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乳酸乳球菌食品级分泌性表达载体pSQZ的构建及报告蛋白的表达被引量：5: 1; 作者孙强正熊衍文 +1 位作者叶长芸徐建国《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期224-228,275,共6页; 目的构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L lactis)食品级分泌表达载体,表达报告蛋白核酸内切酶(NucA)方法PCR扩增乳酸乳球菌未知分泌蛋白(Usp45)编码基因的启动子、核糖体结合位点、分泌信号和成熟肽前11个氨基酸编码序列,克隆到载体pS... 展开更多; 关键词乳酸乳球菌食品级载体分泌性表达报告蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组绵羊白细胞介素2基因的分泌性表达及表达产物的提取: 2; 作者刘艳环苗利光 +2 位作者陈立志刘晓颖张洪涛《特产研究》 2002年第4期23-24,共2页; 将构建的绵羊白细胞介素2基因表达菌株(PMPOIL2)接种在营养肉汤培养基上,培养20h,分别收集菌体及上清液。菌体超声裂解;上清液中的蛋白质分别用MgCl2、(NH4)2SO4、NaCl沉积。用抗Pilin-IL2血清检测菌体裂解物及上清沉淀物,结果上清沉淀... 展开更多; 关键词绵羊白细胞介素2基因分泌性表达表达产物; 在线阅读下载PDF 职称材料

自然流产母胎界面嗜酸粒细胞趋化因子、T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S及其受体的表达被引量：1: 3; 作者肖世金董倩赵爱民《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1170-1174,共5页; 目的探讨嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)/CCR3、T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S(RANTES)/CCR5在正常妊娠免疫耐受及自然流产中的作用。方法采集20例自然流产患者(AP组)和20例正常早孕妇女(NP组)的蜕膜和绒毛组织;采用免疫组织化学方... 展开更多; 关键词趋化因子嗜酸性粒细胞趋化因子 CCR3 T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S CCR5 自然流产; 在线阅读下载PDF 职称材料

人纤溶酶原kringle 5在大肠杆菌中克隆和分泌表达被引量：1: 4; 作者张宇张名姝 +1 位作者李雅雯郑权《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第6期132-134,共3页; 构建能够表达分泌性的人纤溶酶原kringle 5(简称hPK-5)的大肠杆菌工程菌。用PCR方法扩增获得hPK-5基因,构建原核表达载体pET-22b(+)/hPK-5,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达并鉴定其免疫学活性。成功表达14kD的重组hPK-5,且约占菌... 展开更多; 关键词人纤溶酶原Kringle 5 大肠杆菌克隆分泌性表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源与鼠源神经生长因子信号肽引导β-内啡肽分泌表达的差异: 5; 作者徐学武裴树俊 +1 位作者缪雪蓉俞卫锋《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期378-382,共5页; 目的:考察人源神经生长因子信号肽序列是否具有介导β-内啡肽分泌性表达的作用,以及人源与鼠源神经生长因子信号肽的作用效率是否存在差异。方法:构建2个分别利用人或鼠的信号序列介导β-内啡肽分泌表达的真核表达载体pcD-NA3.1-hEP和pc... 展开更多; 关键词信号肽神经生长因子 Β-内啡肽分泌性表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

乳酸乳球菌食品级表达载体的改造被引量：4: 6; 作者马超王丕武 +2 位作者付永平张卓刘宏禹《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期10247-10250,共4页; [目的]改造乳酸乳球菌食品级表达载体,拓宽原系统的应用范围。[方法]以pNZ8149为基础,在pNZ8149的启动子PnisA下游插入乳酸乳球菌MG1363未知分泌蛋白(Usp45)的胞外分泌信号肽基因序列SPusp45,利用特异性引物通过PCR方法删除启动子序列... 展开更多; 关键词乳酸乳球菌 SPusp45 食品级载体分泌性表达 GUS; 在线阅读下载PDF 职称材料

