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玉米C_4型PPDK基因的分段PCR克隆及其表达载体构建
1
作者
崔震海
王雷
+3 位作者
阮燕晔
张立军
朱延姝
樊金娟
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期691-695,共5页
丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)是C4植物和景天科酸代谢(CAM)植物光合作用的关键酶,催化形成固定CO2的初始分子受体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)。玉米的C4型PPDK基因序列较长,难以直接克隆。本研究设计多对引物,首先利用常规PCR扩增PPDK启动子,再利...
丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)是C4植物和景天科酸代谢(CAM)植物光合作用的关键酶,催化形成固定CO2的初始分子受体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)。玉米的C4型PPDK基因序列较长,难以直接克隆。本研究设计多对引物,首先利用常规PCR扩增PPDK启动子,再利用分段PCR扩增PPDK基因全长编码序列;测序证实克隆序列正确无误,最后利用In-Fusion技术将各个片段定向克隆至载体p CAMBIA-1391Z,成功构建了玉米C4型PPDK基因的植物表达载体。最终为C4型PPDK基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列,为全长基因的高效克隆及表达载体构建提供参考。
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关键词
玉米
PPDK
分段pcr
克隆
In-Fusion技术
表达载体构建
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职称材料
题名
玉米C_4型PPDK基因的分段PCR克隆及其表达载体构建
1
作者
崔震海
王雷
阮燕晔
张立军
朱延姝
樊金娟
机构
沈阳农业大学生物技术学院/辽宁省植物基因工程技术研究中心
出处
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期691-695,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31000673
31370283)
+3 种基金
教育部博士点基金项目(20102103110001
20102103120001)
辽宁省科技厅科技攻关项目(2014208001)
中国博士后基金面上项目(2014M561097)
文摘
丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)是C4植物和景天科酸代谢(CAM)植物光合作用的关键酶,催化形成固定CO2的初始分子受体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)。玉米的C4型PPDK基因序列较长,难以直接克隆。本研究设计多对引物,首先利用常规PCR扩增PPDK启动子,再利用分段PCR扩增PPDK基因全长编码序列;测序证实克隆序列正确无误,最后利用In-Fusion技术将各个片段定向克隆至载体p CAMBIA-1391Z,成功构建了玉米C4型PPDK基因的植物表达载体。最终为C4型PPDK基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列,为全长基因的高效克隆及表达载体构建提供参考。
关键词
玉米
PPDK
分段pcr
克隆
In-Fusion技术
表达载体构建
Keywords
maize
PPDK
segmented-
pcr
cloning
In-Fusion technology
expression vector to construct
分类号
S513 [农业科学—作物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米C_4型PPDK基因的分段PCR克隆及其表达载体构建
崔震海
王雷
阮燕晔
张立军
朱延姝
樊金娟
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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