为革兰阳性模式菌株是基础研究和工业应用的常用宿主细胞。介绍了枯草芽胞杆菌中蛋白合成和分泌过程中的重要步骤及重要调控位点。在枯草芽胞杆菌蛋白表达及分泌系统中,可以针对目标基因在体内的转录、翻译、折叠、转运和菌株改造等方面对表达分泌系统进行优化改良,针对不同的目标蛋白,可进行不同优化模块的组装和拼搭,以达到针对目标蛋白产物定制化地提高产量和分泌量的目的。在未来,随着基因编辑和合成生物技术的发展,菌株改良策略的不断优化,枯草芽胞杆菌将会在工业生产蛋白质制品领域发挥更大的应用价值。
关键词
枯草芽胞杆菌
蛋白质
表达
和
分泌
微生物应用
表达
分泌
系统
调控
菌株改造策略
Keywords
Bacillus subtilis
protein expression and secretion
microbial application
regulation of expression and secretion system
strain modification strategy
分类号
Q939.97 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及发酵条件优化
被引量：
2
3
作者
周煌凯
龚月生
杨明明
张云雁
宋秀平
机构
西北农林科技大学动物科技学院
出处
《饲料工业》
北大核心
2010年第14期25-29,共5页
基金
国家自然科学基金(30871813)
文摘
研究耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草芽孢杆菌中异源表达。从耐碱性木聚糖酶高产短小芽孢杆菌BYG5—20中克隆得到带有自身启动子的木聚糖酶基因xynA，将其构建在大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pGJ148中得到重组质粒pGJ148-xynA。采用电转化法将重组质粒pGJ148-xynA转入枯草芽孢杆菌1A747中，得到重组菌电．GJ148-xynA，然后进行诱导表达以及培养基的优化。重组菌GJ148～xynA发酵上清液中木聚糖酶酶活可达93．32IU／ml。耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶基因xynA可以在枯草芽孢杆菌中实现异源表达，为枯草芽孢杆菌木聚糖酶分泌表达系统的进一步优化奠定了基础。
关键词
木聚糖酶
枯草芽孢杆菌
分泌表达系统
发酵条件
Keywords
xylanase
bacillus subtilis
secretion expression system
fermentation conditions
分类号
S816.7 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
分泌表达苹果酸乳酸酶的大肠杆菌系统的构建
王宁宁
刘瑞
陈福生
张秀艳
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
枯草芽胞杆菌蛋白质表达分泌系统发展及展望
张大伟
康倩
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2019
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及发酵条件优化
周煌凯
龚月生
杨明明
张云雁
宋秀平
《饲料工业》
北大核心
2010
2
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职称材料
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