TAT-Apoptin基因原核表达载体的构建及其表达鉴定: 7; 作者陈桂华李翔辉郁川《现代农业研究》 2019年第11期96-98,共3页; 为得到TAT-Apoptin融合蛋白,以pMD-19T-Apoptin为模板PCR扩增出TATApoptin基因,构建重组载体pET-32a-TAT-Apoptin,并对TAT-Apoptin蛋白进行表达。PCR和测序表明,成功构建重组载体pET-32a-TAT-Apoptin,进一步对其进行蛋白表达,发现该蛋... 展开更多; 关键词 TAT-Apoptin融合蛋白重组载体pET-32a-TAT-Apoptin 分泌性表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

浅析巴斯德毕赤酵母表达系统的研究被引量：1: 8; 作者王艳《山东畜牧兽医》 2010年第10期86-87,共2页; 对于一个有商业潜质和广阔市场前景的兽用蛋白质类药物的研究,主要是要寻找一条稳定的工艺条件和获得较高的工作效率,巴斯德毕赤酵母表达系统就具有这方面的优点,其优越性表现在：分泌性表达,不需要复性,有效率为100%,纯化程序简单,大... 展开更多; 关键词毕赤酵母表达系统巴斯德分泌性表达蛋白质类市场前景工作效率工艺条件生产成本; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳酸乳球菌食品级分泌性表达载体pSQZ的构建及报告蛋白的表达被引量：5: 1; 作者孙强正熊衍文叶长芸徐建国; 机构中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期224-228,275,共6页; 文摘目的构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L lactis)食品级分泌表达载体,表达报告蛋白核酸内切酶(NucA)方法PCR扩增乳酸乳球菌未知分泌蛋白(Usp45)编码基因的启动子、核糖体结合位点、分泌信号和成熟肽前11个氨基酸编码序列,克隆到载体pSH91中,构建食品级分泌性表达载体pSQZ;克隆报告蛋白金黄色葡萄球菌NucA成熟肽的编码序列nucA到pSQZ中分泌信号后,转化乳酸乳球菌MBP71,构建乳酸乳球菌分泌性表达系统L lactis MBP71/pSQZ-nucA;采用TB-D法和酶谱法检测乳酸乳球菌分泌性表达的NucA活性。结果PCR扩增得到usp45基因片段,酶切、连接到载体pSH91中构建了食品级表达载体pSQZ;将扩增的nucA基因片段克隆入载体pSQZ并转化乳酸乳球菌,得到乳酸乳球菌分泌性表达系统L lactis MBP71/pSQZ-nucA。在TB-D平板上,L lactis MBP71/pSQZ-nucA克隆子周围出现橙色光晕;在酶谱检测中,L lactis MBP71/pSQZ-nucA上清和菌体在18kDa位置均有橙色条带,但上清条带亮度和宽度大于菌体。结论成功构建了乳酸乳球菌食品级分泌表达系统,实现了报告蛋白NucA在乳酸乳球菌中分泌性表达,为进一步保护性抗原的分泌性表达研究奠定了基础。; 关键词乳酸乳球菌食品级载体分泌性表达报告蛋白; Keywords Lactococcus lactis Food-grade vector Secretion expression Reporter protein; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组绵羊白细胞介素2基因的分泌性表达及表达产物的提取: 2; 作者刘艳环苗利光陈立志刘晓颖张洪涛; 机构吉林特产高等专科学校中国农业科学院特产研究所; 出处《特产研究》 2002年第4期23-24,共2页; 文摘将构建的绵羊白细胞介素2基因表达菌株(PMPOIL2)接种在营养肉汤培养基上,培养20h,分别收集菌体及上清液。菌体超声裂解;上清液中的蛋白质分别用MgCl2、(NH4)2SO4、NaCl沉积。用抗Pilin-IL2血清检测菌体裂解物及上清沉淀物,结果上清沉淀物中有凝集抗原,而菌体中没有,并且(NH4)2SO4沉积的效果最好。; 关键词绵羊白细胞介素2基因分泌性表达表达产物; Keywords Ovine Interleukin-2 Expressed products; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名自然流产母胎界面嗜酸粒细胞趋化因子、T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S及其受体的表达被引量：1: 3; 作者肖世金董倩赵爱民; 机构上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科; 出处《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1170-1174,共5页; 文摘目的探讨嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)/CCR3、T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S(RANTES)/CCR5在正常妊娠免疫耐受及自然流产中的作用。方法采集20例自然流产患者(AP组)和20例正常早孕妇女(NP组)的蜕膜和绒毛组织;采用免疫组织化学方法检测蜕膜和绒毛组织Eotaxin/CCR3、RANTES/CCR5的表达,并进行线性相关分析。结果 NP组蜕膜、绒毛组织Eotaxin的表达阳性率分别为75%和80%,显著高于AP组的35%和30%(P=0.011,P=0.001);NP组阳性表达强度亦显著高于AP组(P=0.003,P=0.002)。