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分枝杆菌噬菌体Chy3对人气道上皮细胞16HBE生长及功能的影响
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作者 熊欣 甘易玲 +3 位作者 徐莉 江莉莎 张莉 郭述良 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1202-1206,共5页
目的:探讨不同滴度的分枝杆菌噬菌体Chy3对人气道上皮细胞16HBE生长及功能的影响。方法:不同滴度噬菌体Chy3作用于人气道上皮细胞后,采用倒置显微镜观察细胞生长形态变化,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测... 目的:探讨不同滴度的分枝杆菌噬菌体Chy3对人气道上皮细胞16HBE生长及功能的影响。方法:不同滴度噬菌体Chy3作用于人气道上皮细胞后,采用倒置显微镜观察细胞生长形态变化,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清液中细胞因子分泌水平,RT-PCR和Western blot分别检测上皮细胞黏蛋白MUC5AC mRNA和蛋白表达水平。结果:不同滴度噬菌体Chy3作用于人气道上皮细胞一段时候后,细胞的生长形态、存活率、凋亡率、细胞因子分泌水平以及黏蛋白MUC5AC表达与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:分枝杆菌噬菌体Chy3无论高低滴度对体外培养人气道上皮细胞生长和功能均无明显影响,有较好的安全性。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体 人气道上皮细胞 安全性 白细胞介素-6/白细胞介素-8 MUC5AC
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噬菌体Chy5的生物学和基因组学特征 被引量:2
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作者 江莉莎 刘平 +1 位作者 邬亭亭 郭述良 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期462-468,共7页
目的筛选能感染结核分枝杆菌的溶源性噬菌体,了解其生物学及遗传学信息。方法从土壤中分离纯化噬菌体;电镜观察噬菌体形态;单斑法测定宿主谱;提取噬菌体DNA,鸟枪法随机测序。采用DNAStar软件包分析基因组成分,Glimmer3.0、GeneMark软件... 目的筛选能感染结核分枝杆菌的溶源性噬菌体,了解其生物学及遗传学信息。方法从土壤中分离纯化噬菌体;电镜观察噬菌体形态;单斑法测定宿主谱;提取噬菌体DNA,鸟枪法随机测序。采用DNAStar软件包分析基因组成分,Glimmer3.0、GeneMark软件预测基因功能,同时做共线性分析。分离溶源菌,通过紫外线诱导试验、超免反应验证噬菌体溶源性。结果分离到一株新的噬菌体Chy5,其头部直径(61.5±1.4)nm,尾部长度(114.1±2.1)nm,为长尾噬菌体,可感染敏感及耐药结核菌株。Chy5基因组全长51214 bp,G+C含量63.60%,与噬菌体D29基因组最相似,有88个推定基因,含有编码整合酶和阻遏蛋白的基因以及attP位点。经紫外线诱导Chy5溶源菌可形成噬菌斑,Chy5与其溶源菌共培养会发生超免反应。结论分离到一株新的能感染敏感及耐药结核菌的溶源性噬菌体Chy5,其基因组与噬菌体D29相似,有望应用于构建荧光报告噬菌体。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体chy5 基因组 结核菌
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噬菌体Chy2生物扩增法的建立及其检测效果的评价
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作者 敖知 郭述良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期241-244,共4页
目的建立噬菌体Chy2生物扩增法,并评价其检测临床痰标本结核分枝杆菌的应用价值。方法噬菌斑测试法观察噬菌体杀灭剂灭活Chy2的工作浓度和作用时间;噬菌斑计数法判断Chy2的最佳感染时间和感染滴度;分别用噬菌体Chy2和D29生物扩增法检测5... 目的建立噬菌体Chy2生物扩增法,并评价其检测临床痰标本结核分枝杆菌的应用价值。方法噬菌斑测试法观察噬菌体杀灭剂灭活Chy2的工作浓度和作用时间;噬菌斑计数法判断Chy2的最佳感染时间和感染滴度;分别用噬菌体Chy2和D29生物扩增法检测58份临床痰标本,以改良罗氏培养法作诊断标准,对比评价Chy2和D29的检测准确性。结果 6%硫酸亚铁铵溶液作用5 min可彻底灭活游离Chy2;Chy2滴度为2.2×1011CFU/mL时,与结核分枝杆菌孵育4 h的感染效率最高;噬菌体Chy2生物扩增法对痰标本的检测灵敏度、特异性、Youden指数、阳性预测值和阴性预测值分别为94.7%、85.0%、0.797、0.923、0.895,噬菌体D29生物扩增法的检测结果相应为76.3%、95.0%、0.713、0.967、0.678,噬菌体Chy2生物扩增法的灵敏度、阴性预测值优于噬菌体D29生物扩增法(P<0.05),两者特异性、Youden指数、阳性预测值无统计学差异(P>0.05)。结论成功建立了噬菌体Chy2生物扩增法,Chy2较D29检测特异性相当,灵敏度有所提高。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体chy2 结核分枝杆菌 灵敏度 特异性
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