NP组蜕膜、绒毛组织RANTES的表达阳性率分别为40%和45%,显著低于AP组的80%和85%(P=0.01,P=0.008),NP组阳性表达强度亦显著低于AP组(P=0.002,P=0.002)。两组蜕膜、绒毛组织CCR5的表达阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);但AP组阳性表达强度显著高于NP组(P=0.018,P=0.029)。两组CCR3的表达阳性率及阳性表达强度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。在NP组中,蜕膜、绒毛RANTES的表达与CCR5的表达均呈正相关(r=0.679,P=0.001;r=0.478,P=0.033);在AP组中,蜕膜、绒毛RANTES的表达与CCR5的表达均为正相关(r=0.610,P=0.004;r=0.620,P=0.004);两组蜕膜、绒毛Eotaxin和CCR3的表达均不存在相关性(P>0.05)。结论趋化因子及其受体Eotaxin/CCR3、RANTES/CCR5在妊娠免疫耐受形成和自然流产的发病机制中可能发挥重要作用。; 关键词趋化因子嗜酸性粒细胞趋化因子 CCR3 T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S CCR5 自然流产; Keywords chemokine eosinophil chemotactic factor CCR3 regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted CCR5 spontaneous abortion; 分类号 R714.21 [医药卫生—妇产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人纤溶酶原kringle 5在大肠杆菌中克隆和分泌表达被引量：1: 4; 作者张宇张名姝李雅雯郑权; 机构北京航空航天大学生物与医学工程学院中国科学院生物物理研究所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第6期132-134,共3页; 基金北京航空航天大学首届大学生科研训练计划基金(4010100); 文摘构建能够表达分泌性的人纤溶酶原kringle 5(简称hPK-5)的大肠杆菌工程菌。用PCR方法扩增获得hPK-5基因,构建原核表达载体pET-22b(+)/hPK-5,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达并鉴定其免疫学活性。成功表达14kD的重组hPK-5,且约占菌体分泌性蛋白20%以上,经Western Blot分析表明其具有hPK-5的免疫抗原活性。人纤溶酶原kringle 5在大肠杆菌中BL21(DE3)获得可分泌表达。; 关键词人纤溶酶原Kringle 5 大肠杆菌克隆分泌性表达; Keywords Human plasminogen kringle 5 E.coli Clone Secretary expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源与鼠源神经生长因子信号肽引导β-内啡肽分泌表达的差异: 5; 作者徐学武裴树俊缪雪蓉俞卫锋; 机构第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期378-382,共5页; 基金国家自然科学基金(30700788)~~; 文摘目的:考察人源神经生长因子信号肽序列是否具有介导β-内啡肽分泌性表达的作用,以及人源与鼠源神经生长因子信号肽的作用效率是否存在差异。方法:构建2个分别利用人或鼠的信号序列介导β-内啡肽分泌表达的真核表达载体pcD-NA3.1-hEP和pcDNA3.1-mEP;脂质体法转染NIH3T3细胞,转染48 h后分别收集细胞培养上清液、细胞,以及细胞呈单层生长的盖玻片。收集的上清液用RIA法测定β-内啡肽的浓度;收集的细胞提取总RNA,一步法RT-PCR检测融合基因的mR-NA的转录;长有细胞的盖玻片处理后进行细胞免疫荧光染色。结果:RT-PCR的结果显示,所构建的融合基因在NIH3T3细胞内发生了表达,β-内啡肽主要分布在NIH3T3细胞的胞质内。pcDNA3.1-hEP和pcDNA3.1-mEP分别转染NIH3T3细胞48 h后,细胞培养上清β-内啡肽的浓度分别是(280.33±24.16)pg/ml和(191.04±7.96)pg/ml,有显著的统计学差异(P<0.05),且与空白对照之间均有显著的统计学差异(P<0.01)。结论:人源神经生长因子信号肽序列能够介导β-内啡肽蛋白的分泌性表达,且作用效率要优于鼠源信号肽。; 关键词信号肽神经生长因子 Β-内啡肽分泌性表达; Keywords signal peptide nerve growth factor beta-endorphin secretory expression; 分类号 R341 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳酸乳球菌食品级表达载体的改造被引量：4: 6; 作者马超王丕武付永平张卓刘宏禹; 机构吉林农业大学生物技术中心; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期10247-10250,共4页; 基金吉林农业大学博士点基金(20070193005); 文摘 [目的]改造乳酸乳球菌食品级表达载体,拓宽原系统的应用范围。[方法]以pNZ8149为基础,在pNZ8149的启动子PnisA下游插入乳酸乳球菌MG1363未知分泌蛋白(Usp45)的胞外分泌信号肽基因序列SPusp45,利用特异性引物通过PCR方法删除启动子序列和信号肽基因序列间的酶切位点,确保SD序列和起始密码子间的距离相对最佳,构建分泌表达载体pNZS。将报告基因gus重组到pNZS的多克隆位点中,构建pNZS-gus,电击转化L.lactisNZ3900。以10ng/ml的nisin诱导培养,取培养液进行GUS染色试验。[结果]新构建的L.lactisN3900/pNZS-gus系统可以正确表达有活性的GUS蛋白,并可以将GUS蛋白分泌到细胞外。[结论]该系统的构建成功,为目的蛋白的分泌性表达研究和口服级疫苗的研制奠定了基础。; 关键词乳酸乳球菌 SPusp45 食品级载体分泌性表达 GUS; Keywords L.lactis SPUSP45 Food-grade vector Secretion expression gus; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TAT-Apoptin基因原核表达载体的构建及其表达鉴定: 7; 作者陈桂华李翔辉郁川; 机构漯河食品职业学院河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室; 出处《现代农业研究》 2019年第11期96-98,共3页; 文摘为得到TAT-Apoptin融合蛋白,以pMD-19T-Apoptin为模板PCR扩增出TATApoptin基因,构建重组载体pET-32a-TAT-Apoptin,并对TAT-Apoptin蛋白进行表达。PCR和测序表明,成功构建重组载体pET-32a-TAT-Apoptin,进一步对其进行蛋白表达,发现该蛋白能与Apoptin多抗发生特异性结合。以上结果证明,TAT-Apoptin基因原核表达载体构建成功,并能在Rosetta中进行分泌性表达。; 关键词 TAT-Apoptin融合蛋白重组载体pET-32a-TAT-Apoptin 分泌性表达; Keywords TAT-Apoptin fusion protein secretory expression of recombinant vector pET-32a-TATApoptin; 分类号 R73 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名浅析巴斯德毕赤酵母表达系统的研究被引量：1: 8; 作者王艳; 机构山东省枣庄市畜牧兽医局; 出处《山东畜牧兽医》 2010年第10期86-87,共2页; 文摘对于一个有商业潜质和广阔市场前景的兽用蛋白质类药物的研究,主要是要寻找一条稳定的工艺条件和获得较高的工作效率,巴斯德毕赤酵母表达系统就具有这方面的优点,其优越性表现在：分泌性表达,不需要复性,有效率为100%,纯化程序简单,大大降低了生产成本,尤其适用于动物干扰素的表达。; 关键词毕赤酵母表达系统巴斯德分泌性表达蛋白质类市场前景工作效率工艺条件生产成本; 分类号 TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	乳酸乳球菌食品级分泌性表达载体pSQZ的构建及报告蛋白的表达	孙强正熊衍文叶长芸徐建国	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	重组绵羊白细胞介素2基因的分泌性表达及表达产物的提取	刘艳环苗利光陈立志刘晓颖张洪涛	《特产研究》	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	自然流产母胎界面嗜酸粒细胞趋化因子、T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S及其受体的表达	肖世金董倩赵爱民	《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人纤溶酶原kringle 5在大肠杆菌中克隆和分泌表达	张宇张名姝李雅雯郑权	《生物技术通报》 CAS CSCD	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人源与鼠源神经生长因子信号肽引导β-内啡肽分泌表达的差异	徐学武裴树俊缪雪蓉俞卫锋	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	乳酸乳球菌食品级表达载体的改造	马超王丕武付永平张卓刘宏禹	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	TAT-Apoptin基因原核表达载体的构建及其表达鉴定	陈桂华李翔辉郁川	《现代农业研究》	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	浅析巴斯德毕赤酵母表达系统的研究	王艳	《山东畜牧兽医》	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料